Nghiên Cứu Đặc Điểm Sinh Học và Khả Năng Ứng Dụng của Chủng Vi Tảo Biển Schizochytrium mangrovei PQ6

Tài liệu nghiên cứu Luận văn nghiên cứu một số đặc điểm sinh học và khả năng ứng dụng của chủng vi tảo biển dị dưỡng, tổng hợp lý thuyết và thực hành, cung cấp kiến thức chuyên

• Tác giả: Hoàng Thị Lan Anh
• Người hướng dẫn: PGS. Đặng Diễm Hồng
• Trường học: Viện Công nghệ sinh học
• Chuyên ngành: Hóa sinh học
• Đề tài: Nghiên Cứu Đặc Điểm Sinh Học và Ứng Dụng của Schizochytrium mangrovei PQ6
• Loại tài liệu: luận án tiến sĩ
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Hà Nội

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Schizochytrium Mangrovei PQ6 Nghiên Cứu Mới

Công nghệ sinh học vi tảo đang trở thành một ngành công nghiệp tỷ đô, mở ra nhiều hướng nghiên cứu mới. Trong đó, việc sử dụng vi tảo để tăng cường giá trị dinh dưỡng cho thực phẩm và thức ăn chăn nuôi vẫn là lĩnh vực quan trọng. Schizochytrium là một chi vi tảo biển dị dưỡng, phân bố rộng rãi trong các hệ sinh thái biển và rừng ngập mặn. Chúng đóng vai trò là sinh vật phân hủy, mắt xích quan trọng trong chuỗi thức ăn. Vi tảo này có khả năng tích lũy hàm lượng lipit cao (lên đến 70% khối lượng khô) và các axít béo không bão hòa omega-3 (ω-3 PUFA), như EPA và DHA. Các ω-3 PUFA này có vai trò quan trọng đối với sự phát triển của trẻ em, sức khỏe tim mạch, hệ thần kinh và điều trị các bệnh ung thư, mất trí nhớ, trầm cảm. Hiện nay, Schizochytrium được xem là ứng cử viên tiềm năng thay thế nguồn sản xuất ω-3 PUFA từ dầu cá truyền thống.

1.1. Phân Loại và Đặc Điểm Sinh Học Chi Schizochytrium

Chi Schizochytrium thuộc ngành Labyrinthulomycota, có khả năng sinh trưởng dị dưỡng. Các tế bào có hình thái thay đổi trong chu trình sống, từ dạng hình cầu đến hình elip. Chúng có khả năng tổng hợp các axít béo omega-3 quan trọng như DHA. Theo Hoàng Thị Lan Anh (2014), Schizochytrium mangrovei PQ6 được phân lập từ rừng ngập mặn Việt Nam, thể hiện tiềm năng lớn trong sản xuất DHA. Nghiên cứu về đặc điểm sinh học của chi này giúp hiểu rõ hơn về khả năng ứng dụng của chúng trong nhiều lĩnh vực.

1.2. Vai Trò Sinh Thái và Ứng Dụng Tiềm Năng Của Schizochytrium

Schizochytrium đóng vai trò quan trọng trong hệ sinh thái biển và rừng ngập mặn, tham gia vào quá trình phân hủy chất hữu cơ. Khả năng tích lũy lipit và omega-3 PUFA cao mở ra nhiều ứng dụng tiềm năng. Chúng có thể được sử dụng làm nguồn thức ăn giàu dinh dưỡng cho nuôi trồng thủy sản, sản xuất thực phẩm chức năng và thậm chí là nhiên liệu sinh học. Việc nghiên cứu và khai thác Schizochytrium có thể mang lại lợi ích kinh tế và môi trường đáng kể.

