Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Của Kim Ngân Hoa

Chuyên khảo phân tích Khảo sát một số hợp chất có hoạt tính sinh học trong nuôi cấy mô sẹo cây kim ngân lonicera japonica, đánh giá các khía cạnh quan trọng, đề xuất hướng nghiên

• Tác giả: Nguyễn Thị Thu Thảo
• Trường học: Trường Đại Học
• Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học
• Đề tài: Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Của Kim Ngân Hoa Qua Phương Pháp Nuôi Cấy Tế Bào
• Loại tài liệu: Đồ án tốt nghiệp

Mục lục chi tiết

• 1. CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU
• 1.1. Mục đích và nội dung nghiên cứu
• 2. CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Khái niệm chung về các hợp chất tự nhiên
• 2.2. Giới thiệu chung về Kim ngân hoa
• 3. CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
• 3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm
• 3.2. Đối tượng nghiên cứu
• 3.3. Trang thiết bị và dụng cụ
• 3.4. Các loại hóa chất sử dụng
• 3.5. Phương pháp thí nghiệm
• 3.5.1. Thí nghiệm 1: cảm ứng tạo mô sẹo
• 3.5.2. Thí nghiệm 2: khảo sát thành phần flavonoid và saponin triterpenoid trong cây Kim ngân bằng phương pháp thử nghiệm sinh hóa
• 3.5.3. Thí nghiệm 3: khảo sát thành phần flavonoid và saponin triterpenoid bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC)
• 3.5.4. Thí nghiệm 4: khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết Kim ngân
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Thí nghiệm 1: cảm ứng mô sẹo
• 4.2. Thí nghiệm 2: khảo sát thành phần flavonoid và saponin triterpenoid bằng phương pháp trắc nghiệm sinh hóa
• 4.2.1. Khảo sát sự hiện diện của flavonoid
• 4.2.2. Khảo sát sự hiện diện của triterpenoid saponin
• 4.3. Thí nghiệm 2: khảo sát thành phần flavonoid và saponin triterpenoid bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC)
• 4.3.1. Khảo sát sự hiện diện flavonoid
• 4.3.2. Khảo sát sự hiện diện triterpenoid
• 4.4. Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết Kim ngân
• 4.4.1. Khảo sát khả năng kháng khuẩn của dịch chiết Kim ngân bằng phương pháp khuếch tán qua vòng giấy lọc
• 4.4.2. Khảo sát khả năng kháng khuẩn bằng phương pháp khuếch tán qua giếng thạch
• 5. CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• 6. CHƯƠNG 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Kim Ngân Hoa

Nghiên cứu hoạt tính sinh học của Kim ngân hoa thông qua phương pháp nuôi cấy tế bào mở ra hướng đi mới trong việc khai thác tiềm năng dược liệu quý giá này. Từ lâu, Kim ngân hoa đã được biết đến trong y học cổ truyền với nhiều công dụng chữa bệnh. Tuy nhiên, việc nghiên cứu sâu hơn về các tác dụng dược lý và thành phần hóa học của nó là vô cùng cần thiết. Phương pháp nuôi cấy tế bào cung cấp một công cụ mạnh mẽ để nghiên cứu in vitro, giúp kiểm soát các yếu tố ảnh hưởng và thu được kết quả chính xác hơn. Nghiên cứu này hứa hẹn sẽ đóng góp vào việc phát triển các dược phẩm và thực phẩm chức năng từ Kim ngân hoa.

1.1. Giới thiệu chung về cây Kim Ngân Hoa Lonicera japonica

Kim ngân hoa (Lonicera japonica) là một dược liệu quý, được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền. Cây có đặc tính kháng khuẩn, kháng viem, và chống oxy hóa. Các bộ phận của cây, đặc biệt là hoa, chứa nhiều thành phần hóa học có giá trị dược lý. Việc nghiên cứu và khai thác Kim ngân hoa có ý nghĩa quan trọng trong việc bảo tồn và phát triển nguồn dược liệu tự nhiên của Việt Nam.

