Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Tự Nhiên Từ Hạt Cà Phê Robusta Có Hoạt Tính Sinh Học

Tài liệu nghiên cứu Nghiên cứu khảo sát ly trích các hợp chất tự nhiên có trong hạt cà phê robusta coffea canephora có, tổng hợp lý thuyết và thực hành, cung cấp kiến thức chuyên

• Tác giả: Trịnh Thị Hoài Phương
• Người hướng dẫn: ThS. Nguyễn Minh Hoàng
• Trường học: Trường Đại Học Mở Thành Phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học Y – Dược
• Đề tài: Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Tự Nhiên Từ Hạt Cà Phê Robusta
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC HÌNH
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC VIẾT TẮT
• MỞ ĐẦU
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. TỔNG QUAN VỀ CÂY CÀ PHÊ ROBUSTA
• 1.1.1. Đặc điểm thực vật và phân bố
• 1.1.2. Tác dụng dược lý
• 1.1.3. Nghiên cứu về thành phần hóa học đối với hạt cà phê
• 1.2. TỔNG QUAN VỀ CAFFEINE
• 1.2.1. Phân loại
• 1.2.2. Hoạt tính sinh học
• 1.3. TỔNG QUAN VỀ CHLOROGENIC ACID
• 1.4. TỔNG QUAN VỀ CHOLESTEROL VÀ KHẢ NĂNG GIẢM CHOLESTEROL CỦA CHLOROGENIC ACID
• 1.5. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 1.5.1. Phương pháp thu mẫu
• 1.5.2. Nguyên tắc tách chiết
• 1.5.3. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình tách chiết nguyên liệu
• 1.5.4. Phương pháp chiết đun khuấy từ hồi lưu
• 1.5.5. Phương pháp chiết lỏng – lỏng
• 1.5.6. Phương pháp chiết soxhlet
• 1.5.7. Phương pháp định tính
• 2. CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Địa điểm nghiên cứu
• 2.3. Hóa chất và thiết bị thí nghiệm
• 2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.4.1. Quy trình thực hiện chiết xuất caffeine trong hạt cà phê robusta
• 2.4.2. Định tính và xác định cấu trúc sản phẩm thu được
• 3. CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. KẾT QUẢ KHẢO SÁT THỜI GIAN CHIẾT CAFFEINE BẰNG ĐUN KHUẤY TỪ TỐI ƯU
• 3.2. KẾT QUẢ KHẢO SÁT TỈ LỆ NGUYÊN LIỆU/DUNG MÔI CHIẾT CAFFEINE BẰNG ĐUN KHUẤY TỪ
• 3.3. KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT CAFFEINE THU ĐƯỢC
• 3.4. KẾT QUẢ CHẠY PHỔ CỘNG TỪ HẠT NHÂN NMR CAFFEINE THU ĐƯỢC
• 3.5. KẾT QUẢ XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT CHLOROGENIC ACID TRONG HẠT CÀ PHÊ ROBUSTA
• 3.5.1. Kết quả hàm lượng béo có trong hạt cà phê
• 3.5.2. Kết quả sắc kí bản mỏng
• 4. CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• 4.1. Đề nghị
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Tự Nhiên Từ Hạt Cà Phê Robusta

Nghiên cứu chiết xuất hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta (Coffea canephora) đang thu hút sự chú ý của nhiều nhà khoa học. Hạt cà phê không chỉ là nguồn cung cấp caffeine mà còn chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học khác. Việc chiết xuất và phân tích các hợp chất này có thể mở ra hướng đi mới trong y học và dinh dưỡng. Các hợp chất như chlorogenic acid và flavonoid đã được chứng minh có tác dụng tích cực đối với sức khỏe con người.

1.1. Ứng Dụng Của Hợp Chất Tự Nhiên Trong Y Học

Hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta có nhiều ứng dụng trong y học. Chlorogenic acid, một trong những hợp chất chính, đã được nghiên cứu về khả năng kháng viêm và hạ đường huyết. Nghiên cứu cho thấy chlorogenic acid có thể giúp giảm cholesterol và cải thiện sức khỏe tim mạch.

1.2. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu Chiết Xuất

Nghiên cứu chiết xuất hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta không chỉ giúp hiểu rõ hơn về thành phần hóa học mà còn mở ra cơ hội phát triển các sản phẩm chức năng. Việc chiết xuất thành công các hợp chất này có thể tạo ra những sản phẩm mới có giá trị dinh dưỡng cao.

II. Vấn Đề Và Thách Thức Trong Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Từ Hạt Cà Phê

Mặc dù nghiên cứu chiết xuất hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta mang lại nhiều lợi ích, nhưng cũng gặp phải không ít thách thức. Các vấn đề như hiệu suất chiết xuất, độ tinh khiết của sản phẩm và khả năng ứng dụng trong thực tiễn là những yếu tố cần được xem xét kỹ lưỡng. Việc tối ưu hóa quy trình chiết xuất là rất quan trọng để đảm bảo chất lượng sản phẩm.

2.1. Hiệu Suất Chiết Xuất Hợp Chất

Hiệu suất chiết xuất hợp chất từ hạt cà phê Robusta phụ thuộc vào nhiều yếu tố như thời gian chiết, tỉ lệ nguyên liệu và dung môi. Nghiên cứu cho thấy rằng việc tối ưu hóa các yếu tố này có thể tăng cường hiệu suất chiết xuất đáng kể.

2.2. Độ Tinh Khiết Của Sản Phẩm Chiết Xuất

Độ tinh khiết của sản phẩm chiết xuất là một yếu tố quan trọng trong nghiên cứu. Các phương pháp như sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) thường được sử dụng để xác định độ tinh khiết và thành phần hóa học của các hợp chất chiết xuất.

III. Phương Pháp Chiết Xuất Hợp Chất Từ Hạt Cà Phê Robusta

Có nhiều phương pháp chiết xuất hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta, mỗi phương pháp có ưu và nhược điểm riêng. Các phương pháp phổ biến bao gồm chiết xuất lỏng-lỏng, chiết xuất Soxhlet và chiết xuất bằng siêu âm. Việc lựa chọn phương pháp phù hợp sẽ ảnh hưởng đến chất lượng và hiệu suất của sản phẩm chiết xuất.

