Nghiên Cứu Đặc Điểm Thực Vật và Tác Dụng Ức Chế Enzym Acetylcholinesterase của Hai Loài Piper

Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng ức chế enzym acetylcholinesterase của hai loài piper thomsonii và piper hymenophyllum.

• Tác giả: Hoàng Việt Dũng
• Người hướng dẫn: TS. Đỗ Quyên
• Trường học: Trường Đại Học Dược Hà Nội
• Chuyên ngành: Dược Học Cổ Truyền
• Đề tài: Nghiên Cứu Đặc Điểm Thực Vật và Tác Dụng Ức Chế Enzym Acetylcholinesterase của Hai Loài Piper
• Loại tài liệu: Luận Án Tiến Sĩ Dược Học
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• MỤC LỤC
• 1. CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1.1. Tổng quan về chi Piper L.
• 1.2. Vị trí phân loại, phân bố và đặc điểm thực vật của chi Piper L.
• 1.2.1. Vị trí phân loại chi Piper L.
• 1.2.2. Đặc điểm phân bố chi Piper L. trên thế giới và ở Việt Nam
• 1.3. Đặc điểm thực vật chi Piper L.
• 1.4. Danh lục các loài thuộc chi Piper L.
• 1.5. Thành phần hóa học
• 1.5.1. Nghiên cứu trên thế giới
• 1.5.2. Nghiên cứu trong nước
• 1.6. Công dụng, tác dụng sinh học và độc tính của chi Piper L.
• 1.6.1. Công dụng của chi Piper L.
• 1.6.2. Tác dụng sinh học và độc tính của chi Piper L.
• 1.7. Tổng quan về nghiên cứu sàng lọc hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 1.7.1. Acetylcholin, enzym acetylcholinesterase và giả thuyết về vai trò của hệ cholinergic đối với bệnh Alzheimer
• 1.7.2. Một số phương pháp thường dùng trong nghiên cứu sàng lọc hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 1.7.2.1. Phương pháp sử dụng thuốc thử Ellman
• 1.7.2.2. Phương pháp sử dụng thuốc thử muối Fast Blue B
• 2. CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Nguyên vật liệu
• 2.1.1. Mẫu nghiên cứu
• 2.1.2. Hóa chất, dung môi
• 2.2. Máy móc, thiết bị và dụng cụ
• 2.3. Phương pháp nghiên cứu
• 2.3.1. Phân tích đặc điểm thực vật
• 2.3.2. Nghiên cứu thành phần hóa học
• 2.3.3. Phương pháp chiết xuất và phân lập hợp chất
• 2.3.4. Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất phân lập được
• 2.3.5. Phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 2.3.5.1. Triển khai phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 2.3.5.2. Đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của hai loài nghiên cứu
• 2.4. Xử lý số liệu
• 2.5. Địa điểm thực hiện
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 3.1. Kết quả nghiên cứu về thực vật
• 3.1.1. Kết quả nghiên cứu về thực vật của loài HVD-002-11
• 3.1.1.1. Đặc điểm hình thái và định tên khoa học loài HVD-002-11
• 3.1.1.2. Đặc điểm vi phẫu của loài Piper thomsonii (C.
• 3.1.1.3. Đặc điểm bột phần trên mặt đất của loài Piper thomsonii (C.
• 3.1.2. Kết quả nghiên cứu về thực vật của loài HVD-004-11
• 3.1.2.1. Đặc điểm hình thái và định tên khoa học loài HVD-004-11
• 3.1.2.2. Đặc điểm vi phẫu của loài Piper hymenophyllum Miq.
• 3.1.2.3. Đặc điểm bột phần trên mặt đất của loài Piper hymenophyllum Miq.
• 3.2. Kết quả nghiên cứu về hóa học
• 3.2.1. Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học của loài Piper thomsonii (C.
• 3.2.2. Kết quả chiết xuất và phân lập hợp chất từ loài Piper thomsonii (C.
• 3.2.3. Kết quả nhận dạng hợp chất phân lập được từ loài Piper thomsonii (C.
• 3.2.4. Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học của loài Piper hymenophyllum Miq.
• 3.2.5. Kết quả chiết xuất và phân lập hợp chất từ loài Piper hymenophyllum Miq.
• 3.2.6. Kết quả nhận dạng hợp chất phân lập được từ loài Piper hymenophyllum Miq.
• 3.3. Kết quả triển khai phương pháp và áp dụng để đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của hai loài nghiên cứu
• 3.3.1. Triển khai phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 3.3.2. Kết quả đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của hai loài nghiên cứu
• 3.3.3. Hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của các mẫu cắn chiết xuất từ hai loài nghiên cứu
• 3.3.4. Hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của các chất phân lập được từ hai loài nghiên cứu
• 3.4. Về đặc điểm thực vật
• 3.4.1. Đặc điểm hình thái và xác định tên khoa học của hai loài nghiên cứu
• 3.4.2. Đặc điểm vi học của hai loài nghiên cứu
• 3.5. Về thành phần hóa học
• 3.6. Về nghiên cứu đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 3.6.1. Về triển khai phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro
• 3.6.2. Về kết quả đánh giá hoạt tính ức chế enzym acetylcholinesterase in vitro của các mẫu thử được chiết xuất và phân lập từ hai loài nghiên cứu
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu đặc điểm thực vật chi Piper