1.2. Tầm quan trọng của nghiên cứu hoạt tính sinh học dược liệu

Nghiên cứu hoạt tính sinh học của dược liệu, như Kim ngân hoa, là bước quan trọng để chứng minh hiệu quả điều trị và tìm ra cơ chế tác dụng của chúng. Các nghiên cứu này cung cấp cơ sở khoa học cho việc sử dụng dược liệu trong y học hiện đại và giúp phát triển các sản phẩm có giá trị cao. Việc phân tích hoạt tính sinh học cũng giúp đánh giá tính an toàn và hiệu quả điều trị của dược liệu.

II. Thách Thức Nghiên Cứu Kim Ngân Hoa và Giải Pháp

Việc nghiên cứu Kim ngân hoa cũng đối mặt với nhiều thách thức, bao gồm sự biến đổi về thành phần hóa học do yếu tố môi trường và nguồn gốc khác nhau. Sản lượng dược liệu từ tự nhiên không ổn định và có thể bị ảnh hưởng bởi mùa vụ. Phương pháp nuôi cấy tế bào giúp giải quyết những vấn đề này bằng cách tạo ra nguồn nguyên liệu đồng nhất và ổn định, đồng thời cho phép kiểm soát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp các hợp chất thứ cấp. Nghiên cứu này tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình nuôi cấy mô tế bào thực vật để tăng cường sản xuất các hoạt chất sinh học có giá trị.

2.1. Các yếu tố ảnh hưởng đến thành phần hóa học Kim Ngân Hoa

Thành phần hóa học của Kim ngân hoa có thể bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố, bao gồm điều kiện khí hậu, thổ nhưỡng, thời điểm thu hoạch và phương pháp chế biến. Sự khác biệt về thành phần hóa học có thể dẫn đến sự khác biệt về hoạt tính sinh học và hiệu quả điều trị. Do đó, việc kiểm soát các yếu tố này là rất quan trọng để đảm bảo chất lượng của dược liệu.

2.2. Ưu điểm của phương pháp nuôi cấy tế bào thực vật in vitro

Phương pháp nuôi cấy tế bào thực vật in vitro mang lại nhiều ưu điểm so với việc khai thác dược liệu từ tự nhiên. Nó cho phép sản xuất hoạt chất sinh học một cách ổn định, không phụ thuộc vào mùa vụ và điều kiện môi trường. Nuôi cấy tế bào cũng giúp kiểm soát chất lượng sản phẩm và giảm thiểu nguy cơ ô nhiễm. Ngoài ra, phương pháp này còn có tiềm năng sản xuất các hợp chất thứ cấp quý hiếm mà cây trồng tự nhiên không thể tạo ra.

2.3. Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật trong sản xuất dược liệu

Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật ngày càng được ứng dụng rộng rãi trong sản xuất dược liệu. Nó cho phép sản xuất các hoạt chất sinh học có giá trị cao với quy mô lớn và chi phí hợp lý. Nhiều công ty dược phẩm đã sử dụng phương pháp này để sản xuất các loại thuốc và thực phẩm chức năng từ các loại cây dược liệu quý hiếm.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Kim Ngân Hoa

Nghiên cứu này sử dụng phương pháp nuôi cấy tế bào để tạo ra mô sẹo từ Kim ngân hoa. Sau đó, các dịch chiết từ mô sẹo, hoa và cành lá được khảo sát thành phần flavonoid và saponin triterpenoid bằng phương pháp trắc nghiệm sinh hóa và sắc ký lớp mỏng (TLC). Cuối cùng, hoạt tính kháng khuẩn của các dịch chiết được đánh giá trên hai chủng vi khuẩn E.coli và Samonella. Các phương pháp phân tích thống kê được sử dụng để đánh giá ý nghĩa thống kê của kết quả.