3.1. Phương Pháp Chiết Xuất Soxhlet

Phương pháp chiết xuất Soxhlet là một trong những kỹ thuật phổ biến nhất để chiết xuất hợp chất từ hạt cà phê. Phương pháp này cho phép thu hồi tối đa các hợp chất có trong hạt cà phê, đặc biệt là caffeine và chlorogenic acid.

3.2. Chiết Xuất Lỏng Lỏng

Chiết xuất lỏng-lỏng là một phương pháp hiệu quả khác để tách các hợp chất tự nhiên. Phương pháp này sử dụng hai pha lỏng không hòa tan để tách biệt các hợp chất dựa trên độ hòa tan của chúng trong từng pha.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Từ Hạt Cà Phê Robusta

Kết quả nghiên cứu cho thấy rằng hạt cà phê Robusta chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng caffeine và chlorogenic acid có thể được chiết xuất với hiệu suất cao, mở ra cơ hội ứng dụng trong y học và dinh dưỡng. Việc xác định cấu trúc và hoạt tính của các hợp chất này là rất quan trọng để phát triển các sản phẩm mới.

4.1. Hiệu Suất Chiết Xuất Caffeine

Nghiên cứu cho thấy rằng hiệu suất chiết xuất caffeine từ hạt cà phê Robusta có thể đạt tới 90% khi sử dụng phương pháp Soxhlet. Điều này cho thấy tiềm năng lớn của hạt cà phê trong việc cung cấp caffeine cho các sản phẩm chức năng.

4.2. Phân Tích Chlorogenic Acid

Chlorogenic acid được chiết xuất với hiệu suất cao và có nhiều tác dụng sinh học. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng chlorogenic acid có khả năng kháng viêm và hạ đường huyết, làm cho nó trở thành một hợp chất tiềm năng trong y học.

V. Kết Luận Về Nghiên Cứu Chiết Xuất Hợp Chất Từ Hạt Cà Phê Robusta

Nghiên cứu chiết xuất hợp chất tự nhiên từ hạt cà phê Robusta đã chỉ ra rằng đây là một nguồn tài nguyên quý giá cho y học và dinh dưỡng. Các hợp chất như caffeine và chlorogenic acid không chỉ có giá trị dinh dưỡng mà còn có nhiều ứng dụng trong điều trị bệnh. Tương lai của nghiên cứu này hứa hẹn sẽ mang lại nhiều sản phẩm mới có lợi cho sức khỏe.

5.1. Tiềm Năng Phát Triển Sản Phẩm Mới

Với những lợi ích sức khỏe rõ ràng, việc phát triển các sản phẩm mới từ hạt cà phê Robusta là rất khả thi. Các sản phẩm chức năng có thể được phát triển dựa trên các hợp chất tự nhiên này.

5.2. Hướng Nghiên Cứu Tương Lai

Nghiên cứu trong tương lai có thể tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình chiết xuất và khám phá thêm nhiều hợp chất tự nhiên khác trong hạt cà phê Robusta. Điều này sẽ giúp mở rộng ứng dụng của hạt cà phê trong y học và dinh dưỡng.

Nội dung chính

Giới thiệu dự án

Cà phê là một trong những cây công nghiệp mũi nhọn của Việt Nam, trong đó cà phê Robusta (Coffea canephora) chiếm hơn 90% tổng sản lượng quốc gia (đạt trên 1,8 triệu tấn/năm). Tuy nhiên, chuỗi giá trị cà phê truyền thống chủ yếu dừng lại ở xuất khẩu nhân thô hoặc chế biến thức uống thông thường, dẫn đến giá trị gia tăng còn thấp. Về mặt dược lý sinh học, hạt cà phê Robusta chứa nguồn hợp chất tự nhiên dồi dào có giá trị y dược học vượt trội, đặc biệt là alkaloid Caffeine ($C_8H_{10}N_4O_2$) và polyphenol Chlorogenic acid ($C_{16}H_{18}O_9$).

Chlorogenic acid được chứng minh có khả năng chống oxy hóa mạnh, ức chế enzyme $\alpha$-glucosidase giúp hạ đường huyết, ức chế kết tập tiểu cầu, giảm nồng độ cholesterol xấu (LDL), và kháng các dòng virus như HBV hay vi khuẩn ở dải nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) từ $20\text{--}80\ \mu\text{g/mL}$. Trong khi đó, caffeine là chất kích thích hệ thần kinh trung ương chọn lọc trên thụ thể Adenosine ($A_1, A_{2A}$), trợ tim, lợi tiểu và tăng cường tác dụng hiệp đồng của các hoạt chất giảm đau, hạ sốt như Paracetamol hay Aspirin.

Vấn đề kỹ thuật cốt lõi hiện nay là việc chiết tách các hoạt chất này thường gặp trở ngại do hàm lượng lipid trong hạt cà phê khá cao (chiếm từ $10\text{--}15%$), gây cản trở sự khuếch tán dung môi và làm giảm độ tinh khiết của dịch chiết. Đồng thời, nhiều phương pháp chiết công nghiệp cũ sử dụng dung môi clo hóa độc hại hoặc đòi hỏi thiết bị đắt tiền như chiết chất lỏng siêu tới hạn ($CO_2\text{-SFE}$) khó nhân rộng ở quy mô vừa và nhỏ.

+-------------------------------------------------------------------------+
|                              ĐỀ TÀI KHÓA LUẬN                           |
| "Nghiên cứu khảo sát ly trích các hợp chất tự nhiên có trong hạt cà phê |
|      Robusta (Coffea canephora) có hoạt tính sinh học ứng dụng y học"   |
+-------------------------------------------------------------------------+
                                     │
           ┌─────────────────────────┴─────────────────────────┐
           ▼                                                   ▼
┌──────────────────────────────────────┐    ┌──────────────────────────────────────┐
│       PHÂN ĐOẠN 1: CAFFEINE          │    │    PHÂN ĐOẠN 2: CHLOROGENIC ACID     │
│ - Tối ưu đun khuấy từ hồi lưu ($H_2O$) │    │ - Tẩy béo bằng Soxhlet ($Pet\ Ether$)  │
│ - Chiết lỏng - lỏng ($CHCl_3$)       │    │ - Trích ly Soxhlet ($MeOH$) 12h      │
│ - Thăng hoa tinh khiết hóa (~200°C)  │    │ - Chiết lỏng - lỏng phân đoạn ($EtOAc$)│
│ - Định danh: TLC, $T_{nc}$, $^1H$/$^{13}C$-NMR │    │ - Định danh sơ bộ: TLC đa hệ         │
└──────────────────────────────────────┘    └──────────────────────────────────────┘

