Luận văn thạc sĩ hay nghiên cứu chiết suất hoạt chất từ cây gai xanh boehmeria nivea l gaud và ứng dụng trong sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe

Luận văn thạc sĩ nghiên cứu chiết suất hoạt chất từ cây gai xanh Boehmeria nivea và ứng dụng trong sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe.

• Tác giả: Nguyễn Thị Hồng Ngọc
• Người hướng dẫn: TS. Trần Văn Chí
• Trường học: Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên
• Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học
• Đề tài: Nghiên Cứu Chiết Xuất Hoạt Chất Từ Cây Gai Xanh (Boehmeria Nivea L.Gaud) Và Ứng Dụng Trong Sản Xuất Thực Phẩm Bảo Vệ Sức Khỏe
• Loại tài liệu: Luận Văn Thạc Sĩ
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Thái Nguyên

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC HÌNH
• MỞ ĐẦU
• 0.1. Tính cấp thiết
• 0.2. Mục tiêu nghiên cứu
• 0.2.1. Mục tiêu chung
• 0.2.2. Mục tiêu cụ thể
• 0.3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn
• 0.3.1. Ý nghĩa khoa học
• 0.3.2. Ý nghĩa thực tiễn
• 1. CHƯƠNG 1: CƠ SỞ KHOA HỌC VÀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU
• 1.1. Cơ sở khoa học
• 1.2. Tổng quan về cây gai xanh
• 1.3. Các hoạt chất sinh học trong cây gai xanh và tính chất của chúng
• 1.4. Tổng quan về gốc tự do và các chất chống oxi hóa
• 1.5. Định nghĩa thực phẩm chức năng
• 1.6. Đặc điểm và tác dụng của thực phẩm chức năng
• 1.7. Tình hình nghiên cứu sản xuất và sử dụng cây gai xanh
• 1.7.1. Tình hình nghiên cứu sản xuất và sử dụng cây gai xanh tại Việt Nam
• 1.7.2. Tình hình nghiên cứu sản xuất và sử dụng cây gai xanh trên thế giới
• 2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu
• 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.1.2. Phạm vi nghiên cứu
• 2.1.2.1. Phạm vi nội dung
• 2.1.2.2. Phạm vi không gian nghiên cứu
• 2.2. Vật liệu, hoá chất và thiết bị sử dụng
• 2.3. Nội dung nghiên cứu
• 2.4. Phương pháp nghiên cứu
• 2.4.1. Phân tích, thử nghiệm hoạt tính sinh học của một số hợp chất trong cây gai xanh
• 2.4.2. Xác định hàm lượng flavonoid tổng số bằng phương pháp cân
• 2.4.3. Phương pháp xác định hoạt động chống oxy hóa tế bào
• 2.4.4. Bố trí thí nghiệm tối ưu hóa quá trình chiết suất cao củ gai
• 2.4.5. Phương pháp thử khả năng kháng khuẩn
• 2.4.6. Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc và cao củ gai
• 2.4.6.1. Nghiên cứu, xây dựng quy trình công nghệ sản xuất trà túi lọc từ lá Gai
• 2.4.6.2. Nghiên cứu, xây dựng quy trình công nghệ sản xuất cao từ rễ (củ) Gai
• 2.4.7. Phương pháp phân tích chỉ tiêu chất lượng các sản phẩm thu được
• 2.4.8. Phương pháp xử lý số liệu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 3.1. Kết quả nghiên cứu một số hoạt chất sinh học trong dịch chiết lá và củ gai
• 3.2. Kết quả phân tích hoạt chất sinh học trong một số bộ phận cây gai xanh
• 3.3. Kết quả thử hoạt tính chống oxy hóa của dịch chiết lá gai
• 3.4. Kết quả tối ưu hóa quá trình chiết suất cao củ gai
• 3.4.1. Ảnh hưởng của nồng độ dung môi chiết suất
• 3.4.2. Ảnh hưởng của thời gian chiết suất
• 3.4.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ chiết suất
• 3.4.4. Ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi
• 3.5. Kết quả tối ưu các điều kiện chiết suất dịch củ gai
• 3.5.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ cô đặc đến chất lượng sản phẩm
• 3.5.2. Kết quả phân tích hàm lượng flavonoid trong cao củ gai
• 3.6. Kết quả nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số hoạt chất sinh học của cây gai xanh
• 3.7. Kết quả nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc và cao củ gai
• 3.7.1. Kết quả nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc
• 3.7.2. Kết quả xác định thành phần hóa học của nguyên liệu
• 3.7.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố trong quá trình sản xuất
• 3.7.3.1. Quy trình sản xuất
• 3.7.3.2. Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho sản phẩm trà túi lọc từ lá gai
• 3.7.4. Kết quả nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất cao củ gai
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO
• appendix.1. Tài liệu tiếng Việt
• appendix.2. Tài liệu tiếng Anh

