Nghiên cứu tạo chủng Bacillus subtilis đột biến có khả năng sinh protease cao bằng chiếu xạ gamma

Người đăng

Ẩn danh

2018

96
3
0

Phí lưu trữ

30 Point

Mục lục chi tiết

LỜI CẢM ƠN

LỜI CAM ĐOAN

1. MỞ ĐẦU

1.1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1.1. Giới thiệu chung

1.1.2. Phân loại protease. Nguồn thu protease. Ứng dụng của protease

1.1.2.1. Ứng dụng trong công nghiệp
1.1.2.2. Trong nghiên cứu và trị liệu
1.1.2.3. Trong nông nghiệp

1.2. BACILLUS SUBTILIS VÀ PROTEASE CỦA BACILLUS

1.2.1. Tổng quan về Bacillus subtilis. Lịch sử phát hiện và phân loại

1.2.2. Đặc điểm sinh thái học và phân bố trong tự nhiên

1.2.3. Đặc điểm hình thái

1.2.4. Đặc điểm sinh hóa và đặc điểm nuôi cấy

1.2.5. Bào tử và khả năng tạo bào tử

1.2.6. Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh tổng hợp protease ở Bacillus subtilis

1.2.6.1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường dinh dưỡng
1.2.6.2. Ảnh hưởng của yếu tố môi trường lên khả năng sinh tổng hợp protease
1.2.6.3. Ảnh hưởng của phương pháp nuôi cấy

1.3. PHƯƠNG PHÁP TĂNG CƯỜNG SẢN XUẤT SẢN PHẨM THỨ CẤP (PROTEASE) VÀ CÔNG NGHỆ RIBOSOME

1.3.1. Công nghệ đáp ứng lại của VSV

1.3.2. Công nghệ gen

1.3.3. Phương pháp gây đột biến

1.3.4. Tái tổ hợp di truyền

1.3.5. Công nghệ trao đổi chất

1.3.6. Công nghệ ribosome

1.4. TƯƠNG TÁC CỦA BỨC XẠ ION HÓA VỚI TẾ BÀO – ỨNG DỤNG BỨC XẠ ION HÓA TRONG GÂY TẠO ĐỘT BIẾN VI SINH VẬT

1.4.1. Quá trình gây hiệu ứng sinh học của bức xạ ion hóa

1.4.2. Các quá trình xảy ra sau khi bức xạ đi vào tổ chức sinh học

1.4.3. Hiệu ứng sinh học gây bởi bức xạ ion hóa

1.4.4. Ứng dụng bức xạ ion hóa trong gây tạo đột biến ở vi sinh vật

2. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ

2.1.1. Nguyên vật liệu

2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.2.1. Bảo quản và giữ giống

2.2.2. Xử lý chiếu xạ

2.2.3. Nuôi cấy huyền dịch tế bào

2.2.4. Chiếu xạ dung dịch nuôi cấy

2.2.5. Xác định số lượng tế bào vi sinh vật

2.2.6. Định tính và định lượng protease

2.2.6.1. Phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch
2.2.6.2. Phương pháp Anson cải tiến

2.2.7. Sàng lọc các đột biến sinh protease cao từ Bacillus subtilis bằng xử lý chiếu xạ

2.2.8. Sàng lọc các đột biến sinh protease cao từ Bacillus subtilis bằng xử lý chiếu xạ kết hợp với kháng sinh

2.2.9. Xác định đột biến

2.2.10. Thiết kế mồi và xử lý số liệu

2.2.11. Khuếch đại trình tự gen rpoB và rpsL12

2.2.12. Tinh sạch sản phẩm PCR

2.2.13. Phương pháp điện di DNA

2.2.14. Giải trình tự

3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. TUYỂN CHỌN CHỦNG Bacillus subtilis CÓ KHẢ NĂNG SINH PROTEASE CAO LÀM NGUYÊN LIỆU GÂY TẠO ĐỘT BIẾN

3.1.1. Tuyển chọn các chủng Bacillus subtilis có hoạt tính cao và ổn định

3.1.2. Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy tới khả năng sinh protease của các chủng Bacillus subtilis

3.2. ẢNH HƯỞNG CỦA XỬ LÝ CHIẾU XẠ TỚI CHỦNG VK BACILLUS SUBTILIS VÀ KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP PROTEASE CỦA CHÚNG

3.2.1. Đánh giá quá trình sinh trưởng của các chủng Bacillus subtilis

3.2.2. Ảnh hưởng của xử lý chiếu xạ tới khả năng sống sót của các chủng Bacillus subtilis

