CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu về curcumin 1.1 Cấu trúc hóa học và đặc tính hóa lý của curcumin Các thành phần hóa học quan trọng của củ nghệ là một trong nhóm các hợp chất được gọi là curcuminoid, bao gồm curcumin, demethoxycurcumin (DMC) và bisdemethoxycurcumin (BDMC) [1]. Củ nghệ chứa khoảng 5% tinh dầu và đến 5% curcumin, một dạng polyphenol, ký hiệu C.I 75300 hay Natural Yellow 3 [1].1 Ba thành phần chủ yếu trong curcuminoid: (A) curcumin (B) DMC (C) BDMC Cấu trúc của curcuminoid (C21H20O6) đước xác định lần đầu tiên vào năm 1910 Kazimierz Kostanecki, J.Milobedzka và Wiktor Lampe [2]. Curcuminoid là những dẫn xuất diarylheptan gồm curcumin, DMC, BDMC. Chúng là những hợp chất phenolic, hầu hết các dẫn xuất đều khác nhau nhóm thế trên gốc phenyl.
Hợp chất chiếm chủ yếu và được nghiên cứu nhiều nhất là curcumin (khoảng 77%), tiếp theo là DMC (17%) và BDMC (3%) [1, 3]. Curcumin tinh khiết rất hiếm và đắt trong khi DMC và BDMC vẫn chưa có trên thị trường. Danh pháp quốc tế của các curcuminoid: - Curcumin: 1,7-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-hepta-1,6-diene-3,5-dione [3]. Công thức cấu tạo: C21H20O6, công thức phân tử hình 1.2, phân tử khối: 368.
1 do an Hình 1.2 Công thức hóa học chung của curcuminoid Hình 1.3 Công thức hóa học của demetoxycurcumin - BDMC: 1,7-bis-(4-hydroxyphenyl)-hepta-1,6-diene-3,5-dione [1].4 Công thức hóa học của bisdemetoxycurcumin Ngoài ra còn có ba thành phần phụ là đồng phân hình học của ba chất trên là đồng phân cis-transcurcumin, đồng phân enol và keto của curcumin.5 Công thức đồng phân cis-transcurcumin 2 do an Hình 1.6 Công thức đồng phân enol Hình 1.7 Công thức đông phân keto Dạng enol bền hơn keton nhờ có liên kết hydro nội phân tử ở dạng liên hợp. Ở dạng dung dịch, đồng phân enol chiếm ưu thế [4]. Cấu trúc của dạng enol hoàn toàn phẳng và cho phép cộng hưởng bên trong hai phần benzene. Kết quả là curcumin dạng enol thể hiện một mũi hấp thụ mạnh vùng khả kiến.
Sự khác nhau của cấu trúc phân tử của curcumin ở dạng enol và keto quan sát rõ hơn ở hình 1. Dạng keto Dạng enol Hình 1.8 Cấu trúc không gian của curcumin dạng keto và enol 1.2 Tính chất vật lý Curcumin từ nghệ có dạng bột màu vàng cam huỳnh quang, không mùi, bền với nhiệt độ và không bền với ánh sáng. Nhiệt độ nóng chảy 180 ÷ 185oC. Khi ở dạng dung dịch.
curcumin dễ bị phân hủy bởi ánh sáng và nhiệt độ, tan trong chất béo, ethanol, methanol, diclomethane, acetone, acid acetic và hầu như không tan trong nước ở môi trường acid 3 do an hay trung tính (độ tan < 10mg ở 25oC). Tan trong môi trường kiềm tạo dung dịch màu đỏ máu rồi ngả tím, tan trong môi trường acid có màu đỏ tươi [5].3 Tính chất hóa học 1.1 Sự điện ly Trong môi trường pH < 1, curcumin có màu đỏ thể hiện trạng thái proton hóa H4A+. Ở pH từ 1÷7, hầu hết các diferulylmethane ở dạng trung hòa H3A, có khả năng hòa tan rất thấp và dung dịch có màu vàng.5, màu dung dịch chuyển sang màu đỏ. Giá trị hằng số phân ly pKa của 3 proton dạng acid của curcumin (dạng H2A-, HA2, A3-) được ác định tương ứng là 7.
