Nghiên cứu chọn chủng virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn PRRSV tại Việt Nam

• Tác giả: Cao Thị Bích Phượng
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Bá Hiên
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên cứu chọn chủng virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (PRRSV) tại Việt Nam để làm nguồn sản xuất vacxin nhược độc
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2016
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. Phần 1: TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 1.1. Mục tiêu của đề tài
• 2. Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp (PRRS)
• 2.2. Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài
• 2.3. Tình hình nghiên cứu trong nước
• 2.4. Đặc điểm dịch tễ học
• 2.5. Triệu chứng bệnh
• 2.6. Chẩn đoán lâm sàng
• 2.7. Chẩn đoán phi lâm sàng
• 2.8. Phòng bệnh
• 2.9. Tác nhân gây bệnh
• 2.10. Hình thái học
• 2.11. Đặc điểm nuôi cấy
• 2.12. Sức đề kháng
• 3. Phần 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Thời gian và địa điểm
• 3.2. Đối tượng nghiên cứu
• 3.3. Nội dung nghiên cứu
• 3.4. Vật liệu nghiên cứu
• 3.5. Sinh phẩm, hóa chất dùng cho tách chiết RNA
• 3.6. Cặp mồi và kit PCR
• 3.7. Hoá chất thực hiện phản ứng huyết thanh học
• 3.8. Tế bào, hóa chất dùng cho nuôi cấy tế bào và phân lập virus
• 3.9. Lợn thí nghiệm
• 3.10. Dụng cụ và thiết bị thí nghiệm
• 3.11. Trang thiết bị
• 3.12. Phương pháp nghiên cứu
• 3.12.1. Phương pháp tách chiết RNA
• 3.12.2. Phản ứng RT-PCR
• 3.12.3. Chạy điện di kiểm tra sự có mặt của virus PRRS
• 3.12.4. Phương pháp phân lập virus PRRS trên tế bào
• 3.12.5. Nghiên cứu tính thích ứng của PRRSV trên tế bào Marc-145
• 3.12.6. Phương pháp xác định hiệu giá virus trên môi trường tế bào
• 3.12.7. Phương pháp phát hiện kháng thể kháng PRRS
• 3.12.8. Phương pháp gây miễn dịch cho động vật thí nghiệm
• 3.12.9. Phương pháp giải trình tự gen
• 3.12.10. Phương pháp xử lý số liệu
• 4. Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Kết quả thu thập mẫu và triệu chứng bệnh tích
• 4.2. Khả năng gây bệnh tích trên môi trường tế bào MARC-145 của chủng VIRUS KTY-PRRS-06
• 4.3. Kết quả so sánh khả năng gây bệnh tích tế bào của chủng VIRUS KTY-PRRS-06 cường độc sau khi cấy truyền qua 90 đời. Kết quả xác định hiệu giá Virus (TCID50) của chủng VIRUS KTY-PRRS-06 qua 90 đời cấy truyền
• 4.4. Kết quả xác định quy luật nhân lên của chủng VIRUS KTY-PRRS-06 qua 90 đời cấy truyền
• 4.5. Kiểm tra sự ổn định di truyền giữa các đời VIRUS KTY-PRRS-06
• 4.6. Kết quả so sánh tương đồng nucleotide gen ORF5 của các chủng virus KTY-PRRS-06 ở các đời cấy truyền khác nhau
• 4.7. Kết quả so sánh tương đồng axit amin của gen ORF5 của chủng virus KTY-PRRS-06 qua các đời cấy truyền khác nhau
• 4.8. Kết quả xác định khả năng nhược độc hoá của VIRUS KTY-PRRS-06 sau 90 đời cấy truyền. Kết quả đo thân nhiệt của lợn sau khi gây nhiễm virus KTY-PRRS-06 sau 90 đời cấy truyền. Kết quả nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của lợn bằng phản ứng ELISA
• 5. Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• 5.1. Đề nghị
• Tài liệu tham khảo

I. Tổng quan về nghiên cứu chọn chủng virus PRRSV tại Việt Nam

Nghiên cứu chọn chủng virus PRRSV để sản xuất vacxin nhược độc cho lợn tại Việt Nam là một chủ đề quan trọng trong ngành thú y. Virus PRRSV gây ra hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn, ảnh hưởng nghiêm trọng đến ngành chăn nuôi. Việc phát triển vacxin nhược độc sẽ giúp kiểm soát dịch bệnh hiệu quả hơn.