3.2.3. Ảnh hưởng của xử lý chiếu xạ tới khả năng sinh protease của các chủng Bacillus subtilis

3.3. XỬ LÝ CHIẾU XẠ KẾT HỢP SỬ DỤNG KS GÂY ĐỘT BIẾN ĐỊNH HƯỚNG TỚI CÁC GEN MÃ CHO SẢN PHẨM LIÊN QUAN TỚI QUÁ TRÌNH SINH TỔNG HỢP PROTEASE CỦA CHỦNG BACILLUS SUBTILIS

3.3.1. Ảnh hưởng của xử lý chiếu xạ tới khả năng kháng streptomycin ở các chủng Bacillus subtilis

3.3.2. Sàng lọc các khuẩn lạc Bacillus subtilis có khả năng sinh protease cao từ các chủng kháng xạ và kháng streptomycin

3.3.3. Xử lý chiếu xạ kết hợp với rifampicin

3.3.4. Ảnh hưởng của xử lý chiếu xạ tới khả năng kháng rifampicin ở các chủng Bacillus subtilis

3.3.5. Sàng lọc các khuẩn lạc Bacillus subtilis có khả năng sinh protease cao từ các khuẩn lạc kháng xạ và kháng rifampicin

3.4. XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN TRÊN CÁC GEN rpoB, rpsL Ở CÁC CHỦNG VI KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG SINH PROTEASE CAO HƠN CHỦNG GỐC

3.4.1. Khuếch đại các gen rpoB và rpsL ở các chủng gốc, các khuẩn lạc sinh protease cao hơn chủng gốc

3.4.2. Tách chiết DNA tổng số từ các chủng gốc và khuẩn lạc sinh protease cao

3.4.3. Khuếch đại các gen rpoB và rpsL từ DNA tổng số bằng phản ứng PCR

3.4.4. Tinh sạch sản phẩm PCR khuếch đại các gen rpoB và rpsL để giải trình tự xác định đột biến

3.4.5. Giải trình tự gen rpoB của 2 chủng thuần và các khuẩn lạc sinh protease vượt trội

3.4.6. Giải trình tự gen rpsL của 2 chủng thuần và các chủng đột biến

3.4.7. Phân tích so sánh kết quả giữa kiểu đột biến, vị trí đột biến với khả năng sinh protease

3.5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Luận văn thạc sĩ hay nghiên cứu tạo chủng bacillus subtilis đột biến có khả năng sinh protease cao bằng chiếu xạ gamma kết hợp với xử lý kháng sinh

Tài liệu "Nghiên cứu Bacillus subtilis đột biến sinh protease cao bằng chiếu xạ gamma" trình bày một nghiên cứu quan trọng về việc tạo ra các chủng Bacillus subtilis đột biến có khả năng sản xuất protease cao thông qua phương pháp chiếu xạ gamma. Nghiên cứu này không chỉ mở ra hướng đi mới trong việc tối ưu hóa quy trình sản xuất enzyme mà còn có tiềm năng ứng dụng rộng rãi trong ngành công nghiệp thực phẩm và dược phẩm.

Độc giả có thể tìm hiểu thêm về các khía cạnh liên quan đến Bacillus subtilis qua tài liệu Luận án sàng lọc và nghiên cứu ảnh hưởng của đột biến điểm trên peptide tín hiệu đến khả năng tiết α amylase tái tổ hợp trong bacillus subtilis, nơi khám phá ảnh hưởng của đột biến đến khả năng tiết enzyme. Bên cạnh đó, tài liệu Nghiên cứu xây dựng quy trình lên men thu nattokinase tái tổ hợp trong bacillus subtilis và ứng dụng sản xuất thực phẩm chức năng hỗ trợ ngăn ngừa sự hình thành huyết khối sẽ cung cấp cái nhìn sâu sắc về quy trình sản xuất enzyme trong Bacillus subtilis. Cuối cùng, tài liệu Luận văn thạc sĩ nghiên cứu tạo chủng bacillus subtilis đột biến có khả năng sinh protease cao bằng chiếu xạ gamma kết hợp với xử lý kháng sinh sẽ giúp bạn hiểu rõ hơn về các phương pháp và kết quả nghiên cứu liên quan đến chủ đề này. Những tài liệu này sẽ giúp bạn mở rộng kiến thức và khám phá sâu hơn về Bacillus subtilis và ứng dụng của nó trong công nghiệp.