Nghiên cứu phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR để phát hiện tác nhân gây nhiễm khuẩn bệnh viện

• Tác giả: Nguyễn Thị Loan
• Người hướng dẫn: TS. Lã Thị Huyền
• Trường học: Học viện Khoa học và Công nghệ
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Nghiên cứu phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR phát hiện một số tác nhân gây nhiễm khuẩn bệnh viện và khảo sát tính kháng kháng sinh
• Loại tài liệu: Luận án tiến sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. CHƯƠNG 1: TÌNH HÌNH VÀ CĂN NGUYÊN VI KHUẨN GÂY NHIỄM KHUẨN BỆNH VIỆN
• 1.1. Lịch sử phát hiện và nghiên cứu về nhiễm khuẩn bệnh viện
• 1.2. Tình hình nhiễm khuẩn bệnh viện hiện nay
• 1.2.1. Trên thế giới
• 1.2.2. Tại Việt Nam
• 2. CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Nguyên vật liệu nghiên cứu
• 2.3. Phương pháp nghiên cứu
• 2.3.1. Nhóm phương pháp vi sinh truyền thống
• 2.3.2. Phương pháp sinh học phân tử
• 2.3.3. Phương pháp kiểm tra độ nhạy, độ đặc hiệu, độ ổn định, ngưỡng phát hiện của bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR
• 2.3.4. Phương pháp thống kê
• 2.3.5. Đạo đức nghiên cứu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Kết quả phân lập các chủng vi sinh vật gây nhiễm khuẩn bệnh viện
• 3.2. Kết quả phân tích gen 16S rARN từ các chủng vi khuẩn phân lập
• 3.2.1. Kết quả phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR xác định đồng thời 5 tác nhân vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện
• 3.2.2. Kết quả lựa chọn, phân tích trình tự gen đích
• 3.2.3. Kết quả thiết kế mồi và mẫu dò
• 3.2.4. Kết quả kiểm tra độ đặc hiệu của mồi và mẫu dò với gen đích
• 3.2.5. Kết quả phản ứng multiplex realtime PCR trên các chủng chuẩn
• 3.2.6. Kết quả tối ưu phản ứng realtime PCR
• 3.2.7. Kết quả xác định ngưỡng phát hiện
• 3.2.8. Kết quả tạo các đối chứng dương
• 3.2.9. Kết quả xác định độ nhạy, độ đặc hiệu
• 3.2.10. Kết quả xác định độ ổn định
• 3.3. Kết quả kháng sinh đồ của các chủng vi khuẩn nghiên cứu và gen mã hoá beta-lactamase mở rộng của vi khuẩn E.
• 3.3.1. Kết quả kháng sinh đồ
• 3.3.2. Kết quả xác định gen mã hoá beta-lactamase phổ rộng của E.
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR phát hiện vi khuẩn bệnh viện

Nghiên cứu phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR nhằm phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện là một bước tiến quan trọng trong lĩnh vực y tế. Việc phát hiện kịp thời các tác nhân gây bệnh giúp bác sĩ đưa ra quyết định điều trị chính xác và hiệu quả hơn. Bộ sinh phẩm này không chỉ giúp giảm thời gian chẩn đoán mà còn nâng cao khả năng điều trị cho bệnh nhân, từ đó giảm thiểu tỷ lệ tử vong và chi phí điều trị.

1.1. Tầm quan trọng của việc phát hiện vi khuẩn bệnh viện

Việc phát hiện sớm các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện là rất cần thiết. Điều này không chỉ giúp cải thiện kết quả điều trị mà còn giảm thiểu sự lây lan của vi khuẩn kháng thuốc trong môi trường bệnh viện.

1.2. Các loại vi khuẩn thường gặp trong bệnh viện

Các vi khuẩn như Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, và Escherichia coli là những tác nhân chính gây nhiễm khuẩn bệnh viện. Việc phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn này giúp bác sĩ có phương pháp điều trị kịp thời.

II. Thách thức trong việc phát hiện vi khuẩn bệnh viện hiện nay

Mặc dù có nhiều phương pháp phát hiện vi khuẩn, nhưng vẫn tồn tại nhiều thách thức trong việc chẩn đoán nhiễm khuẩn bệnh viện. Các phương pháp truyền thống như nuôi cấy vi sinh vật thường mất nhiều thời gian và không đảm bảo độ chính xác cao. Điều này dẫn đến việc chẩn đoán muộn và ảnh hưởng đến kết quả điều trị.

2.1. Hạn chế của phương pháp nuôi cấy vi sinh vật

Phương pháp nuôi cấy vi sinh vật thường yêu cầu thời gian từ 1-5 ngày để có kết quả. Điều này có thể dẫn đến việc chẩn đoán muộn và làm tăng nguy cơ tử vong cho bệnh nhân.

2.2. Tình trạng kháng kháng sinh gia tăng

Sự gia tăng kháng kháng sinh ở các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện đang trở thành một vấn đề nghiêm trọng. Việc phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn kháng thuốc là rất cần thiết để có biện pháp điều trị hiệu quả.

III. Phương pháp phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR hiệu quả

Phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR là một giải pháp hiệu quả để phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện. Phương pháp này cho phép xác định đồng thời nhiều tác nhân gây bệnh trong một lần xét nghiệm, từ đó tiết kiệm thời gian và chi phí cho bệnh viện.

3.1. Quy trình phát triển bộ sinh phẩm

Quy trình phát triển bộ sinh phẩm bao gồm việc thiết kế mồi và mẫu dò, tối ưu hóa điều kiện phản ứng PCR, và kiểm tra độ nhạy, độ đặc hiệu của bộ sinh phẩm.

3.2. Đánh giá hiệu quả của bộ sinh phẩm

Đánh giá hiệu quả của bộ sinh phẩm được thực hiện thông qua việc so sánh kết quả với các phương pháp truyền thống. Kết quả cho thấy bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR có độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn.

IV. Ứng dụng thực tiễn của bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR

Bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR không chỉ giúp phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện mà còn có thể được áp dụng trong nhiều lĩnh vực khác nhau. Việc sử dụng bộ sinh phẩm này trong thực tiễn sẽ góp phần nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe cho bệnh nhân.

4.1. Ứng dụng trong chẩn đoán lâm sàng

Bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR có thể được sử dụng trong chẩn đoán lâm sàng để phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện, từ đó giúp bác sĩ đưa ra quyết định điều trị kịp thời.

4.2. Tác động đến chi phí điều trị

Việc phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây bệnh giúp giảm thiểu thời gian nằm viện và chi phí điều trị cho bệnh nhân, từ đó nâng cao hiệu quả kinh tế cho bệnh viện.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu phát triển bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR là một bước tiến quan trọng trong việc phát hiện vi khuẩn gây nhiễm khuẩn bệnh viện. Tương lai, việc cải tiến và mở rộng ứng dụng của bộ sinh phẩm này sẽ góp phần nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe tại Việt Nam.

5.1. Tương lai của bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR

Bộ sinh phẩm multiplex realtime PCR có tiềm năng lớn trong việc phát hiện nhanh chóng các vi khuẩn gây bệnh, từ đó cải thiện kết quả điều trị cho bệnh nhân.

5.2. Hướng nghiên cứu tiếp theo

Các nghiên cứu tiếp theo có thể tập trung vào việc mở rộng bộ sinh phẩm để phát hiện thêm nhiều loại vi khuẩn khác, cũng như khảo sát tính kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn mới.