Luận văn thạc sĩ vnua nghiên cứu bệnh thối gốc rễ phytophthora sp và bệnh đốm nâu alternaria sp cây chanh leo tại một số tỉnh tây nguyên miền trung và miền bắc

Nghiên cứu bệnh thối gốc rễ Phytophthora sp và bệnh đốm nâu Alternaria sp trên cây chanh leo tại Tây Nguyên, miền Trung và miền Bắc.

• Tác giả: Nguyễn Xuân Vân
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Đức Huy
• Trường học: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Bảo Vệ Thực Vật
• Đề tài: Nghiên cứu bệnh thối gốc rễ (Phytophthora sp.) và bệnh đốm nâu (Alternaria sp.) cây chanh leo tại một số tỉnh Tây Nguyên, Miền Trung và Miền Bắc
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 1.1. Danh mục chữ viết tắt
• 1.2. Danh mục bảng
• 1.3. Danh mục hình
• 1.4. Danh mục đồ thị
• 1.5. Trích yếu luận văn
• 1.6. Tính cấp thiết của đề tài
• 1.7. Mục đích và yêu cầu của đề tài
• 1.8. Tổng quan tài liệu nghiên cứu
• 1.8.1. Tình hình nghiên cứu ngoài nước
• 1.8.2. Giới thiệu sơ lược về cây chanh leo
• 1.8.3. Nghiên cứu về bệnh hại cây chanh leo
• 1.8.3.1. Tình hình nghiên cứu trong nước
• 1.8.3.2. Bệnh đốm nâu do Alternaria
• 1.8.3.3. Bệnh do Phytophthora
• 1.8.3.4. Nghiên cứu về các biện pháp sinh học trong phòng trừ Phytophthora
• 1.9. Đối tượng, vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 1.9.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 1.9.1.1. Đối tượng nghiên cứu
• 1.9.1.2. Vật liệu và dụng cụ nghiên cứu
• 1.9.1.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 1.9.2. Nội dung nghiên cứu
• 1.9.3. Phương pháp nghiên cứu
• 1.9.3.1. Phương pháp điều tra mức độ và diễn biến bệnh ngoài đồng ruộng
• 1.9.3.2. Phương pháp chẩn đoán bệnh
• 1.9.3.3. Phương pháp thu thập mẫu
• 1.9.3.4. Phương pháp nghiên cứu trong phòng thí nghiệm
• 1.9.3.4.1. Phương pháp phân lập Phytophthora sp. gây bệnh thối gốc rễ cây chanh leo
• 1.9.3.4.2. Xác định nấm gây bệnh tàn lụi bằng kĩ thuật PCR, giải trình tự vùng ITS của nấm và phân tích trình tự
• 1.9.3.4.3. Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh học của Phytophthora nicotinanae
• 1.9.3.4.4. Phương pháp kích thích sinh bọc bào tử
• 1.9.3.4.5. Phương pháp lây bệnh nhân tạo
• 1.9.3.4.6. Phương pháp khảo sát hiệu lực của chế phẩm sinh học
• 1.9.4. Chỉ tiêu theo dõi, đánh giá và xử lý số liệu
• 1.10. Kết quả nghiên cứu
• 1.10.1. Kết quả điều tra thành phần bệnh, hiện trạng và diễn biến bệnh thối gốc rễ, đốm nâu lá chanh leo tại vùng Tây Nguyên, miền Trung và miền Bắc
• 1.10.1.1. Kết quả điều tra thành phần bệnh và diễn biến bệnh hại chanh leo tại vùng Tây Nguyên
• 1.10.1.2. Kết quả điều tra thành phần bệnh và diễn biến bệnh hại chanh leo tại các tỉnh miền Bắc
• 1.10.1.3. Diễn biến bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Gia Lai và Sơn La
• 1.10.1.3.1. Tình hình bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Gia Lai
• 1.10.1.3.2. Tình hình bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Sơn La
• 1.10.1.4. Tình hình bệnh đốm nâu lá chanh leo tại các tỉnh Tây Nguyên
• 1.10.2. Kết quả phân thu thập và giám định Phytophthora sp.
• 1.10.2.1. Kết quả thu thập mẫu bệnh
• 1.10.2.2. Kết quả xác định nấm gây bệnh bằng kỹ thuật PCR và giải trình tự gene vùng ITS của nấm gây bệnh
• 1.10.2.3. Kết quả lây bệnh nhân tạo Phytophthora nicotianae gây bệnh trên chanh leo trong điều kiện invitro
• 1.10.2.4. Nghiên cứu đặc điểm hình thái và sinh học của Phytophthora nicotianae
• 1.10.2.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, pH và môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae
• 1.10.3. Thử nghiệm hiệu lực ức chế của nấm, vi khuẩn đối kháng và thuốc đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae
• 1.10.3.1. Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng Bacillus velezensis đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae
• 1.10.3.2. Hiệu lực ức chế của nấm đối kháng Tricoderma asperellum đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae
• 1.10.3.3. Thử nghiệm phòng trừ Phytophthora nicotianae bằng biện pháp hóa học
• 1.10.3.4. Thử nghiệm phòng chống Phytophthora nicotianae gây bệnh thối gốc rễ chanh leo
• 1.10.3.5. Hiệu lực ức chế của sản phẩm KR833 chiết tách từ xạ khuẩn Streptomyces đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae
• 1.11. Kết luận và kiến nghị
• Tài liệu tham khảo

Tóm tắt

I. Tổng quan về bệnh thối gốc rễ và đốm nâu trên cây chanh leo

Cây chanh leo (Passiflora edulis) là một trong những loại cây trồng có giá trị kinh tế cao tại Việt Nam, đặc biệt ở các tỉnh Tây Nguyên và miền Bắc. Tuy nhiên, cây chanh leo thường bị ảnh hưởng bởi nhiều loại bệnh, trong đó bệnh thối gốc rễ do Phytophthora sp. và bệnh đốm nâu do Alternaria sp. là hai bệnh phổ biến nhất. Những bệnh này không chỉ làm giảm năng suất mà còn ảnh hưởng đến chất lượng quả, gây thiệt hại lớn cho nông dân. Việc nghiên cứu và tìm ra các biện pháp phòng trừ hiệu quả là rất cần thiết để bảo vệ cây chanh leo.

