Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài lá kim pinus dalatensis pinus kesiya và podocarpus neriifolius ở việt nam

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài lá kim tại Việt Nam, bao gồm Pinus dalatensis, Pinus kesiya và Podocarpus neriifolius.

• Tác giả: Nguyễn Hoàng Sa
• Người hướng dẫn: PGS. Trịnh Thị Thủy
• Trường học: Viện Hàn Lâm Khoa Học và Công Nghệ Việt Nam
• Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ
• Đề tài: Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học và Hoạt Tính Sinh Học của Các Loài Lá Kim tại Việt Nam
• Loại tài liệu: Luận Án Tiến Sĩ
• Năm xuất bản: 2017
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• MỤC LỤC
• DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC CÁC BIỂU BẢNG
• DANH MỤC CÁC HÌNH
• PHỤ LỤC
• 1. MỞ ĐẦU
• 1.1. Tổng quan về các loài nghiên cứu
• 1.1.1. Thông tre lá dài dài (Podocarpus neriifolius)
• 1.1.2. Tình hình nghiên cứu về hóa học một số loài thuộc chi Pinus
• 1.1.3. Nghiên cứu về thành phần tinh dầu từ chi Pinus
• 1.1.4. Các hợp chất terpenoid từ chi Pinus
• 1.1.5. Các hợp chất flavonoid từ chi Pinus
• 1.1.6. Các hợp chất lignan từ chi Pinus
• 1.1.7. Các hợp chất khác từ chi Pinus
• 1.1.8. Một số nghiên cứu về thành phần hóa học của Thông ba lá
• 1.1.9. Các nghiên cứu về hoạt tính sinh học của các chất phân lập từ các loài thuộc chi Pinus
• 1.1.9.1. Hoạt tính kháng viêm và giảm đau
• 1.1.9.2. Hoạt tính ức chế các khối u và kháng ung thư
• 1.1.9.3. Hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm
• 1.1.9.4. Hoạt tính chống oxi hóa
• 1.1.9.5. Hoạt tính kháng virus và một số hoạt tính khác
• 1.1.10. Tình hình nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh học một số loài thuộc chi Podocarpus
• 1.1.11. Tình hình nghiên cứu về hóa học của loài thông tre lá dài (Podocarpus neriifolius)
• 1.2. Thu hái mẫu cây và xác định tên khoa học
• 1.3. Phương pháp xử lý và chiết mẫu
• 1.4. Phương pháp khảo sát, phân tách và tinh chế các hợp chất từ mẫu thực vật
• 1.5. Phương pháp xác định cấu trúc
• 1.6. Phương pháp thử một số hoạt tính sinh học
• 1.7. Hóa chất và thiết bị
• 1.8. Quy trình chiết và thu các chiết xuất từ các loài thực vật nghiên cứu
• 1.9. Phân lập chất từ các chiết xuất
• 1.9.1. Phân lập các chất từ chiết xuất ethyl acetate của gỗ Thông đà lạt
• 1.9.2. Phân lập các chất từ chiết xuất n-butanol của gỗ Thông đà lạt
• 1.9.3. Phân lập các chất từ chiết xuất n-hexane của lá Thông đà lạt
• 1.9.4. Phân lập các chất từ chiết xuất ethyl acetate của lá Thông đà lạt
• 1.9.5. Phân lập các chất từ chiết xuất ethyl acetate của rễ Thông ba lá
• 1.9.6. Phân lập các chất từ chiết xuất ethyl acetate của gỗ Thông tre lá dài
• 1.10. Dữ kiện phổ của các chất tách được
• 2. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 2.1. Các chất được phân lập từ Thông đà lạt (Pinus dalatensis)
• 2.1.1. Chất TT1: Caryolane-1β,9β-diol
• 2.1.2. Hỗn hợp TT2
• 2.1.3. Chất TT3: 15-Methoxypinusolidic acid
• 2.1.4. Chất TT4: Lambertianic acid
• 2.1.5. Chất TT5: 8(17), 13-ent-Labdadien-15→16-lactone-19-oic acid
• 2.1.6. Chất TT6: Isopimaric acid
• 2.1.7. Chất TT12: 3β-Hydroxy-14-serraten-21-one
• 2.1.8. Chất TF1: Pinocembrin
• 2.1.9. Chất TF2: Chrysin
• 2.1.10. Chất TF3: Pinostrobin
• 2.1.11. Chất TF4: (+) Catechin
• 2.1.12. Chất TF5: Kaempferol
• 2.1.13. Chất TF7: Kaempferol 3-O-(3′′,6′′-di-O-E-p-coumaroyl)-β-D-glucopyrano-side
• 2.1.14. Chất TP1: Dihydropinosylvin
• 2.1.15. Chất TP2: Dihydropinosylvin 5-methyl ether
• 2.1.16. Chất TP3: 3-Hydroxy-5-methoxystilbene
• 2.1.17. Hỗn hợp TP5
• 2.1.18. Chất TP6: Vanillic acid 4-(-β-D-glucopyranoside)
• 2.1.19. Chất TL1: (+) Lariciresinol
• 2.1.20. Chất TL3: Cedrusin-4-O-β-D-glucopyranoside
• 2.1.21. Chất TS1: β-Sitosterol
• 2.1.22. Chất TS2: Daucosterol
• 2.2. Các chất được phân lập từ Thông ba lá (Pinus kesiya)
• 2.2.1. Chất TT11: 7-Oxo-15-hydroxydehydroabietic acid
• 2.2.2. Chất TF6: 3′-O-Methylcatechin 7-O-β-D-glucopyranoside
• 2.2.3. Chất TP4: Resveratrol-3-O-β-D-glucoside
• 2.2.4. Chất TP7: 3,4-Dimethoxyphenyl 2-O-(3-O-methyl-α-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucopyranoside
• 2.2.5. Chất TL2: Cedrusin
• 2.3. Các chất được phân lập từ Thông tre lá dài (Podocarpus neriifolius)
• 2.3.1. Chất TT7: Totarol
• 2.3.2. Chất TT8: Totarol-19-carboxylic acid
• 2.3.3. Chất TT9: Inumakiol D
• 2.3.4. Chất TT10: Macrophyllic acid
• 2.4. Hoạt tính sinh học của một số chất sạch
• 3. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• DANH SÁCH CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Lá Kim Việt Nam

Nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài lá kim tại Việt Nam đang thu hút sự quan tâm lớn. Việt Nam, với khí hậu và địa hình đa dạng, là nơi sinh sống của nhiều loài lá kim có giá trị. Các loài cây này không chỉ quan trọng về mặt sinh thái và kinh tế, mà còn chứa đựng tiềm năng lớn trong y học và công nghiệp. Việc khai thác và nghiên cứu các hợp chất từ lá kim có thể mang lại những ứng dụng quan trọng trong việc phát triển các loại thuốc mới và các sản phẩm có giá trị gia tăng. Cần có những nghiên cứu chuyên sâu để khám phá tiềm năng to lớn này của các loài lá kim tại Việt Nam. Hợp chất thiên nhiên từ lá kim có thể là chìa khóa cho những giải pháp y học mới. Các nghiên cứu này góp phần bảo tồn và phát triển bền vững nguồn tài nguyên quý giá này.

1.1. Đa dạng sinh học và tiềm năng dược liệu lá kim

Việt Nam sở hữu sự đa dạng sinh học cao, với hơn 11.000 loài thực vật bậc cao có mạch, tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu và khám phá các loài lá kim có tiềm năng dược liệu. Các loài cây lá kim, bao gồm chi Pinus và Podocarpus, từ lâu đã được sử dụng trong y học cổ truyền để điều trị nhiều bệnh khác nhau. Nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học của chúng có thể giúp xác định các hợp chất có hoạt tính sinh học, từ đó phát triển các loại thuốc mới và các sản phẩm chăm sóc sức khỏe. Việc kết hợp giữa kiến thức truyền thống và khoa học hiện đại sẽ mở ra những cơ hội mới trong việc khai thác nguồn tài nguyên thiên nhiên này.

1.2. Ứng dụng của tinh dầu thông trong công nghiệp

Ngoài giá trị dược liệu, các loài lá kim còn có giá trị kinh tế cao nhờ vào tinh dầu thông. Tinh dầu thông là nguyên liệu quan trọng trong nhiều ngành công nghiệp, bao gồm công nghiệp sơn, công nghiệp chất béo và sản xuất hóa chất. Việc nghiên cứu và phát triển các phương pháp chiết xuất và chế biến tinh dầu thông hiệu quả hơn có thể mang lại lợi ích kinh tế lớn cho Việt Nam. Hơn nữa, việc tìm kiếm các ứng dụng mới cho tinh dầu thông, như trong sản xuất mỹ phẩm và các sản phẩm thân thiện với môi trường, cũng là một hướng đi đầy tiềm năng. Phát triển bền vững nguồn tài nguyên lá kim cần được chú trọng để đảm bảo nguồn cung ổn định cho các ngành công nghiệp.