Chi Piper, thuộc họ Hồ tiêu (Piperaceae), bao gồm nhiều loài thực vật có giá trị dược liệu. Nghiên cứu này tập trung vào hai loài chính là Piper thomsonii và Piper hymenophyllum. Các loài này không chỉ có giá trị trong y học mà còn có nhiều ứng dụng trong đời sống hàng ngày. Việc tìm hiểu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của chúng sẽ giúp khai thác tiềm năng dược liệu của chi này.

1.1. Đặc điểm phân loại và phân bố của chi Piper

Chi Piper được phân loại theo nhiều hệ thống khác nhau. Theo Takhtajan (2009), chi này bao gồm khoảng 700 loài, phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới. Ở Việt Nam, chi Piper có khoảng 5 loài chính, trong đó Piper nigrum và Piper betle là những loài phổ biến nhất.

1.2. Đặc điểm hình thái của hai loài Piper

Hai loài Piper thomsonii và Piper hymenophyllum có những đặc điểm hình thái riêng biệt. Piper thomsonii thường có lá lớn, trong khi Piper hymenophyllum có lá nhỏ hơn và mọc thành cụm. Những đặc điểm này giúp phân biệt chúng trong tự nhiên.

II. Vấn đề và thách thức trong nghiên cứu tác dụng ức chế enzym

Nghiên cứu tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase (AChE) là một thách thức lớn trong lĩnh vực dược học. AChE có vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh nồng độ acetylcholin trong não, ảnh hưởng đến nhiều chức năng thần kinh. Việc tìm kiếm các chất ức chế AChE từ thực vật như chi Piper có thể mở ra hướng đi mới trong điều trị bệnh Alzheimer.

2.1. Tác động của enzym Acetylcholinesterase trong y học

AChE là enzym chịu trách nhiệm phân hủy acetylcholin, một chất dẫn truyền thần kinh quan trọng. Sự mất cân bằng của enzym này có thể dẫn đến các rối loạn thần kinh, đặc biệt là bệnh Alzheimer. Do đó, việc tìm kiếm các chất ức chế AChE từ thiên nhiên là rất cần thiết.

2.2. Thách thức trong việc sàng lọc hoạt tính ức chế enzym

Quá trình sàng lọc hoạt tính ức chế AChE thường gặp nhiều khó khăn. Các phương pháp thử nghiệm in vitro cần được tối ưu hóa để đảm bảo độ chính xác và độ tin cậy. Việc lựa chọn mẫu và phương pháp thử nghiệm phù hợp là rất quan trọng để đạt được kết quả chính xác.

III. Phương pháp nghiên cứu và giải pháp chính trong đánh giá hoạt tính

Nghiên cứu này áp dụng nhiều phương pháp khác nhau để đánh giá hoạt tính ức chế AChE của hai loài Piper. Các phương pháp này bao gồm phương pháp sử dụng thuốc thử Ellman và các phương pháp sắc ký để phân lập hợp chất. Việc áp dụng các phương pháp này giúp xác định được hoạt tính ức chế của các mẫu chiết xuất.