1.1. Đặc điểm sinh học của cây chanh leo và bệnh hại

Cây chanh leo có đặc điểm sinh học đặc trưng, bao gồm khả năng sinh trưởng nhanh và thích nghi tốt với điều kiện khí hậu Việt Nam. Tuy nhiên, cây cũng dễ bị tấn công bởi các loại nấm gây bệnh. Bệnh thối gốc rễ thường phát triển mạnh trong điều kiện ẩm ướt, trong khi bệnh đốm nâu lại xuất hiện khi thời tiết ẩm ướt và có mưa. Việc hiểu rõ đặc điểm sinh học của cây và bệnh hại sẽ giúp nông dân có biện pháp phòng trừ hiệu quả hơn.

1.2. Tình hình nghiên cứu bệnh hại cây chanh leo tại Việt Nam

Nghiên cứu về bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu trên cây chanh leo đã được thực hiện ở nhiều tỉnh thành, đặc biệt là Tây Nguyên và miền Bắc. Các nghiên cứu cho thấy tỷ lệ nhiễm bệnh có thể lên đến 70% trong một số vụ mùa. Việc xác định chính xác tác nhân gây bệnh và các biện pháp phòng trừ là rất quan trọng để bảo vệ cây trồng và nâng cao năng suất.

II. Vấn đề và thách thức trong việc phòng trừ bệnh hại cây chanh leo

Mặc dù có nhiều nghiên cứu về bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu, nhưng việc phòng trừ vẫn gặp nhiều khó khăn. Các yếu tố như khí hậu, độ ẩm và sự phát triển của nấm bệnh đều ảnh hưởng đến hiệu quả của các biện pháp phòng trừ. Nông dân thường gặp khó khăn trong việc nhận diện bệnh và áp dụng các biện pháp phòng trừ kịp thời. Điều này dẫn đến thiệt hại lớn về kinh tế cho người trồng chanh leo.

2.1. Khó khăn trong việc nhận diện bệnh

Việc nhận diện sớm các triệu chứng của bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu là rất quan trọng. Tuy nhiên, nhiều nông dân chưa có đủ kiến thức để phân biệt các triệu chứng bệnh, dẫn đến việc không phát hiện kịp thời. Điều này làm cho bệnh phát triển mạnh và gây thiệt hại lớn cho cây trồng.

2.2. Thiếu biện pháp phòng trừ hiệu quả

Mặc dù có nhiều loại thuốc bảo vệ thực vật có thể sử dụng để phòng trừ bệnh, nhưng việc lạm dụng thuốc có thể dẫn đến tình trạng kháng thuốc. Hơn nữa, không phải tất cả các biện pháp sinh học đều được áp dụng rộng rãi, dẫn đến hiệu quả phòng trừ không cao. Cần có các nghiên cứu sâu hơn để tìm ra các biện pháp phòng trừ hiệu quả và bền vững.

III. Phương pháp nghiên cứu và giải pháp phòng trừ bệnh hại

Để nghiên cứu và phòng trừ bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu, nhiều phương pháp đã được áp dụng. Các nghiên cứu hiện tại tập trung vào việc xác định tác nhân gây bệnh, đặc điểm sinh học của nấm và thử nghiệm các biện pháp phòng trừ sinh học và hóa học. Việc áp dụng các biện pháp này một cách đồng bộ sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng trừ.

3.1. Phương pháp điều tra và thu thập mẫu bệnh

Phương pháp điều tra hiện trạng bệnh hại được thực hiện theo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia. Việc thu thập mẫu bệnh từ các vùng trồng chanh leo giúp xác định chính xác tác nhân gây bệnh. Các mẫu bệnh được phân lập và nuôi cấy trong điều kiện phòng thí nghiệm để nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm.

3.2. Thử nghiệm các biện pháp phòng trừ

Các biện pháp phòng trừ bao gồm sử dụng thuốc bảo vệ thực vật, nấm đối kháng và vi khuẩn đối kháng. Nghiên cứu cho thấy vi khuẩn Bacillus velezensis và nấm Trichoderma asperellum có hiệu quả cao trong việc ức chế sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Việc áp dụng các biện pháp này cần được thực hiện đúng thời điểm để đạt hiệu quả cao nhất.

IV. Ứng dụng thực tiễn và kết quả nghiên cứu

Kết quả nghiên cứu cho thấy rằng việc áp dụng các biện pháp phòng trừ hiệu quả có thể giảm thiểu thiệt hại do bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu gây ra. Các thử nghiệm cho thấy rằng việc sử dụng nấm đối kháng và vi khuẩn đối kháng có thể đạt hiệu quả phòng trừ lên đến 73%. Điều này mở ra hướng đi mới cho việc bảo vệ cây chanh leo một cách bền vững.

4.1. Kết quả điều tra thành phần bệnh

Kết quả điều tra cho thấy tỷ lệ nhiễm bệnh thối gốc rễ và đốm nâu ở các tỉnh Tây Nguyên và miền Bắc có sự khác biệt rõ rệt. Tại Gia Lai, tỷ lệ nhiễm bệnh có thể lên đến 50%, trong khi ở Sơn La, tỷ lệ này chỉ khoảng 10%. Việc nắm rõ tình hình bệnh hại sẽ giúp nông dân có biện pháp phòng trừ kịp thời.

