Luận văn nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch của chủng vi rút o fmd avac3 để sản xuất vắc xin vô hoạt phòng bệnh lở mồm long móng

Chuyên khảo phân tích Luận văn nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch của chủng vi rút o fmd avac3 để sản xuất vắc xin vô, đánh giá các khía cạnh quan trọng, đề xuất hướng nghiên cứu

• Tác giả: Nguyễn Thị Thuý Quỳnh
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Văn Giáp
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú Y
• Đề tài: Nghiên Cứu Đặc Tính Sinh Miễn Dịch Của Vi Rút Lở Mồm Long Móng Để Phát Triển Vắc Xin
• Loại tài liệu: luận văn
• Năm xuất bản: 2020
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 2. DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• 3. DANH MỤC BẢNG
• 4. DANH MỤC HÌNH, BIỂU ĐỒ
• 5. TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 6. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 7. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
• 8. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
• 8.1. Ý nghĩa khoa học
• 8.2. Ý nghĩa thực tiễn
• 9. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 9.1. LỊCH SỬ BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG
• 9.2. Tình hình bệnh lở mồm long móng trên thế giới

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Nghiên Cứu Virus LMLM và Phát Triển Vắc Xin

Bệnh lở mồm long móng (LMLM) là một bệnh truyền nhiễm cấp tính, có khả năng lây lan rất nhanh ở động vật móng guốc chẵn như trâu, bò, lợn, dê. Bệnh thường gây ra các đại dịch, gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi và ảnh hưởng đến kinh tế xã hội của nhiều quốc gia trên thế giới. Giải pháp hiệu quả nhất để kiểm soát bệnh truyền nhiễm là tạo miễn dịch cho quần thể vật nuôi bằng cách sử dụng vắc xin phòng bệnh LMLM. Hiện nay, Việt Nam vẫn chưa sản xuất thành công vắc xin LMLM ở quy mô thương mại, phụ thuộc vào nguồn vắc xin nhập khẩu. Do đó, việc nghiên cứu và phát triển vắc xin LMLM nội địa là vô cùng cấp thiết. Nghiên cứu này tập trung vào việc nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch của chủng virus LMLM để phát triển vắc xin hiệu quả.

1.1. Tầm quan trọng của việc nghiên cứu vắc xin LMLM

Việc nghiên cứu và phát triển vắc xin LMLM có ý nghĩa vô cùng quan trọng đối với ngành chăn nuôi Việt Nam. Vắc xin giúp tạo miễn dịch chủ động cho vật nuôi, giảm thiểu nguy cơ mắc bệnh và lây lan dịch bệnh. Việc chủ động sản xuất vắc xin trong nước giúp giảm sự phụ thuộc vào nguồn cung từ nước ngoài, đảm bảo nguồn cung ổn định và giá cả hợp lý. Ngoài ra, vắc xin nội địa có thể được điều chỉnh để phù hợp với các chủng virus LMLM đang lưu hành tại Việt Nam, từ đó nâng cao hiệu quả phòng bệnh. Phòng chống bệnh LMLM là yếu tố then chốt để phát triển chăn nuôi bền vững.

1.2. Các chủng virus LMLM phổ biến tại Việt Nam

Tại Việt Nam, hiện có 3 týp virus LMLM lưu hành là týp O, A và Asia 1. Các týp virus này có sự khác biệt về đặc tính kháng nguyên, đòi hỏi vắc xin phải có khả năng bảo vệ chống lại cả ba týp virus. Việc nghiên cứu và giám sát sự biến đổi của các chủng virus LMLM là rất quan trọng để cập nhật và cải tiến vắc xin, đảm bảo hiệu quả phòng bệnh. Các nghiên cứu về biến chủng virus LMLM giúp các nhà khoa học hiểu rõ hơn về sự tiến hóa của virus và dự đoán các chủng virus có thể xuất hiện trong tương lai.

