Luận Văn Thạc Sĩ: Phân Tích Di Truyền Gen Sửa Chữa Bắt Cặp Sai MSH2 Từ Bệnh Nhân Ung Thư Đại Trực Tràng

• Tác giả: Nguyễn Thị Mai
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Thị Hồng Vân
• Trường học: Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên
• Chuyên ngành: Di truyền học
• Đề tài: Phân Tích Di Truyền Gen Sửa Chữa Bắt Cặp Sai Msh2 Từ Bệnh Nhân Ung Thư Đại Trực Tràng
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2012
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI NÓI ĐẦU
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Những nét khái quát về ung thƣ, bệnh ung thƣ và gen ung thƣ
• 1.2. Những hiểu biết về ung thƣ đại trực tràng
• 1.3. Lịch sử nghiên cứu ung thư đại trực tràng
• 1.4. Sơ lược về bệnh ung thư đại trực tràng
• 1.5. Cơ sở phân tử của ung thư đại trực tràng di truyền
• 1.6. Hệ thống gen MMR và đột biến gen MSH2 với hội chứng ung thƣ đại trực tràng
• 1.6.1. Hệ thống gen MMR
• 1.6.2. Gen MSH2 và đột biến gây ung thư đại trực tràng
• 1.7. Một số kỹ thuật di truyền sử dụng trong nghiên cứu ung thƣ đại trực tràng
• 1.7.1. Kỹ thuật phân tích các trình tự lặp lại đơn giản SSR
• 1.7.2. Kỹ thuật đa hình chiều dài các đoạn cắt giới hạn RFLP
• 1.7.3. Kỹ thuật phân tích đa hình sợi đơn SSCP
• 1.7.4. Kỹ thuật phân tích sợi đôi dị hợp HET
• 1.7.5. Kỹ thuật điện di gel gradient biến tính DGGE
• 1.7.6. Các phương pháp giải trình tự ADN
• 1.8. Mục tiêu và nội dung nghiên cứu
• 1.8.1. Mục tiêu nghiên cứu
• 1.8.2. Nội dung nghiên cứu
• 2. CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Vật liệu, địa điểm, hoá chất và thiết bị sử dụng trong nghiên cứu
• 2.2. Vật liệu nghiên cứu
• 2.3. Địa điểm nghiên cứu
• 2.4. Hóa chất và thiết bị sử dụng trong nghiên cứu
• 2.5. Phƣơng pháp nghiên cứu
• 2.5.1. Thu thập và bảo quản mẫu
• 2.5.2. Tách ADN tổng số
• 2.5.3. Xác định độ tinh sạch và hàm lượng ADN tổng số
• 2.5.4. Nhân bản các exon nhờ phản ứng PCR
• 2.5.5. Kỹ thuật SSCP trong phân tích đột biến gây ung thư đại trực tràng
• 2.5.6. Giải trình tự ADN
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Kết quả tách chiết ADN tổng số
• 3.2. Kết quả nhân bản 09 exon gen MSH2
• 3.2.1. Kết quả nhân bản exon 2
• 3.2.2. Kết quả nhân bản exon 3
• 3.2.3. Kết quả nhân bản exon 6
• 3.2.4. Kết quả nhân bản exon 7
• 3.2.5. Kết quả nhân bản exon 8
• 3.2.6. Kết quả nhân bản exon 12
• 3.2.7. Kết quả nhân bản exon 13
• 3.2.8. Kết quả nhân bản exon 14
• 3.2.9. Kết quả nhân bản exon 15
• 3.3. Kết quả phân tích đột biến trên 09 exon gen MSH2
• 3.3.1. Kết quả phân tích đột biến exon 2
• 3.3.2. Kết quả phân tích đột biến exon 3
• 3.3.3. Kết quả phân tích đột biến exon 6
• 3.3.4. Kết quả phân tích đột biến exon 7
• 3.3.5. Kết quả phân tích đột biến exon 8
• 3.3.6. Kết quả phân tích đột biến exon 12
• 3.3.7. Kết quả phân tích đột biến exon 13
• 3.3.8. Kết quả phân tích đột biến exon 14
• 3.3.9. Kết quả phân tích đột biến exon 15
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tổng Quan Về Phân Tích Di Truyền Gen MSH2 Trong Ung Thư Đại Trực Tràng

Phân tích di truyền gen MSH2 đóng vai trò quan trọng trong việc hiểu rõ cơ chế phát sinh ung thư đại trực tràng. Gen MSH2 là một phần của hệ thống sửa chữa bắt cặp sai (MMR), có trách nhiệm phát hiện và sửa chữa các lỗi trong quá trình sao chép ADN. Đột biến trong gen này có thể dẫn đến sự tích lũy các đột biến khác, từ đó làm tăng nguy cơ mắc ung thư đại trực tràng. Nghiên cứu về gen MSH2 không chỉ giúp xác định nguy cơ di truyền mà còn hỗ trợ trong việc phát hiện sớm và điều trị bệnh.

