Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất vắcxin cúm ah5n1 trên tế bào thận khỉ tiên phát ở quy mô phòng thí nghiệm

Luận văn nghiên cứu quy trình công nghệ sản xuất vắc xin cúm AH5N1 trên tế bào thận khỉ tiên phát, ứng dụng trong quy mô phòng thí nghiệm.

• Tác giả: Nguyễn Thu Vân
• Người hướng dẫn: GS. Hoàng Thủy Nguyên
• Trường học: Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Quy trình sản xuất vắc xin cúm AH5N1 trên tế bào thận khỉ tiên phát ở quy mô phòng thí nghiệm
• Loại tài liệu: báo cáo khoa học
• Năm xuất bản: 2007
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• Đặt vấn đề
• 1. Phần 1: Tổng quan
• 1.1. Đặc điểm chung của virót cúm
• 1.1.1. Cấu trúc virion
• 1.1.2. Cấu trúc hệ gen virót Cúm và các protein mã hóa
• 1.1.3. Sự tái tổ hợp của virót Cúm
• 1.1.4. Sự phát triển của virót trên tế bào
• 1.1.5. Đặc điểm dịch tễ học
• 1.2. Kỹ thuật di truyền ngược
• 1.3. Dự phòng
• 1.4. Một số quy trình sản xuất vắcxin Cúm
• 2. Phần 2: Vật liệu và phương pháp
• 2.1. Kháng nguyên chuẩn A/Vietnam/1203/2004 (H5N1)
• 2.2. Vật liệu và trang thiết bị khác
• 2.3. Phương pháp
• 2.3.1. Phương pháp tạo virut tái tổ hợp
• 2.3.2. Sản xuất chủng giống gốc và chủng sản xuất vắcxin H5N1
• 2.3.3. Thử nghiệm kiểm tra độc lực của WSV rgA/H5N1
• 2.3.4. Quy trình lựa chọn khỉ sạch
• 2.3.5. Quy trình sản xuất vắc xin Cúm H5N1 trên quy mô phòng thí nghiệm
• 2.3.6. Phương pháp định lượng HA trong vắcxin
• 2.3.7. Phương pháp sản xuất kháng huyết thanh khỉ kháng H5N1 sử dụng trong thử nghiệm SRID
• 2.3.8. Các thử nghiệm huyết thanh học
• 2.3.9. Các thử nghiệm xác định hiệu giá virót
• 2.3.10. Các thử nghiệm kiểm tra chất lượng
• 2.3.11. Đánh giá sự nhân lên của virót trong quá trình nuôi cấy
• 2.3.12. Đánh giá tính an toàn và đáp ứng miễn dịch trong thử nghiệm tiền lâm sàng
• 2.3.13. Phương pháp thích ứng chủng NIBRG-14 trên tế bào PMKc và Vero
• 2.3.14. Phương pháp thích ứng chủng rgA/H5N1 trên tế bào Vero
• 3. Phần 3: Kết quả
• 3.1. Thiết lập hệ chủng gốc và chủng sản xuất vắc xin Cúm rgA/H5N1 với đầy đủ các chỉ tiêu kỹ thuật theo quy định
• 3.2. Xây dựng quy trình công nghệ sản xuất vắc xin Cúm rgA/H5N1 trên tế bào PMKc
• 3.3. Kết quả sản xuất thử nghiệm vắc xin Cúm ở quy mô phòng thí nghiệm
• 3.4. Kiểm tra chất lượng và đánh giá đáp ứng miễn dịch của vắcxin Cúm rgA/H5N1 trên động vật thực nghiệm
• 3.5. Kết quả nghiên cứu thích ứng chủng NIBRG-14 trên dòng tế bào PMKc, Vero và rgA/H5N1 trên Vero
• 3.6. Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho vắcxin Cúm A/H5N1 về các mặt
• Kết luận
• Kiến nghị
• Tài liệu tham khảo

Tóm tắt

I. Quy trình sản xuất vắc xin cúm AH5N1

Quy trình sản xuất vắc xin cúm AH5N1 trên tế bào thận khỉ tiên phát được thực hiện trong phòng thí nghiệm với các bước cụ thể và chặt chẽ. Quy trình này bao gồm việc tạo chủng virus tái tổ hợp giảm độc lực, sử dụng kỹ thuật di truyền ngược để đảm bảo tính kháng nguyên của chủng gốc A/Vietnam/1194/2004. Các phương pháp kiểm tra chất lượng chủng được áp dụng theo tiêu chuẩn của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), đảm bảo an toàn và hiệu quả của vắc xin.

