CHƯƠNG I. TÔNG QUAN TÀI LIỆU. TÔNG QUAN THỰC VẬT.222222222222222 22222222 ren re, 2 INNHG. Cac hop chat alkaloid trong cay Catharanthus roseus (L.
Cac Vinea alkaloid chit 2222222222512222221112221212222212222222222 222 xe 10 1. Phương pháp chiết xuất, định tính va dinh luong alkaloid. Tối ưu hóa bằng phần mềm. Giới thiệu chung.
Phương pháp tôi ưu hóa. Phần mềm tối ưu hóa Modde §.222221222222222222122222 xe 23 CHƯƠNG 2. ĐỒI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. Dung môi, hóa chất.
Trang thiết bị. 2122222122222 222222222 n2 ng 2n re rse 25 2. Phương pháp nghiên cứu. Chon alkaloid dé dinh hướng chiết.
Khảo sát các hợp chất alkaloid trong dược liệu Dừa cạn. Tôi ưu hóa quy trình chiết alkaloid (định hướng vinblastin) từ Dừa cạn. KẾT QUÁ VÀ BÀN LUẬN. Chon alkaloid dé dinh hướng chiết.
Dinh tính alkaloid trong thuốc tiêm Cytoblastin. Chiét alkaloid trong thuốc tiêm. Xác định khối lượng phân tử của chất chiết được từ thuốc tiêm bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ (MS ). Khảo sát cực đại hấp thụ cua alkaloid trong thuốc tiêm Cytoblastin 10mg/ 10ml bang phuong phap quang pO.
Xây đựng đường chuẩn alkaloid sulfat trong nước. Khảo sát các hợp chất alkaloid trong dược liệu Dừa cạn. Sơ bộ khảo sát thực vật. Dinh tinh alkaloid trong dược liệu Dừa cạn.
Xây dựng quy trình chiết alkaloid (định hướng vinblastin) từ cây Dừa CON n. Xây dựng các thí nghiệm tối ưu hóa. Kết quả tối ưu hóa.-2222222122222122222222 2 re nen rreee 51 3. Phân tích tương tác ảnh hưởng giữa các yếu tố.
Kết quả dự đoán. KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ. 58 AQ Ri nh. 59 TAI LIEU THAM KHAO DANH MUC KY HIEU, CHU VIET TAT STT C ữvếttắt Chữ viết đầy đủ tiếng Anh ngiiếng Việt 1 VB Vinblastin 2 VC Vincristine 3 SKLM Sắc ký lớp mỏng 4 UV-Vis Ultra violet—visible Tử ngoại — khả kiến High-performance liquid „ 5 HPLC chromatography Sac ky long hiéu nang cao Electrospray Ionization - Phương pháp khối phố với 6 ESI-MS Mase Spectrometer ionhóa phun điện 7 DDVN Dược điển Việt Nam 11 DANH MUC HINH ANH Hình 1.
Công thức cấu tạo Vinblastin. Công thức cấu tạo Vincristin. So dé chiét xuat alkaloid bang dung môi hữu cơ trong môi trường kiềm 15 (1) va dich chiết ra từ thuốc tiêm (2).-- ¿22 +22E22E2EE£EE2EE22E5712 1222212121222 22e, 33 Hinh 3. Phổ khối ESI-MS của địch chiết từ thuốc tiêm Cvtoblastin.
Phé UV-Vis ca vinblastine sulfat trong nước. Phổ UV-Vis của vinblastine base trone methanol,. Duong chuan thé hién su phu thuéc cua dé hap thụ vào nồng độ của vinblastine sulfat.o ieee cee cceecccceccccccccecccececeseeccessetesetttetttnevausseccecausaessesecesausaesness 37 Hinh 3. Soi bột dược liêu Dừa can.
Sắc ký đề xác định vinblastine (C) trong địch chiết (T) cây Dừa cạn. So d6 quy trình chiết xuất alkaloid chỉ tiết. Sắc ký đồ khảo sát dung môi chiết ở bước L. Sắc ký đề địch dung môi loại chlorophyvll (địch A).
Sắc ký đồ dịch alkaloid toàn phần (địch B). Sắc ký đồ so sánh dụng môi chiết tách alkaloid base toàn phần (dịch B) 48 Hình 3. Sắc ký đồ của các dung dịch trons thí nehiệm. Kết quả thê hiện mức ảnh hưởng của các yếu tô tối ưu hóa.
