Luận văn thạc sĩ: Nghiên cứu khả năng kháng β-lactam của các chủng Salmonella phân lập từ thịt ...

Luận văn thạc sĩ phân tích nghiên cứu khả năng kháng ss lactam của các chủng salmonelia phân lập từ thịt gà tại các chợ trên, đánh giá thực trạng, chỉ ra hạn chế, đề xuất giải

• Tác giả: Đỗ Thùy Linh
• Người hướng dẫn: TS. Dương Văn Nhiệm
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên cứu khả năng kháng β-lactam của các chủng Salmonella phân lập từ thịt gà tại các chợ trên địa bàn thành phố Hà Nội
• Loại tài liệu: luận văn
• Năm xuất bản: 2018
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 2. DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• 3. DANH MỤC BẢNG
• 4. DANH MỤC HÌNH
• 5. TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 6. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 7. MỤC ĐÍCH
• 8. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 8.1. VI KHUẨN SALMONELLA
• 8.1.1. Khái niệm về Salmonella
• 8.1.2. Khả năng gây bệnh của Salmonella

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Nghiên Cứu Kháng Sinh Salmonella ở Hà Nội

Tình trạng ngộ độc thực phẩm do vi sinh vật, đặc biệt là Salmonella, đang là vấn đề nhức nhối tại Việt Nam. Salmonella là vi khuẩn gây bệnh đường ruột phổ biến trên toàn cầu. Bệnh lây truyền qua thực phẩm, đặc biệt là các chủng Salmonella không thương hàn, gây ra mối lo ngại lớn cho cộng đồng. Hầu hết các vụ dịch Salmonella ở người liên quan đến việc tiêu thụ sản phẩm từ động vật mang mầm bệnh. Sự gia tăng các chủng Salmonella kháng kháng sinh, đặc biệt là kháng beta-lactam, đang trở thành một thách thức lớn trong điều trị. Nghiên cứu này tập trung vào đánh giá khả năng kháng beta-lactam của Salmonella phân lập từ thịt gà tại các chợ ở Hà Nội, một vấn đề cấp thiết cần được làm rõ. Theo Truong H., sự bùng phát các ca bệnh do Salmonella lây truyền qua thực phẩm và chủng Salmonella kháng đa kháng sinh (MDR) là hai vấn đề chính trong dịch tễ học Salmonella không thương hàn.

1.1. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu Về An Toàn Thực Phẩm

Nghiên cứu về khả năng kháng beta-lactam của Salmonella trong thịt gà có ý nghĩa quan trọng trong việc bảo đảm an toàn thực phẩm và sức khỏe cộng đồng. Việc xác định mức độ kháng kháng sinh của Salmonella giúp các cơ quan chức năng có cơ sở khoa học để đưa ra các biện pháp kiểm soát và phòng ngừa hiệu quả. Điều này bao gồm việc giám sát chặt chẽ việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi, tăng cường kiểm tra vệ sinh an toàn thực phẩm tại các chợ và cơ sở giết mổ, đồng thời nâng cao nhận thức của người dân về nguy cơ kháng kháng sinh và các biện pháp phòng tránh ngộ độc thực phẩm.

1.2. Mục Tiêu Nghiên Cứu Kháng Sinh và Thịt Gà ở Hà Nội

Mục tiêu chính của nghiên cứu này là đánh giá khả năng kháng beta-lactam của các chủng Salmonella phân lập từ thịt gà thu thập tại các chợ trên địa bàn Hà Nội. Đồng thời, nghiên cứu cũng nhằm xác định các gen kháng kháng sinh mã hóa enzyme beta-lactamase của các chủng Salmonella kháng sinh. Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp thông tin quan trọng về tình hình kháng kháng sinh của Salmonella trong thịt gà tại Hà Nội, từ đó góp phần vào việc xây dựng các chiến lược phòng chống kháng kháng sinh hiệu quả.

