Luận văn thạc sĩ hus xác định đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương người bằng phương pháp sắc ký khí gc

Luận văn thạc sĩ nghiên cứu hus xác định đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương người bằng phương pháp sắc ký khí gc, khảo sát thực trạng, phân tích nguyên nhân, đề xuất

• Tác giả: Nguyễn Thị Hồng Nhung
• Người hướng dẫn: PGS.TS Tạ Thị Thảo
• Trường học: Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội
• Chuyên ngành: Hóa phân tích
• Đề tài: Xác định đồng thời Methanol và Ethanol trong huyết tương bằng phương pháp sắc ký khí (GC)
• Loại tài liệu: Luận văn thạc sĩ khoa học
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Tổng quan về methanol và ethanol
• 1.2. Cơ chế chuyển hóa methanol và ethanol trong cơ thể sống
• 1.3. Đặc tính của methanol và ethanol
• 2. CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Phương pháp phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis)
• 2.2. Phương pháp phổ hồng ngoại gần (NIR)
• 2.3. Phương pháp sắc ký khí (GC)
• 2.4. Chất chuẩn, hóa chất, thiết bị
• 2.5. Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng methanol
• 2.6. Chuẩn bị mẫu chuẩn và xử lý mẫu phân tích từ huyết tương
• 2.7. Khảo sát điều kiện sắc ký định lượng MeOH, EtOH
• 2.8. Tính chọn lọc và độ đặc hiệu của phương pháp
• 2.9. Khoảng nồng độ tuyến tính
• 2.10. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp
• 2.11. Một số phương pháp bảo quản mẫu ảnh hưởng đến nồng độ MeOH, EtOH trong máu theo thời gian bằng phương pháp sắc ký khí
• 2.12. Độ ổn định mẫu trong quá trình bảo quản
• 2.13. Phân tích mẫu thực tế
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Tối ưu hóa các điều kiện phân tích methanol, ethanol trên thiết bị GC-FID
• 3.2. Khảo sát điều kiện nhiệt độ detector
• 3.3. Khảo sát điều kiện nhiệt độ mẫu
• 3.4. Khảo sát nhiệt độ cột tách
• 3.5. Khảo sát nhiệt độ dòng khí mang
• 3.6. Nhiễu nền methanol, ethanol, phụ tạp, nhiễu ồn tạp
• 3.7. Khảo sát sự phụ thuộc tuyến tính giữa diện tích pic và nồng độ chất phân tích
• 3.8. Khảo sát giới hạn phát hiện và giới hạn nhiễu ồn tạp
• 3.9. Nghiên cứu lựa chọn điều kiện xử lý mẫu huyết tương
• 3.10. Khảo sát nồng độ ồn tạp ACN
• 3.11. Khảo sát tính thuỷ tĩnh ACN
• 3.12. Nhiễu trị số phương pháp phân tích
• 3.13. Độ ưu phương pháp phân tích
• 3.14. Giá trị trung bình, nhiễu nền phương pháp phân tích
• 3.15. Nhiễu nền methanol, ethanol trên nền mẫu huyết tương
• 3.16. Nồng độ ồn tạp và phương pháp bảo quản mẫu trong thời gian dài
• 3.17. Phân tích mẫu thực tế
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về phương pháp sắc ký khí xác định methanol và ethanol

Phương pháp sắc ký khí (GC) là một kỹ thuật phân tích mạnh mẽ, được sử dụng rộng rãi trong việc xác định các hợp chất hữu cơ trong nhiều lĩnh vực khác nhau, bao gồm cả y tế và pháp y. Đặc biệt, việc xác định đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương là một thách thức lớn do tính chất hóa học tương tự của chúng. Nghiên cứu này nhằm cung cấp cái nhìn tổng quan về phương pháp sắc ký khí và ứng dụng của nó trong việc phân tích methanol và ethanol.

1.1. Đặc điểm hóa học của methanol và ethanol

Methanol (CH3OH) và ethanol (C2H5OH) là hai loại rượu phổ biến, có nhiều ứng dụng trong công nghiệp và y tế. Methanol được biết đến với tính độc hại cao, trong khi ethanol thường được sử dụng như một chất khử trùng và trong sản xuất đồ uống có cồn. Sự tương đồng về cấu trúc hóa học giữa chúng khiến cho việc phân tích trở nên phức tạp.

