Luận văn thạc sĩ công nghệ sinh học nghiên cứu ứng dụng hiệu ứng đồng vận để chế tạo oligo b glucan tan nước có hoạt tính kích kháng bệnh trên tôm thẻ chân trắng litopenaeus vannamei

Nghiên cứu ứng dụng hiệu ứng đồng vận trong chế tạo oligo b glucan tan nước, kích kháng bệnh cho tôm thẻ chân trắng Litopenaeus vannamei.

• Tác giả: Võ Thị Ngọc Diệp
• Người hướng dẫn: PGS. Lê Quang Luân
• Trường học: Đại học Nông Lâm
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Nghiên Cứu Ứng Dụng Oligo-Ø-Glucan Kích Kháng Bệnh Trên Tôm Thẻ Chân Trắng
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• TÓM TẮT
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Nguồn nguyên liệu chứa Ø-glucan
• 1.2. Tác dụng của Ø-glucan trên tôm
• 1.3. Tình hình nghiên cứu Ø-glucan trên thế giới và ở Việt Nam
• 1.4. Phương pháp cắt mạch Ø-glucan
• 1.4.1. Phương pháp chiếu xạ
• 1.4.2. Phương pháp chiếu xạ kết hợp xử lý hóa học
• 1.5. Tôm thẻ chân trắng và tình hình nuôi
• 1.5.1. Đặc điểm phân bố, phân loại và hình thái
• 1.5.2. Đặc điểm sinh trưởng
• 1.5.3. Tình hình nuôi tôm thẻ chân trắng
• 1.5.4. Dịch bệnh trên tôm thẻ chân trắng
• 1.5.4.1. Bệnh hoại tử gan tụy cấp tính
• 2. CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
• 2.2. Hóa chất và thiết bị
• 2.3. Chuẩn bị nước nuôi
• 2.4. Chuẩn bị thức ăn có bổ sung oligo-Ø-glucan ở các Mw khác nhau
• 2.5. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 2.5.1. Cắt mạch Ø-glucan bằng bức xạ gamma trong dung dịch H2O2
• 2.5.2. Chuẩn bị mẫu và chiếu xạ mẫu
• 2.5.3. Xác định hiệu suất thu nhận Ø-glucan
• 2.5.4. Phân tích quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier
• 2.5.5. Phân tích hàm lượng Ø-glucan trong mẫu tách chiết được
• 2.5.6. Hiệu ứng của oligo-Ø-glucan lên sự tăng trưởng và miễn dịch ở tôm thẻ
• 2.5.7. Đánh giá hiệu ứng tăng trưởng trên tôm ở các Mw khác nhau
• 2.5.8. Đánh giá hiệu ứng miễn dịch trên tôm thẻ chân trắng
• 2.5.9. Đánh giá hiệu quả bảo vệ tôm thẻ chân trắng của oligo-Ø-glucan trong điều kiện công độc với V. parahaemolyticus và WSSV
• 2.5.10. Xác định liều gây chết 70% (LD70) của vi khuẩn V. parahaemolyticus và WSSV ở tôm thẻ chân trắng
• 2.5.11. Xác định hiệu quả bảo vệ tôm thẻ chân trắng của oligo-Ø-glucan ở các Mw khác nhau trong điều kiện công độc
• 2.5.12. Xác định hiệu quả bảo vệ của oligo-Ø-glucan có Mw ~ 15 kDa trong điều kiện công độc theo nồng độ
• 2.6. Xử lý và phân tích số liệu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Cắt mạch Ø-glucan trong dung dịch H2O2 bằng chiếu xạ gamma Co-60
• 3.2. Hiệu suất tạo Ø-glucan tan nước
• 3.3. Sự thay đổi Mw của Ø-glucan chiếu xạ
• 3.4. Độ tinh khiết của oligo-Ø-glucan
• 3.5. Hiệu ứng tăng trưởng của Ø-glucan chiếu xạ trên tôm thẻ chân trắng
• 3.6. Hiệu ứng tăng cường miễn dịch của oligo-Ø-glucan ở tôm
• 3.6.1. Hoạt độ thực bào
• 3.6.2. Hoạt tính enzyme phenol oxidase
• 3.6.3. Hoạt tính enzyme superoxide dismutase
• 3.6.4. Xác định biểu hiện của một số gen miễn dịch
• 3.7. Xác định LD70 của V. parahaemolyticus và WSSV trên tôm thẻ chân trắng
• 3.8. Hiệu ứng kích kháng bệnh của oligo-Ø-glucan theo Mw khi công độc với V. parahaemolyticus và WSSV
• 3.9. Hiệu ứng kích kháng bệnh theo nồng độ oligo-Ø-glucan Mw ~ 15 kDa khi công độc với V. parahaemolyticus và WSSV
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Oligo Glucan Tôm Thẻ Chân Trắng