II. Thách Thức và Cơ Hội Nghiên Cứu Schizochytrium Mangrovei PQ6

Mặc dù có nhiều tiềm năng, việc nghiên cứu và ứng dụng Schizochytrium vẫn còn đối mặt với nhiều thách thức. Cần tối ưu hóa quy trình nuôi cấy để tăng hiệu suất sản xuất sinh khối và hàm lượng omega-3 PUFA. Nghiên cứu về các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng và tích lũy lipit là rất quan trọng. Bên cạnh đó, cần đánh giá tính an toàn và hiệu quả của các sản phẩm từ Schizochytrium trước khi đưa ra thị trường. Tuy nhiên, những thách thức này cũng mở ra nhiều cơ hội nghiên cứu và phát triển, đặc biệt là trong bối cảnh nhu cầu về nguồn omega-3 bền vững ngày càng tăng.

2.1. Tối Ưu Hóa Quy Trình Nuôi Cấy Schizochytrium Để Sản Xuất DHA

Để sản xuất DHA hiệu quả từ Schizochytrium, cần tối ưu hóa các yếu tố như nguồn carbon, nguồn nitrogen, độ mặn, nhiệt độ và pH. Nghiên cứu của Hoàng Thị Lan Anh (2014) đã chỉ ra rằng Schizochytrium mangrovei PQ6 có khả năng sinh trưởng tốt trong môi trường giàu glucose và cao nấm men. Việc điều chỉnh các yếu tố này có thể giúp tăng sinh khối và hàm lượng DHA trong tế bào.

2.2. Đánh Giá Tính An Toàn và Hiệu Quả Sản Phẩm Từ Schizochytrium

Trước khi sử dụng Schizochytrium trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi, cần đánh giá kỹ lưỡng tính an toàn và hiệu quả của sản phẩm. Các nghiên cứu về độc tính cấp và bán trường diễn trên động vật thực nghiệm là cần thiết. Ngoài ra, cần chứng minh hiệu quả của sản phẩm trong việc cải thiện sức khỏe và năng suất. Nghiên cứu của Hoàng Thị Lan Anh (2014) đã bước đầu đánh giá tính an toàn của viên Algal Omega-3 từ Schizochytrium mangrovei PQ6 trên thỏ.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Đặc Điểm Sinh Học Schizochytrium PQ6

Nghiên cứu đặc điểm sinh học của Schizochytrium mangrovei PQ6 đòi hỏi sự kết hợp của nhiều phương pháp khác nhau. Các phương pháp phân lập và định danh chủng, chụp ảnh hình thái tế bào bằng kính hiển vi điện tử quét (SEM), phân tích sinh học phân tử (PCR, giải trình tự gen) và xác định các đặc điểm sinh lý, sinh hóa là rất quan trọng. Ngoài ra, cần phân tích hàm lượng lipit, thành phần và hàm lượng các axít béo trong sinh khối tảo. Các phương pháp này giúp hiểu rõ hơn về đặc điểm di truyền, hình thái và sinh lý của Schizochytrium mangrovei PQ6, từ đó có thể tối ưu hóa quy trình nuôi cấy và ứng dụng.

3.1. Phân Lập Định Danh và Phân Loại Chủng Schizochytrium

Quá trình phân lập Schizochytrium thường bắt đầu bằng việc thu thập mẫu từ các môi trường biển và rừng ngập mặn. Sau đó, các mẫu được nuôi cấy trên môi trường chọn lọc để phân lập các chủng Schizochytrium. Định danh chủng dựa trên các đặc điểm hình thái và sinh lý. Phân loại chủng có thể được thực hiện bằng các phương pháp sinh học phân tử, như phân tích trình tự gen 18S rRNA.

3.2. Nghiên Cứu Đặc Điểm Sinh Lý và Sinh Hóa Của Schizochytrium

Nghiên cứu đặc điểm sinh lý và sinh hóa của Schizochytrium bao gồm việc xác định ảnh hưởng của các yếu tố môi trường (nhiệt độ, độ mặn, pH, nguồn carbon, nguồn nitrogen) đến sinh trưởng và tích lũy lipit. Các thí nghiệm được thực hiện trong điều kiện kiểm soát để đánh giá khả năng thích nghi và sinh trưởng của chủng trong các môi trường khác nhau.