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Chiết Xuất Hoạt Chất Từ Cây Gai Xanh

Cây gai xanh, hay còn gọi là Boehmeria nivea, đã được sử dụng từ lâu trong y học cổ truyền và công nghiệp thực phẩm. Việc chiết xuất hoạt chất từ cây gai xanh không chỉ mang lại giá trị dinh dưỡng mà còn có nhiều ứng dụng trong bảo vệ sức khỏe. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng cây gai xanh chứa nhiều hợp chất sinh học có lợi, như flavonoid và polyphenol, có khả năng chống oxy hóa và kháng viêm.

1.1. Cây Gai Xanh Trong Y Học Truyền Thống

Cây gai xanh đã được sử dụng trong y học cổ truyền để điều trị nhiều bệnh lý như cảm lạnh, viêm thận và nhiễm trùng đường tiết niệu. Các hoạt chất trong cây có tác dụng kháng khuẩn và chống viêm, giúp cải thiện sức khỏe tổng thể.

1.2. Lợi Ích Của Chiết Xuất Từ Cây Gai Xanh

Chiết xuất từ cây gai xanh cung cấp nhiều lợi ích cho sức khỏe, bao gồm khả năng chống oxy hóa mạnh mẽ. Các hợp chất như chlorogenic acid có tác dụng bảo vệ gan và ngăn ngừa tổn thương tế bào do gốc tự do.

II. Vấn Đề Trong Việc Chiết Xuất Hoạt Chất Từ Cây Gai Xanh

Mặc dù cây gai xanh có nhiều lợi ích, nhưng việc chiết xuất hoạt chất từ cây này vẫn gặp phải một số thách thức. Các vấn đề như quy trình chiết xuất chưa được tối ưu hóa và thiếu thông tin về các hợp chất sinh học cụ thể cần được giải quyết.

2.1. Thách Thức Trong Quy Trình Chiết Xuất

Quy trình chiết xuất hiện tại chưa đạt hiệu quả tối ưu, dẫn đến việc thu hồi hoạt chất không cao. Cần nghiên cứu và phát triển các phương pháp chiết xuất mới để nâng cao hiệu suất.

2.2. Thiếu Thông Tin Về Hợp Chất Sinh Học

Nhiều hợp chất sinh học trong cây gai xanh vẫn chưa được nghiên cứu đầy đủ. Việc thiếu thông tin này gây khó khăn trong việc ứng dụng các hoạt chất vào sản xuất thực phẩm chức năng.

III. Phương Pháp Chiết Xuất Hoạt Chất Từ Cây Gai Xanh

Để tối ưu hóa quy trình chiết xuất, nhiều phương pháp đã được áp dụng. Các nghiên cứu hiện tại đang tập trung vào việc sử dụng dung môi tự nhiên và các kỹ thuật hiện đại để nâng cao hiệu quả chiết xuất.

