Luận văn thạc sỹ môi trường vũ thị thanh

Chuyên khảo môi trường phân tích Luận văn thạc sỹ môi trường vũ thị thanh, đánh giá các khía cạnh quan trọng, đề xuất hướng nghiên cứu tiếp theo.

Trường đại học

Đại học Quốc gia Hà Nội

Chuyên ngành

Khoa học môi trường

Tác giả

Vũ Thị Thanh

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

luận văn thạc sỹ

2013

80
0
0

Phí lưu trữ

30 Point

Mục lục chi tiết

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Rệp muội hại cây trồng

1.2. Đặc điểm sinh học của rệp muội hại cây trồng

1.3. Tình hình rệp muội hại cây trồng trên thế giới và Việt Nam

1.4. Thuốc diệt côn trùng có nguồn gốc sinh học

1.5. Tình hình sử dụng nấm diệt côn trùng trên thế giới

1.6. Tình hình sử dụng nấm diệt côn trùng ở Việt Nam

1.7. Nấm ký sinh côn trùng

1.8. Hệ enzyme chitinase từ nấm sợi

1.9. Cấu trúc của chitinase

1.10. Cơ chế hoạt động của chitinase

1.11. Cơ chất cảm ứng của chitinase

1.12. Các nguồn thu nhận chitinase

1.13. Ứng dụng của chitinase

1.14. Công nghệ lên men lỏng và lên men xốp

1.15. Ảnh hưởng của điều kiện môi trường đến khả năng sinh tổng hợp chitinase

1.15.1. Nhiệt độ nuôi cấy

1.15.2. pH môi trường

2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

2.1. Nguyên liệu, hóa chất và thiết bị sử dụng

2.2. Hóa chất sử dụng trong nghiên cứu

2.3. Phương pháp nghiên cứu

2.3.1. Phương pháp phân lập nấm

2.3.2. Sàng lọc chủng nấm ký sinh côn trùng có độc lực diệt rệp hại ngô cao

2.3.3. Chọn lọc chủng nấm ký sinh côn trùng có hoạt tính chitinase cao

2.3.4. Xác định hoạt tính chitinase của chủng nấm ký sinh côn trùng

2.3.5. Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của chủng nấm có độc lực diệt rệp hại ngô cao

2.3.6. Phương pháp phân loại nấm sợi dựa vào xác định và so sánh trình tự gen mã hóa 18S rRNA

2.3.7. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố môi trường lên khả năng sinh tổng hợp chitinase của chủng nấm được lựa chọn

3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. Phân lập, tuyển chọn chủng nấm ký sinh côn trùng có độc lực diệt rệp muội hại ngô cao

3.2. Tuyển chọn chủng nấm có khả năng sinh tổng hợp chitinase cao

3.3. Hình thái khuẩn lạc và hình thái bào tử của chủng nấm NM4

3.4. Xác định trình tự gene mã hóa 18S rRNA của chủng NM4

3.5. Tách chiết DNA tổng số của chủng nấm NM4

3.6. Nhân đoạn gene 18S rRNA của chủng NM4

3.7. Ảnh hưởng của điều kiện môi trường đến khả năng sinh tổng hợp chitinase của nấm Penicillium sp.

3.7.1. Ảnh hưởng của nguồn cơ chất

3.7.2. Ảnh hưởng của độ dày cơ chất

3.7.3. Ảnh hưởng của độ ẩm cơ chất

3.7.4. Ảnh hưởng của nồng độ cơ chất cảm ứng

3.7.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ

3.7.6. Ảnh hưởng của pH môi trường lên men

3.7.7. Ảnh hưởng của một số nguồn nitơ vô cơ

3.7.8. Ảnh hưởng của thời gian lên men

4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

THÔNG TIN CỦA CHỦNG NẤM PENICILLIUM SP. M4 TRÊN NGÂN HÀNG GEN NCBI

PHỤ LỤC 3: CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN TỚI

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu nấm ký sinh kiểm soát rệp muội hại cây trồng

Nghiên cứu nấm ký sinh là một lĩnh vực quan trọng trong nông nghiệp bền vững. Rệp muội, một trong những loài côn trùng gây hại chính, đã gây ra thiệt hại lớn cho cây trồng. Việc sử dụng nấm ký sinh để kiểm soát rệp muội không chỉ giúp giảm thiệt hại mà còn bảo vệ môi trường. Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và tuyển chọn các chủng nấm có khả năng sinh tổng hợp chitinase, một enzyme quan trọng trong việc tiêu diệt rệp muội.