1.2. Tầm quan trọng của việc xác định methanol và ethanol trong huyết tương

Việc xác định nồng độ methanol và ethanol trong huyết tương là rất quan trọng trong việc chẩn đoán ngộ độc rượu. Nồng độ cao của methanol có thể dẫn đến các triệu chứng nghiêm trọng và tử vong. Do đó, việc phát triển phương pháp phân tích chính xác và nhanh chóng là cần thiết.

II. Thách thức trong việc xác định methanol và ethanol trong huyết tương

Việc xác định đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương gặp nhiều thách thức do sự tương đồng về tính chất hóa học và khả năng tương tác với các thành phần khác trong mẫu. Các yếu tố như nhiệt độ, áp suất và thời gian phân tích đều ảnh hưởng đến độ chính xác của kết quả. Nghiên cứu này sẽ phân tích các thách thức chính và đề xuất giải pháp để cải thiện độ chính xác trong phân tích.

2.1. Sự tương đồng về tính chất hóa học

Methanol và ethanol có cấu trúc hóa học tương tự, dẫn đến việc khó phân biệt chúng trong quá trình phân tích. Điều này đòi hỏi các phương pháp sắc ký phải được tối ưu hóa để đạt được độ phân giải cao.

2.2. Ảnh hưởng của các yếu tố môi trường

Nhiệt độ và áp suất trong quá trình phân tích có thể ảnh hưởng đến độ chính xác của kết quả. Việc kiểm soát các yếu tố này là rất quan trọng để đảm bảo kết quả phân tích chính xác.

III. Phương pháp sắc ký khí trong xác định methanol và ethanol

Phương pháp sắc ký khí (GC) là một trong những kỹ thuật hiệu quả nhất để xác định methanol và ethanol trong huyết tương. Kỹ thuật này cho phép tách biệt các hợp chất dựa trên sự khác biệt về độ bay hơi và tương tác với cột sắc ký. Nghiên cứu này sẽ trình bày chi tiết về quy trình thực hiện và các yếu tố cần lưu ý khi áp dụng phương pháp này.

3.1. Quy trình thực hiện phương pháp sắc ký khí

Quy trình thực hiện phương pháp sắc ký khí bao gồm các bước chuẩn bị mẫu, tách chiết và phân tích. Mẫu huyết tương cần được xử lý để loại bỏ các tạp chất trước khi đưa vào máy sắc ký.

3.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến độ chính xác của phương pháp

Độ chính xác của phương pháp sắc ký khí phụ thuộc vào nhiều yếu tố như loại cột sắc ký, tốc độ dòng khí và nhiệt độ. Việc tối ưu hóa các yếu tố này sẽ giúp cải thiện độ chính xác và độ nhạy của phương pháp.

IV. Ứng dụng thực tiễn của phương pháp sắc ký khí trong phân tích

Phương pháp sắc ký khí không chỉ được sử dụng trong nghiên cứu mà còn có ứng dụng thực tiễn trong các phòng thí nghiệm pháp y. Việc xác định nồng độ methanol và ethanol trong huyết tương có thể giúp các chuyên gia y tế đưa ra chẩn đoán chính xác và kịp thời cho bệnh nhân ngộ độc. Nghiên cứu này sẽ trình bày một số trường hợp thực tế và kết quả đạt được.

4.1. Kết quả phân tích mẫu thực tế

Nghiên cứu đã tiến hành phân tích nhiều mẫu huyết tương từ các trường hợp ngộ độc khác nhau. Kết quả cho thấy phương pháp sắc ký khí có thể xác định chính xác nồng độ methanol và ethanol trong huyết tương.

4.2. Tác động của kết quả phân tích đến điều trị

Kết quả phân tích chính xác giúp các bác sĩ đưa ra phương pháp điều trị kịp thời và hiệu quả cho bệnh nhân. Việc xác định nồng độ methanol và ethanol là rất quan trọng trong việc quyết định phương pháp giải độc.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu về phương pháp sắc ký khí trong xác định methanol và ethanol trong huyết tương đã chỉ ra rằng đây là một kỹ thuật hiệu quả và cần thiết trong lĩnh vực y tế. Tuy nhiên, vẫn còn nhiều thách thức cần được giải quyết để cải thiện độ chính xác và độ nhạy của phương pháp. Triển vọng tương lai của nghiên cứu này là phát triển các phương pháp mới và cải tiến quy trình phân tích để đáp ứng nhu cầu ngày càng cao trong lĩnh vực y tế.