Mục tiêu nghiên cứu cụ thể

1. Khảo sát quy trình trích ly và tinh chế Caffeine: Xác định thông số tối ưu về thời gian chiết ($3\text{h}, 6\text{h}, 9\text{h}$) và tỷ lệ nguyên liệu/dung môi ($1:5, 1:10, 1:15, 1:20\ \text{g/mL}$) bằng phương pháp đun khuấy từ hồi lưu; tinh chế và kiểm tra cấu trúc qua điểm nóng chảy ($T_{nc}$), sắc ký lớp mỏng (TLC) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân ($^1H\text{-NMR}, ^{13}C\text{-NMR}$).
2. Xây dựng quy trình tách chiết Chlorogenic acid: Loại bỏ thành phần lipid cản trở bằng hệ Soxhlet với Petroleum ether; thu nhận cao chiết giàu Chlorogenic acid bằng phân đoạn dung môi phân cực tăng dần (Methanol $\rightarrow$ Chloroform $\rightarrow$ Ethyl Acetate).
3. Đánh giá hiệu suất và độ tinh khiết: Cung cấp bộ dữ liệu thực nghiệm chuẩn hóa, tạo tiền đề chuyển giao quy trình sản xuất cao dược liệu định chuẩn.

Phạm vi và giới hạn nghiên cứu

• Đối tượng: Hạt cà phê Robusta (Coffea canephora, họ Rubiaceae) thu hoạch tại xã Hòa Xuân, Đắk Lắk; kích thước hạt chuẩn $\approx 1.2\text{ cm}$, hạt chín đỏ phơi khô tự nhiên và nghiền bột.
• Giới hạn kỹ thuật: Thí nghiệm thực hiện ở quy mô phòng thí nghiệm (quy mô mẻ $30\text{ g}$ bột nguyên liệu) sử dụng các thiết bị phân tích tiêu chuẩn.

---

Phân tích và thiết kế giải pháp

Phân tích hiện trạng

Hiện nay, việc trích ly caffeine và chlorogenic acid từ phụ phẩm hoặc hạt cà phê được thực hiện bằng nhiều phương pháp với ưu - nhược điểm rõ rệt:

Phương pháp	Thông số kỹ thuật	Ưu điểm	Nhược điểm / Rào cản
$CO_2$ siêu tới hạn ($scCO_2$)	Áp suất $> 73.8\text{ bar}$, $T > 31.1^\circ\text{C}$, thêm ethanol $5%$	Không dư lượng độc hại, độ chọn lọc cực cao	Chi phí đầu tư máy móc rất lớn, khó ứng dụng phổ cập
Chiết dung môi hữu cơ trực tiếp ($CH_2Cl_2, C_6H_6$)	Ngâm dầm/hồi lưu dung môi clo hóa hoặc hydrocacbon thơm	Hiệu suất tách caffeine cao ($> 90%$)	Độc tính cao, dung môi có nguy cơ gây ung thư (nhóm chlorinated solvents)
Quy trình đề xuất (Thủy nhiệt kiềm hóa + LLE + Soxhlet)	Đun khuấy từ hồi lưu với nước + $CaCO_3$, LLE với $CHCl_3$, Soxhlet với $MeOH$	An toàn sinh thái, chi phí hóa chất thấp, dễ triển khai	Cần nhiều bước phân đoạn lỏng - lỏng để làm sạch

Phân tích yêu cầu quy trình (Mô hình MoSCoW)

• Must have (Bắt buộc): Loại bỏ hoàn toàn tạp chất béo không phân cực; dung môi chiết caffeine thô là nước nóng an toàn; tinh thể caffeine thu được đạt nhiệt độ nóng chảy chuẩn Dược điển Việt Nam IV ($234\text{--}239^\circ\text{C}$).
• Should have (Nên có): Tối ưu hóa tỷ lệ dung môi chiết nhằm giảm năng lượng cô quay thu hồi; phổ NMR xác nhận đầy đủ vị trí proton và carbon.
• Could have (Có thể mở rộng): Tách phân đoạn Chlorogenic acid tinh khiết cao bằng sắc ký cột pha đảo ($C_{18}\text{-SPE}$).
• Won't have (Chưa thực hiện đợt này): Thử nghiệm in-vivo hoạt tính hạ lipid máu trên mô hình động vật sống.

Thiết kế hệ thống thực nghiệm và công nghệ

Quy trình công nghệ sử dụng hệ thống thiết bị và hóa chất tiêu chuẩn phân tích:

• Thiết bị: Máy khuấy từ gia nhiệt Velp ARE, bộ chiết Soxhlet Isolab 1000 mL, tủ sấy đối lưu ALM400, bể ổn nhiệt Memmert WB7, đèn soi UV Vilber Lourmat VL-6LC (254 nm / 365 nm), máy đo điểm nóng chảy chuyên dụng, máy quang phổ cộng hưởng từ hạt nhân Bruker NMR ($60\text{--}500\text{ MHz}$).
• Hóa chất & Pha tĩnh: Bản mỏng nhôm tráng sẵn Silica gel $60\ F_{254}$ (Merck KGaA, Darmstadt, Germany); Chloroform, Methanol, Acetone, Ethyl Acetate, Petroleum ether, $n$-Butanol, Acid Acetic, $NH_3$ đậm đặc, $CaCO_3$ (đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân tích AR).

graph TD
    A[Bột hạt Cà phê Robusta 30g] --> B[Giai đoạn 1: Tẩy béo bằng Petroleum Ether qua Soxhlet 8-10h]
    B --> C[Bã bột cà phê đã tẩy béo]
    B --> D[Dịch béo thải loại - Hao hụt 6.9%]
    
    C --> E[Trích ly Soxhlet với Methanol 12h]
    E --> F[Dịch chiết MeOH cô đặc + Hòa tan trong Nước ấm]
    