3.3. Phân Tích Thành Phần Lipit và Axít Béo Trong Sinh Khối Tảo

Phân tích thành phần lipit và axít béo trong sinh khối tảo là bước quan trọng để đánh giá tiềm năng sản xuất omega-3 PUFA của Schizochytrium. Các phương pháp như chiết xuất lipit, chuyển hóa thành FAME và phân tích bằng sắc ký khí (GC) được sử dụng để xác định hàm lượng và thành phần các axít béo.

IV. Ứng Dụng Thực Tiễn Schizochytrium Mangrovei PQ6 Thủy Sản

Sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6 có thể được sử dụng làm giàu luân trùng và Artemia, hai loại thức ăn quan trọng trong ương nuôi ấu trùng thủy sản. Việc bổ sung omega-3 PUFA vào thức ăn giúp cải thiện sức khỏe, tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng. Nghiên cứu của Hoàng Thị Lan Anh (2014) đã thử nghiệm sử dụng sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6 làm giàu Artemia cho ấu trùng cua xanh và cá Chẽm, cho thấy kết quả đầy hứa hẹn. Đây là một hướng đi tiềm năng để nâng cao hiệu quả nuôi trồng thủy sản.

4.1. Làm Giàu Luân Trùng và Artemia Bằng Sinh Khối Schizochytrium

Luân trùng và Artemia là những loại thức ăn sống quan trọng trong giai đoạn đầu của ương nuôi ấu trùng thủy sản. Việc làm giàu chúng bằng sinh khối Schizochytrium giúp tăng hàm lượng omega-3 PUFA, đặc biệt là DHA, trong cơ thể chúng. Điều này giúp cung cấp dinh dưỡng thiết yếu cho ấu trùng, cải thiện sức khỏe và tăng trưởng.

4.2. Thử Nghiệm Sử Dụng Artemia Làm Giàu Cho Ấu Trùng Cua Xanh

Nghiên cứu của Hoàng Thị Lan Anh (2014) đã thử nghiệm sử dụng Artemia làm giàu bằng sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6 làm thức ăn cho ấu trùng cua xanh. Kết quả cho thấy ấu trùng ăn Artemia làm giàu có tỷ lệ sống cao hơn và phát triển nhanh hơn so với ấu trùng ăn Artemia không làm giàu.

4.3. Thử Nghiệm Sử Dụng Artemia Làm Giàu Cho Ấu Trùng Cá Chẽm

Tương tự, nghiên cứu cũng thử nghiệm sử dụng Artemia làm giàu bằng sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6 làm thức ăn cho ấu trùng cá Chẽm. Kết quả cho thấy ấu trùng ăn Artemia làm giàu có tỷ lệ sống cao hơn và tăng trưởng tốt hơn so với ấu trùng ăn Artemia không làm giàu. Điều này cho thấy tiềm năng ứng dụng của Schizochytrium trong nuôi trồng cá Chẽm.

V. Sản Xuất Viên Uống Algal Omega 3 Từ Schizochytrium PQ6

Sinh khối khô của Schizochytrium mangrovei PQ6 có thể được sử dụng để sản xuất viên uống Algal Omega-3, một loại thực phẩm chức năng giàu DHA. Quy trình sản xuất bao gồm các bước như thu hoạch sinh khối, sấy khô, chiết xuất lipit, tinh chế và đóng viên. Viên uống Algal Omega-3 có thể được sử dụng để bổ sung DHA cho con người, đặc biệt là phụ nữ mang thai, trẻ em và người cao tuổi. Nghiên cứu của Hoàng Thị Lan Anh (2014) đã đánh giá tính an toàn và hiệu quả của viên Algal Omega-3 trên động vật thực nghiệm.