5.1. Đề xuất cải tiến phương pháp phân tích

Cần nghiên cứu và phát triển các phương pháp mới để cải thiện độ chính xác và độ nhạy của phương pháp sắc ký khí. Việc áp dụng công nghệ mới có thể giúp nâng cao hiệu quả phân tích.

5.2. Tương lai của nghiên cứu trong lĩnh vực y tế

Nghiên cứu về phương pháp sắc ký khí sẽ tiếp tục đóng vai trò quan trọng trong việc xác định các hợp chất độc hại trong huyết tương, góp phần nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Lạm dụng đồ uống có cồn và vấn nạn rượu giả pha cồn công nghiệp đang là thách thức nghiêm trọng đối với sức khỏe cộng đồng và an ninh trật tự xã hội. Theo thống kê của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), mức tiêu thụ đồ uống có cồn toàn cầu đạt khoảng 6,3 lít cồn nguyên chất trên mỗi người trưởng thành, gây ra 3,3 triệu ca tử vong mỗi năm, chiếm 5,9% tổng số ca tử vong trên toàn thế giới. Tại Việt Nam, chỉ tính riêng tháng 1 năm 2016, người dân đã tiêu thụ ước tính 3,4 triệu lít bia và 10 triệu lít rượu. Đáng báo động, các vụ ngộ độc methanol tập thể diễn ra ngày càng phức tạp với tỷ lệ tử vong rất cao, dao động từ 18% đến 56,3%. Điển hình là vụ ngộ độc tại Lai Châu vào tháng 2 năm 2017 khiến 159 người mắc và 9 người tử vong, với hàm lượng methanol trong rượu lên tới 970 mg/l cồn $100^\circ$, vượt gần 10 lần ngưỡng tối đa 100 mg/l cồn $100^\circ$ theo quy chuẩn QCVN 6-3:2010/BYT.

Vấn đề cốt lõi là methanol khi vào cơ thể sẽ bị chuyển hóa thành axit formic gây toan chuyển hóa nặng và tổn thương thần kinh thị giác. Trong phác đồ điều trị, ethanol được dùng làm chất giải độc cạnh tranh với enzyme alcohol dehydrogenase (ADH). Do đó, việc định lượng đồng thời cả methanol và ethanol trong huyết tương đóng vai trò sống còn trong cấp cứu và giám định tư pháp. Đề tài hướng tới mục tiêu xây dựng, thẩm định quy trình phân tích đồng thời hai chất này trên thiết bị sắc ký khí (GC-FID) và ứng dụng thực tế tại Viện Khoa học Hình sự - Bộ Công an trong năm 2019. Nghiên cứu giúp rút ngắn thời gian phân tích xuống dưới 6 phút, phát hiện chính xác nồng độ methanol ngay từ ngưỡng cảnh báo 20 mg/dL, phục vụ điều trị kịp thời trước khi bệnh nhân đạt mức tử vong trên 50 mg/dL.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu được xây dựng dựa trên lý thuyết động học chuyển hóa độc chất sinh học và nguyên lý phân tích sắc ký hiện đại:

• Cơ chế chuyển hóa cạnh tranh qua enzyme ADH: Khi vào cơ thể, ethanol và methanol được chuyển hóa chủ yếu tại gan qua 3 giai đoạn oxy hóa. Ái lực của enzyme ADH đối với ethanol mạnh gấp 10 đến 20 lần so với methanol. Trong khi ethanol phân giải thành acetaldehyd rồi thành axit axetic vô hại, methanol lại chuyển hóa thành formaldehyde và axit formic có độc tính cao, tích lũy trong cơ thể lâu hơn ethanol gấp 15 lần.
• Lý thuyết dòng sắc ký và phương trình Van Deemter: Phương pháp sắc ký khí giải thích sự di chuyển của các cấu tử bay hơi giữa pha tĩnh và pha động. Việc tối ưu hóa tốc độ khí mang và nhiệt độ lò cột nhằm cực tiểu hóa chiều cao đĩa lý thuyết, đảm bảo hệ số đối xứng pic nằm trong khoảng chuẩn $0,9 < A_s < 1,2$.
• Các khái niệm cốt lõi: Đầu dò ion hóa ngọn lửa (GC-FID), chất nội chuẩn Isopropanol (IS), kết tủa protein bằng dung môi hữu cơ Acetonitrile (ACN) dựa trên hằng số điện môi nhằm làm biến tính cấu trúc bậc 2 và bậc 3 của protein trong dịch sinh học.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu và cỡ mẫu: Nghiên cứu sử dụng 20 mẫu huyết tương thực tế thu thập từ các bệnh nhân ngộ độc rượu và tai nạn giao thông tại 5 tỉnh thành gồm Lai Châu, Phú Thọ, Bắc Ninh, Hà Nội và Hà Giang; kết hợp mẫu huyết tương trắng từ Viện Huyết học và Truyền máu Trung ương để xây dựng đường chuẩn 7 điểm.
• Quy trình xử lý mẫu: Mẫu máu toàn phần chứa chất chống đông heparin được ly tâm ở tốc độ 4000 vòng/phút trong 15 phút để thu huyết tương. Hút 0,5 mL huyết tương, thêm 1 mL dung dịch ACN chứa chất nội chuẩn Isopropanol 500 µg/mL để kết tủa protein, lắc xoáy 1 phút và ly tâm 6000 vòng/phút trong 10 phút trước khi tiêm 1 µL dịch nổi vào buồng tiêm.
• Lý do lựa chọn GC-FID: Sắc ký khí với đầu dò FID được lựa chọn thay vì GC-MS hay UV-Vis vì mang lại độ nhạy cao, độ lặp lại vượt trội, vận hành kinh tế và không đòi hỏi quá trình tạo dẫn xuất phức tạp, loại trừ hoàn toàn sự can thiệp của tạp chất nền sinh học.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

Nghiên cứu đã thiết lập thành công các điều kiện tối ưu và thẩm định phương pháp với những số liệu thực nghiệm vượt trội:

• Thông số vận hành tối ưu của thiết bị: Cột mao quản TG-ALC2 ($30\text{ m} \times 0,32\text{ mm}$, màng film 1,2 µm), nhiệt độ đầu dò FID ở 220°C, nhiệt độ buồng tiêm 150°C ở chế độ không chia dòng (splitless), lưu lượng khí mang Nitơ 1,5 mL/phút, khí bổ trợ 25 mL/phút. Chương trình nhiệt độ cột khởi đầu ở 40°C (giữ 1 phút), tăng với tốc độ 7°C/phút lên 90°C (giữ 1 phút).
• Hiệu quả phân tách sắc ký: Thời gian lưu ($t_R$) của methanol là 3,56 phút, ethanol là 4,34 phút và chất nội chuẩn Isopropanol là 4,81 phút. Các pic sắc ký sắc nét, chân pic hẹp, tách biệt hoàn toàn khỏi đường nền và không bị chồng lấn.
• Độ nhạy và khoảng tuyến tính: Phương pháp đạt độ tuyến tính cao với $R^2 = 0,9998$ trong khoảng nồng độ 50 – 500 µg/mL đối với methanol và 300 – 4000 µg/mL đối với ethanol. Giới hạn phát hiện của thiết bị (IDL) đối với methanol là 8 µg/mL và ethanol là 50 µg/mL; giới hạn định lượng (IQL) lần lượt là 27 µg/mL và 167 µg/mL.
• Độ thu hồi và độ lặp lại: Tỷ lệ thu hồi hoạt chất đạt trên 95%, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của các phép đo lặp lại trong ngày và khác ngày đều dưới 5%, khẳng định độ tin cậy tuyệt đối của quy trình.