1.1. Đặc điểm của virus PRRSV và tác động đến lợn

Virus PRRSV thuộc họ Arteriviridae, gây ra các triệu chứng nghiêm trọng ở lợn. Bệnh này không chỉ ảnh hưởng đến sức khỏe của lợn mà còn gây thiệt hại kinh tế lớn cho người chăn nuôi. Việc hiểu rõ về virus này là cần thiết để phát triển vacxin hiệu quả.

1.2. Tình hình dịch bệnh PRRS tại Việt Nam

Tình hình dịch bệnh PRRS tại Việt Nam diễn biến phức tạp, với nhiều đợt bùng phát. Các nghiên cứu cho thấy virus PRRSV đang không ngừng biến đổi, đòi hỏi cần có vacxin phù hợp để phòng ngừa hiệu quả.

II. Vấn đề và thách thức trong việc sản xuất vacxin nhược độc

Việc sản xuất vacxin nhược độc cho lợn gặp nhiều thách thức. Các chủng virus hiện tại có độc lực cao, gây khó khăn trong việc phát triển vacxin hiệu quả. Cần có nghiên cứu sâu hơn để lựa chọn chủng virus phù hợp.

2.1. Khó khăn trong việc kiểm soát virus PRRSV

Virus PRRSV có khả năng biến đổi gen nhanh chóng, làm cho việc phát triển vacxin trở nên khó khăn. Các vacxin hiện tại không thể kiểm soát hoàn toàn virus này, dẫn đến sự bùng phát dịch bệnh.

2.2. Nhu cầu cấp thiết về vacxin hiệu quả

Nhu cầu về vacxin nhược độc cho lợn ngày càng tăng cao. Việc phát triển vacxin hiệu quả sẽ giúp giảm thiểu thiệt hại kinh tế và bảo vệ sức khỏe đàn lợn.

III. Phương pháp nghiên cứu chọn chủng virus PRRSV

Nghiên cứu chọn chủng virus PRRSV để sản xuất vacxin nhược độc sử dụng nhiều phương pháp hiện đại. Các phương pháp này bao gồm tách chiết RNA, phản ứng RT-PCR và nuôi cấy tế bào.

3.1. Phương pháp tách chiết RNA và RT PCR

Phương pháp tách chiết RNA giúp xác định sự hiện diện của virus PRRSV trong mẫu. Phản ứng RT-PCR được sử dụng để khuếch đại gen virus, từ đó xác định chủng virus cần thiết cho sản xuất vacxin.

3.2. Nuôi cấy tế bào và phân lập virus

Nuôi cấy tế bào là bước quan trọng trong việc phân lập virus PRRSV. Việc này giúp nghiên cứu tính thích ứng của virus và xác định khả năng gây bệnh của các chủng virus khác nhau.

IV. Kết quả nghiên cứu và ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy chủng virus KTY-PRRS-06 có khả năng nhược độc cao, có thể được sử dụng để sản xuất vacxin. Việc này sẽ giúp kiểm soát dịch bệnh PRRS hiệu quả hơn tại Việt Nam.

4.1. Đánh giá khả năng gây bệnh của chủng virus

Chủng virus KTY-PRRS-06 cho thấy khả năng gây bệnh tích tế bào mạnh mẽ. Kết quả cho thấy virus này có thể được sử dụng để phát triển vacxin nhược độc.

4.2. Ứng dụng vacxin trong thực tiễn

Vacxin nhược độc từ chủng KTY-PRRS-06 có thể giúp giảm thiểu thiệt hại do dịch bệnh PRRS gây ra. Việc áp dụng vacxin này sẽ góp phần bảo vệ sức khỏe đàn lợn và tăng cường hiệu quả chăn nuôi.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu chọn chủng virus PRRSV để sản xuất vacxin nhược độc là bước tiến quan trọng trong việc kiểm soát dịch bệnh. Tương lai cần tiếp tục nghiên cứu để cải thiện hiệu quả của vacxin và đáp ứng nhu cầu của ngành chăn nuôi.

5.1. Tầm quan trọng của nghiên cứu trong ngành thú y

Nghiên cứu này không chỉ giúp kiểm soát dịch bệnh mà còn nâng cao chất lượng sản phẩm chăn nuôi. Việc phát triển vacxin nhược độc sẽ là giải pháp bền vững cho ngành chăn nuôi lợn tại Việt Nam.

5.2. Hướng đi tương lai cho nghiên cứu vacxin

Cần tiếp tục nghiên cứu và phát triển các chủng virus mới, cải tiến quy trình sản xuất vacxin để đáp ứng tốt hơn nhu cầu phòng chống dịch bệnh PRRS trong tương lai.