1.1. Đặc điểm sinh học của rệp muội hại cây trồng

Rệp muội là loài côn trùng chích hút nhựa cây, gây hại nghiêm trọng cho nhiều loại cây trồng. Chúng có khả năng sinh sản nhanh chóng và lây lan virus, làm giảm năng suất cây trồng. Đặc điểm sinh học của rệp muội, bao gồm hình dáng, kích thước và phương thức dinh dưỡng, là những yếu tố quan trọng cần được nghiên cứu để phát triển các biện pháp kiểm soát hiệu quả.

1.2. Tình hình rệp muội hại cây trồng trên thế giới và Việt Nam

Trên thế giới, rệp muội gây thiệt hại lớn cho nông nghiệp, với ước tính hàng tỷ đô la Mỹ mỗi năm. Tại Việt Nam, rệp muội cũng là một trong những loài gây hại chính, ảnh hưởng đến nhiều loại cây trồng như ngô, khoai tây và rau màu. Việc hiểu rõ tình hình rệp muội sẽ giúp xây dựng các chiến lược kiểm soát hiệu quả.

II. Vấn đề và thách thức trong kiểm soát rệp muội hại cây trồng

Việc kiểm soát rệp muội gặp nhiều thách thức, bao gồm sự kháng thuốc của rệp đối với các loại thuốc hóa học. Sự gia tăng sử dụng thuốc bảo vệ thực vật hóa học đã dẫn đến ô nhiễm môi trường và ảnh hưởng đến sức khỏe con người. Do đó, cần tìm kiếm các giải pháp thay thế bền vững hơn, như việc sử dụng nấm ký sinh.

2.1. Tác động của rệp muội đến năng suất cây trồng

Rệp muội không chỉ làm giảm năng suất mà còn ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm nông nghiệp. Chúng hút nhựa cây, làm yếu cây và tạo điều kiện cho các bệnh khác phát triển. Việc hiểu rõ tác động này là cần thiết để phát triển các biện pháp kiểm soát hiệu quả.

2.2. Khó khăn trong việc sử dụng thuốc hóa học

Sử dụng thuốc hóa học để kiểm soát rệp muội đã dẫn đến nhiều vấn đề, bao gồm sự kháng thuốc và ô nhiễm môi trường. Các biện pháp sinh học như nấm ký sinh đang trở thành một giải pháp tiềm năng để thay thế thuốc hóa học.

III. Phương pháp nghiên cứu nấm ký sinh kiểm soát rệp muội

Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp phân lập và tuyển chọn chủng nấm ký sinh có khả năng diệt rệp muội. Các điều kiện môi trường cũng được tối ưu hóa để tăng cường khả năng sinh tổng hợp chitinase của nấm. Việc nghiên cứu này không chỉ giúp phát triển các chế phẩm sinh học mà còn mở ra hướng đi mới trong nông nghiệp bền vững.

3.1. Phân lập và tuyển chọn chủng nấm ký sinh

Quá trình phân lập và tuyển chọn chủng nấm ký sinh được thực hiện thông qua các phương pháp nuôi cấy và sàng lọc. Các chủng nấm có khả năng diệt rệp muội sẽ được đánh giá dựa trên hoạt tính chitinase và độc lực của chúng.