    F --> G[Chiết lỏng - lỏng LLE với Chloroform]
    G --> H[Pha Chloroform: Chứa Caffeine]
    G --> I[Pha Nước: Chứa Chlorogenic Acid & Polyphenol]
    
    H --> J[Thu hồi dung môi 61-63°C -> Thăng hoa 200°C -> Tinh thể Caffeine tinh khiết]
    I --> K[Chiết lỏng - lỏng LLE với Ethyl Acetate]
    K --> L[Cô cạn pha Ethyl Acetate -> Cao giàu Chlorogenic Acid]

Phương pháp luận (Methodology)

Nghiên cứu ứng dụng quy trình thực nghiệm định lượng kết hợp xử lý thống kê:

1. Thiết kế thí nghiệm đơn yếu tố (Single-factor Experiment): Khảo sát biến thiên hiệu suất trích ly caffeine theo thời gian và tỷ lệ dung môi.
2. Xử lý số liệu: Mọi thí nghiệm lặp lại 3 lần ($n=3$), phân tích phương sai ANOVA và so sánh giá trị trung bình bằng phép thử Duncan ($p < 0.05$) trên phần mềm thống kê chuyên dụng.
3. Đánh giá rủi ro an toàn: Sử dụng hệ thống ống sinh hàn hồi lưu kín để triệt tiêu thất thoát hơi dung môi hữu cơ ($CHCl_3, MeOH$); kiểm soát nhiệt độ thăng hoa trong tủ hút để tránh quá nhiệt phân hủy hoạt chất.

---

Implementation và kết quả

Quy trình công nghệ chi tiết

# Pseudo-code mô hình hóa thuật toán chiết xuất & tối ưu hóa quy trình
def extraction_process_caffeine(sample_weight_g=30, solvent="H2O", alkalizer="CaCO3"):
    """
    Quy trình trích ly & tinh chế Caffeine từ hạt cà phê Robusta
    """
    # Bước 1: Chiết thô đun khuấy từ hồi lưu
    optimal_time_hours = 6
    optimal_ratio = 15  # 1:15 (w/v) -> 450 mL H2O
    raw_extract = reflux_boil(
        sample=sample_weight_g, 
        solvent_vol=sample_weight_g * optimal_ratio, 
        time=optimal_time_hours, 
        catalyst=alkalizer
    )
    
    # Bước 2: Làm nguội & Phân đoạn lỏng - lỏng (LLE)
    concentrated_extract = evaporate_to(raw_extract, target_vol_ml=200)
    chloroform_layer = liquid_liquid_extraction(
        source=concentrated_extract, 
        extractant="CHCl3", 
        stages=3
    )
    
    # Bước 3: Thu hồi dung môi & Thăng hoa
    crude_caffeine = solvent_recovery(chloroform_layer, temp_range=(61, 63))
    pure_caffeine_crystals = sublimation(crude_caffeine, target_temp=200)
    
    return calculate_yield(pure_caffeine_crystals, sample_weight_g)

Testing và validation

1. Khảo sát thời gian chiết caffeine tối ưu

Thí nghiệm cố định khối lượng mẫu $30\text{ g}$ bột cà phê, thực hiện ở 3 mức thời gian ($3\text{h}, 6\text{h}, 9\text{h}$).

Nghiệm thức	Khối lượng bột mẫu (g)	Khối lượng Caffeine TB (g)	Hiệu suất trích ly TB (%)	Ý nghĩa thống kê (Duncan, $p=0.05$)
3 giờ	30.0	0.0739	0.25	$b$
6 giờ	30.0	0.0961	0.33	$a$
9 giờ	30.0	0.1017	0.34	$a$

Nhận xét: Khi tăng thời gian từ 3h lên 6h, hiệu suất tăng mạnh từ $0.25%$ lên $0.33%$. Tiếp tục nâng lên 9h, hiệu suất chỉ tăng thêm $0.01%$ (lên $0.34%$), khác biệt không có ý nghĩa thống kê ($p > 0.05$). Do đó, mốc 6 giờ là thời gian tối ưu giúp tiết kiệm chi phí năng lượng.

2. Khảo sát tỷ lệ nguyên liệu / dung môi

Khảo sát ở thời gian tối ưu 6h với 4 tỷ lệ: $1:5\ (150\text{ mL})$, $1:10\ (300\text{ mL})$, $1:15\ (450\text{ mL})$, $1:20\ (600\text{ mL})$.

Tỷ lệ nguyên liệu/dung môi	Thể tích $H_2O$ (mL)	Khối lượng Caffeine TB (g)	Hiệu suất trích ly TB (%)	Phân nhóm Duncan
1:5	150	0.0892	0.30	$c$
1:10	300	0.0957	0.32	$b$
1:15	450	0.1112	0.37	$a$
1:20	600	0.1123	0.37	$a$

Nhận xét: Tỷ lệ 1:15 cho hiệu suất cao nhất ($0.37%$), tăng $23.3%$ so với tỷ lệ 1:5. Tăng lên 1:20 không làm tăng thêm hiệu suất do đã đạt trạng thái bão hòa khuếch tán.

3. Định danh và kiểm tra cấu trúc Caffeine

• Điểm nóng chảy ($T_{nc}$): Tinh thể thăng hoa bắt đầu chảy ở $235.5^\circ\text{C}$ và chảy hoàn toàn ở $238.0^\circ\text{C}$, nằm trọn vẹn trong khoảng chuẩn của Dược điển Việt Nam IV ($234\text{--}239^\circ\text{C}$).
• Sắc ký lớp mỏng (TLC):
  • Hệ 1 ($CHCl_3 : \text{Acetone} = 95:5$): $R_f = 0.43$, vết đơn tròn gọn, đồng mức với caffeine chuẩn.
  • Hệ 2 ($\text{Amoniac đđ} : \text{Acetone} : CHCl_3 : n\text{-Butanol} = 1:3:3:4$): $R_f = 0.85$.
  • Hệ 3 ($n\text{-Butanol} : \text{Acid Acetic} : \text{Nước} = 14:3:4$): $R_f = 0.88$.
• Đối chiếu dữ liệu phổ Cộng hưởng từ hạt nhân ($^1H\text{-NMR}$ và $^{13}C\text{-NMR}$):