II. Thách Thức Salmonella Kháng Kháng Sinh Trong Thịt Gà

Sự gia tăng tình trạng kháng kháng sinh của Salmonella là một vấn đề toàn cầu, đặc biệt là do việc lạm dụng kháng sinh trong điều trị bệnh ở người và trong chăn nuôi. Việc sử dụng rộng rãi kháng sinh trong chăn nuôi, bao gồm cả chăn nuôi gà, cho mục đích điều trị, phòng ngừa và kích thích tăng trưởng, đã tạo điều kiện cho vi khuẩn thích nghi và tăng cường khả năng kháng kháng sinh. Điều này dẫn đến sự lan truyền các chủng Salmonella kháng kháng sinh thông qua chuỗi thức ăn, gây nguy cơ lớn cho sức khỏe cộng đồng. Theo Thai T., các nghiên cứu đã chỉ ra bằng chứng về sự lan truyền vi khuẩn kháng kháng sinh từ động vật sang người.

2.1. Nguy Cơ Ngộ Độc Thực Phẩm Do Salmonella Kháng Thuốc

Nguy cơ ngộ độc thực phẩm do Salmonella kháng thuốc ngày càng gia tăng, gây khó khăn trong việc điều trị và kéo dài thời gian phục hồi của bệnh nhân. Các chủng Salmonella kháng beta-lactam, một nhóm kháng sinh quan trọng, đặc biệt đáng lo ngại vì chúng có thể làm giảm hiệu quả của các phương pháp điều trị thông thường. Điều này đòi hỏi phải sử dụng các loại kháng sinh mạnh hơn, đắt tiền hơn, và có thể gây ra nhiều tác dụng phụ hơn. Việc kiểm soát và phòng ngừa Salmonella kháng thuốc trở nên cấp thiết để bảo vệ sức khỏe cộng đồng.

2.2. Tình Hình Sử Dụng Kháng Sinh Trong Chăn Nuôi Gà

Việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi gà tại Việt Nam còn nhiều bất cập, bao gồm việc sử dụng không đúng liều lượng, không đúng mục đích, và không tuân thủ thời gian ngừng sử dụng trước khi giết mổ. Điều này tạo điều kiện cho sự phát triển và lan truyền các chủng Salmonella kháng kháng sinh. Cần có các biện pháp kiểm soát chặt chẽ hơn đối với việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi gà, đồng thời khuyến khích các phương pháp chăn nuôi an toàn sinh học và giảm thiểu sử dụng kháng sinh.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Xác Định Kháng Sinh ở Thịt Gà

Nghiên cứu này sử dụng phương pháp nuôi cấy truyền thống để phân lập Salmonella từ thịt gà. Sau đó, phương pháp kháng sinh đồ (sử dụng khoanh giấy kháng sinh) được sử dụng để xác định nhanh tính kháng kháng sinh của vi sinh vật. Khả năng sinh enzyme beta-lactamase của các chủng Salmonella được kiểm tra. Cuối cùng, kỹ thuật PCR (phản ứng chuỗi polymerase) được sử dụng để phát hiện các gen kháng kháng sinh của chủng vi khuẩn. Các mẫu dương tính sẽ được lưu lại để thực hiện các nghiên cứu sâu hơn.

3.1. Quy Trình Lấy Mẫu và Phân Lập Salmonella

Việc lấy mẫu thịt gà được thực hiện tại các chợ trên địa bàn Hà Nội. Mẫu được bảo quản và vận chuyển về phòng thí nghiệm để tiến hành phân lập Salmonella. Quy trình phân lập bao gồm các bước: làm giàu mẫu, cấy ria lên môi trường chọn lọc, và định danh Salmonella bằng các xét nghiệm sinh hóa. Các chủng Salmonella được xác định sẽ được sử dụng cho các xét nghiệm tiếp theo.

3.2. Xác Định Khả Năng Kháng Kháng Sinh Bằng Kháng Sinh Đồ

Phương pháp kháng sinh đồ được sử dụng để xác định khả năng kháng kháng sinh của các chủng Salmonella phân lập được. Các chủng Salmonella được cấy lên môi trường thạch và đặt các khoanh giấy kháng sinh lên bề mặt thạch. Sau khi ủ, đường kính vòng vô khuẩn xung quanh khoanh giấy kháng sinh được đo và so sánh với tiêu chuẩn để xác định chủng Salmonella có kháng kháng sinh hay không.

3.3. Kỹ Thuật PCR Phát Hiện Gen Kháng Beta Lactamase

Kỹ thuật PCR được sử dụng để phát hiện các gen mã hóa enzyme beta-lactamase trong các chủng Salmonella kháng kháng sinh. Các mồi đặc hiệu cho các gen khác nhau được sử dụng để khuếch đại các đoạn DNA tương ứng. Kết quả PCR được phân tích bằng điện di trên gel agarose để xác định sự hiện diện của các gen kháng kháng sinh.