3.1. Phương pháp sử dụng thuốc thử Ellman

Phương pháp Ellman là một trong những phương pháp phổ biến nhất để đánh giá hoạt tính ức chế AChE. Phương pháp này cho phép đo lường nồng độ acetylcholin còn lại sau khi phản ứng với enzym, từ đó xác định được hoạt tính ức chế của mẫu thử.

3.2. Phương pháp sắc ký để phân lập hợp chất

Sắc ký là một kỹ thuật quan trọng trong việc phân lập các hợp chất từ dịch chiết thực vật. Các phương pháp sắc ký như sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) giúp tách biệt và xác định các hợp chất có hoạt tính ức chế AChE trong hai loài Piper.

IV. Kết quả nghiên cứu và ứng dụng thực tiễn của hai loài Piper

Kết quả nghiên cứu cho thấy cả hai loài Piper thomsonii và Piper hymenophyllum đều có hoạt tính ức chế AChE đáng kể. Các hợp chất phân lập từ hai loài này có tiềm năng ứng dụng trong điều trị các rối loạn thần kinh. Việc khai thác các hợp chất này có thể dẫn đến phát triển các loại thuốc mới hiệu quả hơn.

4.1. Hoạt tính ức chế AChE của dịch chiết từ hai loài

Dịch chiết từ Piper thomsonii và Piper hymenophyllum cho thấy hoạt tính ức chế AChE cao. Các mẫu thử này đã được kiểm nghiệm và cho kết quả tích cực trong việc giảm nồng độ acetylcholin trong các thí nghiệm in vitro.

4.2. Ứng dụng trong phát triển thuốc điều trị bệnh Alzheimer

Các hợp chất từ hai loài Piper có thể được nghiên cứu thêm để phát triển thành thuốc điều trị bệnh Alzheimer. Việc sử dụng các hợp chất tự nhiên này không chỉ an toàn mà còn có thể mang lại hiệu quả cao trong việc cải thiện chức năng thần kinh.

V. Kết luận và triển vọng nghiên cứu trong tương lai

Nghiên cứu về hai loài Piper thomsonii và Piper hymenophyllum đã chỉ ra tiềm năng lớn trong việc phát triển các sản phẩm dược phẩm mới. Việc tiếp tục nghiên cứu và khai thác các hợp chất từ chi Piper sẽ mở ra nhiều cơ hội trong lĩnh vực y học. Tương lai của nghiên cứu này hứa hẹn sẽ mang lại nhiều giá trị cho sức khỏe cộng đồng.

5.1. Tầm quan trọng của nghiên cứu dược liệu từ thiên nhiên

Nghiên cứu dược liệu từ thiên nhiên không chỉ giúp phát hiện các hợp chất mới mà còn góp phần bảo tồn và phát triển nguồn tài nguyên thực vật. Việc khai thác hợp lý các loài thực vật như Piper sẽ mang lại lợi ích lớn cho y học.

5.2. Hướng đi mới trong nghiên cứu và phát triển thuốc

Hướng nghiên cứu mới trong việc phát triển thuốc từ các hợp chất tự nhiên sẽ giúp tạo ra các sản phẩm an toàn và hiệu quả hơn. Việc kết hợp giữa nghiên cứu khoa học và thực tiễn sẽ là chìa khóa cho sự thành công trong tương lai.

Trích đoạn nội dung tài liệu

ĐẶT VẤN ĐỀ Nghiên cứu phát triển thuốc mới là một quá trình gian nan, tốn nhiều thời gian và chi phí bởi quá trình này phải trải qua nhiều giai đoạn. Mặc dù có nhiều hướng tiếp cận vấn đề nghiên cứu khác nhau nhưng quá trình nghiên cứu thường được bắt đầu với việc đánh giá hoạt tính của một lượng lớn các mẫu dược liệu hoặc hợp chất. Giai đoạn này mang tính định hướng và được gọi là giai đoạn nghiên cứu sàng lọc. Ở giai đoạn này, phương pháp thử in vitro được ưu tiên sử dụng bởi có ưu điểm là tiến hành đồng thời nhiều mẫu, lượng mẫu cần cho thử nghiệm ít, cho kết quả nhanh và chi phí thấp.

