Nghiên cứu ứng dụng phản ứng trung hòa đánh giá khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus tiêu chảy dịch tễ ở lợn

• Tác giả: Nguyễn Thị Bích
• Người hướng dẫn: TS. Chu Thị Thanh Hương
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú Y
• Đề tài: Nghiên cứu ứng dụng phản ứng trung hòa đánh giá khả năng miễn dịch chéo giữa chủng porcine epidemic diarrhea virus vắc xin và chủng thực địa lưu hành tại Việt Nam
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2020
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 2. DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• 3. DANH MỤC BẢNG
• 4. DANH MỤC HÌNH
• 5. TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 6. THESIS ABSTRACT
• 7. ĐẶT VẤN ĐỀ
• 8. MỤC TIÊU ĐỀ TÀI
• 9. Ý NGHĨA ĐỀ TÀI
• 10. GIỚI HẠN ĐỀ TÀI
• 11. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 11.1. ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA PEDV
• 11.1.1. Đặc tính gây bệnh
• 11.1.2. Cơ chế sinh bệnh
• 11.1.3. Chẩn đoán, xét nghiệm PEDV
• 11.1.4. Sự thích nghi virus trên tế bào
• 11.2. DỊCH TỄ HỌC PHÂN TỬ CỦA PEDV
• 11.2.1. Cấu trúc di truyền liên quan đến dịch tễ học phân tử của PEDV
• 11.3. ĐẶC ĐIỂM MIỄN DỊCH CỦA PEDV
• 11.3.1. Tìm hiểu cấu trúc PEDV liên quan đặc tính miễn dịch của virus PED
• 11.3.2. Phản ứng của vật chủ với sự nhiễm PEDV
• 11.3.3. Vắc xin phòng bệnh PED
• 11.3.4. Phản ứng chéo huyết thanh học
• 11.4. TỔNG QUAN CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ
• 11.4.1. Phản ứng trung hòa virus
• 11.4.2. Phát hiện kháng thể bằng phản ứng ELISA
• 12. NGUYÊN LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
• 12.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
• 12.2. THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM
• 12.3. Virus PED dùng trong nghiên cứu
• 12.4. Hóa chất, sinh phẩm trong nghiên cứu
• 12.5. Vật tư và thiết bị
• 12.6. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 12.6.1. Phương pháp RT-PCR
• 12.6.2. Phương pháp giám định genogroup của PEDV
• 12.6.3. Phương pháp thử độc lực của PEDV trên lợn con theo mẹ
• 12.6.4. Phương pháp xác định hiệu giá PEDV trên tế bào Vero
• 12.6.5. Phương pháp ELISA phát hiện kháng thể kháng PEDV
• 12.6.6. Phương pháp miễn dịch mỗi chủng PEDV trên thỏ
• 12.6.7. Phương pháp thiết lập phản ứng trung hòa PEDV
• 12.6.8. Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của phản ứng trung hòa virus
• 12.6.9. Phương pháp phản ứng trung hòa chéo giữa các chủng virus
• 13. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 13.1. LỰA CHỌN CHỦNG PEDV DÙNG TRONG NGHIÊN CỨU
• 13.1.1. Xác định đặc tính sinh học và hiệu giá virus
• 13.1.2. Giám định tính thuần khiết của chủng PEDV
• 13.1.3. Xác định độc lực của chủng PEDV thực địa
• 13.2. KẾT QUẢ THIẾT LẬP PHẢN ỨNG TRUNG HÒA PEDV
• 13.2.1. Kết quả tối ưu môi trường dùng trong phản ứng trung hòa
• 13.2.2. Tối ưu cách đánh giá kết quả của phản ứng trung hòa
• 13.3. XÁC ĐỊNH GIÁ TRỊ SỬ DỤNG CỦA PHẢN ỨNG TRUNG HÒA
• 13.3.1. Kết quả xác định độ nhạy và độ đặc hiệu trên nền mẫu thực địa
• 13.3.2. Độ nhạy, độ đặc hiệu của phản ứng trung hòa trên nền mẫu chuẩn QC
• 13.3.3. Phản ứng trung hòa xác định kháng thể ở huyết thanh và sữa đầu
• 13.4. ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG MIỄN DỊCH CHÉO GIỮA CÁC CHỦNG
• 13.4.1. Chế huyết thanh thỏ kháng các chủng PEDV thực địa
• 13.4.2. Đánh giá khả năng trung hòa chéo giữa các chủng PEDV
• 14. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

I. Tổng quan về nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus tiêu chảy dịch tễ ở lợn

Nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus tiêu chảy dịch tễ (PEDV) ở lợn tại Việt Nam là một chủ đề quan trọng trong ngành thú y. Virus PEDV gây ra dịch tiêu chảy cấp tính, ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe và năng suất của đàn lợn. Việc hiểu rõ khả năng miễn dịch chéo giữa các chủng virus và vắc xin sẽ giúp cải thiện hiệu quả phòng bệnh và bảo vệ đàn lợn.