1.1. Giới Thiệu Về Gen MSH2 Và Vai Trò Của Nó

Gen MSH2 là một trong những gen chính trong hệ thống sửa chữa bắt cặp sai MMR. Nó có chức năng nhận diện và sửa chữa các lỗi trong ADN, giúp duy trì tính ổn định của gen. Đột biến trong gen MSH2 có thể dẫn đến sự phát triển của ung thư đại trực tràng, đặc biệt trong hội chứng HNPCC.

1.2. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu Gen MSH2

Nghiên cứu gen MSH2 không chỉ giúp hiểu rõ hơn về cơ chế di truyền của ung thư đại trực tràng mà còn cung cấp thông tin quan trọng cho việc chẩn đoán và điều trị. Việc phát hiện sớm các đột biến trong gen này có thể giúp giảm thiểu nguy cơ mắc bệnh.

II. Vấn Đề Và Thách Thức Trong Phân Tích Gen MSH2

Mặc dù có nhiều tiến bộ trong nghiên cứu gen MSH2, nhưng vẫn còn nhiều thách thức trong việc phân tích và hiểu rõ các đột biến liên quan đến ung thư đại trực tràng. Các vấn đề như độ phức tạp của gen, sự đa dạng của các đột biến và sự khác biệt giữa các cá thể là những yếu tố cần được xem xét.

2.1. Độ Phức Tạp Của Gen MSH2

Gen MSH2 có cấu trúc phức tạp với nhiều exon và intron, điều này làm cho việc phân tích và xác định các đột biến trở nên khó khăn. Các kỹ thuật hiện tại như giải trình tự ADN và phân tích đa hình sợi đơn (SSCP) cần được cải tiến để tăng độ chính xác.

2.2. Sự Đa Dạng Của Các Đột Biến

Có hàng trăm loại đột biến khác nhau trong gen MSH2, từ các đột biến điểm đến các đột biến lớn hơn như mất đoạn. Sự đa dạng này làm cho việc phát hiện và phân loại các đột biến trở nên phức tạp, đòi hỏi các phương pháp phân tích tiên tiến.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Gen MSH2 Trong Ung Thư Đại Trực Tràng

Để phân tích gen MSH2, nhiều phương pháp hiện đại đã được áp dụng, bao gồm kỹ thuật PCR, giải trình tự ADN và phân tích đa hình sợi đơn. Những phương pháp này giúp xác định các đột biến và hiểu rõ hơn về cơ chế di truyền của ung thư đại trực tràng.

3.1. Kỹ Thuật PCR Trong Phân Tích Gen

Phương pháp PCR (Phản ứng chuỗi trùng hợp) được sử dụng để nhân bản các đoạn ADN của gen MSH2. Kỹ thuật này cho phép thu được số lượng lớn ADN cần thiết cho các phân tích tiếp theo.

3.2. Giải Trình Tự ADN Để Xác Định Đột Biến

Giải trình tự ADN là một trong những phương pháp chính để xác định các đột biến trong gen MSH2. Phương pháp này giúp phát hiện các thay đổi trong trình tự nucleotid, từ đó xác định được các đột biến có thể gây ung thư.

IV. Ứng Dụng Thực Tiễn Của Nghiên Cứu Gen MSH2

Nghiên cứu gen MSH2 có nhiều ứng dụng thực tiễn trong y học, đặc biệt trong việc chẩn đoán và điều trị ung thư đại trực tràng. Việc phát hiện sớm các đột biến có thể giúp cải thiện tỷ lệ sống sót và chất lượng cuộc sống cho bệnh nhân.

4.1. Chẩn Đoán Sớm Ung Thư Đại Trực Tràng

Phân tích gen MSH2 giúp phát hiện sớm các nguy cơ mắc ung thư đại trực tràng, từ đó có thể thực hiện các biện pháp can thiệp kịp thời. Điều này đặc biệt quan trọng đối với những người có tiền sử gia đình mắc bệnh.

4.2. Phát Triển Các Phương Pháp Điều Trị Mới

Nghiên cứu về gen MSH2 cũng mở ra cơ hội phát triển các phương pháp điều trị mới, nhắm vào các đột biến cụ thể. Điều này có thể giúp tăng hiệu quả điều trị và giảm tác dụng phụ cho bệnh nhân.

V. Kết Luận Về Phân Tích Gen MSH2 Trong Ung Thư Đại Trực Tràng

Phân tích di truyền gen MSH2 là một lĩnh vực nghiên cứu quan trọng trong việc hiểu rõ cơ chế phát sinh ung thư đại trực tràng. Những kết quả từ nghiên cứu này không chỉ giúp nâng cao nhận thức về bệnh mà còn hỗ trợ trong việc phát hiện và điều trị hiệu quả hơn.

5.1. Tương Lai Của Nghiên Cứu Gen MSH2

Nghiên cứu gen MSH2 sẽ tiếp tục phát triển với sự hỗ trợ của công nghệ sinh học hiện đại. Các phương pháp mới sẽ giúp cải thiện độ chính xác và hiệu quả trong việc phát hiện các đột biến.

5.2. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu Di Truyền

Nghiên cứu di truyền không chỉ giúp hiểu rõ hơn về ung thư đại trực tràng mà còn mở ra hướng đi mới cho các nghiên cứu về các loại ung thư khác. Điều này có thể giúp cải thiện sức khỏe cộng đồng và giảm tỷ lệ mắc bệnh.