4.2. Ứng dụng các biện pháp sinh học trong phòng trừ

Việc ứng dụng các biện pháp sinh học như sử dụng Bacillus velezensis và Trichoderma asperellum đã cho thấy hiệu quả cao trong việc phòng trừ bệnh. Các nghiên cứu cho thấy rằng việc xử lý nấm đối kháng trước khi bệnh xuất hiện sẽ mang lại hiệu quả cao hơn so với xử lý khi bệnh đã xuất hiện.

V. Kết luận và tương lai của nghiên cứu bệnh hại cây chanh leo

Nghiên cứu về bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu trên cây chanh leo là rất cần thiết để bảo vệ cây trồng và nâng cao năng suất. Các biện pháp phòng trừ hiệu quả sẽ giúp nông dân giảm thiểu thiệt hại và nâng cao thu nhập. Tương lai của nghiên cứu cần tập trung vào việc phát triển các biện pháp sinh học và hóa học an toàn, hiệu quả để bảo vệ cây chanh leo một cách bền vững.

5.1. Định hướng nghiên cứu trong tương lai

Các nghiên cứu trong tương lai cần tập trung vào việc phát triển các giống chanh leo kháng bệnh, cũng như nghiên cứu sâu hơn về đặc điểm sinh học của các tác nhân gây bệnh. Việc này sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng trừ và bảo vệ cây trồng một cách bền vững.

5.2. Tầm quan trọng của việc giáo dục nông dân

Giáo dục nông dân về các biện pháp phòng trừ bệnh hại là rất quan trọng. Việc cung cấp thông tin và kiến thức sẽ giúp nông dân nhận diện bệnh sớm và áp dụng các biện pháp phòng trừ kịp thời, từ đó nâng cao năng suất và chất lượng sản phẩm.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Cây chanh leo (Passiflora edulis) là loại cây ăn quả có giá trị kinh tế vượt trội, đóng vai trò quan trọng trong chiến lược xóa đói giảm nghèo tại nhiều vùng đồi núi của Việt Nam. Tính đến tháng 7 năm 2016, tổng diện tích canh tác chanh leo trên cả nước đã vượt mức 4.000 ha, tập trung chủ yếu tại các thủ phủ nông nghiệp như Gia Lai với 1.323 ha, Nghệ An đạt 900 ha, Lâm Đồng ghi nhận 656 ha và Sơn La có 487 ha. Tuy nhiên, sự gia tăng nhanh chóng về quy mô thâm canh đã kéo theo áp lực dịch hại nghiêm trọng, đặc biệt là bệnh thối gốc rễ do nấm Phytophthora sp. và bệnh đốm nâu do nấm Alternaria sp. Tại nhiều địa phương, tỷ lệ cây nhiễm bệnh và chết rụi lên tới 70%, buộc người nông dân phải chặt bỏ vườn cây để chuyển đổi sang trồng ngô hoặc sắn, gây tổn thất kinh tế nặng nề.

Trước thực trạng cấp bách đó, đề tài tập trung điều tra hiện trạng phân bố, quy luật phát sinh và diễn biến của bệnh thối gốc rễ cùng bệnh đốm nâu hại cây chanh leo. Nghiên cứu đồng thời phân lập, xác định chính xác danh tính tác nhân gây bệnh bằng kỹ thuật sinh học phân tử hiện đại, nghiên cứu đặc tính sinh học và khảo nghiệm hiệu lực ức chế của các tác nhân sinh học đối kháng cùng thuốc bảo vệ thực vật chuyên biệt.

Phạm vi nghiên cứu được triển khai toàn diện tại các vùng sinh thái trọng điểm gồm Tây Nguyên (Gia Lai, Đắk Lắk, Đắk Nông, Kon Tum, Lâm Đồng), miền Trung (Nghệ An) và miền Bắc (Sơn La, Cao Bằng, Hải Phòng) trong mốc thời gian từ tháng 11 năm 2018 đến tháng 8 năm 2019. Kết quả nghiên cứu mang lại ý nghĩa thực tiễn to lớn khi thiết lập cơ sở khoa học vững chắc để phát triển quy trình quản lý dịch hại tổng hợp (IPM), giúp giảm thiểu tỷ lệ cây chết xuống dưới mức 5%, hướng tới duy trì năng suất định hình 450 đến 500 tạ/ha/năm và nâng cao giá trị thương phẩm xuất khẩu cho ngành hàng chanh leo Việt Nam.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu được xây dựng dựa trên nền tảng của ba khung lý thuyết then chốt trong bệnh học thực vật:

Thứ nhất là lý thuyết tương tác ký chủ và mầm bệnh (Host - Pathogen Interaction), giải thích cơ chế xâm nhiễm của nấm thủy mi Phytophthora qua hệ thống rễ và mạch dẫn, làm tắc nghẽn quá trình vận chuyển nước, dinh dưỡng và dẫn đến hiện tượng thối đen mô rễ, héo úa toàn cây.

Thứ hai là lý thuyết phòng trừ sinh học (Biological Control Theory), tập trung vào cơ chế đối kháng của vi sinh vật có ích thông qua hiện tượng ký sinh trực tiếp, cạnh tranh không gian sống, nguồn dinh dưỡng và tiết enzyme thủy phân vách tế bào như β-glucanase, chitinase, protease kết hợp kháng sinh tự nhiên để tiêu diệt nấm bệnh.

Thứ ba là hệ thống phân loại tích hợp hình thái và sinh học phân tử (Polyphasic Taxonomy), kết hợp việc mô tả cấu trúc tản nấm, bọc bào tử, du động bào tử với việc đối soát trình tự chuỗi gen chuẩn quốc tế.

