Nghiên cứu sự lưu hành virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) tại Hà Nội

Cập nhật về sự lưu hành virus CIAV gây bệnh thiếu máu ở gà tại Hà Nội. Phân tích tình hình dịch tễ, nguy cơ và giải pháp phòng ngừa hiệu quả.

Chuyên ngành

Thú y

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

Luận văn

2017

79
0
0

Phí lưu trữ

30 Point

Tóm tắt

I. Hiểu đúng về virus CIAV gây bệnh thiếu máu ở gà tại Hà Nội

Bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà, do Chicken Infectious Anemia Virus (CIAV) gây ra, là một trong những thách thức lớn đối với ngành chăn nuôi gia cầm tại Hà Nội và trên toàn thế giới. Đây là một bệnh do virus mới được ghi nhận lần đầu tại Nhật Bản vào năm 1979, đặc trưng bởi khả năng gây thiếu máu nghiêm trọng do tủy xương không sản sinh được tế bào máu (aplastic anemia) và làm teo các cơ quan lympho. Hậu quả trực tiếp là cơ thể gà bị suy giảm miễn dịch nặng nề, trở nên mẫn cảm với các bệnh kế phát do vi khuẩn, virus hoặc nấm. CIAV, còn được biết đến với tên gọi Chicken Anemia Virus (CAV), thuộc giống Gyrovirus, họ Circoviridae. Đây là một ADN virus sợi đơn, dạng vòng, có kích thước rất nhỏ (2,3 kb) và không có vỏ bọc, giúp chúng có sức đề kháng cao với các yếu tố môi trường và hóa chất sát trùng thông thường. Virus này không chỉ gây ra bệnh còi cọc ở gà con mà còn là tác nhân chính trong hội chứng xanh da ở gà (blue wing disease) và hội chứng xuất huyết. Nghiên cứu của Nguyễn Quốc Doanh (2017) là một trong những công trình đầu tiên tại Việt Nam tập trung làm rõ sự hiện diện và đặc điểm của virus gây suy giảm miễn dịch ở gà này tại khu vực Hà Nội. Việc xác định sự lưu hành của CIAV là cực kỳ cấp thiết, bởi nó không chỉ gây thiệt hại kinh tế do CIAV trực tiếp qua tỷ lệ chết và giảm tăng trọng, mà còn ảnh hưởng gián tiếp qua việc làm giảm hiệu quả của các chương trình vaccine khác, mở đường cho các mầm bệnh nguy hiểm khác tấn công đàn gà. Do đó, việc hiểu rõ về tác nhân gây bệnh này là bước đi nền tảng để xây dựng các chiến lược phòng chống hiệu quả.

1.1. CIAV là gì Giới thiệu Circovirus ở gia cầm

Chicken Infectious Anemia Virus (CIAV) là một virus thuộc giống Gyrovirus, họ Circoviridae. Tên gọi Circovirus ở gia cầm bắt nguồn từ đặc điểm bộ gen của virus là ADN sợi đơn vòng (circular). CIAV là một ADN virus không có vỏ bọc, đường kính trung bình từ 25-26,5 nm, được cấu tạo bởi ba loại protein chính là VP1, VP2 và VP3. Virus này có sức đề kháng rất cao, có thể chịu được nhiệt độ 70°C trong một giờ và 80°C trong 15 phút. Sức đề kháng này khiến việc tiêu diệt mầm bệnh trong môi trường chăn nuôi trở nên khó khăn. CIAV là nguyên nhân chính gây ra bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà, một căn bệnh ảnh hưởng kinh tế nghiêm trọng, đặc trưng bởi tình trạng ức chế miễn dịch và thiếu máu không tái tạo.

