CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1. Tổng quan về bệnh do nhiễm Leishmania (Leishmaniasis) 1. Giới thiệu chung về bệnh [22] Leishmaniasis là bệnh do ký sinh trùng đơn bào tử hơn 20 loài Leishmania gây ra. Hơn 90 loài ruồi cát được biết là trung gian lây truyền ký sinh trùng Leishmania qua các vết cắn.
Bệnh xuất hiện ở 3 dạng chính: • Leishmaniasis nội tạng, còn được gọi là kala-azar, gây ra bởi phức hợp Leishmania donovani- L. donovani sensu stricto, gây tử vong nếu không được điều trị trong hơn 95% trường hợp. Nó được đặc trưng bởi những cơn sốt bất thường, sụt cân, lá lách, gan to và thiếu máu. Hầu hết các trường hợp xảy ra ở Brazil, Đông Phi và Ấn Độ.
Ước tính có khoảng 50.000 trường hợp VL mới xảy ra trên toàn thế giới hàng năm, chỉ có 25–45% được báo cáo cho WHO. Bệnh có khả năng bùng phát và gây tử vong. • Leishmaniasis ở da, là dạng phổ biến nhất, gây tổn thương da, chủ yếu là loét, trên các bộ phận hở của cơ thể. Những điều này có thể để lại những vết sẹo suốt đời.
Khoảng 95% trường hợp CL xảy ra ở Châu Mỹ, lưu vực Địa Trung Hải, Trung Đông và Trung Á. Người ta ước tính có khoảng 600.000 đến 1 triệu trường hợp mới xảy ra trên toàn thế giới hàng năm nhưng chỉ có khoảng 200.000 trường hợp được báo cáo cho WHO. • Leishmaniasis ở niêm mạc dẫn đến phá hủy một phần hoặc toàn bộ màng nhầy của mũi, miệng và cổ họng. Hơn 90% trường hợp mắc bệnh xảy ra ở Bolivia, Brazil, Ethiopia và Peru.
Mục tiêu của khoá luận này hướng tới việc bào chế viên nang để điều trị bệnh Leishmania nội tạng. Các nhóm thuốc điều trị - Trong nhiều năm, muối antimoni hóa trị V là thuốc được khuyến cáo hàng đầu cho VL và CL. Muối antimoni hóa trị V– meglumine antimoniate – có hiệu quả khác nhau đối với VL và CL, có thể tiêm tĩnh mạch (IV), tiêm bắp (IM) hoặc tiêm mạch bạch huyết (IL) [24], [25], [26] Hiện đang có những nỗ lực nhằm giảm độc tính và cải thiện việc cung cấp antimoni (Frezard và cộng sự, 2009) bao gồm các công thức dựa trên liposome để điều trị VL (Schettini và cộng sự, 2006) và công thức dựa trên CD để dùng đường uống (Demicheli và cộng sự, 2004) [24]. 2 - Amphotericin B deoxycholate (Fungizone) là một loại thuốc chống nấm toàn thân và có hoạt tính chống Leishmania cao.
Do khả năng kháng kháng sinh ngày càng tăng nên nó được sử dụng làm thuốc thay thế để điều trị VL. Amphotericin B đã thay thế thuốc antimonials thành liệu pháp điều trị đầu tay đối với VL ở một số khu vực trên thế giới, nơi tỷ lệ thất bại trong điều trị đối với thuốc antimonials đạt >60%. Nó có độc tính cao, đòi hỏi phải tiêm tĩnh mạch cẩn thận và chậm rãi. Sốt liên quan đến truyền dịch, ớn lạnh và rét run là những tác dụng phụ hầu như phổ biến sau khi điều trị bằng amphotericin B.
Tác dụng phụ đe dọa tính mạng như hạ kali máu, độc tính trên thận và sốc phản vệ liều đầu tiên không phải là hiếm. Hơn nữa, thuốc đắt tiền và đòi hỏi một phác đồ phức tạp [24], [25], [26]. Đây là loại thuốc điều trị bằng đường uống hiệu quả đầu tiên chống lại VL, được khuyến cáo là thuốc hàng đầu cho trẻ em nhiễm VL (Bhattacharya và cộng sự, 2004). Hiệu quả chống bệnh leishmania của nó được coi là một sự kiện mang tính bước ngoặt vì đây là lần đầu tiên điều trị bằng miệng hiệu quả cho VL, trong đó có Sbv trường hợp kháng thuốc [24], [26].