3.1. Sử Dụng Dung Môi Tự Nhiên Trong Chiết Xuất

Việc sử dụng dung môi tự nhiên như ethanol và nước giúp bảo toàn các hoạt chất sinh học trong cây gai xanh. Phương pháp này không chỉ an toàn mà còn thân thiện với môi trường.

3.2. Kỹ Thuật Chiết Xuất Hiện Đại

Các kỹ thuật như siêu âm và sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) đang được áp dụng để tối ưu hóa quy trình chiết xuất. Những phương pháp này giúp tăng cường hiệu suất và độ tinh khiết của hoạt chất.

IV. Ứng Dụng Thực Tiễn Của Chiết Xuất Từ Cây Gai Xanh

Chiết xuất từ cây gai xanh đã được ứng dụng trong nhiều sản phẩm thực phẩm chức năng và dược phẩm. Các nghiên cứu cho thấy rằng các hoạt chất từ cây này có thể cải thiện sức khỏe và phòng ngừa bệnh tật.

4.1. Sản Phẩm Thực Phẩm Chức Năng

Nhiều sản phẩm thực phẩm chức năng hiện nay đã sử dụng chiết xuất từ cây gai xanh. Các sản phẩm này giúp tăng cường sức đề kháng và hỗ trợ điều trị một số bệnh lý.

4.2. Nghiên Cứu Kết Quả Ứng Dụng

Các nghiên cứu lâm sàng đã chỉ ra rằng chiết xuất từ cây gai xanh có tác dụng tích cực trong việc giảm viêm và cải thiện chức năng gan. Điều này mở ra hướng đi mới cho việc phát triển sản phẩm từ cây này.

V. Kết Luận Về Chiết Xuất Hoạt Chất Từ Cây Gai Xanh

Chiết xuất hoạt chất từ cây gai xanh mang lại nhiều lợi ích cho sức khỏe. Tuy nhiên, cần tiếp tục nghiên cứu để tối ưu hóa quy trình chiết xuất và phát triển các sản phẩm mới từ cây này.

5.1. Tương Lai Của Nghiên Cứu

Nghiên cứu về cây gai xanh sẽ tiếp tục được mở rộng, nhằm khám phá thêm nhiều hợp chất sinh học mới và ứng dụng của chúng trong thực phẩm và y học.

5.2. Khuyến Khích Nghiên Cứu Thêm

Cần khuyến khích các nghiên cứu sâu hơn về cây gai xanh để phát triển các sản phẩm an toàn và hiệu quả, phục vụ cho nhu cầu chăm sóc sức khỏe của cộng đồng.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Chương 1 CƠ SỞ KHOA HỌC VÀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1. Cơ sở khoa học 1. Tổng quan về cây gai xanh [1],[2],[7],[11] Hình 1. Cây gai xanh và củ của cây gai xanh[2] Mô tả thực vật Tên khoa học: Boehmeria nivea (L.) Gaud Tên đồng nghĩa : Urtica nivea L.

Tên khác: Gai tuyết, gai làm bánh (Kinh), trữ ma, bâu pán (Tày), co pán (Thái), chiểu đủ (Dao) Tên nước ngoài: Ramie grass, China grass, chinese silk – plant (Anh); ramie, ramie blanche, ramie de Chine, ortle de Chine argentee, ortie à feuilles blanches (Pháp) Họ : Gai (Urticaceae) Cây nhỏ, cao 1 – 2m. Thân cứng hóa gỗ ở gốc. Cành màu đỏ nhạt, phủ nhiều lông sát. Lá mọc so le, hình trái xoan hoặc hình trứng, gốc tròn hay hình tim, đầu thuôn nhọn, dài 7 – 15 cm, rộng 4 – 8 cm, lúc non phủ nhiều lông mềm ở cả hai LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 4 mặt, lúc già thì mặt trên nhẵn màu lục sẫm, mặt dưới lông trở thành trắng bạc, mép có răng hình tam giác, gân gốc 3, cuống lá mảnh, màu đỏ, có lông mềm, lá kèm hình dải nhọn, dễ rụng.