II. Thách Thức Trong Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Lá Kim

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài lá kim tại Việt Nam đối mặt với nhiều thách thức. Việc thu thập và xác định chính xác các loài cây, đặc biệt là các loài quý hiếm và phân bố hẹp, đòi hỏi kiến thức chuyên môn và kỹ năng thực địa. Quá trình chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất phức tạp từ lá kim cần các thiết bị hiện đại và phương pháp phân tích tiên tiến. Đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất cũng đòi hỏi các phương pháp thử nghiệm in vitro và in vivo chính xác. Khó khăn về nguồn lực tài chính và nhân lực cũng là một trở ngại lớn đối với các nhà nghiên cứu. Vượt qua những thách thức này đòi hỏi sự hợp tác chặt chẽ giữa các nhà khoa học, các tổ chức nghiên cứu và các doanh nghiệp.

2.1. Xác định và thu thập mẫu cây lá kim chính xác

Một trong những thách thức đầu tiên trong nghiên cứu thành phần hóa học của các loài lá kim là việc xác định và thu thập mẫu cây chính xác. Nhiều loài lá kim có hình thái tương đồng, gây khó khăn trong việc phân loại và nhận dạng. Việc thu thập mẫu cây cũng cần tuân thủ các quy định về bảo tồn đa dạng sinh học, đặc biệt là đối với các loài quý hiếm và có nguy cơ tuyệt chủng. Kỹ năng thực địa và kiến thức chuyên môn về thực vật học là rất quan trọng để đảm bảo tính chính xác và tin cậy của các mẫu cây thu thập. Việc sử dụng các phương pháp phân tích DNA có thể hỗ trợ xác định chính xác các loài cây.

2.2. Phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất phức tạp

Quá trình phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất từ lá kim là một thách thức lớn do sự phức tạp của thành phần hóa học và sự có mặt của nhiều hợp chất tương tự. Các phương pháp chiết xuất, sắc ký và phổ nghiệm hiện đại cần được sử dụng để phân tách và xác định cấu trúc của các hợp chất. Phổ NMR, phổ khối lượng và các phương pháp phân tích khác cung cấp thông tin quan trọng về cấu trúc phân tử của các hợp chất. Việc giải mã cấu trúc của các hợp chất mới đòi hỏi kiến thức sâu rộng về hóa học hữu cơ và kỹ năng phân tích dữ liệu phổ nghiệm.

III. Cách Chiết Xuất Thành Phần Hóa Học Từ Lá Kim Hiệu Quả

Chiết xuất thành phần hóa học từ lá kim hiệu quả là bước quan trọng. Quy trình chiết xuất ảnh hưởng lớn đến hiệu suất và chất lượng của các hợp chất thu được. Các phương pháp chiết xuất truyền thống như ngâm chiết và sắc ký có thể được sử dụng. Tuy nhiên, các phương pháp hiện đại như chiết xuất bằng siêu âm, chiết xuất bằng vi sóng và chiết xuất bằng chất lỏng siêu tới hạn có thể mang lại hiệu quả cao hơn. Việc lựa chọn dung môi chiết xuất cũng cần được xem xét cẩn thận để đảm bảo thu được các hợp chất mong muốn. Tối ưu hóa quy trình chiết xuất là rất quan trọng để giảm thiểu chi phí và thời gian nghiên cứu. Hiệu quả chiết xuất cần được đánh giá thông qua các phương pháp phân tích định lượng.