3.2. Tối ưu hóa điều kiện môi trường cho nấm

Điều kiện môi trường như nhiệt độ, pH và nguồn dinh dưỡng sẽ được tối ưu hóa để tăng cường khả năng sinh tổng hợp chitinase của nấm. Việc này sẽ giúp tạo ra các chế phẩm sinh học hiệu quả hơn trong việc kiểm soát rệp muội.

IV. Ứng dụng thực tiễn của nấm ký sinh trong kiểm soát rệp muội

Nấm ký sinh có thể được ứng dụng rộng rãi trong nông nghiệp để kiểm soát rệp muội. Các chế phẩm sinh học từ nấm không chỉ hiệu quả mà còn an toàn cho môi trường và sức khỏe con người. Việc áp dụng nấm ký sinh trong sản xuất nông nghiệp sẽ giúp giảm thiểu thiệt hại do rệp muội gây ra.

4.1. Kết quả nghiên cứu về hoạt tính chitinase

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng các chủng nấm ký sinh có khả năng sinh tổng hợp chitinase cao có thể tiêu diệt rệp muội hiệu quả. Hoạt tính chitinase là yếu tố quyết định trong khả năng kiểm soát rệp muội của nấm.

4.2. Ứng dụng chế phẩm nấm trong sản xuất nông nghiệp

Các chế phẩm từ nấm ký sinh có thể được sử dụng trong sản xuất nông nghiệp để kiểm soát rệp muội. Việc áp dụng này không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn góp phần bảo vệ môi trường.

V. Kết luận và tương lai của nghiên cứu nấm ký sinh

Nghiên cứu nấm ký sinh kiểm soát rệp muội hại cây trồng mở ra nhiều triển vọng cho nông nghiệp bền vững. Việc phát triển các chế phẩm sinh học từ nấm không chỉ giúp kiểm soát rệp muội hiệu quả mà còn bảo vệ môi trường. Tương lai của nghiên cứu này sẽ tiếp tục tập trung vào việc tối ưu hóa các điều kiện nuôi cấy và phát triển các sản phẩm sinh học mới.

5.1. Triển vọng phát triển chế phẩm sinh học từ nấm

Nghiên cứu sẽ tiếp tục phát triển các chế phẩm sinh học từ nấm ký sinh để kiểm soát rệp muội. Các sản phẩm này sẽ được tối ưu hóa để đạt hiệu quả cao nhất trong thực tiễn.

5.2. Hướng đi mới trong nông nghiệp bền vững

Việc áp dụng nấm ký sinh trong kiểm soát rệp muội sẽ mở ra hướng đi mới cho nông nghiệp bền vững. Các biện pháp sinh học sẽ giúp giảm thiểu tác động tiêu cực của thuốc hóa học đến môi trường và sức khỏe con người.

Tóm tắt và mô tả trên trang này được tạo với sự hỗ trợ của AI. Nếu bạn thấy nội dung không chính xác hoặc có vấn đề, vui lòng Báo lỗi nội dung.

16/08/2025

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1. Rệp muội hại cây trồng 1. Đặc điểm sinh học của rệp muội hại cây trồng Trong các loài sâu hại cây trồng có thể nói rệp là nhóm côn trùng chích hút nhựa cây phổ biến nhất thế giới, phân bố tập trung nhất ở vùng ôn đới [36], rệp cũng phân bố khá phổ biến ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới với độ đa dạng thấp hơn.

Ước tính trên thế giới có khoảng 4000 loài rệp muội đã được phát hiện trong đó vùng Đông Nam Á có hơn 1000 loài. Trong số này có khoảng 250 loài rệp là côn trùng phá hoại nguy hiểm đối với nông, lâm nghiệp cần được kiểm soát [26]. Các loài thuộc họ rệp muội gây hại mạnh trong nông nghiệp phải kể đến như: rệp đào (Myzus persicae) gây hại trên cải, rệp bông (Aphis gossypii) gây hại trên cây bông, rệp muội hại ngô (Aphis maydis) gây hại trên cây ngô… Các loài thuộc họ rệp muội (Aphididae) có thân mềm, màu sắc khác nhau, từ màu xanh lá cây, vàng, nâu, đen, hồng hoặc hầu như không có màu. Rệp muội có kích thước rất nhỏ (từ 1-2 mm), hình quả lê, trần trụi, ở cuối bụng có phiến đuôi và 2 ống bụng ở 2 bên, có ba cặp chân phân đốt, mắt kép và một cặp râu, cơ thể được bao bọc bởi bộ khung kitin.