II. Thách Thức Trong Phát Triển Vắc Xin LMLM Hiệu Quả Cao

Phát triển vắc xin LMLM hiệu quả là một thách thức lớn do sự đa dạng về kháng nguyên của virus, khả năng biến đổi nhanh chóng và sự tồn tại của nhiều týp virus khác nhau. Vắc xin cần phải có khả năng tạo ra đáp ứng miễn dịch mạnh mẽ và kéo dài, đồng thời phải an toàn và dễ sử dụng. Một trong những thách thức lớn nhất là làm sao để vắc xin có thể bảo vệ chống lại các chủng virus LMLM đang lưu hành trên thực địa, đặc biệt là các chủng virus mới xuất hiện do sự biến đổi của virus. Việc đánh giá đặc tính sinh miễn dịch của các chủng virus là rất quan trọng để lựa chọn chủng virus phù hợp cho sản xuất vắc xin.

2.1. Tính đa dạng kháng nguyên của virus LMLM

Virus LMLM có tính đa dạng kháng nguyên rất cao, với 7 týp huyết thanh khác nhau và nhiều biến thể trong mỗi týp. Điều này gây khó khăn cho việc phát triển vắc xin phổ rộng có thể bảo vệ chống lại tất cả các týp virus. Vắc xin thường chỉ có hiệu quả đối với các chủng virus có kháng nguyên tương đồng cao. Do đó, việc lựa chọn chủng virus phù hợp để sản xuất vắc xin là rất quan trọng. Tính đa dạng về kháng nguyên đòi hỏi các nhà khoa học phải liên tục nghiên cứu và cập nhật vắc xin để đối phó với các chủng virus mới.

2.2. Khả năng biến đổi gen của virus LMLM

Virus LMLM có khả năng biến đổi gen rất nhanh, dẫn đến sự xuất hiện của các chủng virus mới có khả năng kháng vắc xin. Điều này đòi hỏi vắc xin phải được cập nhật thường xuyên để đảm bảo hiệu quả phòng bệnh. Việc giám sát sự biến đổi của virus và đánh giá hiệu quả của vắc xin hiện có là rất quan trọng để đưa ra các biện pháp phòng chống dịch bệnh kịp thời. Đặc tính biến dị và tiến hóa của virus LMLM là một thách thức lớn đối với việc phát triển vắc xin hiệu quả.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Đặc Tính Sinh Miễn Dịch Virus LMLM

Nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch của virus LMLM là bước quan trọng để phát triển vắc xin hiệu quả. Các phương pháp nghiên cứu bao gồm nuôi cấy virus, xác định độc lực, đánh giá khả năng tạo kháng thể và bảo vệ của vắc xin. Các thí nghiệm trên động vật được sử dụng để đánh giá hiệu quả của vắc xin trong việc phòng ngừa bệnh LMLM. Kết quả nghiên cứu giúp lựa chọn chủng virus phù hợp để sản xuất vắc xin và tối ưu hóa quy trình sản xuất. Phương pháp nghiên cứu virus LMLM cần được thực hiện một cách cẩn thận và chính xác để đảm bảo tính tin cậy của kết quả.

3.1. Nuôi cấy và phân lập virus LMLM

Nuôi cấy và phân lập virus LMLM là bước đầu tiên trong quá trình nghiên cứu. Virus được nuôi cấy trong tế bào hoặc trên động vật thí nghiệm để thu được lượng virus đủ lớn cho các thí nghiệm tiếp theo. Quá trình phân lập giúp tách virus LMLM khỏi các tạp chất khác, đảm bảo tính thuần khiết của virus. Nuôi cấy virus LMLM đòi hỏi các điều kiện nghiêm ngặt để đảm bảo sự phát triển của virus và tránh nhiễm bẩn.

3.2. Đánh giá đáp ứng miễn dịch của vắc xin LMLM

Đánh giá đáp ứng miễn dịch của vắc xin LMLM là bước quan trọng để xác định hiệu quả của vắc xin. Các phương pháp đánh giá bao gồm đo nồng độ kháng thể trong máu, đánh giá khả năng trung hòa virus và đánh giá khả năng bảo vệ của vắc xin trên động vật thí nghiệm. Đánh giá đặc tính sinh miễn dịch giúp xác định liều lượng vắc xin phù hợp và thời gian bảo vệ của vắc xin.

3.3. Giải trình tự gen virus LMLM

Giải trình tự gen virus LMLM là phương pháp quan trọng để xác định chủng virus và theo dõi sự biến đổi của virus. Thông tin về trình tự gen giúp các nhà khoa học hiểu rõ hơn về cấu trúc và chức năng của virus, từ đó phát triển các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả hơn. Phương pháp giải trình tự gen VP1 được sử dụng để xác định chủng virus LMLM.