5.1. Quy Trình Sản Xuất Viên Uống Algal Omega 3 Từ Sinh Khối Tảo

Quy trình sản xuất viên uống Algal Omega-3 bao gồm nhiều bước, từ nuôi cấy và thu hoạch sinh khối tảo đến chiết xuất và tinh chế DHA. Các công nghệ hiện đại được sử dụng để đảm bảo chất lượng và độ tinh khiết của sản phẩm.

5.2. Đánh Giá Tính An Toàn và Hiệu Quả Của Viên Uống Algal Omega 3

Trước khi đưa ra thị trường, viên uống Algal Omega-3 cần được đánh giá kỹ lưỡng về tính an toàn và hiệu quả. Các nghiên cứu trên động vật thực nghiệm và thử nghiệm lâm sàng trên người được thực hiện để đảm bảo sản phẩm an toàn và mang lại lợi ích sức khỏe.

VI. Kết Luận và Hướng Nghiên Cứu Tiềm Năng Về Schizochytrium

Nghiên cứu về Schizochytrium mangrovei PQ6 đã mở ra nhiều hướng ứng dụng tiềm năng trong lĩnh vực nuôi trồng thủy sản và sản xuất thực phẩm chức năng. Tuy nhiên, vẫn còn nhiều vấn đề cần được nghiên cứu sâu hơn, như tối ưu hóa quy trình nuôi cấy, đánh giá toàn diện tính an toàn và hiệu quả của sản phẩm, và khám phá các ứng dụng mới. Việc tiếp tục đầu tư vào nghiên cứu Schizochytrium sẽ giúp khai thác tối đa tiềm năng của loại vi tảo này, mang lại lợi ích kinh tế và sức khỏe cho cộng đồng.

6.1. Tối Ưu Hóa Quy Trình Nuôi Cấy Để Tăng Hiệu Suất Sản Xuất

Nghiên cứu cần tập trung vào việc tối ưu hóa các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng và tích lũy lipit của Schizochytrium, như nguồn carbon, nguồn nitrogen, độ mặn, nhiệt độ và pH. Các phương pháp nuôi cấy tiên tiến, như nuôi cấy theo mẻ có bổ sung và nuôi cấy liên tục, cần được nghiên cứu và áp dụng.

6.2. Khám Phá Các Ứng Dụng Mới Của Schizochytrium Trong Tương Lai

Ngoài các ứng dụng hiện tại, Schizochytrium còn có tiềm năng được sử dụng trong nhiều lĩnh vực khác, như sản xuất nhiên liệu sinh học, mỹ phẩm và dược phẩm. Việc nghiên cứu và khám phá các ứng dụng mới sẽ giúp tăng giá trị kinh tế của Schizochytrium và đóng góp vào sự phát triển bền vững.

Trích đoạn nội dung tài liệu

MỞ ĐẦU Được coi là nền công nghiệp mang lại hàng tỷ đô la hàng năm, công nghệ sinh học vi tảo ngày càng mở ra nhiều lĩnh vực nghiên cứu mới. Mặc dù vậy, việc sử dụng vi tảo nhằm tăng cường giá trị dinh dưỡng của thực phẩm cho con người và thức ăn cho động vật vẫn là những lĩnh vực chiếm ưu thế, mang lại lợi nhuận cao và có một lịch sử phát triển tương đối lâu dài. Schizochytrium là một chi vi tảo biển dị dưỡng phân bố rộng rãi trong hệ sinh thái biển và rừng ngập mặn. Chúng đóng vai trò là những sinh vật phân huỷ, mắt xích đầu tiên trong chuỗi thức ăn ở những hệ sinh thái nói trên.

Loại vi tảo này có khả năng tích lũy hàm lượng cao lipit (có thể lên tới 70% khối lượng khô) và các axít béo không bão hoà thuộc nhóm omega-3 (-3 PUFA) như axít eicosapentaenoic (EPA, C20: 5-3), axít docosahexaenoic (DHA, C22: 6-3). Những tác động tích cực cũng như tầm quan trọng của các -3 PUFA này đã được chứng minh ở nhiều khía cạnh như sự phát triển toàn diện của trẻ nhỏ, sức khỏe đối với hệ tim mạch, hệ thần kinh, và trong nhiều liệu pháp điều trị các bệnh ung thư, mất trí nhớ, trầm cảm…. Hiện nay, loại vi tảo này được coi là ứng cử viên tiềm năng thay thế nguồn sản xuất -3 PUFA truyền thống từ dầu cá. Việc nuôi cấy chúng có thể được thực hiện ở quy mô lớn bằng những hệ thống lên men thông thường với hiệu quả cao.

