Nghiên cứu kit chẩn đoán nhanh streptococcus suis type 2 ở lợn

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. MỤC LỤC

2. DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

3. DANH MỤC BẢNG

4. DANH MỤC HÌNH

5. TRÍCH YẾU LUẬN ÁN

6. THESIS ABSTRACT

7. PHẦN 1: TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI

8. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

8.1. Tổng quan tình hình nghiên cứu

8.1.1. Tình hình nghiên cứu vi khuẩn Streptococcus suis trong nước và trên thế giới

8.1.2. Một số đặc tính của liên cầu khuẩn lợn

8.1.2.1. Đặc điểm hình thái

8.1.2.2. Đặc tính nuôi cấy và sinh hóa

8.1.2.3. Sức đề kháng

8.1.2.4. Cấu trúc kháng nguyên

8.1.2.5. Khả năng gây bệnh

8.1.2.6. Triệu chứng và bệnh tích của bệnh do vi khuẩn S. suis gây ra

8.1.2.6.1. Triệu chứng và bệnh tích do vi khuẩn S. suis gây ra ở lợn

8.1.2.6.2. Triệu chứng và bệnh tích do vi khuẩn S. suis gây ra ở người

8.2. Chẩn đoán bằng phương pháp PCR

8.3. Chẩn đoán bằng phương pháp ELISA

8.4. Điều trị bằng thuốc kháng sinh

8.5. Điều trị bệnh bằng huyết thanh

8.6. Giới thiệu về hạt nano vàng và kỹ thuật sắc ký miễn dịch

8.6.1. Tổng quan về hạt nano vàng

8.6.2. Kỹ thuật sắc ký miễn dịch

9. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

9.1. Vật liệu nghiên cứu

9.2. Nội dung nghiên cứu

9.3. Phương pháp nghiên cứu

9.3.1. Phương pháp sản xuất kháng nguyên của Streptococcus suis type 2

9.3.2. Phương pháp chế tạo kháng thể đặc hiệu kháng S.

9.3.3. Phương pháp nghiên cứu chế tạo conjugate - kháng thể kháng Streptococcus suis type 2

9.3.4. Phương pháp đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của KIT chẩn đoán nhanh Streptococcus suis type 2

9.3.5. Phương pháp phân tích số liệu

10. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

10.1. Nghiên cứu sản xuất kháng nguyên Streptococcus suis type 2

10.2. Tình hình nhiễm Streptococcus suis type 2 ở lợn giết mổ

10.3. Phân lập và xác định đặc tính sinh học phân tử của vi khuẩn S.

10.4. Chế tạo kháng nguyên thô từ vi khuẩn S.

10.5. Kết quả nghiên cứu sản xuất kháng thể đa dòng kháng S.

10.6. Kết quả xác định tính sinh miễn dịch của kháng nguyên

10.7. Kết quả xác định lượng kháng nguyên thích hợp cho khả năng đáp ứng miễn dịch ở chuột SA

10.8. Kết quả xác định chất bổ trợ thích hợp cho khả năng sinh miễn dịch của chuột SA

10.9. Chế tạo, tách chiết và định lượng kháng thể IgG kháng S.

10.10. Xác định hiệu giá kháng thể sau tinh chế

10.11. Kết quả nghiên cứu chế tạo Conjugate – kháng thể kháng S.

10.12. Xác định pH của dung dịch gold colloid thích hợp để gắn kháng thể với hạt vàng nano

10.13. Xác định nồng độ kháng thể kháng S. suis type 2 tối ưu để gắn với hạt vàng nano

10.14. Kết quả chế tạo kháng thể cộng hợp

10.15. Kết quả đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của kit chẩn đoán nhanh Streptococcus suis type 2

10.16. Kết quả xác định nồng độ kháng thể bắt vi khuẩn thích hợp

10.17. Kết quả xác định độ nhạy và độ đặc hiệu của KIT

11. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tính cấp thiết của đề tài