1.2. Lịch sử và phân bố địa lý của bệnh thiếu máu truyền nhiễm

Bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà được mô tả lần đầu tiên vào năm 1979 tại Nhật Bản bởi Yuasa và cộng sự. Tuy nhiên, các bằng chứng huyết thanh học cho thấy virus có thể đã lưu hành tại Mỹ từ những năm 1970. Kể từ khi được phát hiện, virus đã nhanh chóng lây lan và gây bệnh trên đàn gà ở khắp các châu lục, từ châu Á, châu Âu, châu Mỹ đến châu Úc và châu Phi. Bệnh có nhiều tên gọi khác nhau như hội chứng xuất huyết (hemorrhagic syndrome), bệnh cánh xanh (blue wing disease). Sự phân bố rộng rãi của CIAV cho thấy khả năng lây truyền hiệu quả của virus cả theo đường truyền dọc (từ mẹ sang con qua trứng) và đường truyền ngang (tiếp xúc trực tiếp hoặc gián tiếp).

II. Cách CIAV gây thiệt hại kinh tế cho chăn nuôi gia cầm Hà Nội

Sự lưu hành của virus CIAV gây ra những tổn thất kinh tế nặng nề cho ngành chăn nuôi gà, đặc biệt là tại các khu vực có mật độ chăn nuôi cao như Hà Nội và vùng phụ cận. Thiệt hại không chỉ đến từ tỷ lệ chết trực tiếp, dao động từ 10-20% và có thể lên tới 60% trong trường hợp có bệnh kế phát, mà còn từ những ảnh hưởng gián tiếp. Gà nhiễm bệnh thường chậm phát triển, còi cọc, và giảm tỷ lệ chuyển đổi thức ăn. Một nghiên cứu của McIlroy và cộng sự (1992) chỉ ra rằng bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà có thể làm giảm lợi nhuận tới 18,5%. Triệu chứng lâm sàng điển hình bao gồm gà ủ rũ, xù lông, da và mào nhợt nhạt ở gà do thiếu máu (chỉ số hematocrit có thể xuống dưới 27%). Đặc biệt, hội chứng xanh da ở gà và tình trạng xuất huyết dưới da và cơ là những dấu hiệu dễ nhận biết, thường đi kèm với viêm da hoại thư do nhiễm trùng thứ phát. Bệnh tích của CIAV khi mổ khám rất đặc trưng, bao gồm teo tuyến ức và túi fabricius, tủy xương nhạt màu hoặc có màu vàng do nhiễm mỡ. Những tổn thương này phá hủy hệ miễn dịch của gà, làm giảm hiệu quả của các loại vaccine phòng bệnh khác như Gumboro hay Marek, khiến đàn gà dễ dàng bùng phát các dịch bệnh phức tạp, gây ra một vòng luẩn quẩn thiệt hại kinh tế.

2.1. Triệu chứng và bệnh tích điển hình của CIAV ở gà

Gà nhiễm CIAV thường biểu hiện triệu chứng sau 10-14 ngày. Các dấu hiệu lâm sàng bao gồm mệt mỏi, ủ rũ, tăng trọng giảm, da nhợt nhạt. Mào nhợt nhạt ở gà là một trong những triệu chứng rõ nhất của tình trạng thiếu máu. Ngoài ra, gà bệnh có thể bị xuất huyết dưới da và cơ, đặc biệt ở cánh, gây ra hội chứng xanh da ở gà. Khi mổ khám, bệnh tích của CIAV rất đặc trưng. Tuyến ức, cơ quan miễn dịch quan trọng, bị teo nhỏ gần như biến mất và có màu đỏ sẫm. Tủy xương trong xương đùi bị teo, nhiễm mỡ và chuyển sang màu vàng nhạt thay vì màu đỏ của tủy xương khỏe mạnh. Túi fabricius cũng bị teo nhỏ. Đây là những tổn thương cốt lõi dẫn đến suy giảm miễn dịch nghiêm trọng.

