Luận án tiến sĩ: Nghiên cứu tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệt

Trường đại học

Trường Đại học Y Hà Nội

Người đăng

Ẩn danh

2016

189
1
0

Phí lưu trữ

45 Point

Mục lục chi tiết

LỜI CẢM ƠN

LỜI CAM ĐOAN

MỤC LỤC

CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1. ĐẠI CƯƠNG VỀ UNG THƯ TUYẾN TIỀN LIỆT

1.2. Tình hình ung thư tuyến liền liệt trên thế giới

1.3. Tình hình ung thư tuyến tiền liệt tại Việt Nam

1.4. Yều cầu trong chẩn đoán và điều trị UTTTL

1.5. CÁC HIỂU BIẾT VỀ CHẨN ĐOÁN UNG THƯ TUYẾN TIỀN LIỆT

1.5.1. Các phương pháp truyền thống chẩn đoán UTTTL

1.5.2. Các hiểu biết mới trong chẩn đoán và điều trị UTTTL

1.6. KHÁNG THỂ VÀ CHẨN ĐOÁN UNG THƯ TUYẾN TIỀN LIỆT

1.6.1. Kháng thể. Kháng thể đơn dòng

1.6.2. CÁC KĨ THUẬT SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU

1.6.2.1. Kĩ thuật tái tổ hợp DNA
1.6.2.2. Kĩ thuật tạo kháng thể bằng gây miễn dịch trên động vật
1.6.2.3. Kĩ thuật phân lập albumine từ huyết thanh

2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

2.2. Đối tượng nghiên cứu của mục tiêu tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên UTTTL

2.3. Đối tượng nghiên cứu cho mục tiêu tạo bộ sinh phẩm bằng kháng thể và bước đầu ứng dụng trong chẩn đoán UTTTL

2.4. HÓA CHẤT, SINH PHẨM NGHIÊN CỨU

2.5. TRANG THIẾT BỊ SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU

2.6. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.7. PHÂN TÍCH VÀ XỬ LÝ KẾT QUẢ TRONG NGHIÊN CỨU

2.8. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH NGHIÊN CỨU

2.9. CÁC KĨ THUẬT SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU

2.9.1. Tạo kháng nguyên tái tổ hợp mang các epitope EPCA-2

2.9.2. Các kĩ thuật sử dụng gây miễn dịch cho thỏ tạo kháng thể đặc hiệu kháng EPCA-2

2.9.3. Kĩ thuật ELISA xác định EPCA-2

2.10. ĐỊA ĐIỂM TIẾN HÀNH NGHIÊN CỨU

3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1. TẠO GEN TÁI TỔ HỢP MANG CÁC EPITOPE EPCA-2 BẰNG PHƯƠNG PHÁP TÁI TỔ HỢP

3.1.1. Tạo vector tái tổ hợp mang gen polEPCA-2

3.1.2. Biểu hiện vector tái tổ hợp trong vi khuẩn E.coli chủng BL21 (DE3)

3.2. KẾT QUẢ GÂY MIỄN DỊCH Ở THỎ BẰNG KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP PolEPCA-2

3.2.1. Nồng độ kháng thể kháng polEPCA-2 ở huyết thanh thỏ

3.3. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH EPCA-2 TRONG HUYẾT THANH 3 NHÓM NGHIÊN CỨU

3.3.1. Thông tin chung của nhóm bệnh nhân tuyến tiền liệt

3.3.2. Nồng độ EPCA-2 trong huyết thanh 2 nhóm bệnh nhân tuyến tiền liệt được định lượng bằng kháng thể thỏ kháng EPCA-2 và kít CUSABIO

3.3.3. Nồng độ EPCA-2 trong huyết thanh nam giới khỏe mạnh

3.3.4. So sánh độ nhậy, độ đặc hiệu của kháng thể thỏ đặc hiệu kháng EPCA-2 với kháng thể trong kít xác định EPCA-2 của CUSABIO

4. CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN

4.1. VỀ THIẾT KẾ GEN MÃ HÓA POLYEPITOPE CỦA KHÁNG NGUYÊN UNG THƯ TUYẾN TIỀN LIỆT SỚM

4.1.1. Lựa chọn biểu hiện các epitope của kháng nguyên thay vì biểu hiện toàn bộ phân tử kháng nguyên

4.1.2. Thiết kế lặp nhiều lần trình tự các epitope

4.1.3. Thiết kế gen polEPCA-2 có trình tự nhận biết của các enzyme cắt giới hạn

4.1.4. Tạo vector tái tổ hợp mang gen polEPCA-2

4.1.5. Biểu hiện protein tái tổ hợp

4.2. VỀ KẾT QUẢ TẠO KHÁNG THỂ THỎ ĐẶC HIỆU KHÁNG PolEPCA-2

4.2.1. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH EPCA-2 TRONG HUYẾT THANH 3 NHÓM NGHIÊN CỨU

4.2.2. Một số thông tin của 2 nhóm bệnh nhân tuyến tiền liệt

4.2.3. Kết quả xác định EPCA-2 trong huyết thanh bệnh nhân ung thư tuyến tiền liệt bằng kháng thể thỏ có đối chứng với kít thương phẩm

4.2.4. Kết quả xác định EPCA-2 trong huyết thanh bệnh nhân u phì đại lành tính tuyến tiền liệt và nam giới bình thường bằng 2 phương pháp ELISA

4.2.5. So sánh độ nhậy, độ đặc hiệu của 2 phương pháp ELISA sử dụng kháng thể thỏ đặc hiệu kháng EPCA-2 và kháng thể trong kít xác định EPCA-2 của CUSABIO

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

Luận án tiến sĩ nghiên cứu tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệt ứng dụng trong chẩn đoán