Nghiên cứu vận dụng các khái niệm chuyên sâu gồm: kỹ thuật phân lập đơn bào tử, vùng phiên mã nội bộ gen nhân ITS (Internal Transcribed Spacer), hiệu lực ức chế sinh học theo công thức Abbott, và khả năng hình thành bọc bào tử (sporangia) cùng du động bào tử (zoospore). Các dẫn liệu lý thuyết toàn cầu chỉ ra chi Phytophthora hiện có hơn 80 loài gây hại trên diện rộng, trong đó 13 loài đã được định danh tại Việt Nam, đặc biệt là các loài nguy hiểm như Phytophthora nicotianae và Phytophthora cinnamomi. Đối với nấm Alternaria passiflorae, các nghiên cứu chuyên ngành ghi nhận cành bào tử phân nhánh với kích thước biến động từ 96,19 đến 176,97 µm, gây hại nghiêm trọng đến mẫu mã thương phẩm của quả.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu đồng ruộng được thu thập tuần tự qua các đợt điều tra định kỳ mỗi tháng một lần tại các vườn chanh leo ở Tây Nguyên, miền Trung và miền Bắc, tuân thủ nghiêm ngặt Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về phương pháp điều tra phát hiện dịch hại cây trồng QCVN 01-38:2010/BNNPTNT. Cỡ mẫu điều tra tại mỗi vùng gồm 5 điểm chéo góc đại diện, mỗi điểm theo dõi 50 cây, tương ứng với quy mô mẫu 250 cây cho mỗi khu vực nghiên cứu. Phương pháp chọn mẫu ngẫu nhiên phân tầng theo đường chéo góc được lựa chọn nhằm đảm bảo tính khách quan, loại bỏ các sai số do biến động vi khí hậu hoặc độ dốc địa hình canh tác.

Phương pháp phân lập nấm Phytophthora từ mẫu đất vùng rễ (lấy ở tầng đất mặt 10 đến 15 cm) sử dụng kỹ thuật bẫy sinh học bằng cánh hoa hồng sạch trong môi trường nước vô trùng, sau đó cấy chuyển làm thuần đơn bào tử trên môi trường thạch PDA (Potato Dextrose Agar), PCA (Potato Carrot Agar), V8-Juice và Pea-Agar.

Quy trình phân tích phân tử được thực hiện thông qua việc chiết tách DNA tổng số bằng phương pháp CTAB (Cetyltrimethylammonium bromide). Phản ứng khuếch đại gen PCR sử dụng cặp mồi chuẩn ITS4 (5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3') và ITS5 (5'-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3') với chu trình nhiệt 35 chu kỳ. Sản phẩm PCR được điện di kiểm tra trên gel agarose nồng độ 1% ở hiệu điện thế 100V trong 15 phút, sau đó tinh sạch bằng hệ thống cột lọc chuyên dụng và gửi giải trình tự tại Công ty Macrogen (Hàn Quốc). Trình tự nucleotide thu được được đối chiếu trực tiếp trên ngân hàng gen quốc tế GenBank bằng công cụ BLAST.

Các thí nghiệm đánh giá hiệu lực ức chế in vitro của vi khuẩn Bacillus velezensis, nấm Trichoderma asperellum, dịch chiết xạ khuẩn Streptomyces (mã số H216) và 4 loại thuốc hóa học (Ridomil Gold 68WG, Aliette 800WG, Anvil 5SC, Vidoc 30BTN) được bố trí theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh với 3 lần lặp lại. Toàn bộ số liệu thực nghiệm được xử lý phương sai thống kê bằng phần mềm IRRISTAT 4.0 và Microsoft Excel để đảm bảo độ tin cậy khoa học tuyệt đối.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

Nghiên cứu đã ghi nhận và lượng hóa những phát hiện khoa học mang tính đột phá về thành phần bệnh học và giải pháp phòng trị bệnh hại trên cây chanh leo:

Thứ nhất, kết quả điều tra đồng ruộng xác định có 4 loại bệnh chính gây hại chanh leo tại Tây Nguyên và 5 loại bệnh tại các tỉnh phía Bắc. Tại Tây Nguyên, bệnh thối gốc rễ (Phytophthora sp.) và bệnh ghẻ quả (Cladosporium sp.) xuất hiện với tần suất bắt gặp cao nhất, dao động từ 11% đến 50%. Tại các tỉnh miền Bắc, bệnh thối gốc rễ xuất hiện với tần suất từ 5% đến 10% nhưng gây tỷ lệ chết cây cục bộ rất lớn.

Thứ hai, tác giả đã thu thập thành công 7 mẫu nấm Phytophthora từ 6 vùng trồng trọng điểm. Dựa trên phân tích trình tự nucleotide vùng gen ITS dài khoảng 800 bp của mẫu phân lập tại Ia Grai (Gia Lai), nghiên cứu đã định danh chính xác 100% tác nhân gây thối gốc rễ chanh leo là loài Phytophthora nicotianae.

Thứ ba, đặc tính sinh học của nấm Phytophthora nicotianae được xác định rõ nét: tản nấm phát triển dạng bông hoa màu trắng xốp, sợi nấm phân nhánh kiểu san hô không có vách ngăn, bọc bào tử hình quả chanh yên hoặc hình trứng. Nấm sinh trưởng tối ưu ở ngưỡng nhiệt độ 25°C đến 30°C và độ pH từ 6 đến 8. Môi trường V8-Juice cho tốc độ phát triển đường kính tản nấm nhanh nhất đạt 85,0 mm sau 6 ngày nuôi cấy.