IV. Kết Quả Tỷ Lệ Kháng Sinh Của Salmonella Tại Hà Nội

Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ Salmonella lưu hành trên thịt gà tại các chợ ở một số quận nội thành Hà Nội là 32%. Các chủng Salmonella phân lập được kháng lại các kháng sinh cephalosporin thế hệ 1, 2, 3 với tỷ lệ khác nhau. Có một chủng duy nhất sinh enzyme beta-lactamase phổ rộng trong số 32 chủng Salmonella đã thu thập, cũng là chủng kháng các loại kháng sinh cephalosporin thế hệ 1, 2, 3. Có 10 chủng Salmonella sinh enzyme Bla TEM, 4 chủng sinh enzyme CMY-2, 6 chủng sinh enzyme bla PSE, 3 chủng sinh enzyme bla OXA.

4.1. Mức Độ Kháng Cephalosporin Ở Các Chủng Salmonella

Các chủng Salmonella phân lập được thể hiện khả năng kháng với các kháng sinh cephalosporin thế hệ 1, 2 và 3. Tỷ lệ kháng khác nhau giữa các thế hệ kháng sinh, cho thấy sự phức tạp trong cơ chế kháng kháng sinh của Salmonella. Việc xác định cụ thể các gen kháng kháng sinh giúp hiểu rõ hơn về cơ chế này.

4.2. Phát Hiện Các Gen Mã Hóa Enzyme Beta Lactamase

Nghiên cứu đã xác định được sự hiện diện của các gen mã hóa enzyme beta-lactamase như Bla TEM, CMY-2, bla PSE và bla OXA trong các chủng Salmonella phân lập được. Điều này cho thấy các chủng Salmonella này có khả năng sản xuất enzyme beta-lactamase, giúp chúng phân hủy các kháng sinh beta-lactam và trở nên kháng với các kháng sinh này.

V. Ứng Dụng Kiểm Soát Salmonella Kháng Sinh Trong Chăn Nuôi

Kết quả nghiên cứu này có thể được sử dụng để xây dựng các biện pháp kiểm soát Salmonella kháng kháng sinh trong chăn nuôi gà. Điều này bao gồm việc tăng cường giám sát việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi, khuyến khích các phương pháp chăn nuôi an toàn sinh học, và nâng cao nhận thức của người dân về nguy cơ kháng kháng sinh. Ngoài ra, cần có các biện pháp kiểm soát Salmonella tại các cơ sở giết mổ và chế biến thịt gà để giảm thiểu nguy cơ lây nhiễm Salmonella sang người.

5.1. Giải Pháp Giảm Thiểu Sử Dụng Kháng Sinh Trong Chăn Nuôi

Để giảm thiểu việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi, cần áp dụng các biện pháp chăn nuôi an toàn sinh học, bao gồm việc cải thiện điều kiện vệ sinh, tăng cường dinh dưỡng cho vật nuôi, và sử dụng vaccine để phòng bệnh. Ngoài ra, cần có các quy định chặt chẽ về việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi, và xử lý nghiêm các trường hợp vi phạm.

5.2. Nâng Cao Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm Tại Chợ và Cơ Sở Giết Mổ

Việc nâng cao vệ sinh an toàn thực phẩm tại các chợ và cơ sở giết mổ là rất quan trọng để giảm thiểu nguy cơ lây nhiễm Salmonella sang người. Điều này bao gồm việc đảm bảo vệ sinh sạch sẽ tại các khu vực bán thịt gà, kiểm soát nhiệt độ bảo quản thịt gà, và thực hiện các biện pháp khử trùng hiệu quả. Ngoài ra, cần có các chương trình đào tạo về vệ sinh an toàn thực phẩm cho người bán hàng và người lao động tại các cơ sở giết mổ.

VI. Kết Luận Hướng Nghiên Cứu Về Salmonella Kháng Sinh Tương Lai

Nghiên cứu này đã cung cấp thông tin quan trọng về tình hình kháng beta-lactam của Salmonella trong thịt gà tại Hà Nội. Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ Salmonella kháng kháng sinh còn khá cao, đặc biệt là kháng với các kháng sinh cephalosporin. Cần có các nghiên cứu sâu hơn để tìm hiểu về cơ chế kháng kháng sinh của Salmonella, và phát triển các biện pháp kiểm soát Salmonella hiệu quả hơn. Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc xác định các yếu tố nguy cơ liên quan đến sự lan truyền Salmonella kháng kháng sinh, và đánh giá hiệu quả của các biện pháp can thiệp.