IV. Ứng Dụng Nghiên Cứu Phát Triển Vắc Xin LMLM Vô Hoạt

Nghiên cứu này tập trung vào phát triển vắc xin LMLM vô hoạt, một loại vắc xin an toàn và hiệu quả. Vắc xin vô hoạt được sản xuất bằng cách bất hoạt virus bằng hóa chất hoặc nhiệt, loại bỏ khả năng gây bệnh của virus nhưng vẫn giữ được khả năng kích thích hệ miễn dịch. Vắc xin vô hoạt có thể được sử dụng cho nhiều loại động vật khác nhau và có thể được bảo quản trong thời gian dài. Công nghệ sản xuất vắc xin LMLM vô hoạt ngày càng được cải tiến để nâng cao hiệu quả và giảm chi phí sản xuất.

4.1. Quy trình sản xuất vắc xin LMLM vô hoạt

Quy trình sản xuất vắc xin LMLM vô hoạt bao gồm các bước chính sau: nuôi cấy virus, bất hoạt virus, tinh chế virus, phối trộn với chất bổ trợ và đóng gói. Mỗi bước đều đòi hỏi các điều kiện nghiêm ngặt để đảm bảo chất lượng và an toàn của vắc xin. Quy trình sản xuất vắc xin LMLM cần được kiểm soát chặt chẽ để đảm bảo tính ổn định và hiệu quả của vắc xin.

4.2. Chất bổ trợ trong vắc xin LMLM

Chất bổ trợ là các chất được thêm vào vắc xin để tăng cường đáp ứng miễn dịch. Các chất bổ trợ thường được sử dụng trong vắc xin LMLM bao gồm keo phèn và nhũ dầu. Chất bổ trợ giúp kích thích hệ miễn dịch sản xuất nhiều kháng thể hơn và kéo dài thời gian bảo vệ của vắc xin. Ảnh hưởng của chất bổ trợ tới đáp ứng miễn dịch là một yếu tố quan trọng cần được xem xét khi phát triển vắc xin.

V. Kết Quả Nghiên Cứu Đánh Giá Hiệu Quả Vắc Xin LMLM O FMD Avac3

Nghiên cứu đã đánh giá hiệu quả của vắc xin LMLM O/FMD/Avac3 trên lợn. Kết quả cho thấy vắc xin có khả năng tạo ra đáp ứng miễn dịch mạnh mẽ và bảo vệ lợn khỏi bệnh LMLM. Vắc xin cũng có khả năng bảo vệ chéo chống lại các chủng virus LMLM khác nhau. Nghiên cứu này cung cấp bằng chứng khoa học về hiệu quả của vắc xin LMLM O/FMD/Avac3 và mở ra triển vọng sản xuất vắc xin LMLM nội địa hiệu quả. Hiệu quả vắc xin LMLM được đánh giá dựa trên nhiều tiêu chí khác nhau, bao gồm nồng độ kháng thể, khả năng trung hòa virus và khả năng bảo vệ trên động vật thí nghiệm.

5.1. Đáp ứng miễn dịch của lợn sau tiêm vắc xin

Sau khi tiêm vắc xin LMLM O/FMD/Avac3, lợn sản xuất kháng thể chống lại virus LMLM. Nồng độ kháng thể đạt đỉnh sau 2-3 tuần và duy trì ở mức cao trong thời gian dài. Kháng thể giúp bảo vệ lợn khỏi bệnh LMLM khi tiếp xúc với virus. Đáp ứng miễn dịch với virus LMLM là yếu tố quan trọng để đánh giá hiệu quả của vắc xin.

5.2. Khả năng bảo hộ chéo của vắc xin LMLM

Vắc xin LMLM O/FMD/Avac3 có khả năng bảo vệ chéo chống lại các chủng virus LMLM khác nhau, bao gồm cả các chủng virus đang lưu hành tại Việt Nam. Điều này cho thấy vắc xin có tiềm năng sử dụng rộng rãi trong công tác phòng chống dịch bệnh LMLM. Khả năng bảo hộ chéo đối với chủng virus thực địa là một ưu điểm quan trọng của vắc xin.