Hệ số biến thiên của các yếu tố ảnh hưởng. Đường cons thê hiện tương tác øiữa các yếu tô khảo sát. Đường thắng thê hiện mối quan hệ siữa kết quả dự đoán và kết quả thực DANH MUC BANG BIEU Bảng 2. Dung môi và hóa chất cần dùng.
Các thiết bị sử dụng. Nong độ các dung dịch thu được. Các yếu tô ánh hưởng và mức độ biến đối .--55- 5c sec sec 31 Bảng 3. Kết quả định tính alkaloid trong thuốc tiêm Cytoblastin bằng phương pháp hóa học.
D6 hap thy cua cac dung dich từ mẫu thuốc thử Cytoblastin. Két qua dinh tinh alkaloid trong bot duge liéu oo. cece cece 40 Bảng 3. Kết quả khảo sát đung môi chiết ở bước | (theo hình 2.
Kết quả khảo sát đung môi loại chlorophyll ở bước 2. Kết quá khảo sát dung môi chiết tach alkaloid base ở bước 3. Các thí nghiệm tối ưu hóa đã xây đựng được. Kết quả các thông số đánh giá mô hình thiết kế tối ưu hóa.
Điều kiện tối ưu hóa dự đoán. Két quả thực hiện 3 lần điều kiện tôi ưu. SE nen 57 Khóa luận tốt nghiệp được s đại học - Năm gc 2017 — 2018 Té wu ó quy trìn c ết xuất alkaloid trong cay Dwa can (Catharanthus roseus (L. Don Apocynaceace) Duong P wong Quynh Hướng dẫn khoa học: Ths.
Nguyễn Thị Hồng Phúc DAT VAN DE Ngày nay, ung thư đã trở thành căn bệnh nguy hiểm đe dọa đến tính mạng con người. Tuy nhiên, các thuốc điều trị ung thư vẫn còn hạn chế. Từ những năm 60 của thế kỉ trước, các nhà khoa học đã tìm ra được công dụng giúp điều trị ung thư của các hợp chất vinca alkaloid trong Dừa cạn. Thế nhưng, hàm lượng các alkaloid này trong cây không nhiều, vì vậy, nhằm xác định những điều kiện tối ưu đề chiết xuất alkaloid trong cây Dừa cạn, đề tài “Tố ưu ó quy trình chiết xuất alkaloid trong cây Dừa cạn (Cøfharanthus roseus (L.
Don)” đã được thực hiện. ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CUU Đối tượng nghiên cứu: Dược liệu là toàn cây Dừa cạn khô mua tại hiệu thuốc đông y trên đường Hải Thượng Lan Ông, Quận 5, Thành phố Hồ Chí Minh. Chất đối chiếu là vinblastin sulfat chiết từ dung dịch thuốc tiêm Cytoblastin của công ty Cipla Pharma. Phương pháp nghiên cứu: Xác định vinblastin từ thuốc tiêm; khảo sát các hợp chất alkaloid trong dược liệu Dừa cạn và tối ưu hóa quy trình chiết xuất alkaloid trong cây Dừa cạn.
KET QUA VA BAN LUAN Đề tài đã hoản thành các mục tiêu đưa ra và thu được các kết quả như sau: - Xác định vinblastin từ thuốc tiêm bằng: phản ứng hóa học, SKLM, khối phô MS. Sử dụng vinblastin nay làm chất đối chiếu trong dinh tinh alkaloid ti bét dược liệu. Khảo sát được cực dai hap thụ và xây dựng đường chuân vinblastin bằng phương pháp quang phô UV-Vis. - Định tính sơ bộ dược liệu Dừa cạn bằng phương pháp soi bột và định tính các alkaloid trong bột Dừa cạn bằng phương pháp hóa học và sắc ký lớp mỏng.
- Khảo sát các dung môi và xây dựng được quy trình chiết xuất alkaloid toàn phân (định hướng vinblastin) với dung môi chiết ban đầu là ethanol 80 %, dung môi loại chlorophyll là hexan và dung môi chiét tach alkaloid base tir dich acid la chloroform. - Tối ưu hóa quy trình chiết xuất alkaloid từ cây Dừa cạn bằng phần mềm Modde 5.0 và đã chọn được điều kiện tối ưu đề chiết xuất alkaloid từ Dừa cạn: tỷ lệ dung môt/ dược liệu là 5: l (tt/kl), thời gian ngâm lạnh là 1§ giờ và pH kiềm hóa là 8. KẾT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ Sau 2 tháng, đề tài đã đã thực hiện được 3 mục tiêu đề ra: Xác định vinblastin từ thuốc tiêm, khảo sát các hợp chất alkaloid trong dược liệu Dừa cạn và tối ưu hóa quy trình chiết xuất alkaloid trong cay Dwa can. Từ khóa: Dừa cạn, t6i wu héa, Catharanthus roseus, vinblastin, alkaloid.