Bệnh liên cầu khuẩn lợn do streptococcus suis gây ra là một trong những căn bệnh truyền nhiễm nghiêm trọng, ảnh hưởng đến sức khỏe của cả lợn và con người. Vi khuẩn này có thể gây ra nhiều triệu chứng nghiêm trọng như viêm màng não, nhiễm khuẩn huyết, và viêm phổi. Tình hình lây nhiễm từ lợn sang người thường xảy ra qua tiếp xúc trực tiếp hoặc qua thực phẩm không được nấu chín kỹ. Việc phát hiện sớm và chẩn đoán chính xác là rất quan trọng để ngăn chặn sự lây lan của bệnh. Do đó, nghiên cứu chế tạo kit chẩn đoán nhanh cho streptococcus suis type 2 là cần thiết nhằm nâng cao hiệu quả trong việc phát hiện và điều trị bệnh. Theo các nghiên cứu trước đây, tỷ lệ nhiễm streptococcus suis ở lợn có thể lên đến 9%, cho thấy sự cần thiết phải có các phương pháp chẩn đoán nhanh và chính xác.

II. Mục tiêu nghiên cứu

Mục tiêu chính của nghiên cứu này là chế tạo được kit chẩn đoán nhanh cho streptococcus suis type 2 ở lợn. Để đạt được mục tiêu này, nghiên cứu sẽ tập trung vào việc sản xuất kháng nguyên và kháng thể đặc hiệu, cũng như đánh giá độ nhạy và độ đặc hiệu của kit. Việc phát triển phương pháp chẩn đoán hiệu quả sẽ giúp các bác sĩ thú y và người chăn nuôi phát hiện sớm bệnh, từ đó có biện pháp điều trị kịp thời. Nghiên cứu cũng sẽ xem xét các yếu tố tác động đến khả năng gây bệnh của streptococcus suis, nhằm cung cấp thông tin hữu ích cho việc phòng ngừa và kiểm soát bệnh. Kết quả nghiên cứu sẽ góp phần nâng cao nhận thức về bệnh và cải thiện sức khỏe động vật.

III. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng các phương pháp hiện đại để chế tạo kit chẩn đoán nhanh cho streptococcus suis type 2. Đầu tiên, kháng nguyên của vi khuẩn sẽ được sản xuất từ các chủng vi khuẩn thuần khiết. Sau đó, kháng thể đặc hiệu sẽ được chế tạo thông qua việc tiêm kháng nguyên vào chuột nhắt trắng. Các kháng thể này sẽ được tinh sạch và sử dụng để phát triển kit. Phương pháp sắc ký miễn dịch sẽ được áp dụng để tạo ra kit chẩn đoán có độ nhạy và độ đặc hiệu cao. Kết quả sẽ được đánh giá thông qua các thử nghiệm so sánh với phương pháp PCR, nhằm đảm bảo tính chính xác của kit. Nghiên cứu cũng sẽ phân tích các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của kit, từ đó đưa ra các khuyến nghị cho việc ứng dụng trong thực tiễn.

IV. Kết quả và thảo luận

Kết quả nghiên cứu cho thấy kit chẩn đoán nhanh cho streptococcus suis type 2 có độ nhạy lên đến 93,33% và độ đặc hiệu 100%. Điều này cho thấy kit có khả năng phát hiện chính xác vi khuẩn mà không gây phản ứng chéo với các loài vi khuẩn khác. Tỷ lệ nhiễm streptococcus suis ở lợn tại Thừa Thiên Huế được xác định là 9%, cho thấy sự phổ biến của bệnh trong khu vực. Kết quả này không chỉ khẳng định tính hiệu quả của kit mà còn nhấn mạnh tầm quan trọng của việc phát hiện sớm bệnh để có biện pháp can thiệp kịp thời. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng việc sử dụng công nghệ ADN tái tổ hợp có thể mở ra nhiều hướng đi mới trong việc phát triển các phương pháp chẩn đoán và phòng ngừa bệnh hiệu quả hơn.

Luận án tiến sĩ về kit chẩn đoán nhanh streptococcus suis type 2 ở lợn