VI. Kết Luận và Hướng Phát Triển Vắc Xin LMLM Tương Lai

Nghiên cứu đã thành công trong việc đánh giá đặc tính sinh miễn dịch của chủng virus LMLM O/FMD/Avac3 và chứng minh hiệu quả của vắc xin LMLM sản xuất từ chủng virus này. Kết quả nghiên cứu mở ra triển vọng sản xuất vắc xin LMLM nội địa hiệu quả, góp phần vào công tác phòng chống dịch bệnh LMLM tại Việt Nam. Trong tương lai, cần tiếp tục nghiên cứu để cải tiến vắc xin, nâng cao hiệu quả bảo vệ và giảm chi phí sản xuất. Phát triển vắc xin LMLM là một quá trình liên tục, đòi hỏi sự nỗ lực của các nhà khoa học và sự đầu tư của nhà nước.

6.1. Đề xuất cải tiến vắc xin LMLM

Để cải tiến vắc xin LMLM, cần tập trung vào các hướng sau: sử dụng các chất bổ trợ mới để tăng cường đáp ứng miễn dịch, phát triển vắc xin đa giá có thể bảo vệ chống lại nhiều týp virus khác nhau, và sử dụng công nghệ sinh học để sản xuất vắc xin an toàn và hiệu quả hơn. Cải tiến vắc xin LMLM là một quá trình liên tục, đòi hỏi sự sáng tạo và đổi mới.

6.2. Hướng nghiên cứu vắc xin LMLM trong tương lai

Trong tương lai, cần tập trung vào các nghiên cứu về cơ chế miễn dịch của virus LMLM, phát triển các phương pháp chẩn đoán nhanh và chính xác, và nghiên cứu các biện pháp phòng chống dịch bệnh tổng hợp. Nghiên cứu virus học LMLM là nền tảng cho việc phát triển các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ THUÝ QUỲNH NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH SINH MIỄN DỊCH CỦA CHỦNG VI RÚT O/FMD/AVAC3 ĐỂ SẢN XUẤT VẮC XIN VÔ HOẠT PHÒNG BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ngành: Thú Y Mã số: 8 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: TS. Nguyễn Văn Giáp NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP – 2020 LỜI CAM ĐOAN Đây là một phần kết quả nghiên cứu của đề tài “Nghiên cứu, chế tạo vắc xin vô hoạt nhũ dầu, keo phèn phòng bệnh lở mồm long móng đa týp O và A cho gia súc” mã số SPQG.01 thuộc dự án Khoa Học Công Nghệ: “Công nghệ sản xuất vắc xin phòng bệnh lở mồm long móng cho gia súc”. Các số liệu được công bố trong luận văn được sự đồng ý của tổ chức chủ trì nhiệm vụ là công ty Cổ phần Phát triển Công nghệ Nông thôn, các kết quả thu được trung thực, khách quan và là thành quả của sự phối hợp với các đồng nghiệp trong suốt thời gian qua. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc.

Hà Nội, ngày …… tháng …. năm 2020 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thuý Quỳnh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Nhân dịp hoàn thành luận văn, tôi xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Văn Giáp đã hướng dẫn và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám Đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán bộ công nhân viên tại công ty Trách nhiệm hữu hạn Một thành viên Avac Việt Nam đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày …… tháng ….

năm 2020 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thuý Quỳnh ii MỤC LỤC Lời cam đoan. ii Mục lục. iii Danh mục chữ viết tắt. vi Danh mục bảng.

vii Danh mục hình, biểu đồ. viii Trích yếu luận văn. ix Thesis abstract. Tính cấp thiết của để tài.

Mục tiêu nghiên cứu. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài. Ý nghĩa khoa học. Ý nghĩa thực tiễn.

Tổng quan tài liệu. Lịch sử bệnh lở mồm long móng. Tình hình bệnh lở mồm long móng trên thế giới. Tình hình bệnh lở mồm long móng ở Việt Nam.

Hình thái, cấu trúc vi rút LMLM. Sức đề kháng của vi rút. Độc lực và loài vật cảm thụ. Một số đặc tính của vi rút LMLM.

Tính đa dạng về kháng nguyên. Đặc tính biến dị và tiến hóa. Nuôi cấy vi rút LMLM và gây nhiễm vi rút trên động vật. Đặc tính sinh miễn dịch.