H4A+ H3 A H2A- 4 do an HA2- A3- Hình 1.9 Các trạng thái của curcumin thay đổi theo pH Curcumin dễ dàng bị phân hủy dưới ánh sáng hoặc là tác động của môi trường kiềm: dưới tác dụng của ánh sáng, curcumin phân hủy thành vanillin, acid vanillic, aldehyde ferulic, acid ferulic.2 Phản ứng cộng với H2 Phân tử curcumin là phân tử hydrocacbon chưa no, do đó có khả năng tham gia phản ứng cộng một, hai hoặc ba phân tử hydro tạo thành các dẫn xuất dihydrocurcumin, tetrahydrocurcumin và hexahydrocurcumin [1] được mô tả bằng phản ứng ở hình 1. 5 do an Hình 1.10 Phản ứng cộng hydro của curcumin 1.1 Phản ứng tạo phức với kim loại Phức kim loại là ion kim loại trung tâm liên kết với các phân tử khác bằng liên kết cộng hóa trị. Curcuminoid với cấu trúc β- diketon trong môi trường acid hay trung tính nằm dưới dạng hổ biến keto- enol đối xứng và ổn định, giúp cho curcuminoid có khả năng tạo phức với nhiều ion kim loại khác: Mn2+, Fe2+, Cu2+, Ga3+,… [7]. 11 Phản ứng tạo phức với kim loại Hiện tượng hỗ biến keto- enol là sự biến đổi hai chiều của hai dạng keto và enol: 6 do an Hình 1.
12 Hiện tượng hỗ biến keto- enol Curcumin tạo thành các phức hợp mạnh với hầu hết các ion kim loại. Nhưng cấu trúc và đặc tính vật lý của các phức này phụ thuộc vào bản chất của ion kim loại, cùng như điều kiện phản ứng.2 Phản ứng amin hóa Curcumin là hợp chất diketon nên có thể cho phản ứng với các amin bậc một (RNH2), semicarbazid (NH2NHCONH2), hydroxylamine (NH2OH), hydrazine (NH2-NH2),. để tạo thành các dẫn xuất amin tương ứng.3 Phản ứng của nhóm OH trên vòng benzene Trong curcumin, những chất ban đầu được tạo ra bị oxy hóa một electron là mất đi proton nhóm OH ở phenolic để cho các gốc phenoxyl. Như vậy, sự hình thành triệt để phenoxyl là không thể có trong dimethoxylcurcumin, trong đó các nhóm OH cả phenolic bị khóa bởi methoxylation.
Vì vậy, trong dimethoxylcurcumin, phản ứng duy nhất có thể quan sát được là sự oxy hóa của nhóm CH2 trung tâm, là nhóm có thể mất đi một proton. Do đó, hai vị trí có thể xảy ra phản ứng của gốc tự do (hình 1.11) là để tạo ra một gốc phenoxyl (PR1) có thể được tạo ra bởi một trong hai quá trình. Phản ứng tương tự tại nhóm methylene CH2 tạo ra cacbon trung tâm (CR1) [8]. Các cặp electron chưa liên kết của nhóm hydroxyl liên hợp mạnh với vòng benzene làm cho nguyên tử hydro của nhóm hydroxyl trở nên linh động hơn.
Điều này giải thích tính acid và khả năng phản ứng với các gốc tự do của curcumin. Các cặp electron chưa liên kết của nhóm hydroxyl liên hợp mạnh với vòng benzene làm cho nguyên tử hydro của nhóm hydroxyl trở nên linh động hơn. Điều này giải thích cho tính acid và khả năng phản ứng với các gốc tự do của curcumin [8]. 7 do an Hình 1.13 Sơ đồ hai hướng phản ứng của curcumin và gốc tự do [8] 1.4 Dược tính của curcumin 1.1 Hoạt tính chống oxi hóa Gốc tự do là các chất phản ứng mạnh, được tạo ra khi cơ thể chúng ta thu nhận khí oxy hoặc chuyển hóa thức ăn để tạo ra năng lượng.
Bản thân các gốc tự do góp phần vào quá trình lão hóa tự nhiên của cơ thể. Tuy nhiên, nếu số lượng gốc tự do quá nhiều có thể gây tổn thương các tế bào lành và thậm chí có thể là nguyên nhân chính dẫn đến một số bệnh như ung thư, xơ cứng động mạch, làm suy yếu hệ thống miễn dịch dễ bị nhiễm trùng, làm 8 do an giảm trí tuệ, teo cơ quan bộ phận người cao niên [9]. Theo các nhà nguyên cứu, gốc tự do hủy hoại tế bào theo diễn tiến sau: trước hết, gốc tự do oxy hóa màng tế bào, gây trở ngại trong việc thải chất bã và tiếp nhận chất dinh dưỡng, dưỡng khí; rồi các gốc tự do tấn công vào các ty lập thể phá vỡ nguồn cung cấp năng lượng; sau cùng, bằng cách oxy hóa, gốc tự do làm suy yếu các enzyme khiến cơ thể không tăng trưởng được. Để hạn chế hoạt động của gốc tự do người ta dùng chất chống oxy hóa [9].