3.1. Quy trình nuôi cấy mô sẹo Kim Ngân Hoa chi tiết

Quy trình nuôi cấy mô sẹo Kim ngân hoa bao gồm các bước: chọn mẫu, khử trùng, tạo môi trường nuôi cấy, cấy mẫu, và theo dõi sự phát triển của mô sẹo. Các yếu tố như ánh sáng, nhiệt độ, và độ ẩm được kiểm soát chặt chẽ để đảm bảo sự phát triển tối ưu của tế bào thực vật. Môi trường nuôi cấy được bổ sung các chất dinh dưỡng và hormone thực vật cần thiết.

3.2. Phương pháp sắc ký lớp mỏng TLC phân tích thành phần

Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) là một kỹ thuật đơn giản và hiệu quả để phân tích thành phần hóa học của dịch chiết Kim ngân hoa. Nó cho phép xác định sự hiện diện của các flavonoid và saponin triterpenoid dựa trên sự khác biệt về khả năng di chuyển của chúng trên bản mỏng sắc ký. Kết quả TLC được so sánh với các chất chuẩn để xác định danh tính của các hợp chất.

3.3. Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn in vitro của dịch chiết

Hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết Kim ngân hoa được đánh giá bằng phương pháp khuếch tán trên môi trường thạch. Các chủng vi khuẩn E.coli và Samonella được sử dụng để kiểm tra khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn. Vòng vô khuẩn xung quanh đĩa giấy tẩm dịch chiết cho thấy hoạt tính kháng khuẩn của Kim ngân hoa.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học Kim Ngân Hoa

Kết quả nghiên cứu cho thấy mô sẹo Kim ngân hoa có chứa flavonoid và saponin triterpenoid. Dịch chiết từ mô sẹo và hoa có hoạt tính kháng khuẩn đối với cả hai chủng vi khuẩn E.coli và Samonella. Hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết hoa cao hơn so với dịch chiết mô sẹo. Các kết quả này cho thấy tiềm năng của Kim ngân hoa trong việc phát triển các sản phẩm kháng khuẩn tự nhiên.

4.1. Kết quả khảo sát thành phần flavonoid và saponin

Phương pháp trắc nghiệm sinh hóa và sắc ký lớp mỏng (TLC) đã xác định sự hiện diện của flavonoid và saponin triterpenoid trong mô sẹo, hoa và cành lá Kim ngân hoa. Các hợp chất này được cho là có vai trò quan trọng trong hoạt tính sinh học của Kim ngân hoa.

4.2. So sánh hoạt tính kháng khuẩn của các bộ phận cây

Dịch chiết từ hoa Kim ngân hoa có hoạt tính kháng khuẩn mạnh hơn so với dịch chiết từ mô sẹo và cành lá. Điều này có thể là do sự khác biệt về thành phần hóa học và nồng độ của các hoạt chất sinh học trong các bộ phận khác nhau của cây.

4.3. Phân tích thống kê kết quả hoạt tính kháng khuẩn

Kết quả phân tích thống kê cho thấy sự khác biệt về hoạt tính kháng khuẩn giữa các dịch chiết là có ý nghĩa thống kê. Điều này chứng minh rằng Kim ngân hoa có khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn và có thể được sử dụng để phát triển các sản phẩm kháng khuẩn tự nhiên.

V. Ứng Dụng Thực Tiễn và Phát Triển Dược Phẩm Kim Ngân Hoa

Kết quả nghiên cứu này mở ra nhiều hướng ứng dụng thực tiễn cho Kim ngân hoa. Dịch chiết Kim ngân hoa có thể được sử dụng để phát triển các sản phẩm kháng khuẩn tự nhiên, thực phẩm chức năng, và dược phẩm. Việc tối ưu hóa quy trình nuôi cấy tế bào có thể giúp tăng cường sản xuất các hoạt chất sinh học có giá trị, đáp ứng nhu cầu ngày càng tăng của thị trường.

5.1. Tiềm năng phát triển dược phẩm kháng khuẩn từ Kim Ngân Hoa

Kim ngân hoa có tiềm năng lớn trong việc phát triển các dược phẩm kháng khuẩn tự nhiên. Các nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác dụng và tính an toàn của dịch chiết Kim ngân hoa là cần thiết để đưa ra các sản phẩm hiệu quả và an toàn cho người sử dụng.