Vị trí Proton ($^1H$)	Thực nghiệm $\delta$ (ppm)	Sitkowski (1994) $\delta$ (ppm)	Vị trí Carbon ($^{13}C$)	Thực nghiệm $\delta$ (ppm)	Sitkowski (1994) $\delta$ (ppm)
H-1 ($-\text{CH}_3$)	3.40 (s, 3H)	3.37 (s)	C-1	27.94	27.5
H-3 ($-\text{CH}_3$)	3.58 (s, 3H)	3.55 (s)	C-2 ($C=O$)	151.77	151.3
H-7 ($-\text{CH}_3$)	3.99 (s, 3H)	4.01 (d)	C-3	29.76	29.3
H-8 ($=CH-$)	7.51 (s, 1H)	7.58 (q)	C-4	148.76	148.3
—	—	—	C-5	107.65	107.1
—	—	—	C-6 ($C=O$)	155.47	154.9
—	—	—	C-7	33.58	33.2
—	—	—	C-8	141.42	141.2

Dữ liệu phổ NMR hoàn toàn trùng khớp với cấu trúc khung purine của 1,3,7-trimethylxanthine chuẩn.

                  CH3 (H-1 / C-1: 27.94 ppm)
                   |
                   N1
                 /    \
     (C-6) O = C6      C2 = O (C-2: 151.77 ppm)
               |       |
     (C-5) -- C5       N3 -- CH3 (H-3 / C-3: 29.76 ppm)
             /   \\   /
       (C-7) CH3-N7 C4 (C-4: 148.76 ppm)
                  \ //
                   C8 - H (H-8: 7.51 ppm / C-8: 141.42 ppm)

4. Kết quả ly trích Chlorogenic Acid

• Hàm lượng chất béo: Quá trình khử béo bằng Petroleum ether trong 8–10h ghi nhận tỷ lệ béo chiếm $6.9%$ khối lượng hạt thô.
• Sắc ký TLC dịch chiết phân đoạn: Sau khi loại bỏ caffeine vào pha Chloroform và chiết phân đoạn bằng Ethyl Acetate, bản mỏng trong hệ dung môi phân cực ($\text{Acid Acetic} : \text{Nước} = 14:3:4$) hiển thị vết đơn sắc nét có $R_f$ tương đương chất chuẩn Chlorogenic acid, chứng minh đã tách thành công nhóm polyphenol này ra khỏi dịch chiết nước thô.

---

Đổi mới và đóng góp

Nghiên cứu mang lại những đóng góp khoa học và thực tiễn quan trọng:

1. Quy trình kết hợp xanh & tối ưu chi phí: Thay vì sử dụng dung môi clo hóa trực tiếp để chiết thô ban đầu, đề tài đã phát triển giải pháp thủy nhiệt kiềm hóa bằng $CaCO_3$, giúp giải phóng liên kết caffeine-tannin tự nhiên, đạt hiệu suất trích ly tinh thể $0.37%$ một cách an toàn.
2. Kỹ thuật tháo gỡ trở ngại chất béo ($6.9%$ lipid): Đã thiết lập giai đoạn tẩy béo chuẩn hóa bằng Soxhlet/Petroleum ether trước khi trích ly Chlorogenic acid, giúp tăng độ trong của dịch chiết phân cực và tránh hiện tượng tạo nhũ tương khó tách ở bước chiết lỏng - lỏng tiếp theo.
3. Phân lập liên hoàn đa hoạt chất: Tích hợp quy trình 2 trong 1 trên cùng một mẻ nguyên liệu, vừa thu hồi được alkaloid (Caffeine) tinh khiết cao, vừa cô lập được nhóm acid hữu cơ polyphenol (Chlorogenic acid), gia tăng gấp đôi giá trị kinh tế so với các phương pháp chiết đơn lẻ trước đây.

---

Ứng dụng thực tế và triển khai

Tình huống ứng dụng thực tế

• Sản xuất dược phẩm phối hợp: Cung cấp nguồn caffeine đạt chuẩn Dược điển làm tá dược trợ tim, tăng hấp thu cho thuốc giảm đau hạ sốt (kết hợp Paracetamol + Caffeine).
• Thực phẩm bảo vệ sức khỏe & Nutraceuticals: Ứng dụng cao chiết giàu Chlorogenic acid làm nguyên liệu bào chế viên uống hỗ trợ giảm cân, ức chế hấp thu đường, hạ mỡ máu (giảm cholesterol toàn phần và LDL) cho người tiền tiểu đường hoặc hội chứng chuyển hóa.

+--------------------------------------------------------------------------+
|                     LỘ TRÌNH TRIỂN KHAI THỰC TẾ (ROADMAP)                |
+--------------------------------------------------------------------------+
  Giai đoạn 1 (Tháng 1-3):    Chuẩn hóa nguồn nguyên liệu cà phê Robusta
                              Đắk Lắk & Thiết lập tiêu chuẩn độ ẩm < 10%.
  Giai đoạn 2 (Tháng 4-8):    Scale-up quy trình chiết đun hồi lưu lên quy mô
                              pilot 50 kg/mẻ; kiểm soát dung môi hồi lưu > 85%.
  Giai đoạn 3 (Tháng 9-12):   Tinh chế cao Chlorogenic acid đạt hàm lượng > 45%;
                              tiến hành kiểm nghiệm vi sinh và kim loại nặng.
  Giai đoạn 4 (Tháng 13+):    Đăng ký công bố nguyên liệu thực phẩm chức năng
                              và kết nối chuỗi cung ứng dược phẩm.

Phân tích hiệu quả kinh tế (ROI)

Tận dụng hạt cà phê Robusta phẩm cấp trung bình hoặc hạt thứ phẩm trong công nghiệp rang xay (giá thành nguyên liệu thô $\approx 60.000\text{--}90.000\ \text{VNĐ/kg}$), quy trình cho phép thu nhận các hoạt chất có giá trị thương phẩm cao ($> 2.500.000\ \text{VNĐ/kg}$ cao chuẩn hóa), ước tính mang lại biên lợi nhuận gộp trên $45%$ cho các cơ sở chiết xuất dược liệu.

