Nghiên cứu ảnh hưởng của elicitor lên sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid ở cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus) in vitro

LỜI CẢM ƠN

XÁC NHẬN VÀ CAM ĐOAN

TÓM TẮT

ABSTRACT

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1. Tổng quan về cây lan Kim tuyến

1.2. Đặc điểm thực vật học của cây lan Kim tuyến

1.3. Nguồn gốc và phân bố của cây lan Kim tuyến

1.4. Thành phần hóa học cây lan Kim tuyến

1.5. Giá trị kinh tế và ý nghĩa dược học cây lan Kim tuyến

1.6. Tình hình nghiên cứu về cây lan Kim tuyến

2. CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu

2.2. Hóa chất sử dụng trong nghiên cứu

2.3. Môi trường sử dụng nghiên cứu

2.4. Nội dung nghiên cứu

2.4.1. Khảo sát ảnh hưởng riêng lẻ của SA và YE đến khả năng sinh trưởng và tích lũy hợp chất ở cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume) in vitro

2.4.2. Khảo sát ảnh hưởng kết hợp của SA và YE đến khả năng sinh trưởng và tích lũy hợp chất ở cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume) in vitro

2.5. Phương pháp xác định hàm lượng flavonoid trong cây lan Kim tuyến in vitro

2.6. Phương pháp xử lí số liệu

3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. Kết quả nội dung 1: Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng riêng lẻ của SA và YE đến sự sinh trưởng và tích lũy hợp chất của cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume)

3.1.1. Kết quả xây dựng đường chuẩn quercetin

3.1.2. Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của SA đến sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid của cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume) in vitro

3.1.3. Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của YE đến sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid của cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume) in vitro

3.2. Nội dung 2: Kết quả thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng kết hợp của SA và YE lên sự sinh trưởng và tích lũy hợp chất của cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume)

4. CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

I. Tổng quan về nghiên cứu ảnh hưởng của elicitor

Nghiên cứu về ảnh hưởng của elicitor lên sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid ở cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus) in vitro đang thu hút sự quan tâm của nhiều nhà khoa học. Cây lan Kim tuyến là một loài thực vật quý hiếm, có giá trị dược liệu cao. Việc tìm hiểu các yếu tố ảnh hưởng đến sự phát triển của cây sẽ giúp tối ưu hóa quy trình nuôi cấy mô và tăng cường sản xuất các hợp chất có lợi.

1.1. Đặc điểm sinh học của cây lan Kim tuyến

Cây lan Kim tuyến có chiều cao từ 10-20 cm, với thân màu tím và lá mọc cách. Cây thường sinh trưởng dưới tán rừng, ở độ cao từ 500-1600 m. Đặc điểm này ảnh hưởng đến khả năng tích lũy flavonoid trong điều kiện nuôi cấy in vitro.

1.2. Giá trị dược học của flavonoid trong cây lan Kim tuyến

Các hợp chất flavonoid như quercetin và isorhamnetin trong cây lan Kim tuyến có khả năng chống oxi hóa và ngăn ngừa ung thư. Nghiên cứu cho thấy hàm lượng flavonoid cao có thể cải thiện sức khỏe con người.

II. Vấn đề và thách thức trong nghiên cứu cây lan Kim tuyến

Mặc dù cây lan Kim tuyến có nhiều giá trị, nhưng việc nghiên cứu và phát triển giống cây này gặp nhiều thách thức. Sự cạn kiệt nguồn gen tự nhiên và khó khăn trong việc nhân giống là những vấn đề chính. Việc áp dụng công nghệ nuôi cấy mô và sử dụng elicitor có thể là giải pháp hiệu quả.

2.1. Tình trạng cạn kiệt nguồn gen cây lan Kim tuyến

Cây lan Kim tuyến đang bị khai thác quá mức, dẫn đến tình trạng cạn kiệt. Việc bảo tồn và phát triển giống cây này là rất cần thiết để duy trì nguồn gen quý hiếm.

2.2. Khó khăn trong quy trình nuôi cấy mô

Quy trình nuôi cấy mô cây lan Kim tuyến gặp khó khăn trong việc tạo ra môi trường tối ưu cho sự phát triển. Việc nghiên cứu các yếu tố như elicitor có thể giúp cải thiện tình hình này.

III. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của elicitor

Nghiên cứu sử dụng các phương pháp nuôi cấy mô in vitro để khảo sát ảnh hưởng của elicitor như axit salicylic (SA) và chiết xuất men (YE) đến sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid. Các thí nghiệm được thực hiện trên môi trường Murashige và Skoog (MS) với các nồng độ khác nhau.

3.1. Thiết kế thí nghiệm với axit salicylic

Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của SA được thực hiện với các nồng độ khác nhau. Kết quả cho thấy nồng độ 5 mg/L SA mang lại hiệu quả cao nhất trong việc kích thích sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid.

3.2. Thiết kế thí nghiệm với chiết xuất men

Chiết xuất men (YE) cũng được khảo sát với nồng độ 7,5 mg/L cho thấy khả năng tích lũy flavonoid cao. Việc kết hợp giữa SA và YE cho kết quả tốt nhất trong việc tăng cường sinh trưởng.

IV. Kết quả nghiên cứu về sự tích lũy flavonoid

Kết quả nghiên cứu cho thấy sự kết hợp giữa SA và YE có tác động tích cực đến sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid ở cây lan Kim tuyến. Hàm lượng flavonoid cao nhất đạt được là 31,61 mg/g khi sử dụng nồng độ kết hợp 2,5 mg/L SA và 2,5 mg/L YE.

4.1. Đánh giá hàm lượng flavonoid trong cây lan Kim tuyến

Hàm lượng flavonoid được xác định bằng phương pháp đo quang phổ UV-Vis. Kết quả cho thấy sự gia tăng đáng kể trong các mẫu được bổ sung elicitor.

4.2. So sánh hiệu quả giữa các phương pháp

So sánh giữa các phương pháp cho thấy sự kết hợp giữa SA và YE mang lại hiệu quả cao nhất trong việc kích thích sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid.

V. Kết luận và triển vọng nghiên cứu trong tương lai

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc sử dụng elicitor có thể cải thiện sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid ở cây lan Kim tuyến. Các kết quả này mở ra hướng đi mới cho việc phát triển giống cây này trong tương lai, đồng thời góp phần bảo tồn nguồn gen quý hiếm.

5.1. Tầm quan trọng của nghiên cứu trong bảo tồn cây lan Kim tuyến

Nghiên cứu không chỉ giúp tăng cường sản xuất flavonoid mà còn góp phần bảo tồn cây lan Kim tuyến, một loài thực vật quý hiếm đang có nguy cơ tuyệt chủng.

5.2. Hướng nghiên cứu tiếp theo trong lĩnh vực này

Các nghiên cứu tiếp theo có thể tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình nuôi cấy mô và mở rộng ứng dụng của elicitor trong các loài thực vật khác.

Ảnh hưởng của elicitor đến sự sinh trưởng và tích lũy flavonoid ở cây lan Kim tuyến (Anoectochilus setaceus) in vitro