Thứ tư, khảo nghiệm đối kháng sinh học in vitro ghi nhận vi khuẩn Bacillus velezensis đạt hiệu lực ức chế sự phát triển của Phytophthora nicotianae lên tới 73,2% sau 6 ngày đồng nuôi cấy. Nấm đối kháng Trichoderma asperellum đạt hiệu lực ức chế cao nhất là 73,6% khi được cấy trước mầm bệnh 24 giờ.

Thứ năm, trong nhóm giải pháp hóa học, thuốc Ridomil Gold 68WG ở nồng độ 0,01% thể hiện khả năng ức chế tuyệt đối đạt 100% đối với sợi nấm Phytophthora nicotianae sau 7 ngày xử lý, vượt trội hoàn toàn so với các nghiệm thức thuốc Anvil 5SC và Vidoc 30BTN.

Thảo luận kết quả

Diễn biến phát sinh của bệnh thối gốc rễ gắn liền với yếu tố thời tiết và độ ẩm đất. Dữ liệu thực địa có thể được trực quan hóa rõ nét qua biểu đồ đường thể hiện tỷ lệ bệnh theo 12 tháng trong năm: tỷ lệ bệnh tăng vọt và đạt đỉnh điểm trong giai đoạn mùa mưa từ tháng 7 đến tháng 9 khi nhiệt độ bình quân đạt 28°C đến 30°C kết hợp lượng mưa lớn kéo dài. Điều này được lý giải bởi đặc tính của du động bào tử Phytophthora nicotianae có 2 roi bơi, cần màng nước tự do trong đất bão hòa để di chuyển, bám dính vào chóp rễ và xâm nhiễm vào hệ thống mạch dẫn. Ngược lại, vào mùa khô ở Tây Nguyên hoặc mùa đông lạnh giá ở miền Bắc, tỷ lệ bệnh giảm xuống dưới 1% do điều kiện khô hạn làm ức chế quá trình phóng thích bào tử động.

Khi so sánh hiệu lực sinh học, dữ liệu đối kháng có thể được mô tả trực quan qua biểu đồ cột so sánh giữa các công thức xử lý. Nấm Trichoderma asperellum khi cấy phòng ngừa trước 24 giờ cho hiệu lực 73,6%, cao hơn rõ rệt so với công thức cấy đồng thời (đạt khoảng 58%) và cấy sau (đạt dưới 45%). Kết quả này hoàn toàn tương đồng với các công bố quốc tế về cơ chế ký sinh không gian: sợi nấm Trichoderma cần thời gian hình thành giác bám quấn quanh sợi nấm ký chủ và tiết enzyme β-glucanase phá hủy vách tế bào mầm bệnh trước khi nấm Phytophthora bành trướng. Đối với vi khuẩn Bacillus velezensis, hiệu lực 73,2% đạt được nhờ khả năng sinh tổng hợp các hợp chất kháng sinh lipopeptide hòa tan như iturin, surfactin và fengycin khuếch tán trong môi trường thạch, ức chế trực tiếp quá trình phân bào của nấm bệnh.

Đề xuất và khuyến nghị

Dựa trên các bằng chứng thực nghiệm, đề tài đưa ra 4 nhóm giải pháp hành động đồng bộ nhằm kiểm soát bền vững bệnh hại trên cây chanh leo:

1. Kiến thiết hệ thống thoát nước và vệ sinh vườn cây triệt để: Đào rãnh thoát nước sâu 30 đến 40 cm giữa các hàng cây trước mùa mưa lũ, tuyệt đối không để nước đọng cục bộ quanh gốc quá 24 giờ. Tiến hành cắt tỉa toàn bộ cành nhánh la đà cách mặt đất dưới 50 cm trong giai đoạn từ tháng 5 đến tháng 6 nhằm giảm độ ẩm không khí vùng gốc xuống dưới 75%, loại bỏ đường lây truyền của nấm từ đất lên thân lá. Giải pháp này do các hộ nông dân và chủ trang trại trực tiếp thực hiện.

2. Ứng dụng chế phẩm sinh học đối kháng định kỳ: Sử dụng chế phẩm sinh học chứa nấm Trichoderma asperellum hoặc vi khuẩn Bacillus velezensis với liều lượng 20 đến 30 g/gốc, hòa nước tưới hoặc trộn cùng phân hữu cơ hoai mục bón vào vùng rễ cây 2 đến 3 lần mỗi năm, đặc biệt xử lý trước khi mùa mưa bắt đầu khoảng 15 đến 20 ngày. Mục tiêu duy trì mật độ vi sinh vật có ích trong đất đạt trên 10^6 CFU/g đất, khống chế tỷ lệ phát sinh bệnh thối gốc rễ dưới ngưỡng 3%. Giải pháp do các hợp tác xã nông nghiệp điều phối thực hiện.

3. Can thiệp hóa học đúng kỹ thuật khi bệnh chớm xuất hiện: Khi phát hiện tỷ lệ cây chớm nhiễm bệnh đạt từ 3% đến 5%, lập tức sử dụng thuốc Ridomil Gold 68WG hoặc Aliette 800WG pha ở nồng độ khuyến cáo 0,01% đến 0,02% tưới đẫm vùng gốc rễ bị hại 2 lần cách nhau 7 đến 10 ngày. Người canh tác phải tuân thủ nghiêm ngặt nguyên tắc 4 đúng và đảm bảo thời gian cách ly tối thiểu 14 ngày trước thu hoạch nhằm đáp ứng tiêu chuẩn an toàn thực phẩm.