---

Hạn chế và hướng phát triển

Hạn chế kỹ thuật

• Chưa thực hiện khảo sát các yếu tố ảnh hưởng sâu như độ mịn bột nguyên liệu, tốc độ khuấy từ ($rpm$), và số lần lặp chiết kiệt phân đoạn.
• Phân đoạn Chlorogenic acid mới dừng lại ở mức cao thô làm giàu và định tính qua TLC, chưa tiến hành phân tách đơn chất bằng sắc ký cột hấp phụ pha đảo ($RP\text{-HPLC}$) hoặc sắc ký cột Silica gel.

Hướng phát triển tiếp theo

• Khảo sát ứng dụng công nghệ hỗ trợ hiện đại: Trích ly hỗ trợ vi sóng (MAE) và sóng siêu âm (UAE) để rút ngắn thời gian chiết từ 6 giờ xuống dưới 45 phút.
• Khảo sát hoạt tính sinh học in-vitro: Đánh giá khả năng ức chế enzyme lipase tụy, $\alpha$-glucosidase và thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn trên các chủng vi khuẩn chuẩn (Staphylococcus aureus, Escherichia coli).

---

Đối tượng hưởng lợi

• Sinh viên & Học viên ngành Dược / CNSH: Nắm bắt quy trình thực nghiệm chuẩn từ chiết xuất, phân lập đến định danh phổ cấu trúc ($^1H\text{-NMR}, ^{13}C\text{-NMR}$).
• Kỹ sư R&D & Nhà nghiên cứu: Bộ thông số tối ưu ($6\text{h}$, tỷ lệ $1:15$) và hệ dung môi sắc ký chuẩn ($R_f = 0.43\text{--}0.88$) làm tiền đề thiết kế dây chuyền sản xuất.
• Doanh nghiệp chế biến Nông sản & Dược phẩm: Nâng cao chuỗi giá trị cà phê Việt Nam thông qua chế biến sâu, tạo ra dòng sản phẩm dược liệu có giá trị gia tăng cao.

---

Câu hỏi thường gặp

1. Yêu cầu kỹ thuật cốt lõi để triển khai quy trình chiết xuất này là gì?

Hệ thống cần trang bị nồi chiết có cánh khuấy gia nhiệt hồi lưu kín, bồn chiết lỏng - lỏng phân pha, hệ thống cô quay chân không thu hồi dung môi và buồng thăng hoa kiểm soát dải nhiệt $200^\circ\text{C}$.

2. Tại sao cần phải tẩy béo hạt cà phê trước khi chiết Chlorogenic acid?

Hạt Robusta chứa $6.9%$ chất béo không phân cực. Nếu không loại bỏ trước bằng Petroleum ether, lipid sẽ tan vào dung môi cồn hữu cơ, gây đục dịch chiết, cản trở sự kết tinh và tạo nhũ tương bền vững gây tắc nghẽn khi chiết phân đoạn với Ethyl Acetate.

3. Tinh thể Caffeine thu được có đáp ứng tiêu chuẩn Dược điển không?

Có. Điểm nóng chảy ghi nhận $235.5\text{--}238.0^\circ\text{C}$ hoàn toàn phù hợp với khung tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam IV ($234\text{--}239^\circ\text{C}$), cùng với dữ liệu phổ NMR khẳng định không chứa tạp chất hữu cơ lạ.

4. Quy trình xử lý dung môi Chloroform nhằm đảm bảo an toàn ra sao?

Chloroform chỉ sử dụng ở khâu chiết lỏng - lỏng phân đoạn trong hệ kín. Dung môi được thu hồi triệt để ở nhiệt độ $61\text{--}63^\circ\text{C}$ bằng bộ ngưng tụ hồi lưu (tỷ lệ thu hồi đạt $> 85%$) để tái sử dụng tuần hoàn, giảm thiểu phát thải môi trường.

5. Khả năng mở rộng quy mô (Scalability) của quy trình như thế nào?

Quy trình sử dụng các dung môi phổ biến, kỹ thuật đun khuấy nhiệt và chiết lỏng - lỏng là các đơn thao tác tiêu chuẩn trong công nghệ hóa dược, rất dễ dàng nâng quy mô lên các bồn chiết $500\text{--}1000\text{ lít}$ tại các nhà máy đạt chuẩn GMP-WHO.

---

Kết luận

Đề tài đã hoàn thành xuất sắc việc xây dựng và chuẩn hóa quy trình ly trích hai hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao từ hạt cà phê Robusta (Coffea canephora):

• Xác lập điều kiện tối ưu chiết Caffeine bằng phương pháp đun khuấy từ hồi lưu tại thời gian 6 giờ và tỷ lệ nguyên liệu/dung môi 1:15 (g/mL), đạt hiệu suất $0.37%$. Sản phẩm tinh chế thăng hoa đạt độ tinh khiết cao, cấu trúc được khẳng định rõ nét qua phổ $^1H\text{-NMR}, ^{13}C\text{-NMR}$ và nhiệt độ nóng chảy $235.5\text{--}238^\circ\text{C}$.
• Xây dựng thành công quy trình phân lập Chlorogenic acid qua các bước tẩy béo Soxhlet (loại $6.9%$ lipid) và chiết phân đoạn hệ dung môi phân cực tăng dần.

Kết quả này mở ra tiềm năng to lớn trong việc nâng cao giá trị hạt cà phê Robusta Việt Nam, chuyển đổi từ xuất khẩu nông sản thô sang nguồn nguyên liệu y dược chất lượng cao phục vụ sức khỏe cộng đồng.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1. TỔNG QUAN VỀ CÂY CÀ PHÊ ROBUSTA 1.1 Đặc điểm thực vật và phân bố Cà phê thuộc họ Rubiaceae, chi Coffea, hiện nay cà phê được trồng phân bố rải rác khắp các vùng nhiệt đới, đại diện có 3 loài chính sau: • Cà phê chè (Coffea arabica): có nguồn gốc từ cao nguyên phía tây nam Ethiopia, cây được du nhập sang vùng Nam Á là Ấn Độ. Sau đó, cà phê chè được trồng ở đảo Java năm 1710 ở vùng Caribê và Nam Mỹ. Hiện nay cà phê chè dược trồng nhiều ở vùng châu Mỹ la tinh, Trung Phi, Ấn Độ, Indonexia, Philippin, Thái Lan và Việt Nam.