Thảo luận kết quả

Nhiệt độ buồng tiêm 150°C và nhiệt độ detector 220°C giúp hóa hơi toàn diện hai chất phân tích có nhiệt độ sôi thấp (methanol 64,7°C và ethanol 78°C) mà không gây ra hiện tượng phân hủy nhiệt. Tốc độ khí mang 1,5 mL/phút là điểm cân bằng hoàn hảo giúp pic cân đối, rút ngắn thời gian phân tích tổng thể xuống chỉ còn khoảng 5,5 phút, nhanh hơn 50% so với nhiều phương pháp sắc ký thông thường trước đây. Việc xử lý mẫu bằng Acetonitrile giúp loại bỏ hơn 96% protein huyết tương, bảo vệ cột mao quản không bị suy giảm hiệu năng sau hàng trăm lần tiêm mẫu.

Toàn bộ dữ liệu thực nghiệm được trực quan hóa rõ ràng qua các sắc ký đồ tách pic và đồ thị đường chuẩn hồi quy tuyến tính. Các bảng biểu so sánh diện tích pic theo nhiệt độ, tốc độ dòng và thời gian bảo quản mẫu ở -25°C trong 28 ngày đã chứng minh tính ưu việt của phương pháp khi đưa vào ứng dụng giám định thực tế cho 20 ca bệnh nhân lâm sàng tại các địa phương.

Đề xuất và khuyến nghị

Dựa trên kết quả nghiên cứu thực nghiệm, các giải pháp mang tính ứng dụng cao được đề xuất như sau:

• Chuẩn hóa quy trình xét nghiệm cấp cứu tại các bệnh viện: Bộ Y tế và các cơ sở y tế tuyến tỉnh cần ban hành quy chuẩn kỹ thuật định lượng đồng thời methanol - ethanol bằng GC-FID, đặt mục tiêu rút ngắn thời gian trả kết quả xét nghiệm xuống dưới 45 phút kể từ khi tiếp nhận mẫu bệnh phẩm, triển khai ngay trong năm 2020.
• Nâng cấp trang thiết bị tại các trung tâm giám định pháp y: Viện Khoa học Hình sự và cơ quan điều tra các cấp cần đầu tư hệ thống GC-FID trang bị cột chuyên dụng TG-ALC2, nâng công suất phân tích lên trên 50 mẫu/ngày nhằm phục vụ công tác điều tra tai nạn giao thông và các vụ án sản xuất rượu giả.
• Siết chặt kiểm soát chuỗi cung ứng cồn công nghiệp: Cục An toàn Thực phẩm phối hợp cùng lực lượng Quản lý Thị trường tăng cường thanh tra định kỳ các cơ sở sản xuất đồ uống, xử lý nghiêm các trường hợp vượt mức 100 mg/l cồn $100^\circ$ theo QCVN 6-3:2010/BYT, hướng tới mục tiêu giảm 40% số ca ngộ độc rượu cồn công nghiệp vào năm 2022.
• Xây dựng phác đồ điều trị giải độc cá thể hóa: Các trung tâm chống độc cần áp dụng phương pháp định lượng nhanh này để xác định chính xác liều lượng ethanol dùng giải độc và thời điểm chỉ định lọc máu ngắt quãng khi nồng độ methanol huyết tương vượt mức 20 mg/dL, giúp hạ tỷ lệ tử vong do ngộ độc cồn công nghiệp xuống dưới 10% trước năm 2025.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

Luận văn là tài liệu tham khảo giá trị cao cho 4 nhóm đối tượng chuyên môn:

• Giám định viên và kỹ thuật viên pháp y: Ứng dụng quy trình chiết tách và thông số GC-FID chuẩn xác để phân tích mẫu máu trong các vụ án hình sự, tai nạn giao thông và ngộ độc thực phẩm với thời gian xử lý nhanh và độ chính xác pháp lý cao.
• Bác sĩ và chuyên viên xét nghiệm tại các trung tâm chống độc: Sử dụng phương pháp định lượng nồng độ methanol và ethanol huyết tương để chẩn đoán phân biệt, theo dõi tốc độ thanh thải độc chất và điều chỉnh liều ethanol giải độc phù hợp.
• Nhà nghiên cứu và giảng viên chuyên ngành Hóa phân tích: Tham khảo phương pháp luận tối ưu hóa thiết bị sắc ký khí, kỹ thuật xử lý mẫu nền sinh học phức tạp và quy trình thẩm định phương pháp theo tiêu chuẩn quốc tế.
• Cơ quan quản lý an toàn thực phẩm và kiểm nghiệm chất lượng: Khai thác các dữ liệu về tiêu chuẩn kỹ thuật và phương pháp định lượng để hoàn thiện hệ thống văn bản quy chuẩn kiểm soát cồn công nghiệp trong thực phẩm.