Tuy vậy, miltefosine cũng có nhiều tác dụng phụ như nhiễm độc đường tiêu hóa nghiêm trọng và tăng đáng kể nồng độ aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase và creatinine trong huyết thanh. Miltefosine là chất gây quái thai do đó bị nghiêm cấm sử dụng ở phụ nữ mang thai hoặc ở những phụ nữ có khả năng mang thai trong vòng hai tháng điều trị [25], [26]. Nhược điểm của Miltefosine liệu pháp điều trị là thời gian bán hủy dài (150–200 giờ), điều này có thể khuyến khích sự phát triển của tình trạng kháng thuốc và tái phát khi được sử dụng làm thuốc đơn trị liệu, đặc biệt là trong các khóa học không đầy đủ. Ngoài ra, bằng miệng điều trị và cải thiện triệu chứng sớm có xu hướng nó để điều trị không đầy đủ mà không có sự giám sát chặt chẽ [26].
- Sitamaquine là thuốc dùng đường uống thứ hai đang được phát triển để điều trị bệnh Leishmania, sau miltefosine và gần đây đã được thử nghiệm lâm sàng (Jha và cộng sự, 2005). Nó là dẫn chất của 8-amino-quinoline và các nghiên cứu lâm sàng sơ bộ ở Kenya và Brazil cho thấy hiệu quả khả quan đối với các loài Leishmania khác nhau (Sherwood và cộng sự, 1994, Dietze và cộng sự, 2001). Một nghiên cứu gần đây cho thấy rằng nó tấn công succinate dehydrogenase, gây ra stress oxy hóa ở L. donovani prosastigotes (Carvalho et al.
Các tác dụng phụ bao gồm nhiễm độc thận 3 (viêm thận), đau bụng và nhức đầu, chủ yếu có thể quan sát được ở những bệnh nhân dùng liều cao hơn [26]. Tóm lại, tất cả các loại thuốc nêu trên nếu sử dụng riêng lẻ để điều trị bệnh Leishmania đều có những hạn chế. Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), sau cuộc họp năm 2010, khuyến khích các nước áp dụng chính sách dựa trên kết hợp các liệu pháp có sẵn (WHO, 2010). Tuy nhiên, việc hạn chế về đường dùng trên thị trường, các vấn đề về độc tính và kháng thuốc của các liệu pháp hiện tại làm nổi bật sự cần thiết của các loại thuốc mới cho bệnh nhân VL [24].
Gần đây, BBR, một dược chất có nguồn gốc thiên nhiên nhưng kém tan và kém hấp thu khi dùng qua đường uống, đang thu hút được sự chú ý để phát triển các dạng thuốc mới kháng Leishmania. Bên cạnh đó, các dẫn chất CDs cũng cho thấy đây là 1 nhóm tá dược có tiềm năng trong việc phát triển các dạng thuốc đường uống để điều trị Leishmania. Các đặc tính đáng chú ý và tiềm năng của BBR và CDs trong việc phát triển dạng thuốc dùng đường uống kháng leishmania được trình bày dưới đây. Tổng quan về Berberin clorid 1.
Công thức cấu tạo [2] Hình 1. Công thức cấu tạo của berberin clorid 1. Công thức phân tử: C20H18NO4C1. Khối lượng phân tử: 407,9 [2].
Tên khoa học: 5,6 dihydro-8,9-dimethoxy-1,3-dioxa-6a-azoniaindeno (5,6-a) anthracen clorid dihydrat. Nguồn gốc Berberin là một alkaloid thuộc nhóm isoquinolin. Trong tự nhiên ở Việt Nam, BBR được tìm thấy trong rễ, thân rễ, thân và vỏ cây một số loài thực vật như Vàng Đằng (Cosinium usitatum Pierre), Hoàng liên gai (Berberis wallichiana DC), Hoàng liên gai (Maholia 4 bealii Carr). Hiện nay BBR được chiết xuất chủ yếu từ thân và rễ cây Vàng Đằng (Coscinium fenestratum), với hàm lượng 1,5 -2,3 % [1].
Lý tính Cảm quan: Tinh thể hay bột kết tinh màu vàng, không mùi, có vị rất đắng [2]. Độ tan: Tan trong nước nóng, khó tan trong ethanol và nước, rất khó tan trong cloroform, không tan trong ether [2]. BBR không có carbon bất đối nên không có đồng phân quang học. Nhiệt độ nóng chảy: 145oC.