Việt Nam sở hữu tiềm năng lớn cho ngành nuôi tôm nhờ bờ biển dài và mạng lưới sông ngòi dày đặc. Nuôi tôm đã trở thành ngành kinh tế quan trọng, đóng góp vào xuất khẩu và giải quyết việc làm. Tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) là một trong những đối tượng nuôi chủ lực. Tuy nhiên, dịch bệnh do vi sinh vật gây ra vẫn là thách thức lớn. Việc lạm dụng kháng sinh gây ra nhiều hệ lụy, do đó, việc tìm kiếm các giải pháp thay thế an toàn và hiệu quả là vô cùng cần thiết. Oligo-β-Glucan nổi lên như một giải pháp tiềm năng, có khả năng kích kháng bệnh và thúc đẩy tăng trưởng cho tôm. Nghiên cứu này tập trung vào việc ứng dụng Oligo-β-Glucan để nâng cao sức khỏe và năng suất của tôm thẻ chân trắng, đồng thời giảm thiểu tác động tiêu cực đến môi trường. Theo Tổng cục Thủy sản năm 2021, sản lượng tôm thẻ chân trắng đạt 642,5 nghìn tấn trên 110 nghìn ha diện tích nuôi, cho thấy tầm quan trọng của việc bảo vệ và phát triển ngành này.

1.1. Tiềm năng và thách thức của nuôi tôm thẻ chân trắng

Ngành nuôi tôm thẻ chân trắng tại Việt Nam có tiềm năng phát triển lớn nhờ điều kiện tự nhiên thuận lợi và nhu cầu thị trường cao. Tuy nhiên, dịch bệnh, đặc biệt là các bệnh do vi khuẩn và virus gây ra, đang là một trong những thách thức lớn nhất. Việc sử dụng kháng sinh và hóa chất để phòng và trị bệnh có thể gây ra các vấn đề như kháng kháng sinh, ô nhiễm môi trường và ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm. Do đó, việc nghiên cứu và ứng dụng các giải pháp phòng bệnh bền vững và thân thiện với môi trường là rất quan trọng. Các phương pháp tiếp cận mới, như sử dụng các chất kích thích miễn dịch cho tôm, đang được quan tâm và nghiên cứu rộng rãi.

1.2. Vai trò của Oligo β Glucan trong nuôi trồng thủy sản

Oligo-β-Glucan là một polysaccharide tự nhiên có khả năng kích thích hệ miễn dịch của động vật thủy sản, bao gồm cả tôm thẻ chân trắng. Nó hoạt động bằng cách kích hoạt các tế bào miễn dịch, giúp tôm tăng cường khả năng chống lại các tác nhân gây bệnh. Ngoài ra, Oligo-β-Glucan cũng có thể cải thiện hiệu quả sử dụng thức ăn và tăng cường tốc độ tăng trưởng của tôm. Nhiều nghiên cứu đã chứng minh hiệu quả của Oligo-β-Glucan trong việc phòng ngừa và điều trị các bệnh thường gặp trên tôm, như bệnh đốm trắng và bệnh hoại tử gan tụy cấp tính. Việc sử dụng Oligo-β-Glucan như một chất bổ sung thức ăn cho tôm có thể giúp giảm sự phụ thuộc vào kháng sinh và hóa chất, đồng thời nâng cao năng suất và chất lượng sản phẩm.

