Bước đầu xây dựng quy trình nhân giống nhanh hoa cúc Teddy Chrysanthemum bằng phương pháp nuôi cấy in vitro

• Tác giả: Nguyễn Thị Vy
• Người hướng dẫn: PGS. Đồng Huy Giới
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Hướng Dẫn Xây Dựng Quy Trình Nhân Giống Hoa Cúc Teddy Chrysanthemum Bằng Nuôi Cấy In Vitro
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• 1. MỤC LỤC
• 2. MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU
• 2.1. Mục đích
• 2.2. Yêu cầu
• 3. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 3.1. Phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 3.1.1. Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 3.1.2. Cơ sở của nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 3.2. Các giai đoạn (bước) nhân giống in vitro
• 3.2.1. Giai đoạn 1: Chọn lọc cây mẹ và khử trùng mô nuôi cấy
• 3.2.2. Giai đoạn 2: Nhân nhanh
• 3.2.3. Giai đoạn 3: Tạo cây hoàn chỉnh
• 3.2.4. Giai đoạn 4: Thích nghi cây với điều kiện tự nhiên
• 3.3. Giới thiệu chung về cây cúc
• 3.3.1. Nguồn gốc
• 3.3.2. Phân loại hoa cúc
• 4. MỤC TIÊU, ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 4.1. Mục tiêu nghiên cứu
• 4.2. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu
• 4.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 4.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 4.4.1. Tạo vật liệu khởi đầu
• 4.4.2. Nhân nhanh chồi in vitro cây hoa cúc Teddy
• 4.4.3. Tạo cây hoàn chỉnh
• 4.4.4. Bố trí thí nghiệm
• 4.4.5. Các chỉ tiêu theo dõi
• 5. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 5.1. Tạo vật liệu khởi đầu trong nhân giống in vitro cây hoa cúc Teddy
• 5.1.1. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng mẫu bằng NaClO 5% đến khả năng sống và phát sinh hình thái cúc Teddy
• 5.1.2. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng mẫu bằng HgCl2 0.1% đến khả năng sống và phát sinh hình thái của cúc Teddy
• 5.2. Nhân nhanh chồi in vitro
• 5.2.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của BA đến khả năng nhân nhanh chồi của cúc Teddy
• 5.2.2. Ảnh hưởng của Kinetin đến khả năng nhân nhanh chồi cúc Teddy
• 5.2.3. Ảnh hưởng của sự kết hợp giữa BA với α-NAA đến khả năng nhân nhanh chồi cúc Teddy
• 5.3. Ra rễ tạo cây hoàn chỉnh
• 5.3.1. Ảnh hưởng của α-NAA đến khả năng ra rễ của cúc Teddy
• 5.3.2. Ảnh hưởng của nồng độ IBA đến khả năng ra rễ của cúc Teddy
• 5.3.3. Ảnh hưởng của nồng độ than hoạt tính đến khả năng ra rễ của cúc Teddy
• 6. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Quy trình nhân giống hoa cúc

Quy trình nhân giống hoa cúc là một phương pháp khoa học được áp dụng để tạo ra số lượng lớn cây giống chất lượng cao. Trong nghiên cứu này, nuôi cấy in vitro được sử dụng để nhân giống hoa cúc Teddy, một giống hoa mới với đặc điểm độc đáo. Quy trình bao gồm các bước chính: khử trùng mẫu, nhân nhanh chồi, tạo cây hoàn chỉnh và thích nghi với điều kiện tự nhiên. Kỹ thuật nhân giống hoa này đảm bảo cây giống sạch bệnh và đồng nhất về mặt di truyền.

1.1 Khử trùng mẫu

Khử trùng mẫu là bước quan trọng đầu tiên trong quy trình nhân giống hoa cúc. Nghiên cứu sử dụng HClO 5% và HgCl2 0,1% để khử trùng đoạn thân mang mắt ngủ của hoa cúc Teddy. Kết quả cho thấy thời gian khử trùng tối ưu là 20 phút với HClO 5% và 7 phút với HgCl2 0,1%, đạt tỷ lệ mẫu sạch lần lượt là 83,33% và 76,67%. Đây là bước cơ bản để đảm bảo mẫu không bị nhiễm khuẩn trong quá trình nuôi cấy.