Mặc dù vậy, để có thể xây dựng được một phương pháp thử in vitro thì đích phân tử của bệnh (thụ thể, enzym, protein) phải được xác định. Với việc Whitehouse lần đầu tiên đưa ra giả thuyết về vai trò của hệ cholinergic đối với bệnh Alzheimer vào năm 1982, AChE cũng được xác định là một trong những đích phân tử đối với bệnh này. Trên cơ sở đó, một vài phương pháp thử in vitro đã được xây dựng. Trong đó, phương pháp đo quang sử dụng thuốc thử Ellman được sử dụng khá phổ biến trong các nghiên cứu sàng lọc tác dụng ức chế AChE in vitro của dược liệu và hợp chất hiện nay.

Đây cũng là hướng nghiên cứu thu hút được sự quan tâm của nhiều nhà khoa học trên thế giới bởi 2 trong số 5 thuốc được sử dụng phổ biến để điều trị bệnh Alzheimer hiện nay là Galanthamin và Huperzin A đều có tác dụng ức chế R R AChE và có nguồn gốc thực vật [61], [88]. Gần đây, kết quả nghiên cứu sàng lọc dược liệu cho thấy dịch chiết của một số loài thuộc chi Piper L. có tác dụng ức chế AChE in vitro [17], [63]. Trong một vài nghiên cứu khác, hợp 1 chất piperin (alcaloid phổ biến nhất có mặt trong chi Piper L.) thể hiện tác dụng ức chế AChE trên thử nghiệm ex vivo và tác dụng cải thiện trí nhớ trên thử nghiệm in vivo [38], [143].

Bên cạnh đó, tiềm năng nghiên cứu về chi Piper L. là khá lớn bởi có hơn 1.000 loài thuộc chi này phân bố trên thế giới. Chỉ riêng ở Việt Nam, số loài thuộc chi Piper L. Xuất phát từ những lý do trên, chúng tôi tiến hành đề tài: ‘‘Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng ức chế enzym acetylcholinesterase của hai loài Piper thomsonii (C.

thomsonii và Piper hymenophyllum Miq., họ Hồ tiêu (Piperaceae)” với 3 mục tiêu sau: 1. Mô tả đặc điểm hình thái, xác định tên khoa học và mô tả đặc điểm vi học của 2 loài nghiên cứu. Xác định được thành phần hóa học của 2 loài nghiên cứu. Triển khai được phương pháp và áp dụng để đánh giá hoạt tính ức chế AChE in vitro của dịch chiết toàn phần, dịch chiết phân đoạn và hợp chất phân lập được từ 2 loài nghiên cứu.

Tổng quan về chi Piper L. Vị trí phân loại, phân bố và đặc điểm thực vật của chi Piper L. Vị trí phân loại chi Piper L. Theo hệ thống phân loại thực vật của 3 tác giả gồm: Hutchinson (1974) [6], Cronquist A.

(1988) [40] và Takhtajan (2009) [26], chi Hồ tiêu (Piper L.) được xếp nằm trong họ Hồ tiêu (Piperaceae), thuộc bộ Hồ tiêu (Piperales), phân lớp Ngọc Lan (Magnoliidae), lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida), ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta). Trên thế giới, họ Hồ tiêu (Piperaceae) có khoảng 2. Sự phân nhóm đối với các loài và chi của họ này cho đến nay vẫn chưa đạt được sự thống nhất. Tác giả Miquel (1843-1844) chia họ này thành hai nhóm là Piperae gồm 15 chi với 304 loài và Peperomeae có 5 chi với 209 loài.

De Candolle (1869) xác định họ này gồm 2 chi Piper và Peperomia với trên 1. Theo Rendle (1956), họ Hồ tiêu gồm 2 chi lớn là Piper với trên 700 loài và Peperomia với trên 600 loài, ngoài ra, còn thêm 7 chi nhỏ khác. Tuy nhiên, theo Lawrence (1957), họ này có 10 – 12 chi với 2 chi lớn là Piper và Peperomia. Theo phân loại của Takhtajan (2009), họ Piperaceae gồm có 7 chi [26].