2.2. Cơ chế gây suy giảm miễn dịch và thiệt hại kinh tế

Đích tấn công chính của virus gây suy giảm miễn dịch ở gà này là các tế bào tiền thân của hệ miễn dịch trong tuyến ức (tế bào lympho T) và các tế bào tạo máu trong tủy xương. Virus phá hủy các tế bào này, dẫn đến hai hậu quả chính: thiếu máu không tái tạo và ức chế miễn dịch. Khi hệ miễn dịch bị tổn thương, gà không thể tạo ra đáp ứng miễn dịch hiệu quả khi tiêm phòng các loại vaccine khác, dẫn đến thất bại trong việc phòng bệnh. Thiệt hại kinh tế do CIAV không chỉ là chi phí cho con giống, thức ăn, thuốc thú y mà còn là sự sụt giảm năng suất và lợi nhuận do gà còi cọc, chậm lớn và tỷ lệ chết tăng cao, đặc biệt khi có các bệnh kế phát.

III. Phương pháp chẩn đoán CIAV bằng PCR và xét nghiệm huyết thanh

Việc chẩn đoán chính xác sự lưu hành của virus CIAV là yếu tố then chốt để kiểm soát dịch bệnh. Hiện nay, các kỹ thuật sinh học phân tử và huyết thanh học đóng vai trò quan trọng. Phương pháp chẩn đoán CIAV bằng PCR (Polymerase Chain Reaction) được xem là tiêu chuẩn vàng nhờ độ nhạy và độ đặc hiệu cao. Nghiên cứu của Nguyễn Quốc Doanh (2017) đã tiến hành tối ưu hóa phản ứng PCR để phát hiện đoạn gen VP1 của virus từ các mẫu bệnh phẩm như gan, lách, tuyến ức, tủy xương. Quy trình này cho phép xác định sự hiện diện của ADN virus ngay cả với số lượng ít, giúp phát hiện bệnh sớm ở cả thể lâm sàng và cận lâm sàng. Bên cạnh PCR, các phương pháp huyết thanh học như xét nghiệm ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) cũng được sử dụng rộng rãi. ELISA giúp phát hiện kháng thể kháng CIAV trong huyết thanh gà, qua đó đánh giá tình trạng miễn dịch của đàn hoặc xác định sự phơi nhiễm với virus trong quá khứ. Phản ứng này đặc biệt hữu ích trong việc giám sát hiệu quả của vaccine CIAV trên đàn gà bố mẹ và kiểm tra tình trạng miễn dịch mẹ truyền cho gà con. Sự kết hợp giữa PCR để phát hiện virus và ELISA để kiểm tra kháng thể cung cấp một bức tranh toàn diện về dịch tễ học CIAV, giúp người chăn nuôi và các nhà thú y đưa ra quyết định can thiệp kịp thời và chính xác, góp phần bảo vệ sức khỏe đàn gia cầm.

3.1. Quy trình tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV

Để đảm bảo độ chính xác, phản ứng PCR cần được tối ưu hóa. Nghiên cứu tại Hà Nội đã sử dụng cặp mồi đặc hiệu (CAVVP3F/CAV2) để nhân đoạn gen VP1. Quá trình tối ưu hóa bao gồm việc xác định nhiệt độ bắt mồi (annealing temperature) lý tưởng, được xác định là 58,5°C để loại bỏ các sản phẩm không đặc hiệu và tăng hiệu suất phản ứng. Nồng độ mồi cũng được điều chỉnh ở mức 0,5 µM cho mỗi loại mồi xuôi và ngược. Quy trình chẩn đoán CIAV bằng PCR được chuẩn hóa này cho phép phát hiện chính xác virus từ mẫu bệnh phẩm, với vạch sản phẩm đặc hiệu có kích thước khoảng 1038bp trên gel điện di.