1.1. Tạo chủng virus tái tổ hợp

Chủng virus tái tổ hợp được tạo ra bằng kỹ thuật di truyền ngược, kết hợp gen HA và NA từ chủng A/Vietnam/1194/2004 với 6 gen còn lại từ chủng A/PR8/34. Quá trình này được thực hiện trên dòng tế bào PMKc, một dòng tế bào phổ biến trong sản xuất vắc xin. Chủng virus tái tổ hợp được kiểm tra độc lực và tính kháng nguyên trước khi sử dụng làm chủng gốc (MSV) và chủng sản xuất (WSV).

1.2. Sản xuất vắc xin trên tế bào thận khỉ

Quy trình sản xuất vắc xin trên tế bào thận khỉ tiên phát bao gồm các bước: gây nhiễm virus trên tế bào, nuôi cấy, gặt virus, bất hoạt bằng formalin, cô đặc và siêu lọc. Các bước này được thực hiện trong điều kiện phòng thí nghiệm với các thông số kỹ thuật chính xác, đảm bảo chất lượng và hiệu quả của vắc xin.

II. Công nghệ sản xuất vắc xin

Công nghệ sản xuất vắc xin cúm AH5N1 được phát triển dựa trên các phương pháp hiện đại, bao gồm kỹ thuật di truyền ngược và các phương pháp tinh chế kháng nguyên. Quy trình này đảm bảo tính ổn định và hiệu suất cao trong sản xuất vắc xin ở quy mô phòng thí nghiệm.

2.1. Kỹ thuật di truyền ngược

Kỹ thuật di truyền ngược được sử dụng để tạo ra chủng virus tái tổ hợp giảm độc lực, giữ nguyên tính kháng nguyên của chủng gốc. Phương pháp này cho phép sản xuất vắc xin an toàn và hiệu quả, đáp ứng các yêu cầu của WHO.

2.2. Tinh chế kháng nguyên

Các phương pháp tinh chế kháng nguyên hiện đại như siêu lọc, cô đặc và thẩm tách được áp dụng để sản xuất vắc xin. Các phương pháp này đảm bảo độ tinh khiết và hiệu quả của kháng nguyên, giúp vắc xin đạt chất lượng cao.

III. Đánh giá tính an toàn và hiệu quả

Nghiên cứu vắc xin cúm AH5N1 bao gồm các thử nghiệm đánh giá tính an toàn và hiệu quả trên động vật thực nghiệm. Các kết quả cho thấy vắc xin sản xuất được an toàn và có khả năng kích thích đáp ứng miễn dịch mạnh.

3.1. Thử nghiệm an toàn

Các thử nghiệm an toàn được thực hiện trên chuột lang, chuột nhắt và thỏ. Kết quả cho thấy vắc xin không gây tác dụng phụ nghiêm trọng và đáp ứng các tiêu chuẩn an toàn của WHO.

3.2. Đánh giá đáp ứng miễn dịch

Vắc xin được thử nghiệm trên gà và khỉ để đánh giá hiệu quả miễn dịch. Kết quả cho thấy vắc xin kích thích sản xuất kháng thể bảo vệ, đáp ứng yêu cầu về hiệu quả miễn dịch.

IV. Ứng dụng thực tiễn

Phát triển vắc xin cúm AH5N1 có ý nghĩa quan trọng trong phòng chống đại dịch. Vắc xin sản xuất được có khả năng ứng dụng rộng rãi trong thực tế, giúp giảm thiểu nguy cơ lây lan và tử vong do virus cúm AH5N1.

4.1. Phòng chống đại dịch

Vắc xin cúm AH5N1 là công cụ quan trọng trong phòng chống đại dịch, đặc biệt trong bối cảnh virus có khả năng lây truyền từ gia cầm sang người. Vắc xin giúp giảm thiểu nguy cơ bùng phát dịch và bảo vệ sức khỏe cộng đồng.

4.2. Triển vọng tương lai

Nghiên cứu này mở ra triển vọng phát triển các loại vắc xin khác dựa trên công nghệ tế bào thận khỉ tiên phát. Điều này có ý nghĩa lớn trong việc nâng cao năng lực sản xuất vắc xin trong nước và quốc tế.

Nội dung chính

This request was blocked by Gemini's filters. They can occasionally trigger by mistake on safe coding, security, or biology-related queries. Please try rephrasing your prompt. You can send feedback or read more about our policies here.