Final essay for the degree of BS Pharm - Academic year 2017 — 2018 Optimizing conditions for the extraction of alkaloid from periwinkle (Catharanthus roseus (L. Don Apocynaceace) Duong Phuong Quynh Adviser: M. Nguyen Thi Hong Phuc INTRODUCTION These days, cancer has become a life-threatening disease. However, the cancer treatment is still limited.
Since the 1960s, scientists have found a therapeutic use of the vinca alkaloid which is extracted from Catharanthus roseus. However, the content of these alkaloids in the plant is not much, so to determine the optimal conditions for alkaloid extraction from periwinkle, the subject "Optimizing conditions for the extraction of alkaloid from periwinkle (Catharanthus roseus (L. Don Apocynaceace" was done. MATERIALS AND METHOD Material: Dried periwinkle plants was purchased at herbal medicine store on Hai Thuong Lan Ong Street, District 5, Ho Chi Minh City.
The comparator is vinblastine sulfate extracted from the Cytoblastin injection solution of Cipla Pharma. Method: Determination of vinblastine from injection; examination of alkaloid compounds in periwinkle and optimization conditions of the alkaloid extraction process from periwinkle. RESULTS AND DISCUSSTION The project has achieved the following objectives and results: - Determination of vinblastine from injection by: chemical reaction, thin layer chromatography, mass spectrometry. Use vinblastine (which had been determinated) as a comparator to do alkaloid qualitative analysis in dried periwinkle plant.
Determination vinblastine's wavelength of maximum absorbance and preparation of calibration curve of vinblastine by UV-Vis spectroscopy. - Preliminary qualification of dried periwinkle powder and carry out the qualitative analysis of alkaloid in dried periwinkle powder by chemical method and thin layer chromatography. - Investigating the solvents and complete the alkaloid extraction proceduce (orientation of vinblastine) with an initial extraction solvent is ethanol 80%, chlorophyll removal solvent is hexane and the solvent using to extract based alkaloid from an acidic solution is chloroform. - Optimizing the proceduce to extract alkaloid from periwinkle plant using Modde 5.0 and selecting the optimal conditions for alkaloid extraction from periwinkle: ratio of solvent and dried periwinkle powder 5: 1 (vAv), extracting duration is 18 hours and pH is 8.
CONCLUSION After 2 months of researching on the subject, the essay have finished 3 target: determination of vinblastine from injection; examination of alkaloid compounds in dried periwinkle and optimization conditions of the alkaloid extraction process from periwinkle. Keywords: Periwinkle, Catharanthus roseus, optimizing conditions, alkaloid, vinblastine. DAT VAN DE Hiện nay, khi thế giới ngày càng phát triển, con người ta tập quen dân với lối sống hiện đại hơn. Tuy nhiên, cũng từ những lối sống hiện đại này lại kéo theo những hệ lụy khác nghiêm trọng ảnh hưởng đến sức khỏe của con người.
Con người của thé kỉ 21 càng ngày cảng bị đe dọa bởi các chứng bệnh nguy hiểm, mà một trong số đó là ung thư. Khác với ngày xưa, ung thư ngày nay đã trở thành một căn bệnh thé ki, đe đọa đến tính mạng của hàng trăm triệu người trên khắp thế giới. Dù là căn bệnh nguy hiểm nhưng đến nay, ung thư chỉ được điều trị triệt đề khi phát hiện bệnh ở những giai đoạn sớm. Tuy nhiên, giới hạn các thuốc điều trị và giá cả các thuốc này đã khiến cho việc điều trị trở nên càng khó khăn hơn.
Thuốc điều trị ung thư, từ trước đến nay đều khá đắt đỏ bởi vì việc nghiên cứu các loại thuốc này vẫn còn hạn chế và đòi hỏi phải có nguồn kinh phí lớn. Tuy nhiên, vào những năm 60 của thế kỉ trước, các nhà khoa học đã khám phá ra được công dụng thần kì giúp điều trị ung thư của các hợp chất vinca alkaloid (đặc biệt là vinblastin và vincristin) trong Dừa cạn, một loài cây tương đối thân quen, từ đó mở ra một hướng đi mới cho việc nghiên cứu các loại thuốc chông ung thư. Các hợp chất vinca alkaloid trong cây Dừa cạn có tác động tốt trong điều trị ung thư, thế nhưng hàm lượng các alkaloid này trong cây không nhiều.