Theo hai tác giả Phạm Hoàng Hộ và Nguyễn Kim Đào, họ Hồ tiêu phân bố ở Việt Nam có 5 chi gồm: Peperomia, Zippelis, Circaeocarpus, Piper, Lepianthes, trong đó, chi Piper L. Đặc điểm phân bố chi Piper L. trên thế giới và ở Việt Nam * Trên thế giới Chi Piper L. là một thành viên của gia đình họ Hồ tiêu (Piperaceae).

Với số lượng trên 1.000 loài, chi Piper L. là một trong những chi lớn nhất trong ngành thực vật hạt kín. Chi này phân bố chủ yếu ở khu vực nhiệt đới và cận 3 nhiệt đới, tại các vùng núi hoặc ở tầng cây thấp của các khu rừng ẩm nhưng cũng có thể mọc ở những khoảng đất trống, mọc ven sông suối, ven đường hoặc gần khu dân cư [31], [67]. Hầu hết các loài thuộc chi Piper L.

phân bố ở độ cao dưới 2.500 m, chỉ một số ít loài phân bố ở độ cao trên 3. Các loài thuộc chi này có thể phân bố mang tính đặc hữu vùng hoặc phân bố rộng rãi. Đặc điểm phân bố các loài thuộc chi Piper L. trên thế giới được thấy rõ hơn ở hình 1.

Trung Mỹ 200 loài Nhiệt đới Châu Á Amazon 300 loài 300 loài Andes 300 loài Nhiệt đới Châu Phi Nam Thái Bình Dương 15 loài 40 loài Rừng Đại Tây Dương 150 loài Hình 1. Đặc điểm phân bố các loài thuộc chi Piper L. trên thế giới [67] Bảng 1. Đặc điểm phân bố các loài thuộc chi Piper L.

ở một số nước trên thế giới STT Phân bố Số lượng loài TLTK 1 Ấn Độ 45 [60] 2 Brazil 330 [49] 3 Ecuador 100 [119] 4 Honduras 45 [28] 5 Hồng Kông 6 [144] 6 Thái Lan 38 [31] 7 Trung Quốc 60 [37] Hình 1.1 cho thấy khu vực nhiệt đới Châu Mỹ (gồm Trung và Nam Mỹ) có sự phân bố đa dạng nhất của các loài thuộc chi Piper L. và tập trung chủ yếu ở một số trung tâm đa dạng sinh học như: vùng rừng nhiệt đới Amazon (300 loài), vùng núi Andes (200 loài), khu vực Trung Mỹ (200 loài). Đứng thứ hai về sự đa dạng loài thuộc chi Piper L. trên thế giới là khu vực Châu Á với số lượng khoảng 300 4 loài và nơi có ít loài Piper L.

phân bố nhất là vùng nhiệt đới Châu Phi với chỉ khoảng 15 loài. * Ở Việt Nam Theo hai tác giả Phạm Hoàng Hộ và Nguyễn Kim Đào, ở nước ta có 46 loài thuộc chi Piper L., trong đó, có hai loài phân bố rộng khắp cả nước gồm: P. (lá lốt) và một loài được trồng phổ biến ở các tỉnh phía Nam là P. Tây Nguyên là vùng có nhiều loài thuộc chi Piper L.

phân bố nhất với trên 15 loài. Một số vùng khác cũng thấy có sự xuất hiện của khá nhiều loài thuộc chi này là Vườn Quốc gia Cúc Phương (Ninh Bình) và Vườn quốc gia Ba Vì (Hà Nội), đây cũng chính là hai trong số những trung tâm đa dạng sinh học của nước ta. Các loài thuộc chi Piper L. ở nước ta thường mọc trong rừng ẩm ở độ cao từ 150 – 1.500 m, thường gặp ở độ cao 600 – 1.000 m, cá biệt có loài gặp ở độ cao trên 1.

