HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM THẠCH THỊ THU TRANG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA BỆNH SUY GIẢM HÔ HẤP DO VI KHUẨN ORNITHOBACTERIUM RHINOTRACHEALE GÂY RA TRÊN GÀ THẢ VƯỜN TẠI BA VÌ, HÀ NỘI VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Chu Đức Thắng NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kì công trình nào khác. Tôi xin cam đoan các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc.
Hà Nội, ngày… tháng… năm2017 Tác giả luận văn Thạch Thị Thu Trang i LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi luôn nhận được sự quan tâm giúp đỡ của các tổ chức, cơ quan, các nhà khoa học, các thầy cô giáo, bạn bè đồng nghiệp và những người thân trong gia đình. Nhân dịp này, tôi xin trân thành cảm ơn sự giúp đỡ của các giảng viên khoa Thú y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã giảng dạy tôi trong suốt thời gian học tập. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới sự hướng dẫn, giúp đỡ nhiệt tình, đầy trách nhiệm và hết lòng vì khoa học của PGS.TS Chu Đức Thắng. Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn tới những người thân trong gia đình, đồng nghiệp đã luôn quan tâm, động viên giúp tôi hoàn thành luận văn này.
Hà Nội, ngày… tháng… năm2017 Tác giả luận văn Thạch Thị Thu Trang ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC Lời cam đoan. ii Mục lục. iii Danh mục chữ viết tắt. vi Danh mục bảng.
vii Danh mục hình. viii Trích yếu luận văn. ix Thesis abstract. Tính cấp thiết của đề tài.
Mục đích nghiên cứu. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài. Tổng quan tài liệu. Lịch sử và tình hình nghiên cứu bệnh.
Tình hình nghiên cứu trên thế giới. Tình hình nghiên cứu tại Việt Nam. Một số đặc điểm của vi khuẩn Ornithobacterium Rhinotracheale. Hình thái cấu trúc của vi khuẩn.
Tính chất nuôi cấy của vi khuẩn. Đặc tính sinh hóa. Cấu trúc kháng nguyên và độc lực. Sức đề kháng.
Truyền nhiễm học. Loài mắc bệnh. Chất chứa mầm bệnh. Phương thức truyền lây.
Định serotype và phân loại chủng. Khả năng gây bệnh. Khả năng miễn dịch. 12 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.
Một số đặc điểm của bệnh do ORT. Triệu chứng của gà mắc bệnh do ORT. Bệnh tích của gà mắc bệnh do ORT. Chẩn đoán lâm sàng.
Phân lập, nuôi cấy vi khuẩn. Phát hiện kháng nguyên. Huyết thanh học. Chẩn đoán phân biệt.
Biện pháp phòng và điều trị. Phòng bệnh. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu. Địa điểm nghiên cứu.
Đối tượng nghiên cứu. Thời gian nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu.
Phương pháp chẩn đoán lâm sàng. Phương pháp mổ khám. Phương pháp lấy mẫu và bảo quản mẫu. Phương pháp nuôi cấy và phân lập vi khuẩn.
Phương pháp nhuộm Gram. Phương pháp PCR. Phương pháp kiểm tra khả năng mẫn cảm kháng sinh của chủng vi khuẩn ORT phân lập được. Sử dụng một số loại kháng sinh để điều trị bệnh do ORT gây ra ở gà.
Phương pháp xử lý số liệu. Nguyên liệu nghiên cứu. Mẫu bệnh phẩm. Môi trường nuôi cấy và phân lập vi khuẩn.
Các loại hoá chất. 30 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Kết quả và thảo luận. Một số đặc điểm bệnh lý của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT.
Các triệu chứng lâm sàng chủ yếu của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT. Một số đặc điểm bệnh lý đại thể của gà mắc bệnh do ORT. Một số đặc điểm dịch tễ của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT. Tình hình gà mắc bệnh do ORT theo lứa tuổi.
Tình hình mắc bệnh do ORT theo mùa vụ. Tình hình mắc bệnh do ORT theo truyền thồng chăn nuôi. Biện pháp phòng trị. Kết quả phân lập vi khuẩn ORT.
Kết quả xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh và thử nghiệm điều trị. Biện pháp phòng trị. Kết luận và kiến nghị. 57 Tài liệu tham khảo.
58 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Tên viết tắt Tên đầy đủ AGP Accelerated Graphics Port BEAs Boiled Extract Antigens BHB Brain Heart Infusion Broth CBA Columbia Blood Agar CRD Chronic Respiratory Disease DIA Dot Immunobinding Assay DNA Deoxyribonucleic Acid ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay AGP Agar Gel Precipitation IB Infectious Bronchitis IgM Immunoglobulin M ILT Infectious Laryngo Tracheitis ORT Ornithobacterium rhinotracheale PAP Peroxidase - Anti Peroxidase PB Pasteurella Broth PBS Phosphate Saline Buffer PCR Polymerase Chain Reaction PGNR Pleomorphic Gram Negative Rod Rrna Ribosomal Ribonucleic Acide RT-PCR Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction SPAT Standard Plate Agglutination Test TBE Tris-borate-EDTA vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC BẢNG Bảng 2. Phản ứng enzyme O. Rhinotrachaele (Chin et al. Bảng tiêu chuẩn của nhà cung cấp giấy tẩm kháng sinh.