3.2. Vai trò của xét nghiệm ELISA trong giám sát dịch tễ

Xét nghiệm ELISA là công cụ không thể thiếu để giám sát sự lưu hành của CIAV trên quy mô lớn. Phương pháp này giúp sàng lọc nhanh các đàn gà để phát hiện kháng thể, qua đó xác định tỷ lệ đàn đã phơi nhiễm với virus. Đối với đàn gà giống, xét nghiệm ELISA được dùng để kiểm tra mức độ kháng thể sau khi tiêm phòng, đảm bảo gà con nhận được đủ lượng kháng thể mẹ truyền để bảo vệ trong những tuần đầu đời. Dữ liệu từ ELISA cung cấp thông tin quý giá về dịch tễ học CIAV, giúp đánh giá nguy cơ và xây dựng chiến lược tiêm phòng vaccine CIAV phù hợp cho từng khu vực.

IV. Báo cáo tỷ lệ nhiễm CIAV ở gà tại Hà Nội và vùng phụ cận

Nghiên cứu tiên phong của Nguyễn Quốc Doanh (2017) đã cung cấp những số liệu đầu tiên và đáng báo động về sự lưu hành virus CIAV tại Hà Nội và các khu vực lân cận. Kết quả phân tích trên 124 mẫu bệnh phẩm từ 14 trại chăn nuôi cho thấy một tỷ lệ nhiễm CIAV rất cao. Cụ thể, có tới 13/14 trại (chiếm 92,86%) được phát hiện có sự lưu hành của virus. Tổng cộng, 63/124 mẫu (tỷ lệ 50,81%) cho kết quả dương tính với CIAV bằng phương pháp PCR. Con số này khẳng định rằng CIAV không phải là một mầm bệnh xa lạ mà đang lưu hành rất phổ biến trong các đàn gà tại khu vực nghiên cứu. Phân tích sâu hơn về dịch tễ học CIAV cho thấy virus được phát hiện chủ yếu ở gà từ 3 tuần tuổi trở lên. Tỷ lệ nhiễm ở nhóm gà từ 3-5 tuần tuổi là 56,94%, và ở nhóm gà trên 6 tuần tuổi là 50,00%. Mặc dù gà con dưới 3 tuần tuổi mẫn cảm nhất với bệnh, nhưng sự lưu hành ở các lứa tuổi lớn hơn cho thấy virus liên tục tồn tại trong môi trường và có khả năng lây nhiễm chéo. Những kết quả này nhấn mạnh sự cần thiết của các biện pháp an toàn sinh học trong chăn nuôi gà và một chiến lược phòng bệnh toàn diện để giảm thiểu tác động của virus gây suy giảm miễn dịch ở gà này đến ngành chăn nuôi gia cầm tại Hà Nội.

4.1. Phân tích dịch tễ học CIAV qua các mẫu bệnh phẩm thực địa

Kết quả nghiên cứu thực địa cho thấy sự phân bố rộng rãi của virus. Tỷ lệ dương tính trong các trại dao động lớn, có những trại tỷ lệ nhiễm lên tới 100% (8/8 mẫu hoặc 10/10 mẫu dương tính), trong khi chỉ có duy nhất một trại cho kết quả âm tính hoàn toàn. Điều này cho thấy áp lực mầm bệnh trong khu vực là rất lớn và không đồng đều. Các số liệu này tương đồng với nhiều nghiên cứu trên thế giới, ví dụ như ở Canada (77,1% đàn dương tính) hay Bỉ (98 đàn đều dương tính), khẳng định tính phổ biến toàn cầu của dịch tễ học CIAV.

4.2. So sánh tỷ lệ nhiễm virus ở gà theo các nhóm lứa tuổi

Nghiên cứu đã phân loại mẫu theo ba nhóm lứa tuổi: dưới 3 tuần, 3-5 tuần và trên 6 tuần. Kết quả cho thấy không phát hiện virus ở nhóm gà dưới 3 tuần tuổi trong nghiên cứu này. Tuy nhiên, tỷ lệ nhiễm CIAV cao nhất được ghi nhận ở nhóm gà 3-5 tuần tuổi (56,94%), giai đoạn gà con bắt đầu suy giảm miễn dịch mẹ truyền và trở nên mẫn cảm hơn với mầm bệnh từ môi trường. Nhóm gà trên 6 tuần tuổi vẫn có tỷ lệ nhiễm cao (50,00%), cho thấy virus tiếp tục tồn tại và gây bệnh thể cận lâm sàng, trở thành nguồn lây nhiễm dai dẳng trong đàn.