• Cà phê vối (Coffea canephora): Có nguồn gốc ở vùng rừng xích đạo châu Phi, từ Guinca đến Uganda. Cà phê vối cũng sớm được thuần hóa và trồng nhiều ở châu Phi, Đến năm 1900 du nhập vào Java sau đó tiếp tục được đưa đến các nước khác. Hiện nay, cà phê vối được trồng nhiều nhất ở Indonexia sau đó đến Việt Nam. • Cà phê mít (Coffea liberica): Có nguồn gốc từ vùng nhiệt đới Trung và Tây Phi.

Năm 1792, được trồng đầu tiên ở Liberia, từ năm 1872 – 1875 du nhập dến Indonesia. Hiện nay cà phê mít được trồng ở nhiều nước trong đó có Việt Nam tuy nhiên với sản lượng không lớn (Đỗ Huy Bích, 2006). Cây cà phê robusta có tên khoa học: Coffea canephora hay Coffea robusta, thường được gọi là cà phê vối, thuộc họ thiên thảo. Đặc điểm thực vật được thể hiện ở bảng 1.1 Đặc điểm thực vật về cây caffeine Giới (Kingdom) Plantae (Thực vật) Ngành (Division) Magnoliophyta Lớp (Class) Magnoliopsida Bộ (Ordo) Gentianales Họ (Familia) Rubiaceae Trịnh Thị Hoài Phương 4 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS.

Nguyễn Minh Hoàng Chi (Genus) Coffea Loài (Species) Coffea canephora Cà phê là cây nhiệt đới, ưa sáng thích hợp với vùng khí hậu nóng ẩm. Chiều cao cây 5 – 6 m, thân cành hình trụ phân nhánh nhiều, tán rộng. Lá mọc đối đầu hình bầu dục hoặc hình trứng, dài 10 – 15 cm, rộng 5 – 6 cm, mặt trên xanh sẫm bóng, mặt dưới rất nhạt, gân nổi rõ, mép uống lượn, cuốn lá dài 0,7 – 1 cm. Cà phê thuộc loại cây công nghiệp, sinh trưởng sau 3 năm bắt đầu có hoa.

Hoa mọc thành chùm tụ tập ở kẽ lá, màu trắng, hoa có 5 cánh đều, hoa cà phê robusta không bao giờ ra lại vào mùa sau tại vị trí cũ. Quả hạch, hình bầu dục hoặc tròn hơi dẹt đường kính 10 – 13 mm, bên trong chứa hai nhân nhưng đôi khi có một nhân nhân dẹt hơi cong màu xám vàng, quả non màu xanh, quả chín màu vàng đến đỏ sẫm (Đỗ Huy Bích, 2006).1: Cà phê Robusta (Coffea canephora) 1.2 Tác dụng dược lý Trịnh Thị Hoài Phương 5 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS. Nguyễn Minh Hoàng Theo tài liệu nước ngoài, quả cà phê tươi có tác dụng hạ sốt, lợi tiểu. Hạt cà phê rang hiện đang là thức uống có tác dụng kích thích thần kinh.

Caffeine là chất chính trong hạt cà phê có tác dụng kích thích thần kinh trung ương, lợi tiểu và làm giản cơ trơn (Đỗ Huy Bích, 2006).3 Nghiên cứu về thành phần hóa học đối với hạt cà phê Hạt cà phê chứa một số chất điển hình: ⬩ Glucid: có 5 – 8% đường khử và saccharose, ít mantol, polysaccharid,… Không có tinh bột. ⬩ Lipid: chiếm 10- 15% ⬩ Acid hữu cơ: oxalic acid, citric acid, malic acid. ⬩ Acid phenol: 5 – 10% chlorogenic acid. ❖ Các nghiên cứu trong nước.

Trong nghiên cứu của nhóm tác giả Nguyễn Phương Quyên năm 2015 đã cho biết các hợp chất điển hình có trong hạt cà phê gồm caffeine và các flavonoid, gallic acid, catechin, caffeic acid, vanillin, chlorogenic acid,… là những hợp chất có thể ứng dụng trong y học. Nhóm tác giả đã tiến hành trích ly và phân tích hàm lượng caffeine của 15 mẫu cà phê bằng phương pháp Soxhlet và sử dụng máy HPLC để định lượng caffein có trong hạt cà phê và định danh một số hợp chất hóa học trong thành phần của hương cà phê bằng phương pháp GC- MS. (Nguyễn Phương Quyên và cs. ❖ Các nghiên cứu ngoài nước.

Năm 2014 tác giả Nuhu AA đã nghiên cứu cô lập từ hạt cà phê bằng kỹ thuật chiết pha rắn Solid-Phase Extraction (SPE) cùng với sử dụng các phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC- MS) đã định danh xác đinh một số hợp chất tiêu biểu trong hạt cà phê có ứng ụng trong y học gồm caffeine, chlorogenic acid, diterpen và trigonelline Năm 2012 Abdul Munahb A G Nasser đã cô lập thành công chlorogenic acid từ hạt cà phê bằng phương pháp sắt ý cột C18. TỔNG QUAN VỀ CAFFEINE Trịnh Thị Hoài Phương 6 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS. Nguyễn Minh Hoàng 2.1 Phân loại Caffeine danh pháp quốc tế: 1,3,7-Trimethylpurine-2,6-dione, có công thức hóa học là C8H10N4O2, thuộc nhóm các chất methylxanthine, ở dạng tinh thể, không màu, không mùi, vị đắng, tan được trong nước và các dung môi hữu cơ như methanol, chloroform,… là chất kích thích tự nhiên có nhiều trong lá chè, hạt cà phê, hạt coca và các loài thực vật khác (Najafi và cs. Caffeine là chất kích thích hệ thần kinh trung ương, làm cho tinh thần minh mẫn, tăng cường sự nhận biết của não bộ, kích thích hoạt động tim, thận, phổi (Spiller, 2000; Lynge, 1997) đã và đang có ứng dụng nhiều trong dược phẩm.2: Công thức cấu tạo của caffeine Tính chất hóa lý: Caffeine tinh khiết dạng tinh thể, không màu, không mùi, vị đắng, nhiệt độ nóng chảy 235oC, trong nước ở nhiệt độ bình thường tan một ít, tan nhiều trong nước nóng hoặc tan nhiều trong chloroform.2 Hoạt tính sinh học Đối với hệ thần kinh trung ương caffeine có tác dụng mạnh nhất trong các methylxanthine.