Câu hỏi thường gặp

Tại sao cần phải định lượng đồng thời cả methanol và ethanol trong huyết tương? Trong các vụ ngộ độc rượu giả, nạn nhân thường uống phải hỗn hợp chứa cả ethanol và methanol. Ngoài ra, ethanol được dùng làm chất giải độc cạnh tranh enzyme ADH. Định lượng đồng thời giúp bác sĩ nắm bắt nồng độ methanol để đánh giá mức độ độc và duy trì nồng độ ethanol điều trị ở mức 100 – 150 mg/dL.

Phương pháp GC-FID có ưu điểm gì vượt trội so với quang phổ UV-Vis hay HPLC? GC-FID có độ nhạy cao với các hợp chất hữu cơ dễ bay hơi, thời gian phân tích chỉ mất 5,5 phút mà không cần phản ứng tạo màu phức tạp như UV-Vis (vốn dễ bị protein làm sai lệch). So với HPLC, GC-FID cho pic sắc nét hơn, tiết kiệm dung môi và giảm chi phí vận hành đáng kể.

Nồng độ methanol trong máu ở mức nào thì bắt đầu gây tổn thương nghiêm trọng? Theo các hướng dẫn chống độc quốc tế, nồng độ methanol huyết tương từ 20 mg/dL đã bắt đầu gây toan chuyển hóa và tổn thương dây thần kinh thị giác dẫn đến mù lòa. Nồng độ trên 50 mg/dL có thể gây suy đa tạng và tử vong nếu bệnh nhân không được lọc máu khẩn cấp.

Dung môi Acetonitrile đóng vai trò gì trong bước xử lý mẫu huyết tương? Huyết tương người chứa khoảng 4% protein làm bẩn cột sắc ký và gây nhiễu tín hiệu. Acetonitrile làm giảm hằng số điện môi của dung dịch, gây biến tính và kết tủa triệt để protein. Dịch chiết sau ly tâm trong suốt, sạch tạp chất mà không làm thất thoát hai hợp chất cồn cần phân tích.

Điều kiện bảo quản mẫu huyết tương ảnh hưởng như thế nào đến độ chính xác? Methanol và ethanol là các chất phân tử nhỏ, rất dễ bay hơi. Nghiên cứu thực nghiệm chứng minh mẫu bảo quản ở nhiệt độ đông đá -25°C giữ được độ ổn định nồng độ trong suốt 28 ngày với sai số RSD < 5%, trong khi mẫu để ở nhiệt độ phòng sẽ bị suy giảm nồng độ nhanh chóng.

Kết luận

• Xây dựng thành công quy trình GC-FID phân tích đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương người với thời gian sắc ký tối ưu dưới 6 phút.
• Tối ưu hóa điều kiện thiết bị với cột mao quản TG-ALC2, nhiệt độ buồng tiêm 150°C, detector FID 220°C, đảm bảo pic sắc nét với hệ số đối xứng chuẩn $0,9 < A_s < 1,2$.
• Thẩm định phương pháp đạt độ tuyến tính cao ($R^2 = 0,9998$), giới hạn phát hiện 8 µg/mL (methanol) và 50 µg/mL (ethanol), độ thu hồi đạt trên 95%.
• Hoàn thiện quy trình kết tủa protein bằng Acetonitrile đơn giản, hiệu quả cao, bảo vệ tối đa tuổi thọ cột sắc ký.
• Ứng dụng định lượng thành công trên 20 mẫu bệnh nhân thực tế tại Viện Khoa học Hình sự, hỗ trợ tích cực cho công tác cấp cứu y tế và giám định pháp y.

Trong giai đoạn 2020 – 2021, phương pháp cần được tiếp tục mở rộng nghiên cứu trên hệ thống tự động hóa tiêm mẫu không gian hơi (Headspace GC-FID) và chuyển giao kỹ thuật cho các bệnh viện đa khoa tuyến tỉnh. Quý bạn đọc và các đơn vị nghiên cứu quan tâm có thể liên hệ trực tiếp để tiếp cận toàn văn công trình nghiên cứu khoa học giá trị này.