4. Xây dựng quy chuẩn giám định và chuỗi cung ứng cây giống sạch bệnh: Chi cục Trồng trọt và Bảo vệ thực vật các tỉnh phối hợp cùng các viện nghiên cứu thiết lập quy trình kiểm định nguồn cây giống xuất vườn bằng kỹ thuật sinh học phân tử PCR định kỳ mỗi quý. Loại bỏ triệt để 100% cây giống mang mầm mống nấm Phytophthora nicotianae và virus khảm lá trước khi cung cấp ra thị trường sản xuất diện rộng.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

Nội dung và kết quả nghiên cứu của luận văn mang lại giá trị thực tiễn và học thuật sâu sắc cho 4 nhóm đối tượng chính:

1. Học viên cao học, nghiên cứu sinh và giảng viên chuyên ngành Bảo vệ thực vật, Nông học: Luận văn cung cấp khung phương pháp luận hoàn chỉnh về kỹ thuật bẫy nấm bằng cánh hoa hồng, quy trình chiết tách DNA bằng đệm CTAB và kỹ thuật khuếch đại gen ITS phục vụ nghiên cứu giám định nấm bệnh thực vật chuyên sâu.

2. Cán bộ kỹ thuật tại các Chi cục Trồng trọt và Bảo vệ thực vật, Trung tâm Khuyến nông các tỉnh: Tài liệu cung cấp số liệu dịch tễ học thực tế, quy luật phát sinh bệnh theo mùa vụ (tập trung tháng 7 đến tháng 9) giúp cán bộ xây dựng hệ thống dự tính dự báo dịch hại chính xác và thiết kế tài liệu tập huấn kỹ thuật cho nông dân địa phương.

3. Chủ trang trại, giám đốc hợp tác xã và doanh nghiệp canh tác chanh leo quy mô lớn: Cung cấp cẩm nang thực hành nông nghiệp tốt (GAP), hướng dẫn phác đồ xử lý kết hợp giữa biện pháp canh tác, chế phẩm sinh học Trichoderma asperellum, Bacillus velezensis và thuốc đặc trị Ridomil Gold 68WG nhằm giảm thiểu tối đa rủi ro thiệt hại kinh tế.

4. Các công ty sản xuất và kinh doanh thuốc bảo vệ thực vật, phân bón vi sinh: Dữ liệu thực nghiệm về hoạt lực ức chế của vi khuẩn Bacillus velezensis và dịch chiết xạ khuẩn Streptomyces là căn cứ khoa học giá trị để nghiên cứu phát triển các dòng sản phẩm thuốc trừ bệnh sinh học thế hệ mới.

Câu hỏi thường gặp

Tác nhân chính gây bệnh thối gốc rễ chanh leo được xác định trong nghiên cứu là loài nào?

Bằng việc phân tích đặc điểm hình thái tản nấm kết hợp kỹ thuật sinh học phân tử giải trình tự vùng gen ITS qua cặp mồi ITS4 và ITS5, nghiên cứu đã xác định chính xác tác nhân gây bệnh thối gốc rễ chanh leo tại Gia Lai là loài nấm thủy mi Phytophthora nicotianae, có độ tương đồng trình tự đạt 100% với các chuỗi chuẩn quốc tế trên GenBank.

Bệnh thối gốc rễ chanh leo phát triển mạnh nhất vào thời gian nào trong năm?

Bệnh bùng phát dữ dội nhất trong giai đoạn mùa mưa từ tháng 7 đến tháng 9 hàng năm, khi điều kiện nhiệt độ môi trường duy trì ở mức 28°C đến 30°C kết hợp lượng mưa lớn tạo độ ẩm đất bão hòa. Vào mùa khô tại Tây Nguyên và mùa đông lạnh tại miền Bắc, bệnh hầu như ngừng phát triển do thiếu ẩm.

Hiệu lực ức chế nấm bệnh của các chủng vi sinh vật đối kháng đạt mức bao nhiêu?

Trong điều kiện phòng thí nghiệm, chủng vi khuẩn đối kháng Bacillus velezensis thể hiện hiệu lực ức chế nấm Phytophthora nicotianae đạt 73,2% sau 6 ngày nuôi cấy. Chủng nấm đối kháng Trichoderma asperellum đạt hiệu lực ức chế 73,6% khi được cấy trước mầm bệnh 24 giờ nhờ cơ chế quấn siết sợi nấm và tiết enzyme phân hủy.

Loại thuốc bảo vệ thực vật hóa học nào mang lại hiệu lực trừ bệnh cao nhất?

Trong 4 loại thuốc được khảo nghiệm in vitro, thuốc Ridomil Gold 68WG ở nồng độ hoạt chất 0,01% cho hiệu lực ức chế nấm Phytophthora nicotianae cao nhất, đạt mức tuyệt đối 100% sau 7 ngày xử lý. Thuốc Aliette 800WG cũng cho hiệu lực ức chế mạnh, trong khi Anvil 5SC thể hiện hiệu lực kém hơn đối với nhóm nấm thủy mi.

Tại sao cần phải xử lý nấm đối kháng Trichoderma asperellum trước khi bệnh xuất hiện?

Thực nghiệm chứng minh khi cấy Trichoderma asperellum trước 24 giờ, hiệu lực ức chế đạt 73,6%, cao hơn nhiều so với cấy đồng thời hoặc cấy sau. Nguyên nhân do nấm có ích cần thời gian sinh trưởng, thiết lập mạng lưới giác bám trên bề mặt giá thể và tiết kháng sinh sinh học trước khi nấm bệnh Phytophthora nicotianae kịp nhân sinh khối.

