HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM TRẦN THỊ HƢƠNG GIANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CHỦ YẾU CỦA LỢN MẮC HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN (PRRS) THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Nguyễn Hữu Nam NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chƣa từng đƣợc ai công bố trong bất kì công trình nào khác. Tôi xin cam đoan các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã đƣợc chỉ rõ nguồn gốc.
Hà Nội, ngày. năm 2016 Tác giả luận văn Trần Thị Hƣơng Giang i LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Trong suốt quá trình học tập và hoàn thành khóa luận, tôi đã nhận đƣợc rất nhiều sự quan tâm, giúp đỡ quý báu của quý thầy cô, các anh chị và các bạn. Với lòng biết ơn sâu sắc, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới các thầy cô giáo khoa Thú y Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã chia sẻ tri thức và tâm huyết của mình để truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho chúng tôi trong suốt thời gian học tập tại trƣờng. Đặc biệt tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ngƣời thầy kính mến PGS.TS Nguyễn Hữu Nam–Giảng viên môn Bệnh Lý khoa Thú y đã tận tình chỉ bảo, hƣớng dẫn tôi trong suốt quá trình thực hiện khóa luận.
Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô và anh chị làm việc tại phòng thí nghiệm bộ môn Bệnh Lý Thú y Khoa Thú y đã tạo mọi điều kiện tốt nhất cho tôi trong thời gian thực hiện đề tài. Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè những ngƣời luôn động viên, giúp đỡ tôi vƣợt qua mọi khó khăn trong quá trình học tập, nghiên cứu để hoàn thành tốt khóa luận này. Tôi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày. năm 2016 Tác giả luận văn Trần Thị Hƣơng Giang ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC Lời cam đoan.
ii Mục lục .iii Danh mục bảng. vi Danh mục hình ảnh. vii Danh mục các chữ viết tắt. ix Trích yếu luận văn.
Tính cấp thiết của đề tài. Mục tiêu đề tài. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài. Tổng quan tài liệu.
Lịch sử và tình hình dịch prrs ở lợn. Khái quát chung. Lịch sử và tình hình dịch PRRS ở lợn trên thế giới. Tình hình dịch PRRS tại Việt Nam.
Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nƣớc. Tình hình nghiên cứu ngoài nƣớc. Tình hình nghiên cứu trong nƣớc. Tìm hiểu về căn bệnh.
Hình thái và cấu trúc của virus PRRS. Phân loại virus PRRS. Sức đề kháng của virus PRRS. Đặc tính nuôi cấy virus PRRS.
Dịch tễ học. Loài vật mắc bệnh, lứa tuổi mắc bệnh. Chất chứa mầm bệnh và quá trình truyền lây. Cơ chế sinh bệnh.
18 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Triệu chứng và bệnh tích. Triệu chứng của bệnh PRRS. Bệnh tích của bệnh PRRS.
Chẩn đoán và phòng trị bệnh. Các biện pháp phòng và điều trị. Đối tƣợng, nội dung và phƣơng pháp nghiên cứu. Đối tƣợng nghiên cứu.
Nội dung nghiên cứu. Địa điểm, thời gian nghiên cứu. Động vật thí nghiệm. Phƣơng pháp nghiên cứu.
Phƣơng pháp gây bệnh thực nghiệm. Phƣơng pháp ELISA. Phƣơng pháp quan sát, mô tả. Phƣơng pháp mổ khám kiểm tra bệnh tích đại thể.
Phƣơng pháp làm tiêu bản bệnh lý vi thể. Phƣơng pháp nhuộm hóa mô miễn dịch (Immunohistochemistry - IHC). Phƣơng pháp thống kê, xử lý số liệu. Kết quả và thảo luận.
Kết quả gây bệnh thực nghiệm bằng virus chủng PRRSV – CG – 03. Kết quả xét nghiệm của lợn trƣớc khi gây nhiễm PRRSV – CG - 03. Kết quả gây bệnh thực nghiệm bằng chủng virus PRRSV – CG - 03. Kết quả xác định triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn bệnh.
Thân nhiệt của lợn sau gây nhiễm virus chủng PRRSV - CG - 03. Tần số hô hấp của lợn trƣớc và sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG – 03. Nhịp tim của lợn trƣớc và sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Kết quả xác định triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn bệnh.
46 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Kết quả một số chỉ tiêu huyết học của lợn gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Kết quả khảo sát chỉ tiêu hồng cầu của lợn đƣợc gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Kết quả khảo sát chỉ tiêu bạch cầu của lợn đƣợc gây nhiễm virus chủng PRRSV - CG - 03.
Kết quả xác định bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn đƣợc gây nhiễm PRRSV thực nghiệm. Bệnh tích vi thể chủ yếu của lợn đƣợc gây nhiễm PRRSV thực nghiệm. Kết luận và đề nghị. 60 Tài liệu tham khảo.
61 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC BẢNG Bảng 2. Protein cấu trúc của PRRSV. Sức đề kháng của PRRSV. Kết quả xét nghiệm kháng thể kháng PRRSV bằng phƣơng pháp ELISA (Giá trị S/P ).
Kết quả xét nghiệm sự có mặt của virus PRRS và một số virus khác bằng phƣơng pháp RT – PCR .3 Kết quả đo thân nhiệt trƣớc khi gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03. Kết quả xác định sự có mặt của virus PRRS bằng phƣơng pháp RT – PCR. Diễn biến thân nhiệt của lợn thí nghiệm PRRSV – CG - 03. Tần số hô hấp của lợn trƣớc gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG -03.