1.2 Nhân nhanh chồi

Giai đoạn nhân nhanh chồi được thực hiện trên môi trường MS bổ sung các chất điều hòa sinh trưởng như BA và Kinetin. Kết quả cho thấy môi trường MS + 0,4 mg/l BA cho hệ số nhân chồi cao nhất với 7,17 chồi/mẫu. Kỹ thuật nuôi cấy in vitro này giúp tăng nhanh số lượng chồi, tạo nền tảng cho việc sản xuất hàng loạt cây giống.

II. Đặc điểm và ứng dụng của hoa cúc Teddy

Hoa cúc Teddy là một giống hoa mới với đặc điểm nổi bật như dễ trồng, dễ chăm sóc và có kiểu hoa độc đáo. Đặc điểm hoa cúc Teddy bao gồm hoa kép, màu sắc đa dạng và thời gian tàn hoa lâu. Nghiên cứu này nhấn mạnh tiềm năng của hoa cúc Teddy trong thị trường hoa cúc, đặc biệt là trong trang trí và làm cảnh. Ứng dụng nuôi cấy in vitro giúp đáp ứng nhu cầu sản xuất lớn và ổn định.

2.1 Đặc điểm thực vật học

Hoa cúc Teddy thuộc chi Chrysanthemum, có nguồn gốc từ Trung Quốc và Nhật Bản. Cây có thân cỏ, hoa kép với nhiều màu sắc khác nhau. Đặc điểm sinh thái của hoa cúc Teddy cho thấy cây thích nghi tốt với điều kiện khí hậu nhiệt đới, phù hợp với việc trồng trọt tại Việt Nam.

2.2 Ứng dụng trong trang trí

Hoa cúc Teddy được sử dụng rộng rãi trong trang trí không gian nhà ở, văn phòng và các sự kiện. Với kiểu hoa độc đáo và màu sắc đa dạng, hoa cúc Teddy trở thành lựa chọn hàng đầu trong thị trường hoa cúc. Nghiên cứu này cũng chỉ ra tiềm năng xuất khẩu của giống hoa này, góp phần phát triển kinh tế nông nghiệp.

III. Kỹ thuật nuôi cấy in vitro

Kỹ thuật nuôi cấy in vitro là phương pháp hiện đại được áp dụng để nhân giống hoa cúc Teddy. Quy trình bao gồm các giai đoạn: tạo vật liệu khởi đầu, nhân nhanh chồi, tạo cây hoàn chỉnh và thích nghi với điều kiện tự nhiên. Quy trình nuôi cấy mô này đảm bảo cây giống sạch bệnh và đồng nhất về mặt di truyền, phù hợp với nhu cầu sản xuất hàng loạt.

3.1 Tạo cây hoàn chỉnh

Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh được thực hiện bằng cách bổ sung các chất kích thích ra rễ như α-NAA và IBA vào môi trường nuôi cấy. Kết quả cho thấy môi trường MS + 0,2 mg/l IBA cho số rễ trung bình là 19,73 và chiều dài rễ trung bình là 2,92 cm. Cách chăm sóc hoa cúc trong giai đoạn này đảm bảo cây phát triển khỏe mạnh trước khi đưa ra môi trường tự nhiên.

3.2 Thích nghi với điều kiện tự nhiên

Giai đoạn thích nghi là bước cuối cùng trong quy trình nuôi cấy in vitro. Cây giống được chuyển từ môi trường ống nghiệm ra đất, đảm bảo điều kiện nhiệt độ, ánh sáng và độ ẩm phù hợp. Chăm sóc hoa cúc Teddy trong giai đoạn này giúp cây thích nghi tốt với môi trường tự nhiên, đạt tỷ lệ sống cao và phát triển ổn định.