Rệp có lớp biểu bì mềm, có cánh (dạng màng) hoặc không cánh [3] (hình 1. Râu Chân Mắt Ống tiết Đầu Ngực Bụng Đuôi Hình 1. Cấu tạo ngoài của rệp Phương thức dinh dưỡng của rệp là chích hút nhựa cây bằng miệng. Chúng làm yếu cây bằng cách hút cạn nguồn dinh dưỡng và gây ảnh hưởng nghiêm trọng Trường đại học khoa học tự nhiên 3 Lớp cao học môi trường K19 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sỹ môi trường Vũ Thị Thanh cho sự phát triển của cây.

Chúng tiết ra chất đường mật không chỉ làm đóng khí khổng của lá mà còn góp phần tăng sự phát triển của mốc đen, làm ngăn cản ánh sáng đến các mô quang hợp, ảnh hưởng nghiêm trọng tới năng suất cây trồng. Thêm vào đó, các loài rệp còn là những phương tiện góp phần lây lan virus từ những cây bệnh sang các cây khỏe mạnh [27]. Rệp sinh sản bằng hai hình thức: đơn tính và hữu tính (là sự kết hợp giữa các cá thể khác nhau tạo ra trứng để tồn tại qua mùa đông). Tại vùng nhiệt đới, chu kỳ sinh trưởng của rệp muội rất ngắn từ 5-7 ngày [3].

Mỗi rệp cái đẻ trung bình 30-50 con, quá trình sinh con lặp đi lặp lại trong suốt mùa hè, sinh ra nhiều thế hệ. Trong điều kiện nhiệt độ 20-30oC một năm có thể tới 20-30 thế hệ. Tuy nhiên, vòng đời của rệp muội tương đối ngắn, phần lớn từ 15-20 ngày, cá biệt là 25-30 ngày. Các loài rệp muội có thể phát triển trong điều kiện nhiệt độ và độ ẩm khá rộng, có một số loài như rệp cải phát triển mạnh trong điều kiện nhiệt độ 10-30oC.

Rệp muội là những loài côn trùng có sức tàn phá khủng khiếp trên nhiều loại cây trồng khác nhau như ngô, khoai tây, khoai lang, các cây họ dưa (cucurbitaceae) (dưa chuột, dưa tây, dưa hấu, bầu bí), họ cà (solanaceae) (như ớt chuông, cà tím, thuốc lá, cà chua), cam quýt, bông vải, đào, mận, mơ, táo, bắp cải, cải xanh, rau bina, rau diếp, cà rốt và họ cà rốt. Chúng đã gây thiệt hại hàng tỷ đô la Mỹ mỗi năm do cây cho năng suất kém hoặc mất mùa. Mặt khác, thế giới mỗi năm cũng phải chi nhiều tỷ đô la Mỹ để khống chế rệp muội phá hại cây trồng. Rệp muội gây hại bốn mùa, đặc biệt từ mùa xuân đến mùa thu, nhất là vào thời điểm thời tiết râm mát, độ ẩm không khí cao.