Cụm hoa cùng gốc hay khác gốc, ngắn hơn lá, mọc ở kẽ lá, xếp thành chùy đơn ở hoa cái hay hợp lại với nhau ở hoa cái và hoa đực, có khi tạo thành những túm dày đặc; cụm hoa đực nhiều hoa, nụ hình cầu có lông lởm chởm, lá dài 4, nhị 4, nhụy lép có dạng quả lê; cụm hoa cái hình cầu, mang nhiều hoa, bao hoa màu lục nhạt, hình trứng có lông, bầu giẹp, hình trái xoan, hơi có cánh. Quả bế, hình quả lê, có nhiều lông, hạt có dấu. Mùa hoa quả: tháng 11 – 1. Phân bố khắp cả nước, tuy nhiên phát hiện nhiều tại các vùng đồng bằng, miền núi của miền Bắc Việt Nam như: Cao Bằng, Lào Cai, Quảng Ninh, Thái Nguyên, Lạng Sơn, Hà Tây, Hà Nội.

Chi Boehmeria Jacq gồm 75 loài, phân bố rải rác khắp các vùng miền nhiệt đới và cận nhiệt đới bắc bán cầu. Ở châu Á có 15 loài, trong đó Việt Nam có khoảng 10 loài. Gai là cây trồng tương đối phổ biến trong nhân dân để lấy lá làm bánh và rễ củ làm thuốc. Gai còn phân bố ở nhiều nước khác như Ấn Độ, Thái Lan, Lào, Trung Quốc, Campuchia và Nhật Bản.

Gai thuộc loại cây ưa ẩm và có thể hơi chịu bóng, sinh trưởng phát triển nhanh trong mùa mưa ẩm, đến mùa đông có hiện tượng rụng lá, hơi tàn lụi. Cây ra hoa hàng năm. Chưa quan sát được cây con mọc từ hạt. Song, gai lại có khả năng tái sinh vô tính khỏe bằng cách tái sinh cây chồi sau khi chặt và từ các đoạn thân, cành đem giâm xuống đất.

Bộ phận dùng Rễ củ gai thường gọi là trử ma căn. Rễ thu hái quanh năm, tốt nhất là vào mùa hạ hay mùa thu. Đào rễ rửa sạch đất cát, cắt bỏ rễ con, để nguyên hay thái phiến, dùng tươi hay phơi, sấy khô, Rễ hình trụ, thường cong queo dài 5 – 10 cm, đường kính 0,5 – 1,5 cm, mặt ngoài nâu sẫm, có những nếp nhăn dọc và sẹo của dễ con, dễ nẻ, vết bẻ màu vàng có xơ, không mùi, vị nhạt. LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 5 Lá gai dùng làm bánh hoặc nấu nước uống thanh nhiệt, giải cảm, ngoài ra hàm lượng protein trong lá rất cao được ứng dụng trực tiếp làm thức ăn gia súc để cung cấp hàm lượng đạm thực vật cho vật nuôi… Thân gai: Hàng năm, các nhà máy dệt của Việt Nam phải nhập khẩu hàng vạn tấn sợi gai để sản xuất vải.

Ngoài ứng dụng thân cây gai xanh để sản xuất vải may mặc, nó còn được ứng dụng tạo sợi đan lưới đánh cá và là cơ chất lý tưởng để nuôi trồng và sản xuất nấm ăn. Năng suất thân gai tươi thường 40 - 60 tấn/ha, cho 1.600 kg sợi khô và 500 - 1.200 kg sợi đã loại chất keo. Ở Philippin thu được 2.000 kg sợi khô/ha trong năm đầu và 3.500 kg sợi khô trong các năm tiếp theo. Các diện tích gai ở nhiều nước thường sau 7 - 20 năm mới phải phá đi để trồng lại.