BBR kém ổn định trong môi trường kiềm mạnh, dễ hỗ biến mở vòng isoquinolin cho chức aldehyd gọi là berberinal. Liên kết đôi C=N của vòng isoquinolin tham gia phản ứng khử nối đôi. Tác dụng dược lý BBR theo y học cổ truyền được sử dụng để điều trị các bệnh nhiễm trùng, nhiễm khuẩn khác nhau về tai, mắt và miệng; ký sinh trùng đường ruột; chữa lành vết thương; chữa bệnh trĩ, khó tiêu, lỵ; hoặc điều trị rối loạn tử cung và âm đạo [18], [36]. BBR và các dẫn xuất của nó đã được báo cáo là một tác nhân tiềm năng để điều trị cả bệnh Leishmania ở nội tạng và da (Ghosh và cộng sự, 1985; Vennerstrom J L và cộng sự, 1990) [43].
Các nghiên cứu khác cũng đã chứng minh rằng BBR có hoạt tính diệt ký sinh trùng Leishmania, bằng cách tạo ra sự mất cân bằng oxy hóa khử và khử cực của màng ty thể, dẫn đến cái chết của tế bào theo chương trình độc lập với caspase (De Sarkar và cộng sự, 2019) [37]. Theo (Alamzeb và cộng sự, 2021), các alkaloid berberine bao gồm berberine, columbamine, jatrorrhizine, palmatine và 8- trichloromethyldihydroberberine có đặc tính diệt Leishmania mạnh, chống lại L. tropica với độc tính thấp trên tế bào động vật có vú [38], [39], [42]. Gần đây, đã có những báo cáo về tiềm năng cao của các công thức chứa BBR đối với bệnh Leishmania ở nội tạng và da [41].
Ví dụ, BBR liposome đã được báo cáo là có khả năng giảm lượng ký sinh trùng một cách hiệu quả trong mô hình chuột mắc bệnh Leishmania nội tạng (Calvo và cộng sự, 2020) [40]. Hơn nữa, các tác giả cũng đã phát hiện ra rằng sử dụng kem BBR hai lần một ngày không độc hại và có thể ngăn chặn sự phát triển của ký sinh trùng cũng như cải thiện sự xuất hiện của các tổn thương của CL (Calvo và cộng sự, 2022). Khi kết 5 thúc điều trị, lượng ký sinh trùng trên da giảm 99,9% (4 log) và các gen liên quan đến quá trình chữa lành vết thương tăng so với chuột không được điều trị. Bên cạnh đó, đã có một số nghiên cứu cho thấy các thuốc hạ lipid máy, chẳng hạn như các statins, cũng góp phần trong điều trị bệnh leishmania.
Trong khi đó, một số nghiên cứu đã cho thấy BBR làm giảm đáng kể TG huyết thanh, cholesterol toàn phần (TC) và nồng độ lipoprotein-cholesterol tỷ trọng thấp (LDL-C) và làm tăng nồng độ lipoprotein- cholesterol tỷ trọng cao (HDL-C) trong huyết thanh. Chẳng hạn Wang và cộng sự nhận thấy rằng việc sử dụng BBR bằng đường uống trong 7 ngày (100 mg/kg/ngày) có thể làm giảm đáng kể TG, TC huyết thanh và LDL-C ở chuột đồng bị tăng lipid máu [18], [19]. Cơ chế hạ lipid máu của BBR có thể liên quan đến nhiều khía cạnh. Trong một nghiên cứu in vitro, BBR ức chế tổng hợp lipid bằng cách kích hoạt AMPK trong tế bào ung thư gan người HepG2.
BBR có thể làm tăng tính ổn định của LDLR mRNA thông qua con đường ERK và tăng cường hoạt động phiên mã của LDLR mRNA bằng cách kích hoạt con đường JNK/c-Jun [18]. Đặc tính dược động học Hấp thu: Một trong những nhược điểm chính của BBR là sinh khả dụng qua đường uống kém do khả năng hòa tan trong nước thấp (Zhang và cộng sự, 2013). Độ hòa tan của BBR phụ thuộc vào nhiệt độ và pH, tăng khi nhiệt độ tăng (Battu và cộng sự, 2010).