3.1. So sánh các phương pháp chiết xuất truyền thống và hiện đại

Có nhiều phương pháp chiết xuất khác nhau có thể được sử dụng để thu được các hợp chất từ lá kim. Các phương pháp truyền thống như ngâm chiết và sắc ký đơn giản và dễ thực hiện, nhưng có thể có hiệu suất chiết xuất thấp và thời gian chiết xuất dài. Các phương pháp hiện đại như chiết xuất bằng siêu âm, chiết xuất bằng vi sóng và chiết xuất bằng chất lỏng siêu tới hạn có thể mang lại hiệu quả cao hơn và thời gian chiết xuất ngắn hơn. Việc lựa chọn phương pháp chiết xuất phù hợp phụ thuộc vào loại hợp chất mong muốn, tính chất của mẫu và nguồn lực có sẵn. Chiết xuất siêu âm và chiết xuất vi sóng đang ngày càng được ưa chuộng nhờ tính hiệu quả và thân thiện với môi trường.

3.2. Tối ưu hóa dung môi và điều kiện chiết xuất

Việc lựa chọn dung môi và điều kiện chiết xuất (nhiệt độ, thời gian, tỷ lệ dung môi/mẫu) có ảnh hưởng lớn đến hiệu suất và chất lượng của các hợp chất thu được. Dung môi chiết xuất cần phải có khả năng hòa tan tốt các hợp chất mong muốn, đồng thời ít độc hại và dễ bay hơi. Các điều kiện chiết xuất cần được tối ưu hóa để đảm bảo chiết xuất được tối đa các hợp chất, đồng thời tránh làm biến đổi hoặc phân hủy các hợp chất. Tối ưu hóa bằng thực nghiệm và mô hình hóa toán học có thể được sử dụng để tìm ra các điều kiện chiết xuất tối ưu.

IV. Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Của Các Chất Từ Lá Kim

Nghiên cứu hoạt tính sinh học của các chất từ lá kim là bước quan trọng. Các hợp chất này có tiềm năng ứng dụng trong y học, nông nghiệp và công nghiệp thực phẩm. Các hoạt tính sinh học thường được nghiên cứu bao gồm hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxy hóa, chống viêm và chống ung thư. Các phương pháp thử nghiệm in vitro và in vivo được sử dụng để đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất. Việc xác định cơ chế tác động của các hợp chất cũng rất quan trọng để phát triển các ứng dụng tiềm năng. Hoạt tính sinh học tiềm năng có thể mang lại những lợi ích to lớn cho sức khỏe con người và môi trường. Ứng dụng thực tiễn cần được xem xét kỹ lưỡng để đảm bảo tính an toàn và hiệu quả.

4.1. Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm của lá kim

Nhiều loài lá kim chứa các hợp chất có hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm mạnh mẽ. Các hợp chất này có thể được sử dụng để phát triển các loại thuốc kháng sinh và kháng nấm tự nhiên, giúp giải quyết vấn đề kháng thuốc kháng sinh đang ngày càng trở nên nghiêm trọng. Các phương pháp thử nghiệm in vitro, như phương pháp khuếch tán đĩa và phương pháp pha loãng liên tiếp, được sử dụng để đánh giá hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm của các hợp chất. MIC (Minimum Inhibitory Concentration) là một chỉ số quan trọng để đánh giá hiệu quả của các hợp chất.

4.2. Nghiên cứu hoạt tính chống oxy hóa và chống viêm

Các hợp chất từ lá kim cũng có thể có hoạt tính chống oxy hóa và chống viêm, giúp bảo vệ cơ thể khỏi các tổn thương do gốc tự do và các phản ứng viêm. Các hợp chất phenolic và flavonoid thường được tìm thấy trong lá kim có hoạt tính chống oxy hóa mạnh mẽ. Các phương pháp thử nghiệm in vitro, như phương pháp DPPH và phương pháp ABTS, được sử dụng để đánh giá hoạt tính chống oxy hóa của các hợp chất. Hoạt tính chống viêm có thể được đánh giá bằng các phương pháp thử nghiệm in vitro và in vivo, như phương pháp ức chế COX-2 và phương pháp giảm phù nề.

V. Kết Quả Nghiên Cứu Hoạt Chất Tiềm Năng Từ Lá Kim

Nghiên cứu đã xác định được nhiều hoạt chất tiềm năng từ các loài lá kim ở Việt Nam. Các hoạt chất này có cấu trúc hóa học đa dạng, bao gồm terpenoid, flavonoid, lignan và stilbene. Nhiều hợp chất đã được chứng minh là có hoạt tính sinh học đáng chú ý, như hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxy hóa, chống viêm và chống ung thư. Kết quả này mở ra những cơ hội mới cho việc phát triển các loại thuốc mới và các sản phẩm chăm sóc sức khỏe từ nguồn tài nguyên lá kim. Phân lập và xác định cấu trúc các hoạt chất là bước quan trọng. Ứng dụng tiềm năng cần được nghiên cứu sâu hơn để đưa các hoạt chất này vào thực tiễn.

