Nghiên cứu mô hình bệnh loãng xương trên cá medaka và tác dụng chống loãng xương của các hoạt chất

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

MỞ ĐẦU

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1. Bệnh loãng xương và thực trạng

1.2. Hoạt động mô hình và tái mô hình xương giúp xương phát triển và đổi mới

1.3. Con đường RANKL/RANK và sự tham gia của sốc tự do cho sự biệt hóa và hoạt động của tế bào hủy xương

1.4. Các liệu pháp điều trị loãng xương

1.4.1. Thuốc chống loãng xương nhóm bisphosphonate, tác dụng và hiệu quả

1.4.2. Nghiên cứu về các hợp chất tự nhiên và tổng hợp có tiềm năng chống loãng xương

1.5. Tiềm năng chống loãng xương của NecroX và DMSO

1.6. Mô hình động vật dùng cho nghiên cứu về loãng xương

1.6.1. Mô hình động vật có vú cho nghiên cứu loãng xương

1.6.2. Cá medaka làm mô hình cho các nghiên cứu về xương

2. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Đối tượng nghiên cứu

2.2. Vật liệu, thiết bị, dụng cụ và hóa chất dùng trong nghiên cứu

2.3. Phương pháp nghiên cứu

2.3.1. Phương pháp nuôi và duy trì

2.3.2. Phương pháp sốc nhiệt tạo kiểu hình loãng xương cho cá

2.3.3. Phương pháp chọn dòng cá rankl:HSE:CFP và thời gian sốc nhiệt đánh giá

2.3.4. Phương pháp sang lọc xác định cá

2.3.5. Phương pháp pha chất cho thí nghiệm đánh giá tác dụng của chất trên cá

2.3.6. Phương pháp xử lý, đánh giá tác dụng của chất trên cá Rankl

2.3.7. Phương pháp nhuộm xương cá cố định

2.3.8. Phương pháp chụp ảnh và xử lý hình ảnh cá nhuộm cố định

2.3.9. Phương pháp nhuộm xương huỳnh quang trên cá sống

2.3.10. Phương pháp đánh giá mức độ khoáng hóa và tổn thương xương cá

2.3.11. Phương pháp đánh giá ảnh hưởng của resveratrol/NecroX-5 đến tế bào tạo xương và sự tạo xương trên cá chuyển gen col10a1:nlGFP

2.3.12. Phương pháp đánh giá ảnh hưởng của chất NecroX-5 đến sự biểu hiện các gen tham gia vào con đường RANKL

2.3.13. Phương pháp xử lý thống kê số liệu

2.4. Các phần mềm được sử dụng

3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1. Nghiên cứu chọn dòng cá rankl:HSE:CFP và thời gian sốc nhiệt phù hợp

3.2. Ảnh hưởng của bisphosphonate đến sự tổn thương xương ở cá Rankl

3.2.1. Ảnh hưởng của alendronate đến sự tổn thương xương trên cá Rankl

3.2.2. Ảnh hưởng của etidronate đến sự tổn thương xương trên cá Rankl

3.3. Ảnh hưởng của DMSO đến mức độ tổn thương xương trên cá Rankl

3.4. Đánh giá khả năng bảo vệ xương của một số hoạt chất trên cá Rankl

3.4.1. Ảnh hưởng của chất tự nhiên resveratrol đến sự tổn thương xương trên cá Rankl

3.4.2. Ảnh hưởng của chất tổng hợp NecroX-5 đến sự tổn thương xương của cá Rankl

4. ALENDRONATE VÀ ETIDRONATE CÓ TÁC DỤNG BẢO VỆ XƯƠNG CÁ MEDAKA KHỎI TỔN THƯƠNG GÂY RA BỞI RANKL VÀ CÓ THỂ ĐƯỢC DÙNG NHƯ ĐỐI CHỨNG DƯƠNG CHO CÁC THỬ NGHIỆM ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA HOẠT CHẤT

4.1. DMSO có thể ảnh hưởng đến mức độ tổn thương xương của cá Rankl, sử dụng DMSO làm dung môi cần chú ý đến nồng độ

4.2. Resveratrol có tác dụng bảo vệ xương cá, làm giảm tổn thương xương gây ra bởi Rankl

4.3. NecroX-5 có tác dụng bảo vệ xương cá theo hướng ức chế hủy xương và kích thích tạo xương

KIẾN NGHỊ VỀ NHỮNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về bệnh loãng xương

Bệnh loãng xương (bệnh loãng xương) là một tình trạng y tế phổ biến, đặc biệt ở phụ nữ sau mãn kinh và người cao tuổi. Tình trạng này được đặc trưng bởi mật độ xương giảm, dẫn đến cấu trúc xương yếu và dễ gãy. Theo nghiên cứu, loãng xương có thể gây ra những hậu quả nghiêm trọng cho sức khỏe, bao gồm gãy xương và tăng nguy cơ tử vong. Việc phát hiện bệnh thường muộn, khi xương đã bị tổn thương. Các yếu tố nguy cơ bao gồm lối sống ít vận động, chế độ ăn uống không hợp lý và sử dụng thuốc không đúng cách. Do đó, việc tìm kiếm các phương pháp điều trị hiệu quả cho bệnh loãng xương là rất cần thiết.

II. Mô hình nghiên cứu bệnh loãng xương trên cá medaka

Cá medaka (cá medaka) đã được sử dụng như một mô hình nghiên cứu hiệu quả cho bệnh loãng xương. Mô hình này cho phép nghiên cứu các cơ chế sinh học liên quan đến bệnh và đánh giá tác dụng của các hoạt chất chống loãng xương. Việc sử dụng cá medaka có nhiều ưu điểm, bao gồm khả năng sinh sản nhanh, chi phí thấp và khả năng quan sát các quá trình sinh học thông qua các kỹ thuật hình ảnh. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng cá medaka chuyển gen rankl:HSE:CFP có thể được sử dụng để mô phỏng bệnh loãng xương, từ đó giúp đánh giá tác dụng của các hoạt chất như resveratrol và NecroX-5.

III. Tác dụng chống loãng xương của các hoạt chất

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng một số hoạt chất có tác dụng bảo vệ xương, bao gồm resveratrol và NecroX-5. Resveratrol, một hợp chất tự nhiên, đã được chứng minh có khả năng làm giảm tổn thương xương do loãng xương gây ra. Trong khi đó, NecroX-5, một hợp chất tổng hợp, cũng cho thấy hiệu quả tương tự. Các thí nghiệm trên cá medaka đã xác định được nồng độ tối ưu của các hoạt chất này, từ đó mở ra hướng đi mới trong việc phát triển các phương pháp điều trị loãng xương hiệu quả hơn.

IV. Phương pháp nghiên cứu và kết quả

Phương pháp nghiên cứu bao gồm việc nuôi cá medaka trong điều kiện kiểm soát và thực hiện các thí nghiệm để đánh giá tác dụng của các hoạt chất. Kết quả cho thấy rằng việc sử dụng cá medaka làm mô hình nghiên cứu bệnh loãng xương không chỉ giúp hiểu rõ hơn về cơ chế bệnh lý mà còn hỗ trợ trong việc phát triển các liệu pháp điều trị mới. Nghiên cứu đã hoàn thiện quy trình sử dụng cá medaka để đánh giá tác dụng của các hoạt chất, từ đó cung cấp thông tin quý giá cho các nghiên cứu tiếp theo trong lĩnh vực này.

Nghiên cứu mô hình bệnh loãng xương trên cá medaka và đánh giá tác dụng của các hoạt chất chống loãng xương