Trích đoạn nội dung tài liệu

BKHCN-BYT VVSDT T¦ BKHCN-BYT BKHCN-BYT vvsdt t− VVSDT T¦ Bé khoa häc c«ng nghÖ – Bé y tÕ ViÖn VÖ sinh DÞch tÔ trung −¬ng 1 Yersin, Hµ Néi b¸o c¸o tæng kÕt khoa häc vµ kü thuËt ®Ò tµi nghiªn cøu x©y dùng quy tr×nh c«ng nghÖ s¶n xuÊt v¾cxin cóm a/h5n1 trªn tÕ bµo thËn khØ tiªn ph¸t ë quy m« phßng thÝ nghiÖm m∙ sè : §T§L-2006/02G GS.NguyÔn THU V¢N 6374 14/5/2007 Hµ néi – 2007 B¶n quyÒn 2007 thuéc C«ng ty v¾cxin vµ sinh phÈm sè 1,ViÖn VSDTT¦ §¬n xin sao chÐp b¶n toµn bé hoÆc tõng phÇn tµi liÖu nµy ph¶i göi ®Õn Gi¸m ®èc C«ng ty v¾cxin vµ sinh phÈm sè 1 trõ tr−êng hîp sö dông víi môc ®Ých nghiªn cøu Bé khoa häc c«ng nghÖ – Bé y tÕ ViÖn VÖ sinh DÞch tÔ trung −¬ng 1 Yersin, Hµ Néi b¸o c¸o tæng kÕt khoa häc vµ kü thuËt ®Ò tµi nghiªn cøu x©y dùng quy tr×nh c«ng nghÖ s¶n xuÊt v¾cxin cóm a/h5n1 trªn tÕ bµo thËn khØ tiªn ph¸t ë quy m« phßng thÝ nghiÖm m∙ sè : §T§L-2006/02G GS.NguyÔn THU V¢N Hµ néi – 2007 B¶n th¶o viÕt xong th¸ng 3/2007 Tµi liÖu nµy ®−îc chuÈn bÞ trªn c¬ së kÕt qu¶ thùc hiÖn §Ò tµi cÊp Nhµ n−íc, m· sè §T§L-2006/02G ®Ò tµi nghiªn cøu khoa häc c«ng nghÖ nhµ n−íc §T§L-2006/02G nghiªn cøu x©y dùng quy tr×nh c«ng nghÖ s¶n xuÊt v¾cxin cóm a/h5n1 trªn tÕ bµo thËn khØ tiªn ph¸t ë quy m« phßng thÝ nghiÖm Cè vÊn khoa häc : GS.Hoµng Thñy Nguyªn Chñ nhiÖm ®Ò tµi : GS.TSKH NguyÔn Thu V©n C¸c c¸n bé tham gia TS.NguyÔn TuyÕt Nga Th¹c sü §inh Thóy V©n KS.TrÞnh TuÊn ViÖt CNSH.NguyÔn Kim Dung Th¹c sü §oµn V¨n L−u TS.§ç Thñy Ng©n Th¹c sü NguyÔn Thu H»ng CNSH.NguyÔn Hoµng Mai Th¹c sü NguyÔn BÝch Thñy TS.NguyÔn QuÕ Anh TS.Lª Quúnh Mai Th¹c sü NguyÔn Lª Kh¸nh H»ng C¬ quan thùc hiÖn : ViÖn VÖ sinh DÞch tÔ Trung −¬ng c¸c ch÷ viÕt t¾t ADN Desoxyribonucleic acid (axÝt desoxyribonucleic) ARN Ribonucleic acid (axÝt ribonucleic) BSA Bovine Serum Albumin CCID 50 Cell Culture Infectious Dose 50 (LiÒu g©y nhiÔm 50% tÕ bµo) CDC Centers for Disease Control and Prevention (Trung t©m kiÓm so¸t bÖnh tËt vµ dù phßng- Mü) CPE Cytopathic effect t¸c ®éng g©y hñyho¹i tÕ bµo dpi day post infection Ngµy sau g©y nhiÔm E.coli Escherichia coli ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay (thö nghiÖm miÔn dÞch g¾n enzym) EID50 Effective infectious dose 50 (LiÒu g©y nhiÔm hiÖu qu¶ 50%) ED50 Effective dose 50 (LiÒu g©y miÔn dÞch 50%) FDA Food and Drug Administration (C¬ quan qu¶n lý thùc phÈm vµ thuèc) HA Hemagglutination assay Thö nghiÖm ng−ng kÕt hång cÇu HAU HA unit §¬n vÞ HA HI Hemagglutination inhibition øc chÕ ng−ng kÕt hång cÇu IVPI Intravenous Pathogenicity Index ChØ sè ®é lùc tiªm tÜnh m¹ch kD kiloDalton mARN message ARN ARN th«ng tin MDCK Madin-Darby Canine Kidney MDHQ MiÔn dÞch huúnh quang MEM Minimum Essential Medium M«i tr−êng cÇn thiÕt tèi thiÓu ml mililit µg mcg MSV Master seed virus (Chñng gèc gièng) M.