Rệp ngô có tên khoa học là Aphis maydis, thuộc họ rệp muội, là một trong những loại sâu hại quan trọng đối với người trồng ngô. Rệp hút nhựa ở trên nõn ngô, bẹ lá, bông cờ, lá bi, làm cho cây ngô mất hết dinh dưỡng, trở nên gầy yếu, bắp bé đi hoặc không hình thành bắp nếu bị hại từ giai đoạn cây còn nhỏ, chất lượng hạt xấu kém. Rệp phá hại làm giảm năng suất và phẩm chất ngô rõ rệt. Ngoài cây ngô chúng còn có nhiều loại cây ký chủ khác như: kê, cao lương, mía, cỏ trồng làm thức Trường đại học khoa học tự nhiên 4 Lớp cao học môi trường K19 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sỹ môi trường Vũ Thị Thanh ăn cho gia súc… Mặt khác chúng còn là môi giới truyền virus gây một số bệnh cho cây bắp như potyvirus, virus màu vàng, bệnh vàng lùn, bệnh khảm lá, bệnh đỏ lá… [17].

Trong quần thể rệp thường thấy nhiều loại hình: Rệp cái không cánh, rệp cái có cánh và rệp con. Rệp trưởng thành có hai loại hình, rệp có cánh và rệp không cánh dài 1,5-2,3 mm, màu vàng nhạt hoặc xanh xám, cơ thể hình bầu dục, thân mềm. Chân và tuyến tiết sáp ngắn, màu xanh đen. Rệp cái có cánh có đầu, ngực màu đen và bụng màu xanh.

Rệp non màu xanh sáng, chân và tuyến tiết sáp giống như trưởng thành có màu đen (hình 1. Rệp non trải qua 7-10 lần lột xác mới thành rệp trưởng thành. Một năm có từ 7-10 lứa. Rệp ngô Aphis maydis Rệp ngô sinh sản theo lối đơn tính và đẻ con.

Chúng thường đẻ nhiều nhất ở nhiệt độ 30oC và đẻ ít nhất ở nhiệt độ 15oC [25]. Rệp ngô thường phát triển nhiều trong tháng 1 và tháng 2 lúc độ ẩm không khí cao. Từ tháng 4 trở đi số lượng rệp giảm dần. Trong mùa hè chỉ thấy rệp xuất hiện lẻ tẻ.

Rệp thường phá hại ở cây ngô từ giai đoạn 8-10 lá cho tới khi ngô chín sáp. Đến cuối vụ khi cây ngô đã già, không còn thức ăn nữa thì các con rệp có cánh di chuyển sang các cây ký chủ, đẻ ra rệp con không có cánh tiếp tục phát triển trên các cây ký chủ này cho tới vụ ngô sau. Tình hình rệp muội hại cây trồng trên thế giới và Việt Nam  Tình hình rệp muội hại cây trồng trên thế giới Trường đại học khoa học tự nhiên 5 Lớp cao học môi trường K19 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sỹ môi trường Vũ Thị Thanh Trên thế giới, rệp đang được coi là kẻ thù nguy hiểm đối với cây trồng. Rệp cây hại tại nhiều quốc gia và không cố định trong một vùng nhất định.

Những thiệt hại do rệp gây ra đang ngày càng nghiêm trọng và diễn ra trên diện rộng. Sản lượng nông nghiệp thế giới hàng năm bị thiệt hại khoảng 15% do côn trùng [33], ở Mỹ là 13% [59]. Mặc dù chưa có thống kê chính thức về thiệt hại nông nghiệp do rệp nhưng trong số 300 loài côn trùng gây hại nghiêm trọng [49] thì có đến 250 loài là rệp. Chúng là tác nhân chính gây hại ở nhiều loại cây trồng quan trọng như bông, đậu tương, hướng dương, củ cải đường, khoai tây, ngô, ngũ cốc và rau cải.

Theo nghiên cứu của các nhà côn trùng học Úc, ngành du lịch nước này đã thiệt hại 75 triệu USD/năm do nạn rệp hoành hành. Tình trạng nạn rệp lan tràn ở xứ sở này chỉ là một phần của đại dịch toàn cầu với số lượng rệp trên thế giới đã tăng lên gấp đôi mỗi năm. Các nhà côn trùng học cho biết, nguyên nhân là việc thay đổi biện pháp diệt côn trùng (không dùng thuốc xịt mà dùng mồi) và do sự gia tăng đáng kể lượng du khách đến từ các nước đang phát triển, nơi rệp vẫn còn đang hoành hành. Tại châu Á, rệp gây thiệt hại nghiêm trọng một số loại cây trồng, đặc biệt là dưa chuột, hại tiêu và cà chua.