Tần số hô hấp của lợn sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG – 03. Nhịp tim của lợn trƣớc khi gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03. Nhịp tim của lợn sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn đƣợc gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03.
Kết quả khảo sát một số chỉ tiêu hệ hồng cầu ở lợn gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG-03. Kết quả khảo sát chỉ tiêu bạch cầu của lợn gây bệnh. Bệnh tích đại thể của lợn đƣợc gây nhiễm PRRSV thực nghiệm. Bệnh tích vi thể chủ yếu của lợn đƣợc gây nhiễm PRRSV thực nghiệm.
58 vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2. Bản đồ lịch sử xuất hiện bệnh PRRS trên thế giới. Dịch bệnh PRRS tại Việt Nam năm 2007. Hình thái virus PRRS.
Cấu trúc bộ gen của PRRSV. Virus PRRS xâm nhập và phá hủy tế bào đại thực bào. Nhỏ PRRSV – CG - 03. Lấy mẫu máu xét nghiệm.
Nhiệt độ trung bình của lợn đƣợc gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03. Tần số hô hấp trƣớc khi gây nhiễm 7 ngày và 21 ngày sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Diễn biến nhịp tim trƣớc 7 ngày và 21 ngày sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. Lợn mệt mỏi, ủ rũ, chán ăn.
Mắt lợn viêm, có nhử đặc. Phân lợn bị táo bón. Lợn tụ máu ở da toàn thân. Biểu đồ diễn biến công thức bạch cầu của lợn gây bệnh thực nghiệm.
Biểu đồ diễn biến công thức bạch cầu của lợn đối chứng. Phổi thuỷ thũng, tụ huyết, màng phổi viêm tơ huyết. Hạch phổi sƣng, xuất huyết. Thận xuất huyết điểm.
Xuất huyết niêm mạc dạ dày. Lách sƣng, tụ máu. 57 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Tá tràng, manh tràng sung huyết.
Hồng cầu tràn ngập trong lòng các phế quản, phế nang ( HE. Viêm kẽ phổi (HE. Thận thâm nhiễm tế bào viêm ở kẽ thận. Lách tụ máu, tủy đỏ dãn rộng chứa đầy hồng cầu (HE.
Virus có nhiều ở tế bào biểu mô ống mật gan (IHC. Virus có nhiều ở tế bào đại thực bào trong lòng phế nang (IHC. 59 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay H.E Hematoxylin & Eosin IPMA Immuno – Peroxidase Monolayer Assay NXB Nhà xuất bản OIE Organisation of International Epidemiology (Tổ chức Dịch tễ học Thế giới) OD Optical Density (Mật độ quang) PBS Phosphate Buffer Saline PCR Polymerase Chain Reaction PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome PRRSV Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus RNA Ribonucleic Acid RT – PCR Reverse Transcriptase – Polymerase Chain Reaction DMEM Dulbecco,s Modified Eagle Medium BED Blue Ear disease MSD Mistery Swine DiseasE SHFV Simian hemorrhaghic fever virus LDHV Lactate Dehydlogenase – elevating virus EAV Equine virus PAM Pulmnary alveolar macrophage PCV2 Porcine Circovirus Type 2 FMDV Foot-and-mouth disease virus CSFV Classical swine Fever virus EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ORF Open reading frame (khung đọc mở) ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Họ và tên học viên: Trần Thị Hƣơng Giang Tên đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (PRRS) thực nghiệm” Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60.01 Tên cơ sở đào tạo : Học viện Nông nghiệp Việt Nam I. Mục đích và đối tƣợng nghiên cứu: Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp (PRRS) hay còn gọi với cái tên “Bệnh Tai xanh ở lợn” (là một bệnh truyền nhiễm mới với các biểu hiện đặc trƣng đồng thời ở hệ sinh sản, hệ hô hấp và hệ tiêu hóa: sảy thai, đẻ muộn ở lợn nái; viêm tinh hoàn ở lợn đực; tiêu chảy, viêm phổi và tai xanh ở lợn con theo mẹ; phát ban , sƣng phù mặt, xuất huyết và hoại tử da ở lợn vỗ béo…) PRRS là một bệnh truyền nhiễm gây thiệt hại khủng khiếp về mặt kinh tế do: - Giảm số đầu con sơ sinh/nái đẻ vì chết thai, sảy thai.
- Chết do trụy hô hấp và tiêu chảy. Từ tính chất nguy hiểm của bệnh và yêu cầu thực tiễn đó, chúng tôi tiến hành: “Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (PRRS) thực nghiệm” 1.Đối tƣợng nghiên cứu : - 10 con lợn giống Landrace 6 tuần tuổi, chủng PRRSV – CG - 03 2.Mục đích của đề tài : - Xác định đƣợc các đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc bệnh PRRS thực nghiệm. Các phƣơng pháp nghiên cứu.Phƣơng pháp gây bệnh thực nghiệm 2.Phƣơng pháp ELISA 3.Phƣơng pháp quan sát, mô tả 4.Phƣơng pháp mổ khám kiểm tra bệnh tích đại thể 5.Phƣơng pháp làm tiêu bản bệnh lý vi thể 6.