4.3. Kết quả giải trình tự gen và phân tích di truyền các chủng CIAV

Phân tích di truyền trên 26 chủng CIAV phân lập cho thấy các chủng này có mức độ tương đồng nucleotide rất cao (từ 96,8% đến 100%). Phân tích cây phát sinh chủng loại cho thấy tất cả các chủng virus lưu hành tại Hà Nội trong nghiên cứu này đều thuộc genotype nhóm 3 (phân nhóm 3a và 3b). Điều quan trọng là các chủng này nằm ở nhánh di truyền khác biệt so với chủng virus trong vaccine CIAV (Nobilis P4, thuộc phân nhóm 3b). Sự khác biệt về di truyền này đặt ra câu hỏi về hiệu quả bảo hộ của vaccine hiện tại đối với các chủng virus thực địa, gợi ý sự cần thiết phải phát triển các loại vaccine phù hợp hơn.

V. Bí quyết phòng bệnh thiếu máu ở gà và an toàn sinh học hiệu quả

Kiểm soát bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà đòi hỏi một chiến lược tổng hợp, kết hợp giữa vaccine và các biện pháp quản lý chặt chẽ. Hiện tại, không có phác đồ điều trị hỗ trợ đặc hiệu cho bệnh do virus gây ra. Do đó, phòng bệnh thiếu máu ở gà là ưu tiên hàng đầu. Biện pháp hiệu quả nhất là tiêm phòng vaccine CIAV cho đàn gà bố mẹ. Việc tiêm phòng giúp gà mẹ tạo ra kháng thể và truyền cho gà con qua lòng đỏ trứng (miễn dịch mẹ truyền), bảo vệ gà con trong giai đoạn mẫn cảm nhất (2-3 tuần đầu đời). Vaccine thường được sử dụng cho gà hậu bị vào khoảng 13-15 tuần tuổi, và phải thực hiện ít nhất 3 tuần trước khi gà bắt đầu đẻ trứng để tránh nguy cơ virus vaccine truyền dọc. Bên cạnh vaccine, an toàn sinh học trong chăn nuôi gà là yếu tố không thể thiếu. Vì CIAV có sức đề kháng cao, việc vệ sinh, sát trùng chuồng trại bằng các loại hóa chất phù hợp là rất quan trọng để giảm áp lực mầm bệnh. Các biện pháp bao gồm: quản lý cùng vào - cùng ra, hạn chế người và phương tiện ra vào trại, kiểm soát côn trùng và vật chủ trung gian, đảm bảo nguồn nước và thức ăn sạch. Việc kết hợp đồng bộ giữa tiêm phòng và an toàn sinh học sẽ giúp giảm thiểu thiệt hại kinh tế do CIAV và bảo vệ sức khỏe toàn đàn.

5.1. Tầm quan trọng của vaccine CIAV cho đàn gà giống bố mẹ

Đường lây truyền dọc từ mẹ sang con là con đường lây nhiễm quan trọng và nguy hiểm nhất của CIAV. Gà con nở ra từ trứng nhiễm virus sẽ mắc bệnh từ rất sớm, bị suy giảm miễn dịch và trở thành nguồn lây lan virus cho cả đàn. Do đó, việc tiêm phòng vaccine CIAV cho đàn gà bố mẹ là bắt buộc. Chương trình vaccine hiệu quả sẽ đảm bảo đàn gà bố mẹ có miễn dịch đồng đều, tạo ra kháng thể mẹ truyền ở mức cao và ổn định, giúp bảo vệ toàn bộ đàn gà con khỏi sự tấn công của virus trong giai đoạn đầu đời.