Hiểu biết chung về vắc xin. Khái quát về vắc xin. Thành phần của vắc xin. Độ ổn định của kháng nguyên LMLM.

Các phương pháp đánh giá đáp ứng miễn dịch của động vật khi tiêm vắc xin LMLM. Tình hình phát triển vắc xin lmlm trên thế giới. Vắc xin LMLM vô hoạt. Một số thử nghiệm vắc xin mới.

Các vắc xin LMLM hiện hành. Đối tượng, nội dung và phương pháp nghiên cứu. Thời gian nghiên cứu. Địa điểm nghiên cứu.

Nguyên vật liệu, đối tượng sử dụng trong nghiên cứu. Chủng giống vi sinh, động vật thử nghiệm. Trang thiết bị, dụng cụ. Nội dung nghiên cứu.

Giám định đặc tính di truyền của vi rút vắc xin. Khả năng sản sinh đáp ứng miễn dịch của vắc xin LMLM chủng O3. Ảnh hưởng của chất bổ trợ tới đáp ứng miễn dịch. Khả năng bảo hộ chéo đối với chủng vi rút thực địa.

Độ dài miễn dịch tạo ra bởi vắc xin LMLM chủng O3. Phương pháp nghiên cứu. Phương pháp nuôi cấy tế bào và gây nhiễm vi rút. Phương pháp chuẩn độ vi rút và trung hòa vi rút trên tế bào.

Phương pháp cô đặc, vô hoạt, phối trộn với chất bổ trợ và kiểm tra vắc xin khi phối trộn. Phương pháp lựa chọn động vật thí nghiệm. Phương pháp xác định liều gây nhiễm và số lần tiêm vắc xin cho lợn. Phương pháp xác định hiệu giá kháng thể của lợn tiêm vắc xin keo phèn.

Phương pháp định lượng kháng thể bằng phương pháp LPB – ELISA (Liquid phase blocking ELISA). Phương pháp giải trình tự gen VP1. Xử lý số liệu. Kết quả và thảo luận.

Đặc tính di truyền của chủng giống. Khả năng sản sinh đáp ứng miễn dịch. Đáp ứng miễn dịch của lợn khi tiêm một mũi vắc xin. Đáp ứng miễn dịch của lợn sau tiêm hai mũi vắc xin.

Ảnh hưởng của chất bổ trợ tới đáp ứng miễn dịch. Khả năng bảo hộ chéo đối với chủng vi rút thực địa. Độ dài miễn dịch tạo ra bởi vắc xin lmlm chủng O3. Kết luận và đề nghị.

Tài liệu tham khảo. 64 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Mô tả đầy đủ BEI Binary ethylenimine BHK Baby hamster kidney CPE Cytopathic effect DMEM Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium DNA Deoxyribonucleic acid ELISA Enzyme- Linked ImmunoSorbent Assay FBS Fetal bovine serum FMDV Foot and Mouth disease virus FTM Fruid thioglycolate LMLM Lở mồm long móng LPB – ELISA Liquid phase blocking ELISA MOI Multiplicity of Infection OIE Office International des Epizooties OPD o-Phenylenediamine PBS Phosphate Buffered Saline RNA Ribonucleic acid RTD Công ty Cổ phần Phát triển Công nghệ Nông thôn SD Sabouraud dextrose agar TCID50 50% Tissue Culture Infective Dose TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam TMB Tetramethyl benzidine TSA Trypticase soy agar TSB Trypticase Soybean TV Trypsin versene VNT Virus Neutralization test XLD Xylose Lysine Deoxycholate vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2. Tình hình bệnh LMLM giai đoạn 2001 - 2005. Tình hình dịch LMLM từ năm 2015 – 2017.

Chỉ số tin cậy trong đánh giá hiệu quả vắc xin. Nguồn gốc các vi rút được chọn để đánh giá chọn giống. Đáp ứng miễn dịch của lợn sau khi tiêm 1 mũi vắc xin. Đáp ứng miễn dịch của lợn sau tiêm 2 mũi vắc xin.

Đáp ứng miễn dịch của lợn khi tiêm vắc xin LMLM vô hoạt keo phèn. Giá trị r1 của chủng vắc xin với chủng vi rút thuộc topotype ME-SA. Giá trị r1 của chủng vắc xin với các topotype O lưu hành ở Việt Nam. Độ dài miễn dịch ở lợn sau khi tiêm vắc xin LMLM bằng phương pháp trung hoà vi rút.