6.1. Đề Xuất Các Nghiên Cứu Sâu Hơn Về Cơ Chế Kháng Sinh

Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc tìm hiểu sâu hơn về cơ chế kháng kháng sinh của Salmonella, bao gồm việc xác định các gen kháng kháng sinh mới, và nghiên cứu về sự biểu hiện của các gen kháng kháng sinh. Điều này sẽ giúp chúng ta hiểu rõ hơn về cách Salmonella phát triển khả năng kháng kháng sinh, và từ đó phát triển các biện pháp kiểm soát Salmonella hiệu quả hơn.

6.2. Tăng Cường Giám Sát Dịch Tễ Học Salmonella Kháng Thuốc

Cần tăng cường giám sát dịch tễ học Salmonella kháng thuốc để theo dõi sự lan truyền của các chủng Salmonella kháng kháng sinh, và xác định các yếu tố nguy cơ liên quan đến sự lan truyền này. Điều này sẽ giúp chúng ta đưa ra các biện pháp can thiệp kịp thời và hiệu quả để ngăn chặn sự lan truyền Salmonella kháng kháng sinh.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ĐỖ THÙY LINH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG β-LACTAM CỦA CÁC CHỦNG SALMONELLA PHÂN LẬP TỪ THỊT GÀ TẠI CÁC CHỢ TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HÀ NỘI Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: TS. Dương Văn Nhiệm NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 c LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng dùng để bảo vệ lấy bất kỳ học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày… tháng… năm… Tác giả luận văn Đỗ Thùy Linh i c LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ, động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi được bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc tới TS. Dương Văn Nhiệm – Bộ môn Thú y Cộng đồng đã tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia, đặc biệt cám ơn PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo – Viện trưởng, và ThS. Nguyễn Thành Trung – Phụ trách Khoa Vi sinh vật cùng các cán bộ Khoa Vi sinh vật đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày… tháng… năm… Tác giả luận văn Đỗ Thùy Linh ii c MỤC LỤC Lời cam đoan . ii Mục lục . iii Danh mục chữ viết tắt .v Danh mục bảng . vi Danh mục hình . vii Trích yếu luận văn . viii Thesis abstract. Tính cấp thiết của đề tài . Tổng quan tài liệu . Vi khuẩn Salmonella . Khái niệm về Salmonella . Khả năng gây bệnh của Salmonella . Gia cầm – vật chủ chứa Salmonella. Tình hình ô nhiễm Salmonella trên gia cầm . Tình hình ô nhiễm Salmonella trên gia cầm trên thế giới. Tình hình ô nhiễm Salmonella trên gia cầm tại Việt Nam . Kháng sinh và kháng kháng sinh . Lịch sử phát triển của kháng sinh . Kháng sinh β-lactam . Cephalosporin và kháng sinh phổ rộng. Kháng kháng sinh . Cơ chế kháng kháng sinh của vi khuẩn . Kháng Cephalosporine . Enzyme B-lactamase phổ rộng . Kháng kháng sinh của vi khuẩn Salmonella . Các phương pháp sử dụng để phân lập, đánh giá tính kháng kháng sinh, và xác định gen kháng thuốc (gen mã hóa enzyme β-lactamse) của vi khuẩn Salmonella . Các phương pháp phát hiện Salmonella . Các phương pháp đánh giá tính kháng kháng sinh – kháng sinh đồ . Các phương pháp xác định gen mã hóa enzyme β-lactamse . Đối tượng, nội dung và phương pháp nghiên cứu . Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu . Nội dung nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu . Phương pháp lấy mẫu, bảo quản và lưu trữ mẫu . Phương pháp phân lập Salmonella. Phương pháp xác định gen kháng kháng sinh . Kết quả và thảo luận . Xác định tỉ lệ lưu hành của Salmonella trong thịt gà tươi tại bốn quận nội thành Hà Nội . Xác định khả năng kháng kháng sinh nhóm β-lactam của vi khuẩn Salmonella . Kháng kháng sinh cephalosporin thế hệ 1 Cefazoline (CZ): . Kháng kháng sinh cephalosporin thế hệ 2 CXM, FOX: . Xác định chủng Salmonella sinh enzyme β-lactamase phổ rộng. Xác định gen mã hóa enzyme βeta-lactamese . Xác định gen mã hóa enzyme bla TEM . Xác định gen mã hóa enzyme bla PSE . Xác định gen mã hóa enzyme bla CMY-2 . Xác định gen mã hóa enzyme bla OXA . Kết luận và đề nghị .57 Tài liệu tham khảo .58 iv c DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt AOAC Hiệp hội chính thức các nhà phân tích hóa học BHI Brain heart Infusion BOA Văn phòng công nhận chất lượng CAL Ceftazidime + clavulanic axit CAZ Ceftazidime CLSI Viện Tiêu chuẩn Lâm sàng và Thí nghiệm CRO Ceftriaxone CTL Cefotaxim + clavulanic axit CTX Cefotaxime CXM Cefuroxime CZ Cefazolin ESBL Enzyme β-lactamase phổ rộng FDA Cục Quản lý Dược phẩm và Thực phẩm Hoa Kỳ FOX Cefoxitin FSIS Tổ chức Kiểm tra An toàn thực phẩm IEC Ban điện ISO Tổ chức Tiêu chuẩn thế giới LCR Phản ứng chuỗi Ligase LDC Môi trường L-Lyzin đâ khử nhóm cacboxyl MIC Nồng độ ức chế tối thiểu MKTTn Tetrathionat/novobioxin muller-kauffmann NCCLS Ủy ban Quốc gia Tiêu chuẩn Lâm sàng trong Phòng thí nghiệm NTS Salmonella không thương hàn OMP Porin màng ngoài PBP Protein liên kết penicillin PCR Phản ứng chuỗi polymerase RFLP Kỹ thuật đa hình độ dài đoạn cắt hạn chế RV Rappaport-Vassiliadis S. Salmonella TAE Tris-acetate-EDTA (EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid) TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam TSA Trypton casein soy agar TSI Triple sugar iron USDA Bộ Nông nghiệp Hoa Kỳ WHO Tổ chức Y tế Thế giới XLD deoxycholat lyzin xyloza v c DANH MỤC BẢNG Bảng 3. Tên kháng sinh và điểm đọc kháng sinh đồ . Trình tự các cặp mồi . Chu trình nhiệt . Số lượng mẫu thu thập được tại các chợ . Tỉ lệ ô nhiễm Salmonella trên thịt gia cầm theo khu vực . Kết quả kháng cephalosporin thế hệ 1 CZ . Kết quả kháng cephalosporin thế hệ 2 CXM . Kết quả kháng cephalosporin thế hệ 3 . Tỉ lệ kháng kháng sinh β-lactam cephalosporin . Các chủng Salmonella kháng kháng sinh cephalosporin . Các chủng Salmonella mang gen mã hóa enzyme β-lactamase. 56 vi c DANH MỤC HÌNH Hình 2. Vi khuẩn Salmonella . Khay kháng sinh . Phương pháp cột khuếch tán kháng sinh – Etest . Phương pháp sử dụng khoanh giấy kháng sinh . Xác định vi khuẩn sinh ESBL .1 Địa điểm lấy mẫu tại một số Quận nội thành Hà Nội . Thịt gà bày bán tại chợ sau khi giết mổ . Khuẩn lạc khi ria lên thạch XLD . Kết quả phản ứng trên thạch TSI. Phản ứng trên Urea broth . Phản ứng trên LDC broth . Kháng sinh đồ trên chủng dương đối chiếu Salmonella 572. Kháng sinh đồ trên chủng đối chiếu E. Tỉ lệ nhiễm Salmonella trong gia cầm tại các Quận nội thành . Chủng Salmonella kháng với cephalosporin thế hệ 1 CZ . Chủng Salmonella kháng với cephalosporin thế hệ 1, 2 (CZ, CXM) . Chủng Salmonella đối chứng kháng kháng sinh β-lactam phổ rộng. Chủng Salmonella sinh enzyme B-lactamse phổ rộng . Đoạn khuếch đại gen mã hóa enzyme bla . Đoạn khuếch đại gen mã hóa enzyme bla PSE . Đoạn khuếch đại gen mã hóa enzyme bla CMY-2 . Đoạn khuếch đại gen mã hóa enzyme bla OXA . 