5.2. Xây dựng phác đồ điều trị hỗ trợ và vệ sinh chuồng trại

Mặc dù không có thuốc điều trị đặc hiệu, một phác đồ điều trị hỗ trợ có thể giúp giảm thiệt hại khi bệnh xảy ra. Phác đồ này bao gồm việc sử dụng kháng sinh phổ rộng để kiểm soát các bệnh nhiễm khuẩn kế phát, bổ sung vitamin, chất điện giải và các thuốc trợ sức, trợ lực để tăng cường sức đề kháng cho gà. Về vệ sinh, cần lưu ý rằng CIAV rất bền với môi trường. Do đó, sau mỗi lứa nuôi, cần thực hiện nghiêm ngặt quy trình làm sạch và sát trùng. Các chất sát trùng có hiệu quả bao gồm formaldehyde hoặc các sản phẩm chứa glutaraldehyde. Thực hành tốt an toàn sinh học trong chăn nuôi gà là chìa khóa để phá vỡ chu trình lây nhiễm của virus.

14/10/2025
Nghiên cứu sự lưu hành của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà chicken infectious anemia virus ciav tại hà nội và vùng phụ cận luận văn thạc sĩ nông nghiệp

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN QUỐC DOANH NGHIÊN CỨU SỰ LƯU HÀNH CỦA VIRUS GÂY BỆNH THIẾU MÁU TRUYỀN NHIỄM Ở GÀ (CHICKEN INFECTIOUS ANEMIA VIRUS - CIAV) TẠI HÀ NỘI VÀ VÙNG PHỤ CẬN Ngành: Thú y Mã số: 60.01 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ TS. Nguyễn Thị Thu Hằng NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng dùng để bảo vệ lấy bất kỳ học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc.

Hà Nội, ngày tháng năm2017 Tác giả luận văn Nguyễn Quốc Doanh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ, động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi được bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc PGS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ và TS. Nguyễn Thị Thu Hằng đã tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo Đội Kiểm Dịch Động Vật Lưu Động – Chi Cục Thú Y Hà Nộiđã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài và học tập. Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày tháng năm2017 Tác giả luận văn Nguyễn Quốc Doanh ii MỤC LỤC Lời cam đoan.

ii Mục lục. iii Danh mục chữ viết tắt.v Danh mục bảng. vi Danh mục hình. vii Trích yếu luận văn.

viii Thesis abstract. Tính cấp thiết của đề tài. Mục tiêu nghiên cứu. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài.

Tổng quan tài liệu. Tình hình nghiên cứu về virus gây ức chế miễn dịch. Hiểu biết về ciav và bệnh do ciav gây ra. Lịch sử và địa dư bệnh.

Đặc điểm dịch tễ học. Biện pháp kiểm soát bệnh. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu.

Nội dung nghiên cứu. Địa điểm và thời gian nghiên cứu. Vật liệu nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu.

Phương pháp lấy mẫu. Phương pháp tách chiết ADN. Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử.

Kết quả và thảo luận. Kết quả xác định sự lưu hành ciav ở đàn gà nuôi tại hà nội và vùng phụ cận. Kết quả tối ưu hóa phản ứng PCR để xác định CIAV. Sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận.

Kết quả PCR phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm. Kết quả giải trình tự gen ciav. Kết quả phan tíchmột số đặc điểm dịch tễ học phân tử của ciav. Kết quả phân loại genotype của CIAV.

Kết quả so sánh trình tự animo acid giữa các nhóm di truyền của CIAV. Kết quả nghiên cứu quá trình biến đổi aminoacid của protein VP1. Kết luận và đề nghị. 43 Tài liệu tham khảo.

