Luận văn thạc sĩ: Xây dựng cơ sở dữ liệu ADN và nhân giống Dây thìa canh (Gymnema sylvestre) bằng phương pháp nuôi cấy in vitro

• Tác giả: Đào Thị Thúy Hằng
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Văn Việt
• Trường học: Trường Đại Học Lâm Nghiệp
• Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học
• Đề tài: Nghiên Cứu Xây Dựng Cơ Sở Dữ Liệu ADN Và Nhân Giống Dây Thìa Canh (Gymnema Sylvestre) Bằng Phương Pháp Nuôi Cấy In Vitro
• Loại tài liệu: Luận Văn Thạc Sỹ
• Năm xuất bản: 2018
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Giới thiệu về Chi Gymnema
• 1.2. Đặc điểm thực vật và phân bố của chi Gymnema
• 1.3. Các loài thuộc chi Gymnema
• 1.4. Các loài thuộc chi Gymnema ở Việt Nam
• 1.5. Giới thiệu chung về cây Dây thìa canh
• 1.5.1. Nguồn gốc, phân loại
• 1.5.2. Đặc điểm thực vật học của cây Dây thìa canh
• 1.5.3. Kỹ thuật nuôi cấy mô - tế bào
• 1.5.4. Cơ sở của khoa học của phương pháp nuôi cấy mô - tế bào thực vật
• 1.5.5. Các bước tiến hành của phương pháp nuôi cấy mô - tế bào thực vật
• 2. CHƯƠNG 2: MỤC TIÊU, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Mục tiêu tổng quát
• 2.2. Mục tiêu cụ thể
• 2.3. Đối tượng, phạm vi nghiên cứu
• 2.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 2.4.1. Phương pháp nghiên cứu
• 2.4.2. Chỉ tiêu theo dõi, đánh giá
• 2.4.3. Phương pháp theo dõi
• 2.4.4. Phương pháp xử lý số liệu
• 2.4.5. Địa điểm và thời gian bố trí thí nghiệm
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Xây dựng cơ sở dữ liệu ADN mã vạch cây Dây thìa canh
• 3.2. Kết quả tách chiết DNA tổng số
• 3.3. Kết quả PCR các đoạn mã vạch ADN
• 3.4. Phân tích trình tự các đoạn mã vạch ADN với các đoạn mồi khác nhau
• 3.5. Kết quả nhân giống Dây thìa canh bằng phương pháp nuôi cấy in vitro
• 3.6. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian khử trùng bằng HgCl2 0,1% tỷ lệ tạo mẫu sạch và tái sinh chồi
• 3.7. Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng đến khả năng nhân nhanh chồi
• 3.8. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BAP đến nhân nhanh chồi
• 3.9. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BAP, Kinetin và NAA đến nhân nhanh chồi
• 3.10. Ảnh hưởng của hàm lượng sucrose đến khả năng ra rễ
• 3.11. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ IBA đến khả năng ra rễ
• 4. KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

I. Tổng quan về nghiên cứu cơ sở dữ liệu ADN Dây thìa canh

Nghiên cứu về Dây thìa canh (Gymnema sylvestre) đã trở thành một chủ đề quan trọng trong lĩnh vực công nghệ sinh học. Cây Dây thìa canh không chỉ có giá trị dược liệu cao mà còn là nguồn gen quý cần được bảo tồn. Việc xây dựng cơ sở dữ liệu ADN mã vạch cho loài cây này sẽ giúp xác định chính xác loài và hỗ trợ trong công tác bảo tồn. Mục tiêu của nghiên cứu này là phát triển phương pháp nhân giống Dây thìa canh bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro, nhằm tạo ra nguồn giống chất lượng cao.

1.1. Giới thiệu về Dây thìa canh và giá trị dược liệu

Dây thìa canh (Gymnema sylvestre) được biết đến với khả năng hỗ trợ điều trị bệnh tiểu đường. Thành phần chính của cây là axit gymnemic, có tác dụng ức chế hấp thu đường và kích thích sản sinh insulin. Nghiên cứu cho thấy cây này có thể giúp cải thiện tình trạng đường huyết ở bệnh nhân tiểu đường.

