Bảo Tồn Chủng Ký Sinh Trùng Sốt Rét Plasmodium spp. và Ứng Dụng

LỜI CAM ĐOAN

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Đặt vấn đề

1.2. Tính cấp thiết của đề tài

1.3. Mục tiêu nghiên cứu

1.4. Nội dung nghiên cứu

1.5. Ý nghĩa khoa học

1.6. Ý nghĩa thực tiễn

1.7. Tổng quan về bệnh sốt rét

1.7.1. Lịch sử phát hiện bệnh sốt rét

1.7.2. Định nghĩa bệnh sốt rét

1.7.3. Sơ lược về dịch tể học sốt rét

1.7.4. Tình hình dịch tể sốt rét trên thế giới

1.7.5. Tình hình dịch tể sốt rét tại Việt Nam

1.7.6. Tình hình dịch tể sốt rét tỉnh Bình Phước

1.7.7. Chu kỳ và hình thể của ký sinh trùng sốt rét

1.7.7.1. Giai đoạn phát triển trong cơ thể người

1.7.7.2. Giai đoạn phát triển trong cơ thể muỗi

1.7.8. Tình hình kháng thuốc hiện nay của ký sinh trùng sốt rét

1.7.8.1. Định nghĩa kháng thuốc

1.7.8.2. Trên thế giới

1.7.8.3. Tại Việt Nam

1.7.9. Tình hình nghiên cứu, bảo tồn chủng ký sinh trùng sốt rét trên thế giới và Việt Nam

1.7.9.1. Trên thế giới

1.8. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

1.8.1. Địa điểm và thời gian tiến hành đề tài

1.8.2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu

1.8.2.1. Đối tượng nghiên cứu

1.8.2.2. Thiết kế nghiên cứu

1.8.2.3. Phương pháp phân tích mẫu

1.8.2.4. Phát hiện KST Plasmodium spp. bằng kỹ thuật nhuộm giêm – sa

1.8.2.5. Xác định loài Plasmodium spp. bằng kỹ thuật Nested – PCR

1.8.2.5.1. Giới thiệu khái quát về kỹ thuật PCR và phương pháp phát hiện KST SR bằng kỹ thuật PCR

1.8.2.5.2. Kỹ thuật tách chiết DNA KST SR Plasmodium spp.

1.8.2.5.3. Kỹ thuật Nested – PCR phát hiện KST SR

1.8.2.5.4. Kỹ thuật Nested – PCR để phát hiện điểm đột biến K13 liên quan đến kháng artemisinin

1.8.2.6. Đọc kết quả điện di

1.8.2.7. Xác định loài Plasmodium spp. bằng kỹ thuật giải trình tự

1.8.2.7.1. Kỹ thuật tinh sạch sản phẩm DNA để giải trình tự

1.8.2.7.2. Kỹ thuật PCR giải trình tự

1.8.2.7.3. Phân tích kết quả giải trình tự

1.8.2.8. Kỹ thuật cất đông chủng ký sinh trùng sốt rét

1.8.2.9. Kỹ thuật nuôi cấy dài ngày để tạo chủng Plasmodium spp.

1.8.2.9.1. Kỹ thuật nuôi cấy chủng P.

1.8.2.9.2. Môi trường nuôi cấy

1.8.2.9.3. Chuẩn bị hồng cầu lành

1.8.2.9.4. Chuẩn bị huyết thanh nuôi cấy

1.8.2.9.5. Phá đông chủng KST SR Plasmodium spp.

1.8.2.9.6. Điều kiện nuôi cấy

1.8.2.9.6.1. Điều kiện nuôi cấy in vitro Plasmodium spp.

1.8.2.9.6.2. Điều kiện trong lấy mẫu tại thực địa

1.8.2.10. Thống kê và xử lý số liệu

1.9. KẾT QUẢ, THẢO LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

1.9.1. Kết quả xác thu thập mẫu và xác định loài Plasmodium spp. bằng kỹ thuật nhuộm giêm – sa

1.9.2. Kết quả xác định loài Plasmodium spp. bằng kỹ thuật Nested – PCR

1.9.3. Kết quả giải trình tự Plasmodium spp.

1.9.4. Kết quả giải trình tự kháng K13

1.9.5. Kết quả nuôi cấy chủng Plasmodium spp. thuần bằng phương pháp nuôi cấy trong phòng nuôi cấy tại phòng thí nghiệm

1.9.6. Kết quả bảo tồn chủng sốt rét Plasmodium spp. và phát hiện kháng K13 liên quan đến kháng artemisinin

1.10. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tổng quan về Bảo Tồn Chủng Ký Sinh Trùng Sốt Rét Plasmodium spp

Bệnh sốt rét do ký sinh trùng Plasmodium spp. gây ra là một trong những vấn đề y tế nghiêm trọng tại các khu vực nhiệt đới. Việc bảo tồn các chủng ký sinh trùng này không chỉ giúp duy trì nguồn gen mà còn hỗ trợ cho các nghiên cứu y học trong tương lai. Nghiên cứu về Plasmodium có thể cung cấp thông tin quý giá về sự phát triển và kháng thuốc của các chủng ký sinh trùng này.