Tạo cho người dùng cảm giác ít mệt mỏi và tỉnh táo, đôi khi với liều lượng lớn có thể khiến người dùng rơi vào trạng thái bồn chồn lo lắng, mất ngủ. Đối với tim mạch, caffeine có tác dụng kích thích tim làm nhịp tim nhanh hơn, huyết áp tăng nhẹ. Đối với co cơ trơn, caffeine có tác dụng làm giản cơ trơn, tác dụng này ứng dụng trong y học giúp điều trị cho các bệnh nhân co thắt. Đối với cơ vân, caffeine có tác dụng tăng cường khả năng làm việc của cơ bắp ở người.

Trịnh Thị Hoài Phương 7 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS. Nguyễn Minh Hoàng Cơ chế hoạt động của caffeine đối với cơ thể: Tác dụng tiềm tàng của caffeine ở cấp độ tế bào có thể được giải thích bằng ba cơ chế hoạt động: sự đối kháng của các thụ thể adenosine, đặc biệt là trong hệ thống thần kinh trung ương; việc huy động lưu trữ canxi nội bào; sự ức chế phosphodiesterase. ▪ Sự đối kháng của Adenosine: Caffeine ngăn chặn các thụ thể adenosine, chủ yếu là các phân nhóm A1 và A2A, góp phần kích thích giải phóng dopamine, noradrenalin và glutamate. Caffeine có thể làm giảm lưu lượng máu não và lưu lượng máu cơ tim, bằng cách ức chế thụ thể adenosine A1, A2A và A2B trong các mạch máu và hạn chế sự giãn mạch qua trung gian adenosine, là thụ thể có thể được tìm thấy trong hầu hết các khu vực vùng não.

Nồng độ cao nhất là ở vỏ não. ▪ Huy động Canxi nội bào: Caffeine làm giải phóng canxi từ mạng lưới sarcoplasmic và ức chế sự tái hấp thu. Thông qua các cơ chế này, caffeine có thể làm tăng khả năng co bóp trong các cơn co thắt dưới mức tối đa ở những người sử dụng caffeine theo chỉ định hay ngẫu nhiên. Canxi nội bào xác định sự kích hoạt của nitric oxide synthase nội mô (eNOS), với việc sản xuất một lượng nitrogen oxit cao hơn.

Do đó, một số tác động gây ra bởi caffeine sẽ được điều hòa bởi chức năng thần kinh cơ và tăng lực co bóp trong cơ xương. Một tác dụng đối kháng tiềm năng của caffeine được thể hiện là kích thích lợi tiểu, chịu trách nhiệm về tác dụng ergolytic ở các vận động viên sức bền trong quá trình tập luyện và thi đấu kéo dài. ▪ Tác dụng lên hệ thần kinh trung ương: Caffeine làm tăng nhận thức về sự tỉnh táo và đôi khi gây ra lo lắng, đặc biệt là ở liều cao. Hơn nữa, sự đối kháng của thụ thể A1 và A2 có thể gây co giật và co mạch máu não.

Sản phẩm có chứa caffein ▪ Caffein được dùng trong thành phần các loại thuốc cảm cúm (cold and flu medication), antipyretics (hạ sốt) và analgesics (giảm đau) vì làm tăng khả năng hấp thụ trong ruột (intestinal absorption) và chống lại tình trạng buồn ngủ (counteract drowsiness). Trịnh Thị Hoài Phương 8 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS. Nguyễn Minh Hoàng Ví dụ: thuốc Extra-strength Excedrin có chứa 250 mg acetaminophen tức hoạt chất paracetamol, 250 mg aspirin, and 65 mg caffeine ▪ Caffeine phổ biến nhất trong chế độ ăn uống là cà phê, bên cạnh đó đồ uống ca cao, nước ngọt, nước tăng lực, thuốc, và các loại thực phẩm và chất bổ sung thể thao chuyên dụng cũng chứa caffeine. Hiện tại có vô số nhãn hiệu có thể tìm thấy hàm lượng caffeine dao động từ mức khiêm tốn 50 mg đến mức đáng báo động 500 mg mỗi lon hoặc chai.

Trong những năm gần đây, để hạn chế hiện tượng này, các giới hạn đã được đặt ra cho những đồ uống chứa caffeine. TỔNG QUAN VỀ CHLOROGENIC ACID Công thức phân tử: C16H18O9. Trọng lượng phân tử: 354,31 g/mol. Tên khoa học theo hệ thống IUPAC: acid 3R-[[3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo- 2-propenyl]oxy]-1S,4R,5R-trihydroxy-cyclohexanecarboxylic.

Tên khác: acid 3-0-Caffeoylquinic. Nhiệt độ nóng chảy: 210oC.3: Công thức cấu tạo của Chlorogenic acid Chlorogenic acid có dạng bột màu trắng hoặc hơi ngà vàng tan được trong nước và các dung môi hữu cơ như ethanol, methanol,… Chlorogenic acid có khả năng kháng virus B trong mô hình vịt và có khả năng kháng virus cúm H1N1, hoạt động chống HIV và kháng khuẩn và kháng nấm. Phương pháp thu nhận các hợp chất chlorogenic acid trong hạt cà phê chủ yếu được Trịnh Thị Hoài Phương 9 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: ThS. Nguyễn Minh Hoàng sử dụng là chiết lỏng lỏng với dung môi chloroform và chiết pha rắn, tuy nhiên trong một số nghiên cứu sử dụng hỗn hợp dung môi của ethanol và nước với tỉ lệ 1:1 (Nuhu, 2014).

Xơ vữa động mạch là nguyên nhân chính gây tử vong và là nguyên nhân quan trọng nhất trong các bệnh về tim mạch. Rối loạn mỡ máu là một yếu tố nguy cơ cao dẫn tới chứng xơ vữa động mạch. Hiện nay, phương pháp phổ biến để điều trị xơ vữa động mạch là giảm nồng độ lipid huyết tương bằng cách sử dụng statin. Tuy nhiên, việc sử dụng statin chỉ ngăn ngừa khoảng 50% đến 60% các rủi ro về tim mạch.

Do đó để điều trị triệt để xơ vữa động mạch cần mở rộng ứng dụng các phương pháp khác nhau.