Nhiều sản phẩm có nguồn gốc từ loại vi tảo này dành cho con người, và động vật đã có mặt trên thị trường quốc tế và dần trở nên quen thuộc với người tiêu dùng ở khắp nơi trên thế giới. Việt Nam đang sở hữu một khu hệ động thực vật biển rất đa dạng về thành phần loài/chủng và giàu các hợp chất tự nhiên có thể dùng trong công nghiệp, thực phẩm, nông nghiệp, y dược trong đó có vi tảo. Vi tảo biển quang tự dưỡng là một trong những đối tượng truyền thống đã được các nhà nghiên cứu trong nước quan tâm cho nhiều mục đích khác nhau trong đó có nuôi trồng thuỷ sản (Nannochloropsis, Isochrysis, Chaetoceros…). Tuy nhiên, những nghiên cứu nhằm khai thác và ứng dụng các chi vi tảo biển dị dưỡng, đặc biệt là chi Schizochytrium vẫn còn là rất mới, hứa hẹn sẽ mang đến nhiều lợi ích thực tiễn cho đời sống con 2 người.

Chính vì vậy, chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học và khả năng ứng dụng của chủng vi tảo biển dị dưỡng Schizochytrium mangrovei PQ6”. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU  Có được bộ sưu tập chủng vi tảo biển dị dưỡng thuộc chi Schizochytrium phân lập từ một số vùng biển, vùng rừng ngập mặn của Việt Nam và sàng lọc các chủng tiềm năng cho việc sản xuất -3 PUFA.  Lựa chọn được một chủng tiềm năng để nuôi thu sinh khối tạo viên thực phẩm chức năng và thử nghiệm trên một số đối tượng thuỷ hải sản. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU  Phân lập các chủng Schizochytrium spp.

từ các mẫu lá cây thu thập ở ven bờ biển, vùng rừng ngập mặn ở Việt Nam;  Nghiên cứu đặc điểm sinh học cơ bản của một số chủng tiềm năng đã phân lập;  Nuôi trồng Schizochytrium mangrovei PQ6 trong các hệ thống lên men khác nhau (5, 10 và 30 lít);  Sản xuất viên Algal Omega- 3 từ sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6, đánh giá tính an toàn và hiệu lực của chế phẩm này trên động vật thực nghiệm;  Sử dụng sinh khối Schizochytrium mangrovei PQ6 làm giàu Artemia và luân trùng (Brachionus plicatilis) để ương nuôi ấu trùng cua xanh (Scylla serrate Forskal, 1775) và cá Chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790). Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA LUẬN ÁN  Bổ sung thêm chi vi tảo biển dị dưỡng Schizochytrium mới vào danh sách các chi vi tảo biển có nguồn gốc từ Việt Nam;  Có được những dẫn liệu khoa học về các đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa của một số loài/chủng tiềm năng thuộc chi Schizochytrium đã được phân lập;  Chứng minh được khả năng ứng dụng chủng vi tảo Schizochytrium mangrovei PQ6 trong lĩnh vực sản xuất thực phẩm chức năng và nuôi trồng thủy sản. TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1. Hệ thống phân loại, các kĩ thuật phân lập và định tên chi Schizochytrium 1.