5.1. Phân lập các terpenoid có hoạt tính sinh học từ Pinus

Terpenoid là một nhóm hợp chất lớn và đa dạng được tìm thấy trong nhiều loài Pinus. Nghiên cứu đã phân lập được nhiều terpenoid mới và quen thuộc từ các loài Pinus ở Việt Nam. Một số terpenoid đã được chứng minh là có hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxy hóa và chống ung thư. Ví dụ, axit abietic và axit pimaric đã được chứng minh là có hoạt tính kháng khuẩn mạnh mẽ đối với nhiều loại vi khuẩn gây bệnh. Nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác động của các terpenoid là cần thiết.

5.2. Flavonoid và lignan từ Podocarpus với tiềm năng y học

Flavonoid và lignan là hai nhóm hợp chất phenolic được tìm thấy trong nhiều loài Podocarpus. Nghiên cứu đã phân lập được nhiều flavonoid và lignan mới và quen thuộc từ các loài Podocarpus ở Việt Nam. Một số flavonoid và lignan đã được chứng minh là có hoạt tính chống oxy hóa, chống viêm và chống ung thư. Ví dụ, podophyllotoxin, một lignan được tìm thấy trong Podocarpus peltatus, đã được sử dụng làm thuốc chống ung thư trong nhiều năm. Phát triển các dẫn xuất của flavonoid và lignan có thể tăng cường hoạt tính sinh học của chúng.

VI. Hướng Nghiên Cứu Tương Lai và Ứng Dụng Lá Kim Bền Vững

Nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài lá kim tại Việt Nam có nhiều hướng phát triển tiềm năng trong tương lai. Cần có những nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác động của các hoạt chất để phát triển các ứng dụng y học và nông nghiệp hiệu quả hơn. Việc phát triển các phương pháp chiết xuất và chế biến thân thiện với môi trường là rất quan trọng để đảm bảo sử dụng bền vững nguồn tài nguyên lá kim. Hợp tác quốc tế và đầu tư nghiên cứu là rất cần thiết để thúc đẩy sự phát triển của lĩnh vực này. Bảo tồn đa dạng sinh học cũng là một yếu tố quan trọng cần được xem xét.

6.1. Phát triển các loại thuốc mới từ hoạt chất lá kim

Một trong những hướng nghiên cứu quan trọng nhất trong tương lai là phát triển các loại thuốc mới từ các hoạt chất được tìm thấy trong lá kim. Các hoạt chất này có thể được sử dụng để điều trị nhiều bệnh khác nhau, bao gồm ung thư, bệnh tim mạch, bệnh tiểu đường và các bệnh nhiễm trùng. Tuy nhiên, cần có những nghiên cứu sâu hơn về tính an toàn và hiệu quả của các hoạt chất này trước khi chúng có thể được sử dụng trong điều trị. Thử nghiệm lâm sàng là bước quan trọng để đánh giá hiệu quả của các loại thuốc mới.

6.2. Ứng dụng lá kim trong nông nghiệp hữu cơ và bền vững

Các hợp chất từ lá kim cũng có thể được sử dụng trong nông nghiệp hữu cơ và bền vững. Ví dụ, các hợp chất kháng khuẩn và kháng nấm có thể được sử dụng để bảo vệ cây trồng khỏi các bệnh do vi khuẩn và nấm gây ra. Các hợp chất chống oxy hóa có thể giúp tăng cường sức khỏe của cây trồng và cải thiện khả năng chống chịu với các điều kiện bất lợi. Sử dụng hợp lý và kiểm soát chặt chẽ là rất quan trọng để đảm bảo an toàn cho môi trường và sức khỏe con người.