1.2. Tầm quan trọng của cơ sở dữ liệu ADN

Cơ sở dữ liệu ADN mã vạch giúp xác định loài và theo dõi sự đa dạng di truyền. Việc xây dựng cơ sở dữ liệu này cho Dây thìa canh sẽ hỗ trợ trong việc bảo tồn và phát triển giống cây, đồng thời cung cấp thông tin quý giá cho các nghiên cứu tiếp theo.

II. Thách thức trong việc nhân giống Dây thìa canh

Việc nhân giống Dây thìa canh gặp nhiều thách thức do cây này thường sinh trưởng không đồng đều khi nhân giống bằng phương pháp truyền thống. Hệ số nhân giống thấp và phụ thuộc vào mùa vụ là những vấn đề chính. Do đó, cần có giải pháp hiệu quả để đảm bảo nguồn giống ổn định và chất lượng.

2.1. Những khó khăn trong phương pháp nhân giống truyền thống

Phương pháp gieo hạt và giâm hom thường gặp khó khăn trong việc duy trì chất lượng giống. Cây sinh trưởng không đồng đều và dễ bị nhiễm bệnh, dẫn đến tỷ lệ sống sót thấp.

2.2. Tác động của môi trường đến sự phát triển của cây

Điều kiện môi trường như độ ẩm, ánh sáng và dinh dưỡng ảnh hưởng lớn đến sự phát triển của Dây thìa canh. Việc kiểm soát các yếu tố này là rất quan trọng để đạt được kết quả tốt trong nhân giống.

III. Phương pháp nuôi cấy in vitro cho Dây thìa canh

Phương pháp nuôi cấy in vitro đã được áp dụng để nhân giống Dây thìa canh với nhiều ưu điểm vượt trội. Kỹ thuật này cho phép tạo ra số lượng lớn cây giống trong thời gian ngắn, đồng thời đảm bảo chất lượng và tính đồng nhất của giống cây.

3.1. Quy trình nuôi cấy mô tế bào

Quy trình nuôi cấy mô tế bào bao gồm các bước chuẩn bị mẫu, khử trùng và nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng. Mô được chọn phải có khả năng tái sinh cao và sạch bệnh để đảm bảo tỷ lệ thành công.

3.2. Ảnh hưởng của các yếu tố đến sự phát triển mô

Tỷ lệ auxin và cytokinin trong môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến sự phát sinh hình thái của mô. Việc điều chỉnh nồng độ các chất này giúp tối ưu hóa quá trình nhân giống.

IV. Kết quả nghiên cứu về nhân giống Dây thìa canh

Kết quả nghiên cứu cho thấy phương pháp nuôi cấy in vitro đã mang lại hiệu quả cao trong việc nhân giống Dây thìa canh. Tỷ lệ sống sót và khả năng phát triển của cây giống được cải thiện đáng kể so với các phương pháp truyền thống.

4.1. Tỷ lệ thành công trong nhân giống

Tỷ lệ thành công trong việc nhân giống Dây thìa canh bằng phương pháp nuôi cấy in vitro đạt trên 80%. Điều này cho thấy phương pháp này là một giải pháp khả thi cho việc bảo tồn giống cây quý.

4.2. Đánh giá chất lượng cây giống

Cây giống Dây thìa canh được nhân giống in vitro có chất lượng tốt, đảm bảo hàm lượng hoạt chất ổn định và không bị nhiễm bệnh. Điều này rất quan trọng cho việc phát triển thương mại cây dược liệu.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu về xây dựng cơ sở dữ liệu ADN và nhân giống Dây thìa canh bằng phương pháp nuôi cấy in vitro đã mở ra nhiều cơ hội mới cho việc bảo tồn và phát triển giống cây này. Các kết quả đạt được sẽ là nền tảng cho các nghiên cứu tiếp theo trong lĩnh vực công nghệ sinh học.

5.1. Tương lai của nghiên cứu Dây thìa canh

Nghiên cứu sẽ tiếp tục mở rộng để tìm hiểu thêm về các loài khác trong chi Gymnema và ứng dụng công nghệ sinh học trong bảo tồn nguồn gen.

5.2. Ứng dụng thực tiễn trong sản xuất

Kết quả nghiên cứu có thể được áp dụng trong sản xuất thương mại Dây thìa canh, đáp ứng nhu cầu ngày càng cao về dược liệu tự nhiên trong điều trị bệnh.