Kết quả thu thập mẫu bệnh phẩm tại các địa phương. Kết quả chẩn đoán vi khuẩn bằng kỹ thuật PCR. Triệu chứng lâm sàng của gà nhiễm ORT. Kết quả mổ khám kiểm tra bệnh tích đại thể của gà nhiễm ORT (n=45).
Tình hình gà nhiễm ORT ở các lứa tuổi tại huyện Ba Vì, Hà Nội. Tình hình nhiễm ORT theo mùa vụ tại huyện Ba Vì, Hà Nội. Kết quả điều tra tình hình nhiễm bệnh do ORT trên đàn gà nuôi tại huyện Ba Vì theo truyền thống chăn nuôi. Kết quả phân lập vi khuẩn ORT từ các mẫu bệnh phẩm trên gà thả vườn tại Ba Vì.
Bảng tổng hợp kết quả thử tính mẫn cảm của ORT với một số loại kháng sinh. Kết quả sử dụng một số kháng sinh điều trị bệnh do ORT gây ra. 52 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC HÌNH Hình 2. Hình ảnh nhuộm gram vi khuẩn ORT sau 48 giờ nuôi cấy (Charlton et al., 1993; Pan et al.
Hình ảnh thạch máu có bổ sung gentamycin. Kết quả điện di sản phẩm phản ứng PCR. Kết quả chẩn đoán vi khuẩn ORT bằng kĩ thuật PCR. Gà có biểu hiện khó thở.
Trứng méo mó, biến dạng, chất lượng vỏ trứng kém. Phổi viêm đỏ sẫm. Phổi viêm có mủ ở nhánh phế quản. Phổi viêm đỏ có mủ.
Túi khí dầy, đục màu. Tỷ lệ gà nhiễm và chết do ORT ở các lứa tuổi trên đàn gà thả vườn tại huyện Ba Vì, Hà Nội. Tỷ lệ mắc bệnh do ORT theo mùa vụ. Khuẩn lạc ORT nuôi cấy trên thạch máu sau 48 giờ.
Hình thái vi khuẩn ORT dưới kính hiển vi. Kết quả kiểm tra tính mẫn cảm của vi khuẩn ORT đối với các loại kháng sinh trên thạch. 50 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Thạch Thị Thu Trang Tên luận văn: “Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của bệnh suy giảm hô hấp do vi khuẩn Ornithobacterium rhinotracheale gây ra trên gà thả vườn tại Ba Vì, Hà Nội và biện pháp phòng trị”. Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam I.
Mục đích nghiên cứu Xác định được một số đặc điểm bệnh lý của bệnh suy giảm hô hấp do vi khuẩn ORT gây ra trên gà thả vườn tại Ba Vì. Phương pháp nghiên cứu 2. Nội dung nghiên cứu Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT - Chẩn đoán vi khuẩn ORT bằng kỹ thuật PCR. - Xác định các triệu chứng lâm sàng của đàn gà mắc bệnh do ORT.
- Xác định những biến đổi bệnh lý đại thể của gà mắc bệnh do ORT. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo lứa tuổi, mùa vụ và truyền thống chăn nuôi. Biện pháp phòng và trị bệnh - Phân lập vi khuẩn ORT từ gà mắc bệnh. - Xác định tính mẫn cảm của chủng ORT phân lập được với kháng sinh và thử nghiệm điều trị.
- Xây dựng biện pháp phòng và trị bệnh. Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp chẩn đoán lâm sàng - Phương pháp mổ khám - Phương pháp PCR - Lấy mẫu bệnh phẩm và bảo quản mẫu làm tiêu bản - Phương pháp nuôi cấy và phân lập vi khuẩn ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com - Phương pháp kiểm tra khả năng mẫn cảm kháng sinh của chủng vi khuẩn phân lập được. Kết quả chính và kết luận Một số đặc điểm bệnh lý của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT: Chẩn đoán vi khuẩn ORT bằng kĩ thuật PCR : Xác định được 45/58 mẫu dương tính (77,59%) với vi khuẩn ORT bằng kỹ thuật PCR. Triệu chứng lâm sàng của đàn gà mắc bệnh do ORT: Ủ rũ, mệt mỏi, xã cánh, khó thở, bỏ ăn hoặc giảm ăn 100%; sốt, chảy dịch mũi, dịch miệng, giảm đẻ, trứng biến dạng, giảm tăng trọng từ 77,78-89,29% số gà theo dõi.
Những biến đổi bệnh lý đại thể của gà mắc bệnh do ORT: Xác định được bệnh tích đại thể ở các cơ quan phủ tạng có tỷ lệ cao: Phổi viêm 100%; khí quản có dịch nhày, túi khí có fibrin 93,33%; xuất huyết khí quản 80%; phổi viêm hóa mủ 77,78% và một số bệnh tích khác có tỷ lệ thấp hơn (ở thận; gan, lách. Một số đặc điểm dịch tễ của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT: Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo lứa tuổi: Gà mắc bệnh theo lứa tuổi, nặng nhất ở ≤ 6 tuần tuổi (53,1%), đến gà 7-20 tuần tuổi (51,43%) và cuối cùng là >20 tuần tuổi (44,23%). Tỷ lệ chết tương ứng: 32,95%; 16% và 12,82%. Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo mùa vụ: Gà mắc bệnh theo mùa vụ, nặng nhất Đông-Xuân (54,37%), đến Thu-Đông (49,79%) và cuối cùng là Xuân-Hè (39,56%).
Tỷ lệ chết tương ứng: 24,33%, 22,55% và 17,58%.