II. Vấn Đề Cấp Thiết Bệnh Tôm Giải Pháp Từ Oligo Glucan

Dịch bệnh trên tôm thẻ chân trắng gây thiệt hại lớn cho người nuôi. Các bệnh thường gặp như bệnh đốm trắng, bệnh hoại tử gan tụy cấp tính (AHPND) làm giảm năng suất và tăng chi phí sản xuất. Việc sử dụng kháng sinh để kiểm soát bệnh có nhiều hạn chế. Oligo-β-Glucan là một giải pháp thay thế đầy hứa hẹn. Nó có khả năng kích thích hệ miễn dịch tôm, tăng cường sức đề kháng, giúp tôm chống lại các tác nhân gây bệnh. Nghiên cứu này tập trung vào việc đánh giá hiệu quả của Oligo-β-Glucan trong việc phòng bệnh cho tôm và cải thiện năng suất nuôi.

2.1. Các bệnh thường gặp và tác động của chúng đến nuôi tôm

Ngành nuôi tôm thẻ chân trắng thường xuyên đối mặt với nhiều loại bệnh khác nhau, gây ra những thiệt hại đáng kể về kinh tế. Trong số đó, bệnh đốm trắng (WSSV) và bệnh hoại tử gan tụy cấp tính (AHPND) là hai bệnh nguy hiểm nhất. Bệnh đốm trắng gây ra tỷ lệ chết cao và lan nhanh, trong khi bệnh AHPND ảnh hưởng nghiêm trọng đến chức năng gan tụy của tôm, dẫn đến suy dinh dưỡng và chết. Các bệnh khác như bệnh đầu vàng, bệnh phân trắng cũng gây ra những ảnh hưởng tiêu cực đến năng suất và chất lượng tôm nuôi. Việc kiểm soát và phòng ngừa các bệnh này đòi hỏi người nuôi phải áp dụng các biện pháp quản lý chặt chẽ và sử dụng các sản phẩm phòng bệnh hiệu quả.

2.2. Hạn chế của việc sử dụng kháng sinh trong phòng bệnh tôm

Việc sử dụng kháng sinh để phòng và điều trị bệnh cho tôm thẻ chân trắng đã trở nên phổ biến trong quá khứ. Tuy nhiên, việc lạm dụng kháng sinh đã gây ra nhiều hệ lụy nghiêm trọng. Một trong những vấn đề lớn nhất là sự phát triển của các vi khuẩn kháng kháng sinh, làm giảm hiệu quả của các loại thuốc này trong việc điều trị bệnh. Ngoài ra, dư lượng kháng sinh trong tôm có thể gây ra những tác động tiêu cực đến sức khỏe con người và ảnh hưởng đến khả năng xuất khẩu sản phẩm. Việc sử dụng kháng sinh cũng có thể gây ra những tác động tiêu cực đến môi trường, ảnh hưởng đến hệ sinh thái tự nhiên. Do đó, việc tìm kiếm các giải pháp thay thế kháng sinh, như sử dụng các chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc tự nhiên, là rất cần thiết.

III. Phương Pháp Chế Tạo Oligo Glucan Kích Thích Miễn Dịch Tôm

Nghiên cứu này tập trung vào phương pháp chế tạo Oligo-β-Glucan tan nước bằng cách sử dụng chiếu xạ gamma kết hợp với xử lý hóa học. Mục tiêu là tạo ra Oligo-β-Glucan có hoạt tính kích kháng bệnh cao, dễ hấp thu cho tôm thẻ chân trắng. Quá trình này bao gồm cắt mạch β-Glucan từ nguồn tự nhiên để tạo ra các đoạn Oligo-β-Glucan có kích thước phù hợp. Các thông số chiếu xạ và xử lý hóa học được tối ưu hóa để đạt được hiệu quả cao nhất.