Hệ thống phân loại Trong những nghiên cứu trước đây, chi Schizochytrium được xếp vào bộ Saprolegniales thuộc ngành Oomycota do có nhiều nét tương đồng với nấm động bào tử. Tuy nhiên, ngày nay với những bằng chứng về siêu cấu trúc và trình tự nucleotit của đoạn gen 18S rRNA thu được, các nhà khoa học đã xếp chúng vào một giới riêng - giới Chromista. Chi Schizochytrium được xếp vào ngành Labyrinthulomycota, lớp Labyrinthulea, bộ Labyrinthulida, họ Thraustochytriidae (Porter, 1990; Cavalier- Smith, 1998). Sơ đồ phân loại chi Schizochytrium được chỉ ra trên hình 1.

Ngành Labyrinthulomycota Lớp Labyrinthulea Bộ Họ Chi Labyrinthulida Labyrinthulidae Labyrinthula L Thraustochytrium Thraustochytriidae Schizochytrium Ukenia Labyrinthuloides … Hình 1. Vị trí phân loại chi Schizochytrium (Porter, 1990) Chi Schizochytrium được đặc trưng bởi tế bào hình cầu, mạng lưới ngoại chất rất phát triển, khuẩn lạc sinh dưỡng lớn, động bào tử có dạng ovan hoặc dạng trứng, sinh trưởng bằng hình thức tế bào sinh dưỡng phân đôi liên tiếp tạo thành 4, 8 hoặc một cụm tế bào (có thể lên tới 100 tế bào). Cũng như nhiều chi thuộc ngành Heterokontophyta, trong chu trình sống của tế bào có giai đoạn hình thành động bào 4 tử có hai roi lệch.2 là hình mô tả chu trình sống của một số chi đại diện (Porter, 1990). Chu trình sống của các chi đại diện thuộc ngành Labyrinthulomycota (Porter, 1990) Chú thích: chi Schizochytrium: tế bào non với mạng lưới ngoại chất (a) phân chia liên tiếp tạo thành 4 tế bào (b) và tạo thành một khối các tế bào (c); Mỗi tế bào phát triển thành túi động bào tử (d) và giải phóng động bào tử (e), động bào tử biệt hóa thành tế bào non.

Thành tế bào có chứa sulphate polysacharide với thành phần chủ yếu là galactose hoặc fructose và protein (Chamberlain, 1980). Hệ thống mạng lưới ngoại chất (EN) được sinh ra từ một hoặc nhiều điểm trên thành tế bào. EN hình thành nên một mạng lưới nhánh của màng sinh chất kéo dài, liên quan đến một bào quan gọi là bothrosome hoặc sagenogenetosome (sagenogen) ở phía bề mặt ngoài tế bào (Porter, 1990). EN góp phần làm tăng vùng bề mặt tế bào, có chứa enzyme thủy 5 phân gắn trên bề mặt hoặc nằm chìm trong môi trường xung quanh đã giúp cho việc tiêu hóa dễ dàng các vật liệu hữu cơ.

EN cũng gắn tế bào với môi trường và tiến hành phân hủy các cơ chất hữu cơ. Tế bào hầu như không sản xuất EN khi phát triển trên môi trường lỏng giàu dinh dưỡng, đặc biệt là trong điều kiện nuôi lắc (Raghukumar, 2008). Hiện có 5 loài thuộc chi Schizochytrium đã được mô tả bao gồm S. aggretatum Goldstein & Belsky, S.

minutum Gaertner và S. limacinum Honda & Yokochi (Raghukumar, 1988; Honda và cs, 1998). Trong cả một thời gian dài sự phân loại của chi Schizochytrium nói riêng và lớp Labyrinthulea nói chung chỉ dựa vào duy nhất các đặc điểm hình thái và hình thức giải phóng động bào tử. Khóa phân loại chi tiết của các họ và chi thuộc lớp Labyrinthulea dựa trên các đặc điểm hình thái (hình dạng tế bào, mạng lưới ngoại chất, tế bào amip), sự hình thành động bào tử và tổng hợp sắc tố (chủ yếu là beta-caroten) đã được Yokoyama và cộng sự đưa ra năm 2007 (Yokohama và cs.