Kết luận

• Đã xác định cơ cấu dịch hại gồm 4 loại bệnh tại Tây Nguyên và 5 loại bệnh tại miền Bắc, trong đó thối gốc rễ và ghẻ quả là hai bệnh nguy hiểm nhất với tần suất bắt gặp từ 11% đến 50%.
• Giám định chính xác nấm Phytophthora nicotianae là tác nhân gây bệnh thối gốc rễ chanh leo thông qua đặc điểm hình thái và giải trình tự gen ITS.
• Làm sáng tỏ quy luật dịch tễ: mầm bệnh bùng phát mạnh nhất trong điều kiện nóng ẩm từ tháng 7 đến tháng 9 (nhiệt độ 28°C đến 30°C), sinh trưởng tối ưu ở 25°C và pH 6 đến 8.
• Khẳng định hiệu lực phòng trừ sinh học đạt trên 73% của nấm Trichoderma asperellum và vi khuẩn Bacillus velezensis trong điều kiện in vitro.
• Xác lập hiệu lực ức chế tuyệt đối 100% của thuốc Ridomil Gold 68WG ở nồng độ 0,01% sau 7 ngày xử lý làm giải pháp can thiệp khẩn cấp.

Đóng góp lớn nhất của luận văn là đã cung cấp hệ thống dẫn liệu khoa học chuẩn xác từ cấp độ phân tử đến đồng ruộng, mở ra hướng đi bền vững thay thế dần thuốc hóa học bằng các giải pháp sinh học an toàn. Lộ trình nghiên cứu tiếp theo trong giai đoạn 2020 đến 2022 cần mở rộng khảo nghiệm hiệu lực của Bacillus velezensis và dịch chiết xạ khuẩn Streptomyces ngoài đồng ruộng diện rộng. Các tổ chức nông nghiệp và người trồng chanh leo hãy chủ động áp dụng ngay quy trình quản lý dịch hại tổng hợp IPM để bảo vệ vườn cây, nâng cao năng suất và nâng tầm thương hiệu nông sản Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN XUÂN VÂN NGHIÊN CỨU BỆNH THỐI GỐC RỄ (PHYTOPHTHORA SP.) VÀ BỆNH ĐỐM NÂU (ALTERNARIA SP.) CÂY CHANH LEO TẠI MỘT SỐ TỈNH TÂY NGUYÊN, MIỀN TRUNG VÀ MIỀN BẮC Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 8620112 Người hướng dẫn khoa học: TS. Nguyễn Đức Huy NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng dùng để bảo vệ lấy bất kỳ học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Xuân Vân i LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ, động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình.

Tôi xin gửi lời cảm ơn đặc biệt, sâu sắc nhất và lòng biết ơn chân thành đến TS. Nguyễn Đức Huy, người đã tận tâm hướng dẫn, chỉ bảo trực tiếp và tạo mọi điều kiện, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Bệnh cây, Khoa Nông học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán bộ công chức, viên chức Chi cục Trồng trọt và Bảo vệ thực Hải Phòng đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt thời gian tôi học tập và thực hiện đề tài.

Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán bộ viên chức Trung tâm Kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu đã giúp đỡ tôi trong suốt thời gian tôi thực hiện đề tài. Tôi xin chân thành cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đã luôn động viên và tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện khóa luận tốt nghiệp. Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Xuân Vân ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] MỤC LỤC Lời cam đoan. ii Mục lục.

iii Danh mục chữ viết tắt. vi Danh mục bảng. vii Danh mục hình. viii Danh mục đồ thị.

viii Trích yếu luận văn. Tính cấp thiết của đề tài. Mục đích và yêu cầu của đề tài. Tổng quan tài liệu nghiên cứu.

Tình hình nghiên cứu ngoài nước. Giới thiệu sơ lược về cây chanh leo. Nghiên cứu về bệnh hại cây chanh leo. Tình hình nghiên cứu trong nước.

Bệnh đốm nâu do Alternaria. Bệnh do Phytophthora. Nghiên cứu về các biện pháp sinh học trong phòng trừ Phytophthora. Đối tượng, vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu.

Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu. Vật liệu và dụng cụ nghiên cứu. Địa điểm và thời gian nghiên cứu.

Nội dung nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu. Phương pháp điều tra mức độ và diễn biến bệnh ngoài đồng ruộng. 23 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.

Phương pháp chẩn đoán bệnh. Phương pháp thu thập mẫu. Phương pháp nghiên cứu trong phòng thí nghiệm. Phương pháp phân lập Phytophthora sp.

gây bệnh thối gốc rễ cây chanh leo. Xác định nấm gây bệnh tàn lụi bằng kĩ thuật PCR, giải trình tự vùng ITS của nấm và phân tích trình tự. Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh học của Phytophthora nicotinanae. Phương pháp kích thích sinh bọc bào tử.

Phương pháp lây bệnh nhân tạo. Phương pháp khảo sát hiệu lực của chế phẩm sinh học. Chỉ tiêu theo dõi, đánh giá và xử lý số liệu. Kết quả nghiên cứu.

Kết quả điều tra thành phần bệnh, hiện trạng và diễn biến bệnh thối gốc rễ, đốm nâu lá chanh leo tại vùng Tây Nguyên, miền Trung và miền Bắc. Kết quả điều tra thành phần bệnh và diễn biến bệnh hại chanh leo tại vùng Tây Nguyên. Kết quả điều tra thành phần bệnh và diễn biến bệnh hại chanh leo tại các tỉnh miền Bắc. Diễn biến bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Gia Lai và Sơn La.

Tình hình bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Gia Lai. Tình hình bệnh thối gốc rễ trên chanh leo tại Sơn La. Tình hình bệnh đốm nâu lá chanh leo tại các tỉnh Tây Nguyên. Kết quả phân thu thập và giám định Phytophthora sp.

Kết quả thu thập mẫu bệnh. Kết quả xác định nấm gây bệnh bằng kỹ thuật PCR và giải trình tự gene vùng ITS của nấm gây bệnh. Kết quả lây bệnh nhân tạo Phytophthora nicotianae gây bệnh trên chanh leo trong điều kiện invitro. Nghiên cứu đặc điểm hình thái và sinh học của Phytophthora nicotianae.