Trích đoạn nội dung tài liệu

MỞ ĐẦU Ngày nay, đi đôi với sự phát triển nhanh chóng về mọi mặt của xã hội loài người là nhiều vấn đề nghiêm trọng mà cả thế giới đang phải đối mặt. Trong tám mục tiêu thiên niên kỷ mà nhân loại cố gắng đạt được trong thế kỷ 21 (gọi tắt là MDGs từ tiếng Anh: Millennium Development Goals), thì vấn đề có liên quan tới sức khỏe của con người là một trong số mục tiêu được đặt lên hàng đầu. Rõ ràng, biến đổi khí hậu đang diễn ra trên phạm vi toàn cầu cùng với sự ô nhiễm ô nhiễm môi trường ngày càng trầm trọng và vấn đề thực phẩm bẩn đã và đang gây ra những ảnh hưởng vô cùng tiêu cực đến sức khỏe của con người nói riêng và sự sống của toàn thể sinh vật trên trái đất nói chung. Cụ thể là, gần đây nhân loại luôn phải đối mặt với những dịch bệnh nguy hiểm và có khả năng lan rộng thành đại dịch ở quy mô toàn cầu.

Có thể lấy một số ví dụ điển hình như HIV/AIDS, các loại ung thư, các loại bệnh viêm nhiễm, các loại cúm virus, bệnh do virus Ebola, các biến chứng do nhiễm virus Zika, tim mạch, đái tháo đường, vv. Việc tìm ra phương pháp hiệu quả để điều trị các bệnh này là vấn đề vô cùng khó khăn, nó đặt ra nhiều thách thức lớn cho các nhà khoa học. Trước thực trạng đó, một trong những con đường hữu hiệu để phát hiện ra các chất có hoạt tính tiềm năng có thể phát triển thành thuốc mới chữa bệnh cho người, vật nuôi và cây trồng là đi từ các hợp chất thiên nhiên. Và như thế, người ta có thể sử dụng các hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên một cách trực tiếp để làm thuốc, hoặc sử dụng chúng làm chất dẫn đường để nghiên cứu tổng hợp các loại thuốc mới.

Việt Nam là nước có khí hậu và địa hình rất đa dạng, gồm có bốn miền khí hậu chủ yếu: khí hậu phía Bắc, phía Nam, Trung và nam Trung bộ, khí hậu Biển Đông. Việt nam với trên 3000 km bờ biển và 4/5 diện tích là đồi núi. Những đặc điểm về điều kiện tự nhiên và khí hậu như trên đã tạo ra thảm thực vật có đa dạng sinh học cao. Theo những nghiên cứu mới đây ở Việt Nam có hơn 11.000 loài thực vật bậc cao có mạch, 800 loài rêu, 600 loài nấm, hơn 2000 loài tảo, 537 loài vi tảo, 667 loài rong biển và 15 loài cỏ biển, trong đó nhiều loài được dùng làm thuốc [1].

Trong thảm thực vật phong phú và đa dạng ấy, các loài cây lá kim là những cây rừng quan trọng cả về sinh thái, kinh tế, thương mại và văn hóa. Ngoài nguồn cung cấp gỗ, tinh dầu thông còn là nguyên liệu chính trong nhiều ngành công nghiệp (công nghiệp sơn, công 1 nghiệp chất béo, vv.), một số loài Thông còn được dùng là vị thuốc dân tộc. Thông còn là môi trường của nhiều loài nấm nội kí sinh, Taxol® (paclitaxel) là thuốc chống ung thư được cho là tốt nhất hiện nay được phát hiện từ loài thông đỏ ở châu Âu. Cũng như các chi khác trong bộ Thông (Pinales), nhiều loài trong chi Pinus L.

(Pinaceae) và chi Podocarpus L'Hér. (Podocarpaceae) từ lâu đã gắn bó với đời sống hằng ngày của người dân và cũng được sử dụng trong y học cổ truyền để trị nhiều loại bệnh khác nhau. Trong khi đó, tính tới thời điểm này (2017) tuy đã có nhiều công trình nghiên cứu nghiên cứu về mặt hóa học cũng như hoạt tính sinh học của trên một trăm loài Pinus và khoảng tám mươi loài Podocarpus nhưng vẫn còn có nhiều loài trong hai chi này hầu như chưa được nghiên cứu hoặc mới chỉ có những nghiên cứu bước đầu. Trong đó, loài Thông đà lạt (Pinus dalatensis Ferré) là một loài gần như đặc hữu của Việt Nam và chưa được nghiên cứu về mặt hóa học; Thông ba lá (Pinus kesiya Royle ex Gordon) và loài Thông tre lá dài (Podocarpus neriifolius D.