Ngày nay, các công cụ sinh học phân tử hiện đại đã hỗ trợ đắc lực trong việc phân loại chính xác hơn các loài thuộc các chi khác nhau. Mặc dù còn là lĩnh vực khá non trẻ, hệ gen của các sinh vật đơn bào ở biển giúp chúng ta hiểu biết nhiều hơn về sinh vật nhân chuẩn (Worden & Allen, 2010). Hệ gen này có thể là những công cụ vô giá cho việc khai thác mối quan hệ tiến hóa, chức năng gen, trao đổi chất và sự phát triển của các đặc điểm phức tạp giữa các nhóm vi sinh vật (McGrath & Katz, 2004) và sẽ tiếp tục làm sáng tỏ những điểm còn đang tranh cãi. Nhìn chung, các sinh vật biển đơn bào có độ đa dạng cao do chúng là kết quả của các hiện tượng nội cộng sinh khác nhau diễn ra từ xa xưa (Worden & Allen, 2010).

Yokoyama và cộng sự đã đề xuất bổ sung thêm 5 chi mới nâng tổng số lên 12 chi thuộc họ Thraustochytriidae (Yokoyama & Honda, 2007; Yokoyama và cs, 2007). Điều này dẫn đến sự sắp xếp lại một số loài trong đó có 4 loài thuộc chi Schizochytrium (bảng 1. Tuy nhiên, đây vẫn còn là vấn đề đang gây tranh cãi đối với các nhà khoa học. Những thay đổi trong việc phân loại một số loài thuộc chi Schizochytrium (Jones & Pang, 2012) Chi Tên mới Tên gốc Oblongichytrium minutum Schizochytrium minutum (A.

Oblongichytrium Oblongichytrium octosporum Schizochytrium octosporum (Raghuk. Honda và Schizochytrium limacinum Yokochi) R. Honda và Yokochi Aurantiochytrium Aurantiochytrium mangrovei Schizochytrium mangrovei (Raghuk. Kĩ thuật phân lập và định tên 1.

Kĩ thuật phân lập Phương pháp dùng mồi là phấn thông (pine pollen baiting) và trải trực tiếp trên đĩa (direct plating) là phương pháp hiệu quả, được sử dụng để phân lập các loài thuộc họ Thraustochytriidae nói chung và chi Schizochytrium nói riêng (Bremer, 2000; Burja và cs, 2006; Jakobsen và cs, 2007). Các hạt phấn thông được khử trùng được rải trên bề mặt mẫu nước biển có chứa kháng sinh, chất kháng nấm và được ủ 1–2 tuần. Khi quan sát thấy các tế bào phát triển trên bề mặt phấn thông, chúng sẽ được trải trên đĩa thạch để thu nhận các khuẩn lạc đặc trưng trước khi đưa vào môi trường lỏng nuôi cấy nhằm thu chủng sạch (Wilkens & Maas, 2012). Nhiệt độ có thể ảnh hưởng lên quá trình phân lập thành công hay không vì khi tiến hành phân lập ở 18-30oC cũng là nhiệt độ thích hợp cho sự phát triển của cả các vi sinh vật tạp nhiễm như nấm và vi khuẩn.

Các chất kháng sinh như penicillin và streptomycin (Burja và cs, 2006; Quilodran và cs, 2010), rifampicin và các thuốc kháng nấm như nystatin (Jakobsen và cs, 2007; Wilkens & Maas, 2012) và amphotericin B (Taoka và cs, 2010) đã được bổ sung vào môi trường thạch và lỏng để hạn chế sự sinh trưởng của vi khuẩn và các khuẩn lạc sợi nấm. Các kĩ thuật định tên * Kĩ thuật hóa sinh Kĩ thuật nhuộm huỳnh quang đã được phát triển nhằm xác định số lượng tế bào nhờ phản ứng giữa fluorochrome (acriflavine), thành tế bào và nhân. Khi đó, thành tế bào bắt màu đỏ, nhân bắt màu xanh.