Curcumin là hợp chất tự nhiên có khả năng chống oxy hóa bằng cách ngăn cản sự tạo thành gốc tự do như superoxide, hydroxyl. Ngăn cản sự peroxide hóa các lipid trong cơ thể nhờ vào nhóm OH trên vòng benzene [6].2 Hoạt tính kháng viêm, kháng virus, vi khuẩn và kí sinh trùng Viêm nhiễm là một chuỗi phản ứng của cơ thể nhằm chống lại tổn thương mô, phản ứng này cần thiết cho quá trình lành vết thương, nhưng đồng thời cũng tạo ra sự đau đớn kết hợp với nổi mẩn đỏ và phòng vết thương. Trong quá trình viêm nhiễm, cơ thể sinh ra một chất giống hormone là arachidonic acid. Arachidonic acid dưới tác dụng của enzyme cyclooxygenase sẽ bị chuyển hóa thành các hợp chất: prostaglandin (PG), thromboxane (TX), hydroxyeicosatetraenoid acid (HETE), leukotriene (LT).
Một số PG làm giảm mạch máu, trong khi LT làm tăng khả năng thấm qua mạch làm trương phồng mô dẫn đến quá trình viêm. Lượng PG tăng lên gây mẩn đỏ, trương phồng, đau nhức vết thương; còn TX có thể ngăn quá trình cung cấp máu và năng lượng cho tế bào [8]. Nghiên cứu về cấu trúc hóa học của curcumin kết hợp với hoạt tính sinh học cho thấy rằng sự hiện diện của liên kết đôi của C3,4 và C3’,4’ và nhóm OH ở C8,8’ trên vòng benzene tạo ra hoạt tính kháng viêm cho curcumin [10]. 9 do an Hình 1.
14 Công thức phân tử có đánh số thứ tự Carbon Mặc dù các nghiên cứu khác nhau đã được thực hiện với chiết xuất từ một số thành phần của nghệ trong một số mô hình động vật [11], nhưng chỉ có một vài nghiên cứu lâm sàng được báo cáo cho đến nay. Ở những bệnh nhân trải qua phẫu thuật, sử dụng curcumin bằng đường miệng làm giảm viêm sau phẫu thuật [12]. Gần đây, curcumin được coi là chất gây phân hủy sinh học giải phóng chậm microspheres để điều trị viêm khớp ở chuột. Từ các nghiên cứu này cho thấy các microspher có thể phân hủy curcuminoid và có thể được sử dụng thành công để quản lý điều trị viêm [13].
Chất kháng viêm có khả năng ngăn cản enzyme cyclooxygenase và lipoxygenase- nhóm động của enzyme sẽ làm giảm sản phẩm gây viêm từ sự chuyển hóa của arachidonic acid.3 Hoạt tính chống đông máu Sự kết tụ của các tiểu huyết cầu trong máu sẽ gây ra hiện tượng đông máu. curcumin có khả năng ngăn cản hoạt động của enzyme cyclooxynase tạo thêm tiểu huyết cầu, nên curcumin có tác dụng chống đông máu [9].4 Bảo vệ gan Một nghiên cứu đã kiểm tra tác dụng bảo vệ curcumin đối với độc tính gan gây ra bởi carbon tetrachloride (CCl4) [10]. Một nghiên cứu bổ sung chỉ ra rằng, curcumin ngăn ngừa tổn thương gan do CCl4 gây ra bằng cách ức chế sự kích hoạt của “KappaB” (NF- kB) và gây ra tác dụng chống oxy hóa [14]. Hơn nữa, nghiên cứu cũng nêu lên, việc bảo vệ gan được đảm bảo bởi curcumin chống lại thiệt hại do CCl4 gây ra có thể phụ thuộc, ít nhất là một phần vào tác dụng tương phản của nó chống lại thiệt hại do CCl4 gây ra với cytochrom P450 [15].5 Ngăn cản và điều trị ung thư Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng curcumin ngăn ngừa quá trình gây ung thư bằng cách ảnh hưởng đến hai quá trình: phát sinh mạch máu và tăng trưởng khối u [16].