55 vii c TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Đỗ Thùy Linh Tên Luận văn: Nghiên cứu khả năng kháng β-lactam của các chủng Salmonella phân lập từ thịt gà tại các chợ trên địa bàn thành phố Hà Nội Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Đánh giá được khả năng kháng β-lactam của các chủng Salmonella phân lập trên các mẫu thịt gà thu thập được tại một số chợ tại Hà Nội. Xác định được gen mã hóa enzyme β-lactamase của các chủng Salmonella kháng thuốc. Phương pháp nghiên cứu Dựa trên mục đích nghiên cứu, chúng tôi lựa chọn phương pháp nuôi cấy truyền thống để phân lập Salmonella trên thịt gia cầm, phương pháp dùng khoanh giấy kháng sinh để phát hiện nhanh tính kháng kháng sinh của vi sinh vật và kiểm chứng khả năng sinh enzyme β-lactamase của chủng Salmonella đã thu thập, Các gen kháng kháng sinh của chủng vi khuẩn bước đầu được phát hiện bằng kỹ thuật khuếch đại gen Polymerase chain Reaction (PCR). Các mẫu dương tính sẽ được lưu lại để thực hiện tiếp các nghiên cứu sâu hơn như phát hiện các đột biến điểm, các gen kháng kháng sinh khác. Kết quả chính và kết luận Tỉ lệ Salmonella lưu hành trên thịt gia cầm tại các chợ tại một số quận nội thành Hà Nội là 32. Các chủng Salmonella phân lập được kháng lại các kháng sinh cephalosporin thế hệ 1, 2, 3 với tỉ lệ lần lượt: Cefazolin (CZ) là 15.13% và Ceftazidime (CAZ) với 9. Có 1 chủng duy nhất sinh eznyme B- lactamase phổ rộng trong số 32 chủng Salmonella đã thu thập, cũng là chủng kháng các loại kháng sinh cephalosporin thế hệ 1, 2, 3. Có 10 chủng Salmonella sinh enzyme Bla TEM, 4 chủng sinh enzyme CMY-2, 6 chủng sinh enzyme bla PSE, 3 chủng sinh enzyme bla OXA. Không có chủng Salmonella nào sinh enzyme bla SHV và enzyme bla DHA trong số 32 chủng đã thu thập. viii c THESIS ABSTRACT Master candidate: Do Thuy Linh Thesis title: A study on the β-lactam antibiotic resistance of Salmonella spp. isolated from chicken in markets of Hanoi. Major: Veterinary Medicine Code: 60 64 01 01 Educational organization: Vietnam National University of Agriculture (VNUA) Research Objectives Evaluate of β-lactam resistance of Salmonella spp. isolated from chicken collected in markets of Hanoi. Identify of the gene encoding the β-lactamase enzyme of antibiotic resistant Salmonella spp. Materials and Methods Based on our research objectives, we chose the traditional method for the isolation of Salmonella in poultry, the method of using disk diffusion antibiotic sensitivity testing to detect quickly antibiotic resistance of bacteria, and test the ability of the β-lactamase gene exits in isolated Salmonella. Antibiotic resistance genes were initially detected by PCR technique. Positive samples will be retained for other follow- up studies such as point mutations detect, other antibiotic resistance genes. Main findings and conclusions The prevalence of Salmonella isolated from poultry in Hanoi is 32. The resistance ratios of isolated Salmonella on the first, second and third generation cephalosporin are: Cefazolin (CZ) 15. There is one Salmonella strain that produced the extended spectrum B- lactamase enzyme in 32 strains of isolated Salmonella, which resist the first, second and third generation cephalosporin. There are 10 isolated strains contain CMY-2 enzyme, 6 strains contain bla PSE enzyme and 3 strains contain bla OXA enzyme. There is no Salmonella strains produced bla SHV enzyme and bla DHA enzyme from 32 isolated strains. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Ngày nay, tình trạng ngộ độc thực phẩm, đặc biệt là ngộ độc thực phẩm do vi sinh vật ngày càng trở thành vấn đề báo động tại Việt Nam, trong đó có ngộ độc thực phẩm do Salmonella gây nên. Salmonella là vi khuẩn gây bệnh phổ biến gây ra các triệu chứng đường ruột trên toàn thế giới. Bệnh lây truyền qua thực phẩm gây ra bởi Salmonella không thương hàn đang là mối quan tâm của cộng đồng toàn cầu.