Phương Pháp Sắc Ký Lỏng Khối Phổ Xác Định Ethylene Glycol Và Diethylene Glycol Trong Thực Phẩm - Đinh Minh Nhật

• Tác giả: Đinh Minh Nhật
• Người hướng dẫn: ThS. Bùi Cao Tiến
• Trường học: Trường Đại học Dược Hà Nội
• Chuyên ngành: Hóa phân tích và kiểm nghiệm thuốc
• Đề tài: Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ xác định ethylene glycol và diethylene glycol trong thực phẩm
• Loại tài liệu: Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ
• Năm xuất bản: 2023
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CẢM ƠN
• 1. ĐẶT VẤN ĐỀ
• 2. TỔNG QUAN VỀ ETHYLENE GLYCOL VÀ DIETHYLENE GLYCOL
• 2.1. Tổng quan về Ethylene glycol
• 2.1.1. Khái quát chung
• 2.1.2. Định danh và tính chất lý hóa
• 2.2. Tổng quan về Diethylene glycol
• 2.2.1. Khái quát chung
• 2.2.2. Định danh và tính chất lý hóa
• 2.3. Tổng quan phương pháp xác định EG và DEG
• 2.3.1. Một số phương pháp xác định EG và DEG trên thế giới
• 3. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Nguyên vật liệu, thiết bị
• 3.2. Đối tượng nghiên cứu
• 3.3. Chất chuẩn, hóa chất và thiết bị
• 3.4. Nội dung nghiên cứu
• 3.4.1. Lựa chọn chất chuẩn nội
• 3.4.2. Khảo sát các điều kiện xác định EG bằng LC-MS/MS
• 3.4.3. Khảo sát quá trình dẫn xuất
• 3.4.4. Khảo sát ảnh hưởng của nền mẫu
• 3.4.5. Thẩm định phương pháp
• 3.4.6. Ứng dụng phương pháp
• 3.4.7. Phương pháp nghiên cứu
• 3.4.8. Phương pháp xử lý mẫu dự kiến
• 3.4.9. Phương pháp thẩm định quy trình phân tích
• 3.4.10. Phương pháp xử lý số liệu
• 4. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 4.1. Lựa chọn chất chuẩn nội
• 4.2. Khảo sát điều kiện sắc ký lỏng khối phổ LC-MS/MS
• 4.2.1. Khảo sát điều kiện khối phổ
• 4.2.2. Khảo sát điều kiện sắc ký
• 4.3. Khảo sát quy trình xử lý mẫu
• 4.3.1. Khảo sát thể tích benzoyl clorid
• 4.3.2. Khảo sát thời gian tạo dẫn xuất
• 4.3.3. Khảo sát nồng độ NaOH
• 4.3.4. Khảo sát ảnh hưởng của nền mẫu
• 4.4. Thẩm định phương pháp phân tích
• 4.4.1. Tính tương thích của hệ thống
• 4.4.2. Độ chọn lọc của phương pháp
• 4.4.3. Giới hạn phát hiện LOD và giới hạn định lượng LOQ
• 4.4.4. Đường chuẩn và khoảng tuyến tính
• 4.4.5. Độ lặp lại và độ thu hồi
• 4.5. Áp dụng phương pháp đánh giá hàm lượng EG và DEG trong thức ăn cho mèo
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về phương pháp sắc ký lỏng khối phổ

Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) là một kỹ thuật phân tích hiện đại, kết hợp giữa sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và khối phổ (MS). Phương pháp này được sử dụng rộng rãi trong phân tích thực phẩm nhờ độ nhạy cao, tính chọn lọc tốt và khả năng xác định đồng thời nhiều chất. Ethylene glycol (EG) và diethylene glycol (DEG) là hai chất độc hại có thể gây nguy hiểm cho sức khỏe, đặc biệt là trong thực phẩm cho mèo. Việc xác định chính xác nồng độ của hai chất này là cần thiết để đảm bảo an toàn thực phẩm.