1.1. Định nghĩa và Tình hình Bệnh Sốt Rét

Bệnh sốt rét là một bệnh truyền nhiễm do ký sinh trùng Plasmodium gây ra, thường gặp ở các nước nhiệt đới. Tình hình dịch tễ học cho thấy số ca mắc bệnh vẫn còn cao, đặc biệt ở những vùng có điều kiện sống khó khăn.

1.2. Vai trò của Ký Sinh Trùng Plasmodium trong Y Học

Ký sinh trùng Plasmodium không chỉ gây ra bệnh sốt rét mà còn ảnh hưởng đến sức khỏe cộng đồng. Nghiên cứu về chúng giúp phát triển các phương pháp điều trị hiệu quả và vaccine phòng ngừa.

II. Vấn đề và Thách thức trong Bảo Tồn Chủng Ký Sinh Trùng

Việc bảo tồn các chủng ký sinh trùng Plasmodium spp. gặp nhiều thách thức, bao gồm sự kháng thuốc ngày càng gia tăng và sự biến đổi của môi trường sống. Những yếu tố này làm cho việc thu thập và bảo tồn trở nên khó khăn hơn.

2.1. Kháng Thuốc và Tác Động của Plasmodium

Kháng thuốc là một trong những thách thức lớn nhất trong điều trị sốt rét. Các chủng Plasmodium đã phát triển khả năng kháng lại các loại thuốc điều trị, làm tăng nguy cơ bùng phát dịch bệnh.

2.2. Biến Đổi Môi Trường và Ảnh Hưởng đến Ký Sinh Trùng

Biến đổi khí hậu và các hoạt động con người đã làm thay đổi môi trường sống của muỗi truyền bệnh, từ đó ảnh hưởng đến sự phát triển và lây lan của ký sinh trùng Plasmodium.

III. Phương Pháp Bảo Tồn Chủng Ký Sinh Trùng Plasmodium spp

Để bảo tồn các chủng ký sinh trùng Plasmodium spp., các phương pháp như nuôi cấy trong môi trường thích hợp và bảo quản trong nitơ lỏng được áp dụng. Những phương pháp này giúp duy trì sự sống của các chủng ký sinh trùng trong thời gian dài.

3.1. Nuôi Cấy Chủng Ký Sinh Trùng

Nuôi cấy chủng ký sinh trùng Plasmodium trong môi trường nhân tạo giúp tạo ra các chủng thuần, phục vụ cho nghiên cứu và phát triển thuốc.

3.2. Bảo Quản Chủng Ký Sinh Trùng trong Nitơ Lỏng

Bảo quản trong nitơ lỏng là phương pháp hiệu quả để giữ gìn các chủng ký sinh trùng Plasmodium trong điều kiện lạnh, giúp duy trì tính sinh học của chúng.

IV. Ứng Dụng Thực Tiễn của Nghiên Cứu Bảo Tồn Ký Sinh Trùng

Nghiên cứu về bảo tồn các chủng ký sinh trùng Plasmodium spp. không chỉ có giá trị trong việc phát triển thuốc mà còn hỗ trợ cho các nghiên cứu về vaccine và các phương pháp phòng ngừa bệnh sốt rét.

4.1. Phát Triển Thuốc Điều Trị Mới

Việc bảo tồn các chủng ký sinh trùng giúp các nhà nghiên cứu phát triển các loại thuốc mới, hiệu quả hơn trong việc điều trị sốt rét.

4.2. Nghiên Cứu Vaccine Phòng Ngừa

Nghiên cứu về các chủng ký sinh trùng Plasmodium có thể dẫn đến việc phát triển vaccine hiệu quả, giúp ngăn ngừa sự lây lan của bệnh sốt rét.

V. Kết Luận và Tương Lai của Bảo Tồn Ký Sinh Trùng

Bảo tồn các chủng ký sinh trùng Plasmodium spp. là một nhiệm vụ quan trọng trong việc đối phó với bệnh sốt rét. Tương lai của nghiên cứu này sẽ phụ thuộc vào sự hợp tác giữa các nhà khoa học và các tổ chức y tế để phát triển các giải pháp hiệu quả.

5.1. Tầm Quan Trọng của Hợp Tác Quốc Tế

Hợp tác quốc tế trong nghiên cứu và bảo tồn ký sinh trùng Plasmodium là cần thiết để chia sẻ kiến thức và tài nguyên.

5.2. Định Hướng Nghiên Cứu Tương Lai

Nghiên cứu trong tương lai cần tập trung vào việc phát triển các phương pháp mới để bảo tồn và nghiên cứu các chủng ký sinh trùng, nhằm nâng cao hiệu quả điều trị và phòng ngừa bệnh sốt rét.

Bảo Tồn Chủng Ký Sinh Trùng Sốt Rét Plasmodium spp. và Hướng Ứng Dụng