5.2. Ứng dụng Kim Ngân Hoa trong thực phẩm chức năng

Kim ngân hoa có thể được sử dụng làm thành phần trong thực phẩm chức năng nhờ vào hoạt tính chống oxy hóa và kháng viem. Các sản phẩm này có thể giúp tăng cường sức đề kháng và bảo vệ cơ thể khỏi các tác nhân gây bệnh.

5.3. Nghiên cứu phát triển các sản phẩm chăm sóc da từ Kim Ngân Hoa

Hoạt tính kháng viem và kháng khuẩn của Kim ngân hoa có thể được ứng dụng trong các sản phẩm chăm sóc da, giúp điều trị mụn trứng cá và các bệnh ngoài da khác. Các nghiên cứu về độc tính tế bào và tính an toàn của dịch chiết Kim ngân hoa trên da là cần thiết để đảm bảo an toàn cho người sử dụng.

VI. Kết Luận và Hướng Nghiên Cứu Hoạt Tính Sinh Học

Nghiên cứu này đã chứng minh hoạt tính sinh học của Kim ngân hoa thông qua phương pháp nuôi cấy tế bào. Kết quả cho thấy tiềm năng của Kim ngân hoa trong việc phát triển các sản phẩm kháng khuẩn tự nhiên. Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc xác định và phân lập các hoạt chất cụ thể, nghiên cứu cơ chế tác dụng, và đánh giá tính an toàn của Kim ngân hoa.

6.1. Tóm tắt kết quả nghiên cứu và ý nghĩa khoa học

Nghiên cứu đã cung cấp bằng chứng khoa học về hoạt tính kháng khuẩn của Kim ngân hoa và tiềm năng của nó trong việc phát triển các sản phẩm tự nhiên. Kết quả này đóng góp vào việc bảo tồn và phát triển nguồn dược liệu quý giá của Việt Nam.

6.2. Hướng nghiên cứu tiếp theo về Kim Ngân Hoa

Các hướng nghiên cứu tiếp theo nên tập trung vào việc xác định và phân lập các hoạt chất cụ thể, nghiên cứu cơ chế tác dụng, đánh giá tính an toàn, và tối ưu hóa quy trình nuôi cấy tế bào để tăng cường sản xuất các hoạt chất sinh học có giá trị.

6.3. Đề xuất các nghiên cứu về độc tính tế bào và dược động học

Các nghiên cứu về độc tính tế bào và dược động học là cần thiết để đảm bảo tính an toàn và hiệu quả điều trị của Kim ngân hoa. Các nghiên cứu này sẽ cung cấp thông tin quan trọng cho việc phát triển các dược phẩm và thực phẩm chức năng từ Kim ngân hoa.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Đặt vấn đề Ứng dụng nuôi cấy tế bào thực vật để sản xuất các hợp chất thứ cấp đã tạo ra một bước tiến xa trong khoa học thực vật. Việc phát triển và sử dụng các công cụ di truyền cũng như sự hiểu biết ngày càng sâu sắc hơn về bản chất của tế bào và các phương thức điều hòa quá trình chuyển hóa trao đổi chất là cơ sở cho việc sản xuất chúng ở quy mô thương mại. Do nhu cầu sử dụng các sản phẩm tự nhiên trong y dược ngày càng tăng nhưng sản lượng của chúng ở cây trồng tự nhiên lại rất thấp đã thúc đẩy sự phát triển không ngừng của công nghệ nuôi cấy tế bào ở quy mô lớn. Tuy nhiên, các con đường sinh tổng hợp các hợp chất thứ cấp mong muốn trong thực vật cũng như trong nuôi cấy tế bào ở quy mô lớn là rất phức tạp.