49 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt ALV Avian Leucosis Virus ARV Avian Reovirus CAA Chicken Anemia Agent CAV Chicken Anemia Virus CIA Chicken Infectious Anemia CIAV Chicken Infectious Anemia Virus CPE Cytophathogenic Effect DNA Deoxyribonucleic acid ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay FAdV4 Fowl Adenovirus serotype 4 IBDV Infectious Bursal Disease Virus IBDV infectious bural disease virus IBH inclusion body hepatitis IFN interferon IL-1 Interleukin-1 IL-2 Interleukin-2 MDCC Marek’s disease chicken cel MDV Marek’s Disease Virus PCR Deoxyribonucleic acid PCV Packed Cell Volume REV Reticuloendotheliosis Virus TCID50 50% Tissue Culture Infective Dose v DANH MỤC BẢNG Bảng 3. Trình tự mồi đặc hiệu phát hiện và giải trình tự gen VP1. Chu trình nhiệt của phản ứng PCR. Bố trí thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ mồi.

Trình tự gen tham chiếu. Tổng hợp tình hình thu thập mẫu gà theo lứa tuổi. Kết quả PCR phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm. Kết quả kiểm tra CIAV ở các lứa tuổi gà .32 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.

Gà bệnh bị xuất huyết ở cánh, ngực; mào nhợt nhạt do thiếu máu. Bệnh tích xuất huyết đặc trưng. Gan, thận nhạt màu. Sơ đồ các vùng gen của CIAV được nhân lên bởi mồi CAVVP3F/CAV2.

Tối ưu hóa nhiệt độ bắt mồi của phản ứng PCR. Tối ưu nồng độ mồi của phản ứng PCR. Gà bị xuất huyết ở cánh, dưới da, cơ. Gan sưng, tụ huyết hoặc xuất huyết.

Thận sưng to, nhạt màu. Tuyến ức bị teo, xuất huyết. Minh họa kết quả phản ứng PCR phát hiện CIAV. Kết quả PCR giải trình tự gencủa chủng phân lập C20.

Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 1- 110. Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 111- 440. Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 141- 609. Kết quả so sánh mức tương đồng nucleotide giữa 26 chủng CIAV.

Cây phát sinh chủng loại của CIAV. Trình tự amino acid protein VP1 của CIAV. Trình tự amino acid protein VP1 của CIAV. Sự thay đổi amino acid của VP1 ở các nút dẫn tới nhánh CIAV lưu hành ở Việt Nam .42 vii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Quốc Doanh Tên Luận văn: “Nghiên cứu sự lưu hành của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (Chicken Infectious Anemia Virus - CIAV) tại Hà Nội và vùng phụ cận”.

Ngành: Thú y Mã số: 60.01 Tên cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: - Xác định được có hay không có sự lưu hành của CIAV ở đàn gà thuộc địa bàn nghiên cứu. - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của CIAV. Nội dung nghiên cứu Trong khuôn khổ nghiên cứu của đề tài, chúng tôi thực hiện các nội dung sau: - Xác định sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận. - Giải trình tự gen mã hóa protein VP1 của CIAV.

- Phân tích một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của CIAV. Phương pháp: Phương pháp lấy mẫu; Phương pháp tách chiết ADN; Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV; Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử. Kết quả chính và kết luận: (1) Trong số 14 trại kiểm tra có đến 13 trại (tỷ lệ 92,86%) phát hiện có sự lưu hành của CIAV; chỉ duy nhất 01 trại (tỷ lệ 7,14%) âm tính với kết quả PCR phát hiện CIAV. Trong tổng số 124 mẫu bệnh phẩm của gà có triệu chứng lâm sàng được kiểm tra thì tỷ lệ phát hiện được CIAV rất cao (63 mẫu dương tính, tỷ lệ 50,81%).