1.1. Ưu điểm của LC MS MS

LC-MS/MS có nhiều ưu điểm vượt trội so với các phương pháp khác như sắc ký khí (GC) hay sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Phương pháp này có độ nhạy cao, phù hợp để phân tích các chất ở nồng độ thấp. Ngoài ra, LC-MS/MS có khả năng tách và xác định đồng thời nhiều chất dựa trên tỷ lệ khối lượng/điện tích (m/z). Điều này giúp tăng tính chính xác và hiệu quả trong phân tích thực phẩm.

1.2. Ứng dụng trong xác định EG và DEG

Ethylene glycol và diethylene glycol là hai chất độc hại có thể gây ngộ độc cấp tính, đặc biệt là ở động vật như mèo. LC-MS/MS được sử dụng để xác định nồng độ của hai chất này trong thực phẩm nhờ độ nhạy và tính chọn lọc cao. Phương pháp này giúp phát hiện chính xác các chất độc hại ở mức thấp, đảm bảo an toàn thực phẩm và sức khỏe động vật.

II. Tổng quan về ethylene glycol và diethylene glycol

Ethylene glycol (EG) và diethylene glycol (DEG) là hai chất lỏng không màu, không mùi, có vị ngọt. Chúng thường được sử dụng trong công nghiệp nhưng cũng có thể xuất hiện trong thực phẩm do nhiễm bẩn. Cả hai chất này đều có độc tính cao, đặc biệt là đối với thận và gan. Việc xác định chính xác nồng độ của chúng trong thực phẩm là rất quan trọng để ngăn ngừa ngộ độc.

2.1. Tính chất lý hóa của EG và DEG

Ethylene glycol có công thức hóa học là C2H6O2, trong khi diethylene glycol có công thức C4H10O3. Cả hai chất đều có tính chất hút ẩm và hòa tan tốt trong nước. EG có nhiệt độ sôi là 197.3°C, trong khi DEG có nhiệt độ sôi cao hơn, khoảng 245°C. Cả hai chất đều có độc tính cao, đặc biệt là khi tiêu thụ với lượng lớn.

2.2. Độc tính của EG và DEG

Ethylene glycol và diethylene glycol đều có độc tính cao, đặc biệt là đối với thận và gan. EG có thể gây suy thận cấp và tử vong nếu không được điều trị kịp thời. DEG cũng có độc tính tương tự, với chất chuyển hóa HEAA là tác nhân chính gây độc. Việc xác định chính xác nồng độ của hai chất này trong thực phẩm là rất quan trọng để đảm bảo an toàn thực phẩm.

III. Phương pháp xác định EG và DEG bằng LC MS MS

Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) được sử dụng để xác định ethylene glycol và diethylene glycol trong thực phẩm. Phương pháp này bao gồm các bước xử lý mẫu, tạo dẫn xuất và phân tích bằng LC-MS/MS. Kết quả phân tích cho thấy phương pháp này có độ nhạy cao, độ chính xác tốt và phù hợp để xác định hai chất độc hại này trong thực phẩm.

3.1. Quy trình xử lý mẫu

Quy trình xử lý mẫu bao gồm các bước chiết xuất, tạo dẫn xuất và làm sạch mẫu. Benzoyl chloride được sử dụng để tạo dẫn xuất của EG và DEG, giúp tăng độ nhạy của phương pháp. Mẫu sau khi xử lý được phân tích bằng LC-MS/MS để xác định nồng độ của hai chất này.

3.2. Kết quả phân tích

Kết quả phân tích cho thấy phương pháp LC-MS/MS có độ nhạy cao, với giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) thấp. Phương pháp này cũng có độ chính xác và độ lặp lại tốt, phù hợp để xác định EG và DEG trong thực phẩm. Kết quả này khẳng định giá trị thực tiễn của phương pháp trong phân tích thực phẩm và đảm bảo an toàn thực phẩm.