Gai trồng để làm thức ăn gia súc, năng suất lá có thể đến 300 tấn tươi hay 42 tấn khô với 14 lần cắt trong 1 năm. Năng suất phụ thuộc nhiều vào tính chất thổ nhưỡng, cách chăm sóc và trồng giống. Các hoạt chất sinh học trong cây gai xanh và tính chất của chúng Lá cây gai xanh cũng thường được sử dụng trong các biện pháp dân gian như một thuốc lợi tiểu và chống sốt, và đã được cho là có tính chất hepatoprotective, chống oxy hóa, và chống viêm [12]. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng lá gai chứa kiwiionoside, rutin, uracil, axit 3-hydroxy-4-methoxy-benzoic, cholesterol, α- amyrin, nonacosanol, emodin, emodin-8-O-β-glucoside, physcion, polydatin, catechin , kali nitrat, β-sitosterol, epicatechin và epicatechin gallate.

nivea chứa một lượng lớn các hợp chất phenolic, có khả năng ức chế men chuyển đổi angiotensin I. Trong rễ của loài B. tricuspis có một số epicatechin dimers như (-) - epiafzelechin - (-) - epicatechin-4,8 (hoặc 6) -dimer, và (-) - epicatechin - (-) epicatechin- 4,8- (hoặc 6) –dimer, trong số đó epicatechin, epicatechin gallate, và rutin là các hợp chất polyphenolic được gọi là flavonoid, được biết đến với đặc tính chống oxy hóa, chống viêm, chống khối u, chống vi khuẩn, chống virus và chống dị ứng [12]. Rễ gai chứa acid chlorogenic, acid protocatechuic, acid cafeic, acid quinic, rhoifolin 0,7%, apigenin, rhoifolin khi thủy phân cho apigenin, glucose, rhamnose.

Ngoài ra, còn chứa β- sitosterol, daucosterol và acid 19α hydroxyl ursolic (CA, 126, 1997, 291739). Các polysaccharide thành phần chủ yếu gồm D- galctose , L – LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 6 rhamnose, D –arabinose, D – mannose, và D – galacturonic Me – ester. Bên cạnh polysaccharid, còn có một số oligosaccharid và monosaccharide. Các monosaccharide trong rễ cây là erythrose, heptose và một lượng nhỏ D – galactose, L – arabinose, acid D- galacturonic, melibiose, glucose và fructose, các polysaccharide, một số oligo saccharid và monosaccharide.

Các pectin với thành phẩn chủ yếu là acid D – galacuronic và dẫn chất mentyl ester của chúng, cùng với đường L – rhamnose, D – galactose, L – arabinose, L – fructose, D – glucose, D – manose và D – Xylose, các hemicelluloses với thành phần chính là glucomannan [11]. Tổng quan về gốc tự do và các chất chống oxi hóa 1. Giới thiệu về gốc tự do Gốc tự do là những nguyên tử hay phân tử mất đi một điện tử ở lớp vỏ ngoài cùng. Do thiếu một điện tử nên các phân tử hay nguyên tử này trở nên không ổn định và dễ dàng phản ứng với các phân tử/nguyên tử lân cận khác để trở nên bền vững, kết quả tạo ra một loạt gốc tự do mới [15].

Phân loại: gốc tự do được tạo ra từ nguyên tử oxy (reactive oxygen species – ROS) như superoxide (O2-•) hydroxyl (OH•), peroxyl (ROO•), lipid peroxyl (LOO•); và từ nguyên tử nitơ (Reactive nitrogen species) như nitric oxide (NO•) và nitrogen dioxide (NO2•). Ngoài ra các phân tử không phải là gốc tự do như hydroperoxide (H2O2), ozon (O3), oxy phân tử (O2), axit hypochoric (HOCl), axit nitric (HNO2), chúng được gọi những chất oxi hóa do dễ dàng tạo ra các phản ứng sinh gốc tự do trong tế bào [15]. Gốc tự do nội sinh được tạo ra từ các phản ứng enzyme trong tế bào liên quan đến hoạt động hô hấp, thực bào, tổng hợp prostaglandin và hoạt động chuyển hóa của hệ enzyme cytochrome P450. Các trường hợp sinh ra gốc tự do nội sinh như hoạt động của tế bào miễn dịch, viêm, căng thẳng, tập thể dục quá sức, thiếu máu cục bộ, nhiễm trùng, ung thư và lão hóa.