Don) trên thế giới mới chỉ có một vài nghiên cứu nên việc nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của ba loài này là rất cần thiết, nhằm góp phần tạo cơ sở để hướng đến nghiên cứu khai thác và sử dụng sau này. Chính vì lý do trên, mục tiêu của các nghiên cứu trong luận án này là: 1. Nghiên cứu thành phần hóa học của ba loài lá kim: Thông đà lạt (P. dalatensis), Thông ba lá (P.

kesiya) và Thông tre lá dài (P. Thử nghiệm một số hoạt tính sinh học của các chất sạch tách ra từ các loài trên để tìm kiếm các hoạt chất tiềm năng có thể ứng dụng vào cuộc sống. Tổng quan về các loài nghiên cứu 1. Thông đà lạt (Pinus dalatensis Ferré) Thông đà lạt (Pinus dalatensis Ferré), tên đồng nghĩa: Pinus wallichiana A.

Đây là một loài thông năm lá gần đặc hữu của Việt Nam, cây phân bố chủ yếu ở Đà Lạt và một số vùng lân cận, ngoài ra một số ít được tìm thấy ở Quảng Nam, Quảng Bình và biên giới Việt-Lào. Cây mọc trong rừng rậm, trên núi trung bình, ở độ cao 1500-2000 m. Cây gỗ to, cao đến hơn 30 m và đường kính thân 0. Gỗ không bị mối mọt, được sử dụng trong xây dựng, làm đồ gỗ gia dụng và mỹ nghệ.

Đến nay, chưa có công bố nào ở Việt Nam cũng như trên thế giới về thành phầ n hóa ho ̣c và hoa ̣t tính sinh học của loài này. Hình chụp cây Thông đà lạt (1), tiêu bản cành mang lá và quả (2), quả (3) (Tiêu bản số VNMN.B000005006 bảo tàng thiên nhiên Việt Nam, VAST) 1. Thông ba lá (Pinus kesiya Royle ex Gordon) Thông ba lá (Pinus kesiya Royle ex Gordon; tên đồng nghĩa: Pinus langbianensis A., Pinus insularis var.) Silba, Pinus yunnanensis Franch.) là một loài lá kim thuộc họ Thông (Pinaceae). Trên thế giới, cây phân bố ở Ấn Độ, Myanmar, Thái Lan, Lào, Việt Nam và Philippines.

Ở Việt Nam, thông ba lá lần đầu được phát hiện ở cao nguyên Langbiang, đó là loài có diện tích lớn nhất trong số các loài thông ở Việt Nam, phân bố ở Hà Giang, Sơn La, Gia Lai, Kon Tum,. nhưng nhiều nhất (90% diện tích) là trên cao 3 nguyên Langbiang. Lá cây hình kim, thường đính ba lá kim trên một đầu cành ngắn, thường có màu xanh ngọc, mỗi lá kim thường dài 20-25 cm. Đầu cành ngắn đính lá thường có độ dài 1.5 cm, đính cách vòng xoắn ốc trên cành lớn [3].

Cây thường được trồng để lấy gỗ phục vụ cho công nghiệp giấy, ngành xây dựng và mỹ nghệ. Đến nay, chỉ mới có vài công bố về thành phần hóa học và hoạt tính của tinh dầu từ loài này. Hình chụp quần thể cây (1) rễ (2) và lá (3) của thông ba lá (Tiêu bản số VNMN.B000005007 bảo tàng thiên nhiên Việt Nam, VAST) 1. Thông tre lá dài dài (Podocarpus neriifolius D.

Hình chụp mẫu gỗ (1), tiêu bản lá (2) của Thông tre lá dài (Tiêu bản số VNMN.B0000050013 bảo tàng thiên nhiên Việt Nam, VAST) Thông tre lá dài (Podocarpus neriifolius D. Don) là một loài thực vật họ Thông tre 4 (Podocarpaceae). Ở Việt Nam, cây mọc rải rác trong rừng nguyên sinh các tỉnh Kon Tum, Gia Lai, ĐakLak, Lâm Đồng, Khánh Hòa, Ninh Thuận, Bình Thuận, Đồng Nai, Kiên Giang, Nghệ An, Hà Tĩnh, Yên Bái, Tuyên Quang. và mọc ở độ cao 2300 m ở Vườn quốc gia Bì Đúp - Núi Bà thuộc tỉnh Lâm Đồng.