(2) Đã giải trình tự gen thành công phân đoạn gen VP1 của CIAV. 26 chủng CIAV được lựa chọn để giải trình tự có mức tương đồng rất cao về trình tự nucleotide, từ 96,8% đến 100%. (3) Qua phân tích đặc điểm dịch tễ học phân tử dựa vào trình tự gen mã hóa protein VP1, có thể kết luận: - Các chủng CIAV lưu hành có sự đa dạng tương đối về mặt di truyền. - Các chủng này nằm ở nhánh di truyền khác với các chủng virus vacxin.

viii THESIS ABSTRACT Name of Master student: Nguyen Quoc Doanh Thesis title: “Researchthe prevalence of Chicken Infectious Anemia Virus - CIAVof chicken in Hanoi and surrounding areas”. Major:Veterinary Medicine Code:60.01 Name of Institute: Vietnam National University of Agriculture. Research Objectives Determiningthe prevalence of CIAVof chicken in Hanoi and surrounding areas. Researching molecular epidemiological characteristics of CIAV.

Research contents: - Determining the prevalence of CIAVof the chicken in Hanoi and surrounding areas. - Sequencingprotein VP1 geneof CIAV. - Researching molecular epidemiological characteristics of CIAV. Methodology - Sampling method; - DNA extraction method; - PCR for identifying CIAV; - Methods for researching molecular epidemiological characteristics of CIAV.

Results: (1) By using PCR,13 farms (92.86%)of tested 14 farms were CIAV positive; there was only one farm (7.14%) was CIAVnegative; In total124 samples of chickenwhich had clinical symptoms,there were 63 CIAV positive samples (50.81%); (2) 26 sequencing of VP1gene of CIAVin this study sharedfrom 96.8% to 100% nucleotide identity. (3) By phylogenetic analysis based on nucleotide sequences of VP1 gene of CIAV showed that: - CIAV strains in this study have geneticvariation; - These strains were located in different branches of phylogenetic tree with vaccine virus strains. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Trước diễn biến phức tạp của bệnh, dịch gia cầm trên thế giới và ở Việt Nam, rất nhiều các nhà khoa học đã tập trung nghiên cứu các vấn đề mới.Sự xuất hiện của một số bệnh mới và ảnh hưởng của chúng tới khả năng miễn dịch của vật nuôi đã gây ra những hậu quả nghiêm trọng cho ngành chăn nuôi và đang trở thành vấn đề gây quan tâm cho những nhà khoa học làm việc trong ngành Thú y trên thế giới và ở Việt Nam. Một loạt câu hỏi được đưa ra cần có câu trả lời: nguyên nhân nào dẫn tới sự suy giảm miễn dịch? Cơ chế nào gây suy giảm miễn dịch? Những dấu hiệu hay phương pháp chẩn đoán sự suy giảm miễn dịch? Biện pháp kiểm soát và giảm thiểu ảnh hưởng của sự suy giảm miễn dịch? Câu trả lời nằm ở những yếu tố gây ức chế miễn dịch, trong đó có vai trò của một số virus.

Theo “chiến lược phát triển chăn nuôi đến năm 2020” đã được Thủ tướng phê duyệt tại Quyết định số 10/2008/QĐ-TTg, định hướng phát triển đến năm 2020 tổng đàn gà tăng bình quân trên 5% năm, đạt khoảng 300 triệu con, trong đó đàn gà công nghiệp chiếm khoảng 33%. Tăng trưởng về quy mô đàn gia cầm cũng làm gia tăng áp lực dịch bệnh, kéo theo nguy cơ xuất hiện nhiều dịch bệnh mới. Nhận thức được tính nguy hiểm của nhóm virus gây ức chế miễn dịch như: ức chế miễn dịch mở đường cho nhiều bệnh kế phát xảy ra (Subler et al., 2006), làm giảm hiệu lực của vacxin (Sun et al. nên việc làm sáng tỏ câu hỏi có những virus gây ức chế miễn dịch nào lưu hành ở đàn gà ở Việt Nam là hết sức cần thiết.

Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