Nghiên cứu đặc điểm hình thái và sinh học của Phytophthora nicotianae. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, pH và môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. 47 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Thử nghiệm hiệu lực ức chế của nấm, vi khuẩn đối kháng và thuốc đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae.

Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng Bacillus velezensis đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Hiệu lực ức chế của nấm đối kháng Tricoderma asperellum đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Thử nghiệm phòng trừ Phytophthora nicotianae bằng biện pháp hóa học. Thử nghiệm phòng chống Phytophthora nicotianae gây bệnh thối gốc rễ chanh leo.

Hiệu lực ức chế của sản phẩm KR833 chiết tách từ xạ khuẩn Streptomyces đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Kết luận và kiến nghị. 64 Tài liệu tham khảo. 71 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt BVTV Plant ptotection Bảo vệ thực vật DNA Deoxyribonucleic acid Axit deoxyribonucleic HCN xianhidric acid axit xianhiđric IAA Indole - 3 - axetic acid Axit Indole - 3 – axetic ITS Internal transcribed spacer Vùng sao chép nội bộ PCA Potato carot agar Môi trường thạch - khoai tây - cà rốt PDA Potato dextrose agar Môi trường thạch – khoai tây - đường dextrose vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC BẢNG Bảng 4.

Tình hình bệnh hại chanh leo tại các tỉnh Tây Nguyên. Tình hình bệnh hại chanh leo tại các tỉnh miền Bắc. Tỷ lệ bệnh thối gốc rễ tại Gia Lai, Tây Nguyên. Tỷ lệ bệnh thối gốc rễ tại Sơn La.

Tình hình bệnh đốm nâu cây chanh leo tại một số tỉnh Tây Nguyên. Tình hình bệnh đốm nâu cây chanh leo tại một số tỉnh miền Trung và miền Bắc. Kết quả thu thập và phân lập Phytophthora sp. từ một số mẫu tại Tây Nguyên và các tỉnh miền Bắc.

Kết quả xác định mẫu Phytophthora sp. gây bệnh thối gốc rễ chanh leo tại Gia Lai bằng giải trình tự và tìm kiếm các chuỗi gần gũi trên ngân hàng gene (GenBank). Kết quả lây nhiễm bệnh nhân tạo Phytophthora nicotiana trên cây chanh leo. Đặc điểm hình thái Phytophthora nicotiana trên môi trường PDA.

Ảnh hưởng của nhiệt độ sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Ảnh hưởng của pH môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae (sử dụng môi trường PDA). Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng Bacillus velezensis đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae.

Hiệu lực ức chế của nấm đối kháng Trichoderma asperellum đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae. Khảo sát hiệu lực ức chế Phytophthora nicotiana của 3 loại thuốc: Aliette 800WG, Ridomil Gold 68 WG, Anvil 5SC. Kết quả thử nghiệm phòng chống Phytophthora nicotianae gây bệnh thối gốc rễ chanh leo. Thử nghiệm hiệu lực ức chế của sản phẩm KR833 chiết tách từ xạ khuẩn Streptomyces đối với Phytophthora nicotianae trên môi trường PDA.

61 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC HÌNH Hình 4. Một số hình ảnh bệnh hại chanh leo tại Tây Nguyên. Một số triệu chứng bệnh hại chanh leo tại Sơn La và Cao Bằng. Mẫu Phytophthora sp.

phân lập từ đất phần gốc rễ bị thối của cây chanh leo tại La Gra - Gia Lai (a, d), Cư M’gar - Đắk Lắk (b) và Ngọc Hồi - Kon Tum (c). Thí nghiệm lây Phytophthora nicotiana trên cây chanh leo. Tản và bọc bào tử của Phytophthora nicotiana. Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng B.

velezensis đến sự phát triển của P. Thí nghiệm hiệu lực ức chế của nấm đối kháng Trichoderma asperellum đối với Phytophthora nicotiana. a) T cấy trước P 24 giờ, T và P cấy cùng thời điểm và c) T cấy sau P. 56 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC ĐỒ THỊ Đồ thị 4.

Diễn biến của bệnh thối gốc rễ chanh leo tại Gia Lai. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae trên môi trường PDA. Ảnh hưởng của độ pH đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae trên môi trường PDA. Ảnh hưởng của môi trường đến sự phát triển của Phytophthora nicotianae.

Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng B. velezensis đến sự phát triển của P. Hiệu lực của nấm đối kháng Trichoderma asperellum đối với Phytophthora nicotianae. Hiệu lực ức chế của một số thuốc bảo vệ thực vật đối với Phytophthora nicotianae.

Hiệu lực phòng chống của một số phẩm sinh học đối với Phytophthora nicotianae. 60 ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Xuân Vân Tên Luận văn: “Nghiên cứu bệnh thối gốc rễ (Phytophthora sp.) và bệnh đốm nâu (Alternaria sp.) cây chanh leo tại một số tỉnh Tây Nguyên, Miền Trung và Miền Bắc”. Ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 8620112 Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Điều tra hiện trạng bệnh hại chanh leo, bệnh thối gốc rễ và bệnh đốm nâu hại cây chanh leo tại một số tỉnh Tây Nguyên, Miền Trung và Miền Bắc Việt Nam. Nghiên cứu đặc điểm sinh học và thử nghiệm phòng trừ bệnh thối gốc rễ bằng sinh học.

Phương pháp nghiên cứu Điều tra thành phần, mức độ phổ biến, diễn biến bệnh trên ruộng theo phương pháp điều tra theo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về phương pháp điều tra phát hiện dịch hại cây trồng QCVN 01-38:2010/BNNPTNT.