Các rệp đào Myzus persicae thường phát triển nhanh trong mùa vụ và phát triển nhanh chóng đến tuổi trưởng thành nên tăng nhanh về số lượng. Ước tính thiệt hại hàng tỷ đô la Mỹ mỗi năm do nạn rệp hoành hành. Tại 3 tỉnh của Thái Lan, trong tháng 7/2009 nạn rầy nâu hại lúa, rệp hại cây trồng đã bùng phát mạnh và gây thiệt hại khoảng 7,5 ngàn ha mỗi vụ. Đậu tương là loại hạt dầu được trồng nhiều nhất trên thế giới, nhưng năng suất bị đe dọa nghiêm trọng bởi Aphis glycines (rệp đậu tương).

Sản lượng hạt bị thiệt hại ước tính khoảng 34% [65], theo tính toán của Catangui và cộng sự (2009), con số thiệt hại thậm chí lên đến 48-72%. Nguyên nhân do rệp chích hút có thể làm giảm 50% tốc độ quang hợp của lá cây [30]. Lipaphis erysimi (rệp cải dầu) ký sinh trên một số loài cây nhưng chủ yếu là các loại cải và cải dầu. Ngoài ra nó còn ký sinh trên cà chua và bí xanh.

Ở phía Trường đại học khoa học tự nhiên 6 Lớp cao học môi trường K19 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sỹ môi trường Vũ Thị Thanh đông của miền Trung Ấn Độ, Lipaphis erysimi cùng với Myzus persicae và Brevicoryne brassicae là ba loại rệp nguy hiểm đối với cây cải dầu (Brassica juncea). Trong đó Lipaphis erysimi phá hoại nhiều nhất, riêng nó gây thiệt hại 35,4- 91,3 % sản lượng [28]. Theo nghiên cứu của Patel và cộng sự (2004), nếu không có biện pháp bảo vệ, Lipaphis erysimi có thể gây thiệt hại 80,6-97,6% sản lượng cải dầu [57]. Trong một nghiên cứu khác, Razaq và cộng sự (2011) đã chỉ ra rằng, Lipaphis erysimi và Brevicoryne brassicae cũng gây thiệt hại 75,1-81,9% sản lượng cải dầu ở Multan, Punjab, Pakistan [64].

Ngoài cải dầu, Brassica brassicae còn phá hoại nhiều cây quan trọng khác như súp lơ, cà rốt và củ cải. Rệp làm giảm năng suất cây trồng không chỉ do phá hoại trực tiếp mà còn do truyền virus gây bệnh rụng lá ở đậu lăng, đậu răng ngựa, đậu gà [54]. Myzus persicae là loại nguy hiểm nhất trong 10 loại rệp truyển bệnh virus gây bệnh rụng lá ở khoai tây. Rệp truyền virus gây bệnh khảm có thể làm thiệt hại 60% năng suất dưa chuột [71].

Không những phá hoại rau và cây công nghiệp, rệp còn là côn trùng nguy hiểm đối với cây lương thực. Diuraphis noxia (rệp lúa mì Nga) chuyên phá hoại lúa mì, lúa mạch đen, lúa mạch trắng, yến mạch. Theo nghiên cứu của Akhtar và cộng sự (2010), năng suất lúa mì có thể bị giảm 7,9-34,2 % do Diuraphis noxia (rệp lúa mì Nga) phá hoại [21]. Như vậy với nguy cơ làm giảm năng suất cây trồng của rệp, yêu cầu phải có biện pháp kiểm soát rệp để bảo vệ mùa màng là cấp thiết.

Biện pháp kiếm soát rệp và các loại côn trùng khác được áp dụng chủ yếu trong nhiều thập kỷ qua là sử dụng hóa chất diệt côn trùng tổng hợp.

Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