Độ dài miễn dịch ở lợn sau khi tiêm vắc xin LMLM bằng phương pháp LPB- ELSIA. 55 vii DANH MỤC HÌNH, BIỂU ĐỒ Hình 2. Bản đồ phân bố dịch LMLM của các nước thành viên OIE. Tổ chức bộ gen và cấu trúc của vi rút LMLM.

Cây phả hệ gen VP1 của chủng LMLM týp O lưu hành tại Việt Nam. So sánh khoảng cách di truyền của chủng O3. Mối liên hệ di truyền dựa vào gen VP1 của vi rút LMLM týp O. Kết quả phát hiện kháng thể trung hoà vi rút LMLM.

Biến động hiệu giá kháng thể ở lợn sau khi tiêm 1 mũi vắc xin. Biến động hiệu giá kháng thể ở lợn sau khi tiêm 2 mũi vắc xin. So sánh hiệu giá kháng thể ở lợn tại thời điểm D28 và D56. Biến động hiệu giá kháng thể ở lợn tiêm vắc xin vô hoạt keo phèn.

So sánh đáp ứng miễn dịch ở lợn tiêm vắc xin nhũ dầu và keo phèn bằng phản ứng trung hòa. Kết quả LPB-ELISA phát hiện kháng thể trung hòa ở lợn. So sánh đáp ứng miễn dịch ở lợn tiêm vắc xin nhũ dầu và keo phèn bằng phản ứng LPB-ELISA. Chỉ số tương đồng kháng nguyên giữa chủng vi rút vắc xin với các chủng vi rút trong cùng topotype ME-SA.

So sánh độ dài miễn dịch ở lợn sau tiêm vắc xin bằng phương pháp trung hòa vi rút và LPB-ELISA. 56 viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Thuý Quỳnh Tên luận văn: Nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch của chủng vi rút O/FMD/Avac3 để sản xuất vắc xin vô hoạt phòng bệnh lở mồm long móng Ngành: Thú y Mã số: 8 64 01 01 Tên cơ sở đào tạo: Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: Giám định đặc tính di truyền của chủng O/FMD/Avac3, đánh giá đáp ứng miễn dịch của lợn được tiêm vắc xin LMLM chủng O3 và ảnh hưởng của chất bổ trợ đến đáp ứng miễn dịch. Ngoài ra còn đánh giá mức tương đồng kháng nguyên của chủng vi rút O3 với các chủng vi rút thuộc cùng topotype ME-SA và các topotype O lưu hành ở Việt Nam. Phương pháp nghiên cứu: - Phương pháp nuôi cấy tế bào và gây nhiễm vi rút - Phương pháp chuẩn độ vi rút và trung hòa vi rút trên tế bào - Phương pháp cô đặc, vô hoạt, phối trộn với chất bổ trợ và kiểm tra vắc xin khi phối trộn - Phương pháp lựa chọn động vật thí nghiệm - Phương pháp xác định liều gây nhiễm và số lần tiêm vắc xin LMLM cho lợn - Phương pháp xác định hiệu giá kháng thể của lợn khi tiêm vắc xin LMLM vô hoạt với chất bổ trợ keo phèn - Phương pháp định lượng kháng thể bằng phương pháp LPB – ELISA (Liquid phase blocking ELISA) - Phương pháp giải trình tự gen VP1 - Xử lý số liệu Kết quả chính và kết luận: - Về đặc tính di truyền: chủng vi rút O3 thuộc topotype ME-SA và khác biệt về trình tự gen ở mức 0,036 đến 0,179 so với các chủng vi rút týp O lưu hành ở Việt Nam.

- Hàm lượng vi rút trong một liều vắc xin ở trong khoảng 6 - 7 - 7,5 log10 TCID 50 /ml ít ảnh hưởng tới đáp ứng miễn dịch. Đáp ứng miễn dịch kích thích sản sinh bởi vắc xin LMLM sản xuất từ chủng vi rút O3 phụ thuộc chủ yếu vào quy trình miễn ix dịch 2 lần. Chỉ bằng gây miễn dịch 2 lần mới tạo được đáp ứng miễn dịch ở ngưỡng bảo hộ.