Vì vậy, các thông tin ở mức độ tế bào và phân tử của các quá trình chuyển hóa là rất cần thiết cho sự phát triển của sản xuất công nghiệp. Nhiều nghiên cứu được đã thực hiện ở các điều kiện khác nhau để giải thích các hiện tượng xuất hiện trong quá trình sản xuất các chất trao đổi thứ cấp từ các tế bào thực vật nuôi cấy in vitro. Các kết quả này cũng cho thấy các hệ thống nuôi cấy tế bào thực vật có tiềm năng rất lớn cho việc khai thác thương mại các chất trao đổi thứ cấp. Mục đích và nội dung nghiên cứu 1.

Mục đích Bước đầu khảo sát một vài hợp chất có hoạt tính sinh học có trong mẫu mô sẹo, hoa, cành lá của Kim ngân hoa và thử hoạt tính của chúng lên hai chủng vi khuẩn E.coli và Samonella. Từ đó tạo tiền đề cho những nghiên cứu tách chiết và phân lập các chất có giá trị dược lý trong mô sẹo, hoa, cành lá Kim ngân làm nguyên liệu phục vụ cho nghành công nghiệp dược. 1 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo 1. Nội dung nghiên cứu Bước đầu khảo sát hai hợp chất có hoạt tính sinh học được biết nhiều trong Kim ngân hoa là saponin triterpenoid và flavonoid bằng hai phương pháp: trắc nghiệm sinh hóa và sắc ký lớp mỏng (TLC).

Thử hoạt tính dịch chiết của mô sẹo, hoa đối với hai chủng vi khuẩn E.coli và Samonella. 2 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2. Khái niệm chung về các hợp chất tự nhiên 2. Khái niệm Hợp chất tự nhiên, là chất biến dưỡng thứ cấp, có trọng lượng phân tử nhỏ, được tạo ra bởi cơ thể của một sinh vật.

Chất biến dưỡng thứ cấp có thể cần thiết hoặc nhiều khi không cần thiết cho sự sống của sinh vật, điều này khác với những hợp chất đại phân tử như protein, acid nucleic, polysacchride là những hợp chất căn bản cần thiết đối với sự sống của mỗi sinh vật. Phân loại Các chất biến dưỡng thứ cấp bao gồm nhiều loại hợp chất và được sắp xếp thành những nhóm khác nhau. Việc phân loại các hợp chất thành một nhóm thường không phải bởi một định nghĩa duy nhất, cũng như ranh giới của một nhóm thường không rõ ràng. Alkaloid Alkaloid là những hợp chất có tính base yếu, do sự có mặt của nguyên tử nitơ.

Tính base của các alkaloid cũng khác nhau tùy theo sự hiện diện của các nhóm thế R (mang các nhóm chức khác nhau) gắn trên nguyên tử nito. Các alkaloid chia thành ba loại:  Alkaloid thật: là những hợp chất có hoạt tính sinh học, luôn có tính base, thường được sinh tổng hợp từ amino acid, phân bố giới hạn trong thực vật và hiện diện trong cây dưới dạng muối của một acid hữu cơ.  Protoalkaloid được xem là những amin có hoạt tính sinh học kể cả mescalin và N, N–dimetyltryptamin. Chúng là những amin đơn giản, được tổng hợp từ các amino acid, trong đó nguyên tử nitơ không ở trong vòng dị hoàn.

 Giả alkaloid là những hợp chất không bắt nguồn từ những amino acid, bao gồm hai nhóm hợp chất lớn là alkaloid steroid và alkaloid terpenoid. 3 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo 2. Flavonoid  Khái niệm Flavonoid là một nhóm hợp chất lớn thường gặp trong thực vật. Hơn một nữa rau quả thường dùng có chứa flavonoid.

Flavonoid cũng là thành phần hay gặp trong dược liệu có nguồn gốc từ thực vật. Cho đến nay có khoảng 4.000 chất đã được xác định cấu trúc. Chỉ riêng 2 nhóm flavon và flavonol và với nhóm thế là -OH và / hoặc -OCH3 thì theo lý thuyết có thể gặp 38. Phần lớn các chất flavonoid có màu vàng (flavonoid do từ flavus có nghĩa là màu vàng).