1.1. Đặc điểm sinh học của virus PEDV và vắc xin

Virus PEDV thuộc họ Coronaviridae, gây ra bệnh tiêu chảy cấp tính ở lợn. Vắc xin hiện tại chủ yếu là vắc xin vô hoạt hoặc nhược độc, nhưng vẫn cần nghiên cứu để xác định tính hiệu quả của chúng đối với các chủng virus thực địa.

1.2. Tình hình dịch bệnh PED tại Việt Nam

Dịch bệnh PED đã được xác định lần đầu tiên tại Việt Nam vào năm 2008. Tình hình dịch bệnh diễn biến phức tạp với sự xuất hiện của nhiều chủng virus khác nhau, đòi hỏi cần có các biện pháp phòng ngừa hiệu quả.

II. Thách thức trong việc đánh giá khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV

Đánh giá khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV gặp nhiều thách thức. Sự biến đổi gen của virus và sự khác biệt giữa các chủng vắc xin và thực địa có thể ảnh hưởng đến hiệu quả miễn dịch. Việc xác định đúng chủng virus và vắc xin phù hợp là rất quan trọng.

2.1. Sự biến đổi gen của virus PEDV

Virus PEDV có khả năng biến đổi gen cao, dẫn đến sự xuất hiện của các chủng mới. Điều này làm cho việc phát triển vắc xin trở nên khó khăn hơn, vì vắc xin có thể không còn hiệu quả với các chủng mới.

2.2. Khó khăn trong việc xác định chủng virus thực địa

Việc phân lập và xác định các chủng virus thực địa là một thách thức lớn. Các phương pháp chẩn đoán hiện tại cần được cải thiện để đảm bảo tính chính xác và độ nhạy cao.

III. Phương pháp nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV

Nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV sử dụng nhiều phương pháp khác nhau. Các phương pháp này bao gồm phản ứng trung hòa virus, ELISA và RT-PCR. Mỗi phương pháp có ưu điểm và nhược điểm riêng, cần được lựa chọn phù hợp với mục tiêu nghiên cứu.

3.1. Phản ứng trung hòa virus trong nghiên cứu

Phản ứng trung hòa virus là một phương pháp quan trọng để đánh giá khả năng miễn dịch. Phương pháp này giúp xác định khả năng kháng thể trung hòa virus trong huyết thanh lợn.

3.2. Sử dụng ELISA để phát hiện kháng thể

Phương pháp ELISA được sử dụng để phát hiện kháng thể kháng PEDV trong mẫu huyết thanh. Đây là một công cụ hữu ích trong việc đánh giá tình trạng miễn dịch của đàn lợn.

IV. Kết quả nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV

Kết quả nghiên cứu cho thấy khả năng miễn dịch chéo giữa các chủng virus PEDV và vắc xin là có. Một số chủng vắc xin có khả năng trung hòa chéo với các chủng virus thực địa, điều này cho thấy tiềm năng ứng dụng trong sản xuất vắc xin.

4.1. Đánh giá khả năng trung hòa chéo giữa các chủng

Nghiên cứu đã xác định được một số chủng PEDV thực địa có khả năng trung hòa chéo với vắc xin. Điều này mở ra cơ hội cho việc phát triển vắc xin hiệu quả hơn.

4.2. Ứng dụng thực tiễn từ kết quả nghiên cứu

Kết quả nghiên cứu có thể được ứng dụng trong việc lựa chọn chủng virus để sản xuất vắc xin, từ đó nâng cao hiệu quả phòng bệnh cho đàn lợn.

V. Kết luận và triển vọng tương lai trong nghiên cứu vắc xin PEDV

Nghiên cứu khả năng miễn dịch chéo giữa vắc xin và virus PEDV là một lĩnh vực quan trọng cần được tiếp tục khai thác. Việc phát triển các vắc xin mới dựa trên các chủng virus thực địa sẽ giúp kiểm soát dịch bệnh hiệu quả hơn.

5.1. Tương lai của nghiên cứu vắc xin PEDV

Nghiên cứu cần tiếp tục để phát triển các vắc xin mới có khả năng bảo vệ tốt hơn trước các chủng virus mới nổi. Việc này sẽ giúp giảm thiểu thiệt hại do dịch bệnh gây ra.

5.2. Khuyến nghị cho ngành chăn nuôi lợn

Ngành chăn nuôi cần áp dụng các biện pháp phòng ngừa hiệu quả, bao gồm việc sử dụng vắc xin phù hợp và theo dõi tình hình dịch bệnh thường xuyên để đảm bảo sức khỏe cho đàn lợn.