Một số ít loài phân bố ở gần khu vực dân cư sinh sống, ven rừng, ven đường [5], [16]. Đặc điểm thực vật chi Piper L. - Dạng sống: cây bụi với những nhánh thẳng đứng hoặc trải rộng, cây leo với rễ mọc ở đốt, bám vào thân cây khác; đôi khi có dạng thân thảo bò trên mặt đất hoặc sống bì sinh; hiếm khi có dạng cây gỗ nhỏ và thường có mùi [5], [135]. - Lá: đơn, mép nguyên; mọc đối hoặc mọc cách; có thể có hoặc không có lá kèm (rụng sớm để lại sẹo ở mấu khá rõ).

Lá rất khác nhau về hình dạng và kích thước giữa các loài. Lá có các dạng: hình mác, hình trứng, hình tim, hình elip. Trên cùng một cây có thể có nhiều hình dạng lá khác nhau với đặc điểm lá già thường to và nổi bật hơn so với những lá còn lại. Phiến lá có thể mỏng hoặc dày; nhẵn bóng, nhăn nheo hoặc thô ráp; có thể có lông.

Lông che chở mầu nâu hoặc trắng; có thể đơn bào hoặc đa bào; bao phủ bề mặt lá và/hoặc toàn thân cây. Gốc lá cân đối hoặc lệch; dạng hình tròn hoặc hình tim. Cuống lá ngắn hoặc dài khoảng vài centimet. Gân lá thường tạo thành các cặp 5 xuất phát từ một số điểm như: gốc lá, điểm sát gốc lá, điểm giữa hoặc điểm phía trên của gân giữa lá.

Một số lá có hệ gân thứ cấp chạy dọc theo gân giữa, có dạng đường cong từ gốc đến đỉnh của lá, có hình chân vịt hoặc có một phần xẻ lông chim [135]. - Hoa: cụm hoa dạng bông, mọc đối diện với lá hoặc ở nách lá; hiếm khi mọc ở đỉnh cành và cũng hiếm khi tạo thành cụm gồm nhiều bông mọc ở nách lá. Cụm hoa có dạng vươn thẳng hoặc uốn cong nhẹ và có thể bị rủ xuống khi chín. Hoa trần, thường đơn tính (đa số khác gốc, ít khi cùng gốc) hoặc lưỡng tính, không có cuống.

Hoa có thể có màu hồng, màu hạt dẻ, màu xanh xám, màu vàng xanh, màu trắng đục… Lá bắc nhỏ; mọc đối diện với hoa, đôi khi dính với trục cụm hoa; hình khiên, hình tam giác hoặc hình tròn; thường nhẵn hoặc có lông mịn. Bộ nhị 2-6, chỉ nhị ngắn; bao phấn 2, 2-4 thùy. Bộ nhụy có bầu nhụy rời hoặc đôi khi ôm lấy trục, 1 ô, 1 noãn; núm nhụy 2-5 [134], [135]. - Quả: loại quả hạch, có hoặc không có cuống; dạng hình trứng, hình cầu, hình trứng ngược hoặc có mặt cắt hình tam giác, hiếm khi hình bầu dục; khi chín thường có màu đỏ hoặc vàng.

Quả thường nhẵn hoặc đôi khi có lông tơ; mỗi quả có 1 hạt. Hạt gần hình cầu, vỏ hạt mỏng; phôi nhỏ, ngoại nhũ dạng bột và cứng [135], [136]. - Nhiễm sắc thể: kết quả nghiên cứu của tác giả Joseph Jose và cộng sự (1985) cho thấy số lượng nhiễm sắc thể (NST) của 8 loài thuộc chi Piper L. nghiên cứu thay đổi từ 2n = 24 đến 195.

Theo nhóm tác giả này, số NST của các loài thuộc chi Piper L. nghiên cứu thường là bội số của 13, trừ loài P. Kích thước NST của các loài nghiên cứu nằm trong khoảng 0,56 – 2,41 μm, riêng kích thước NST của loài P. Nhóm tác giả cũng đưa ra nhận định rằng thể đa bội có thể là yếu tố quan trọng của quá trình tiến hóa [70].