Tuy nhiên một số có màu xanh, tím, đỏ, một số khác lại không có màu cũng thuộc nhóm flavonoid. Trong thực vật cũng có một số nhóm hợp chất khác không thuộc flavonoid nhưng lại có màu vàng như carotenoid, anthranoid, xanthon.  Cấu trúc hóa học Người ta xếp vào nhóm flavonoid những chất có cấu tạo khung theo kiểu C6– C3–C6 hay nói cách khác là khung cơ bản gồm 2 vòng benzen A và B nối với nhau qua một mạch 3 carbon.1: khung cơ bản của flavonoid Người ta xem cấu trúc này gồm hai phần (được theo dõi bằng chất đồng vị): + C6 – C3 (tức là vòng B + 3C) phần này xuất phát từ acid shikimic dẫn đến các dẫn chất phenylpropanoid 4 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo Hình 2.2: sơ đồ hình thành phenylpropanoid + C6 hay là (vòng A) xuất phát từ 3 đơn vị acetat dẫn đến acid triacetic. Sau đó 2 phần được ghép lại tạo thành chalcone Hình 2.3: cấu tạo cơ bản của chalcone Phần lớn các flavonoid có thể xem là các dẫn chất có gốc phenyl của các nhân trên.

Đánh số thứ tự bắt đầu từ dị vòng, số 1 từ dị tố oxy rồi tiếp đến vòng A, vòng B đánh số phụ. Trường hợp không có vòng C (nghĩa là mạch 3C hở) ví dụ trường hợp chalcon thì đánh số bắt đầu từ vòng B, vòng A đánh số phụ. 5 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo Hình 2.4: cấu tạo cơ bản của flavan  Phân loại flavonoid Sự phân loại các flavonoid dựa vào vị trí của gốc aryl (vòng B) và các mức độ oxy hóa của mạch 3C. Người ta chia ra: Euflavonoid là các flavonoid có gốc aryl ở vị trí C – 2, isoflavonoid có gốc aryl ở vị trí C – 3, neoflavonoid có gốc ary ở vị trí C – 4.

Người ta còn phân biệt biflavanoid là những flavonoid dimer, triflavonoid cấu tạo bởi 3 monomer flavonoid, flavolignan là những flavonoid mà phân tử có một phần cấu trúc ligan.  Euflavonoid: bao gồm các nhóm: anthocyanidin, flavan, flavan 3–ol flavan 4– ol, 3,4–diol, flavanon, 3–hydroxy flavanon, flavon, flavonol, dihydrochalcon, chalcon, auron.  Isoflavonoid: bao gồm nhiều nhóm khác nhau: isoflavan, isoflav-3–ene, isoflavan – 4 –ol, isoflavanon, isoflavon, rotenoid, pterocarpan, coumestan, 3– arylcoumarin, coumaronochromen, coumaronochromon, dihyroisochalcon, homoisoflavon. Isoflavonoid thường gặp trong họ Đậu – Fabaceac.

 Neoflavonoid chỉ có giới hạn trong một số loài thực vật, bao gồm: 4– arylchrroman, 4–arylcoumarin, dalbergion.  Biflavonoid và triflavonoid: những flavonoid dimer và trimer. Những hợp chất này được gọi là proanthocyanidin. Ở đây những biflavonoid tạo thành từ flavon, flavanon, dihydroflavonol–chalcon, dihydro chalcon, auron, isoflavon.

6 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo  Sự phân bố flavnoid trong thực vật Trong thực vật bậc thấp flavonoid ít được gặp. Trong ngành rêu chỉ phát hiện được rất ít chất. Trong dương xỉ số lượng flavonoid ít nhưng đều có mặt các nhóm anthocyanin, flavanon, flavon, flavonol, chalcon, dihydrochalcon. Ngành hạt trần có khoảng 700 loài, 20 họ, số lượng flavnoid cũng không nhiều nhưng cũng đủ các nhóm anthocyanidin, leucoanthocyanidin, flavanon, flavon, flavonol, isoflavon.