Cây gỗ cao 20–25 m, đường kính có thể tới 50 cm, thân thẳng, tròn. Vỏ xám nâu, mỏng, nhẵn. Cành lá mọc vòng, màu xanh non hoặc xanh vàng. Lá mọc cách, hình mác dài, đầu nhọn dần, dài 7–15 cm, rộng 0.9 cm, đầu và đuôi nhọn, đầu mặt trên xanh bóng, mặt dưới xanh vàng.

Gân chính nổi ở giữa rõ cả 2 mặt, mép lá cong xuống phía dưới.5 cm, phía dưới có rãnh. Nón đực dạng bông không cuống, thường 3 bông mọc chụm ở nách lá gần đầu cành, khi non hình trứng, khi già hình trụ dài 2–5 cm. Nón cái mọc lẻ ở nách lá, chỉ có một lá noãn phát triển mang một noãn, các lá noãn khác hợp thành đế. Nón hình trứng dài 1.6 cm, đường kính 0.8–12 cm, đế mập to gần bằng nón, có cuống dài 0.

Có 2 lá bắc sớm rụng, dài 1,5 cm, rộng 1 cm. Hạt hình trứng, dài 1,2–1.1 cm, dưới có đế mập, đường kính gần bằng đường kính hạt, quả màu tím [6]. Tình hình nghiên cứu về hóa học một số loài thuộc chi Pinus Về thành phần hóa học thì hầu hết các loài lá kim đều có chứa tinh dầu. Bên cạnh đó, theo thống kê trên thế giới đến nay đã có trên 450 hợp chất được phân lập từ trên một trăm loài thuộc chi Pinus, bao gồm các hợp chất carbohydrate, cyclitol, acid béo, terpenoid, phổ biến nhất là diterpene có khung carbon rất đa dạng như: cembrane pimarane, labdane và abietane; triterpene khung seratane và lanostane, lignan, steroid, các phenol, flavonoid và flavonoid glycoside [7].

Nghiên cứu về thành phần tinh dầu từ chi Pinus Hầu hết các loài trong chi Pinus đều có tinh dầu, có rất nhiều nghiên cứu trong vòng 40 năm trở lại đây chỉ ra rằng thành phần chính của có trong dầu thông của nhiều loài thuộc chi Pinus có chứa chủ yếu là các hợp chất terpenoid như: sesquiterpenoid và monoterpe- noid; trong đó thường hay gặp với hàm lượng cao là các chất α-pinene (1) và β-pinene (2), camphene (3), α-myrcene (4), β-myrcene (5) α-terpineol (6), limonene (7) và α-terpinene (8) [8, 9, 10, 11, 12]; các sesquiterpenoid thường thấy nhất là longifolene (9), caryo- phyllene (10) và germacrene D (11) [10, 11]. Ngoài ra, theo một nghiên cứu gần đây vào 5 2014 về thành phần tinh dầu của loài P. nigra, người ta đã nhận thấy sự có mặt lượng lớn các nhóm chất oxygen–diterpene và sesquiterpene [13]. Trong một công bố vào năm 2015 của Zhouqi Li và các cộng sự, ngoài α-pinene (1) còn tìm thấy thêm hàm lượng β- caryophellen (12) tương đối cao trong tinh dầu ở sáu loài thuộc chi Pinus bản địa ở Trung Quốc [14].

Các hợp chất terpenoid từ chi Pinus Các triterpenoid được tìm thấy trong chi Pinus chủ yếu có khung seratane và lanostane. Trong một công bố vào năm 1991, từ vỏ loài thông trắng Trung Quốc P. armandii các nhà khoa học đã tách ra được các chất (13-22) có khung seratane [15]. Từ các loài thông trắng miền Tây ở Bắc Mỹ là P.

monticola, và loài thông Luchu P. luchuensis đã tách được tám triterpenoid khung seratane (23-30) trong các công bố vào năm 1984, 1975 và 2001 [16, 17, 18]. Ngoài ra, các seratane triterpenoid kể trên cũng được tìm thấy từ các loài P. Các lanostane triterpenoid được tìm thấy chủ yếu từ loài P.

Cụ thể là, năm 1981, mười chất (31-40) đã được phân lập từ loài P.