Ngược lại gốc tự do sinh ra không liên quan đến hoạt động của các enzyme mà do phản ứng của oxy với các hợp chất hữu cơ hoặc do các phản ứng phophoryl hóa xảy ra ở ty thể gọi là gốc tự do ngoại sinh. Nguồn gốc của các gốc tự do ngoại sinh từ không khí, nước bị ô nhiễm, khói thuốc, rượu, kim loại nặng (Cd, Hg, Pb, Fe, As), thuốc kháng sinh (gentamycin, LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 7 bleomycine), thuốc ức chế miễn dịch (cyclosporine, tacrolimus), thịt hun khói, dầu mỡ cháy, phóng xạ [15]. Vai trò của gốc tự do: Ở mức thấp và vừa, gốc tự do là nguồn cung cấp năng lượng cho cơ thể, tạo ra các chất màu melamine cần cho thị giác, góp phần sản xuất axit béo không bão hòa có tác dụng ngăn ngừa nhiễm trùng, tăng cường miễn dịch. Tuy nhiên ở nồng độ cao nó sẽ gây ra sự phá hủy cấu trúc tế bào và là nguyên nhân của các bệnh mạn tính và thoái hóa như ung thư, hen, lão hóa, rối loạn miễn dịch, tim mạch và thoái hóa tế bào thần kinh (Alzheimer, Parkinson), trầm cảm, thoái hóa khớp [15].

Các chất chống oxi hóa Khi gốc tự do bị dư thừa cơ thể có cơ chế bảo vệ bằng cách sản sinh ra các chất để trung hòa các gốc tự do gọi là các chất chống oxi hóa. Chất chống oxi hóa gồm enzyme chống oxi hóa tương ứng với các gốc tự do như superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) và glutathione reductase (GRx); các chất chống oxi hóa không có hoạt tính enzyme gồm chất chống oxi hóa chuyển hóa (còn được gọi là chất chống oxi hóa nội sinh được sinh ra bởi quá trình chuyển hóa trong cơ thể như axit lipoid, glutathione, L-ariginine, coenzyme Q10, melatonin, acid uric, bilirubin, …) và chất chống oxi hóa dinh dưỡng (là chất chống oxi hóa ngoại sinh không được sản xuất trong cơ thể phải cung cấp từ thực phẩm hay bổ sung như vitamin E, vitamin C, carotenoids, flavonoid, omega-3, omega-6, các nguyên tố: manganm kẽm, selen) [16]. Định nghĩa thực phẩm chức năng  Tại Mỹ: Thực phẩm chức năng (thực phẩm bảo vệ sức khỏe): là thực phẩm mang đến nhiều lợi ích cho sức khỏe, là bất cứ thực phẩm nào được thay đổi thành phần qua chế biến hoặc có các thành phần của thực phẩm có lợi cho sức khỏe ngoài thành phần dinh dưỡng truyền thống của nó.  Hiệp hội thông tin thực phẩm quốc tế (IFIC): Thực phẩm chức năng là thực phẩm mang đến những lợi ích cho sức khỏe vượt xa hơn cơ bản.

 Tại Úc: Thực phẩm chức năng là thực phẩm: - Có tác dụng đối với sức khỏe hơn là các chất dinh dưỡng thông thường. LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 8 - Gần giống như các TP truyền thống nhưng nó được chế biến để cho mục đích ăn kiêng hoặc tăng cường các chất dinh dưỡng để nâng cao vai trò sinh lí của chúng khi bị giảm dự trữ. - Được chế biến, sản xuất theo công thức chứ không phải các thực phẩm có sẵn trong tự nhiên.