Nét đặc trưng của nghành hạt trần có khác thực vật bậc thấp và ngành hạt kín ở chỗ sự hiện diện của nhiều dẫn chất biflavonoid. Flavonoid tập trung chủ yếu vào ngành hạt kín ở lớp 2 lá mầm. Có rất nhiều họ chứa flavonoid và đủ các loại flavonoid. Tuy nhiên cũng có một vài nét đặc trưng cho một số họ ví dụ họ Asteraceae là một họ lớn với 15.000 loài, 1000 chi, có rất nhiều dẫn xuất thuộc các nhóm khác nhau.

Tuy nhiên, một số chi có nét đặc trưng riêng của nó, ví dụ trong các chi Carthamus, Coreopsis, Cosmos, Dahlia thì hay gặp các dẫn chất chalcon và auron. Chi Gymnosperma, Ageratum thì gặp các dẫn chất flavon và flavonol có nhiều nhóm thế có oxy (có thể đến 8 nhóm). Họ Fabaceae thì hay gặp các chất thuộc nhóm isoflavonoid. Họ Rutaceae thường gặp các flavon và flavonol có nhiều nhóm methoxy.

Họ Theaceae hay gặp các flavan–3–ol. Họ Ranunculaceae và Paeoniaceae hay gặp dẫn chất flavonol 3,7 diglycosid. Họ Rosaceae chi Rubrus và Prunus ở trong quả hay gặp anthocyanin có mạch đường phân nhánh. Họ Polygonaceae ở chi Hydropiper hay gặp các flavon và flavonol sulfat.

Lớp một lá mầm có 53 họ nhưng cho đến nay chỉ khoảng trên 10 họ tìm thấy có flavonoid: Amaryllidaceae, Araceae, Cannaceae, Commelinaceae, Iridaceae, Lemnaceae, Liliaceae, Musaceae, Oridaceae, Poaceae. Hàm lượng và cả thành phần flavonoid trong cây phụ thuộc vào nơi mọc. Cây mọc ở vùng nhiệt đới và núi cao thì hàm lượng cao hơn ở nơi cây thiếu ánh sáng. 7 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo Hình 2.5: sơ đồ sinh tổng hợp flavonoid  Tính chất Các dẫn chất flavon có màu vàng rất nhạt có khi không có màu (trường hợp các nhóm OH đã methyl hóa), flavonol vàng nhạt đến vàng, chalcon và auron vàng đậm, đến đỏ cam.

Các chất thuộc nhóm isoflavon, flavanon, isoflavanon, flavanonol, leuco–anthocyanidin, flavan–3–ol do không có nối đôi liên hiệp giữa vòng B với nhóm carbonyl nên không màu. Các dẫn chất anthocyanidin thì màu thay đổi tùy theo pH của môi trường. Tuy nhiên khi các flavonoid ở trong các bộ phận của cây thì còn phụ thuộc vào hỗn hợp với các sắc tố khác. Độ tan không giống nhau, thường flavonoid glycosid và flavonoid sulfat là những hợp chất phân cực nên không tan hoặc ít tan trong dung môi hữu cơ, tan được trong nước tốt nhất là cồn.

Các aglycon flavonoid thì tan được trong dung môi hữu cơ, không tan trong nước. Các dẫn chất flavnoid có nhóm 7–hydroxy thường đễ tan trong dung dịch kiềm loãng. 8 Đồ án tốt nghiệp SVTH: Nguyễn Thị Thu Thảo  Tác dụng sinh học của flavonoid Các dẫn chất flavonoid có khả năng loại bỏ các gốc tự do như -HO, -ROO. Các gốc này sinh ra trong tế bào bởi nhiều nguyên nhân và khi sinh ra cạnh DNA thì sẽ gây ra những ảnh hưởng nguy hại như gây biến dị, hủy hoại tế bào, gây ung thư, tăng nhanh sự lão hóa.

Thí nghiệm cho thấy khả năng ức chế của một số flavonoid theo thứ tự: myriceum > quercetin > rhammetin > morin > diosmetin > naringenin > apigenis > catechin > 5,7 dihydroxy–3’, 4’, 5’ trimethoxy flavon > robinin > kaempferol > flavon.