3.1. Chiếu xạ gamma kết hợp xử lý hóa học để cắt mạch β Glucan

Phương pháp chiếu xạ gamma kết hợp với xử lý hóa học là một trong những phương pháp hiệu quả để cắt mạch β-Glucan thành các đoạn Oligo-β-Glucan có kích thước nhỏ hơn. Chiếu xạ gamma sử dụng năng lượng cao để phá vỡ các liên kết glycosidic trong phân tử β-Glucan, trong khi xử lý hóa học giúp tăng cường quá trình cắt mạch và cải thiện độ tan của sản phẩm. Quá trình này đòi hỏi sự kiểm soát chặt chẽ các thông số như liều lượng chiếu xạ, thời gian chiếu xạ, nồng độ hóa chất và nhiệt độ để đảm bảo hiệu quả và chất lượng của sản phẩm.

3.2. Tối ưu hóa các thông số để thu được Oligo β Glucan hiệu quả

Để đạt được hiệu quả cao trong quá trình chế tạo Oligo-β-Glucan, việc tối ưu hóa các thông số là rất quan trọng. Các thông số cần được tối ưu hóa bao gồm liều lượng chiếu xạ, thời gian chiếu xạ, nồng độ hóa chất, nhiệt độ và thời gian xử lý hóa học. Các thông số này cần được điều chỉnh để đảm bảo quá trình cắt mạch diễn ra hiệu quả, sản phẩm có độ tan cao và hoạt tính sinh học tốt. Việc sử dụng các phương pháp thống kê và thiết kế thí nghiệm có thể giúp xác định các thông số tối ưu một cách hiệu quả.

IV. Nghiên Cứu Hiệu Quả Oligo Glucan Trên Hệ Miễn Dịch Tôm Thẻ

Nghiên cứu đánh giá tác động của Oligo-β-Glucan lên hệ miễn dịch tôm thông qua các chỉ số như hoạt động thực bào, hoạt tính enzyme phenoloxidase (PO) và superoxide dismutase (SOD). Mức độ biểu hiện của một số gen miễn dịch quan trọng cũng được khảo sát. Kết quả cho thấy Oligo-β-Glucan có khả năng kích thích hệ miễn dịch, tăng cường khả năng chống lại bệnh tật của tôm thẻ chân trắng.

4.1. Đánh giá hoạt động thực bào và hoạt tính enzyme miễn dịch

Hoạt động thực bào và hoạt tính enzyme phenoloxidase (PO) và superoxide dismutase (SOD) là những chỉ số quan trọng để đánh giá chức năng của hệ miễn dịch không đặc hiệu ở tôm thẻ chân trắng. Hoạt động thực bào thể hiện khả năng của các tế bào miễn dịch (ví dụ như tế bào máu) trong việc tiêu diệt các tác nhân gây bệnh. Hoạt tính enzyme PO và SOD thể hiện khả năng chống oxy hóa và kháng khuẩn của hệ miễn dịch. Nghiên cứu đánh giá sự thay đổi của các chỉ số này sau khi tôm được cho ăn thức ăn bổ sung Oligo-β-Glucan để đánh giá tác động của chất này lên hệ miễn dịch.

4.2. Phân tích biểu hiện gen liên quan đến hệ miễn dịch tôm

Việc phân tích biểu hiện của các gen liên quan đến hệ miễn dịch là một phương pháp quan trọng để hiểu rõ cơ chế tác động của Oligo-β-Glucan lên hệ miễn dịch tôm. Nghiên cứu tập trung vào việc khảo sát mức độ biểu hiện của một số gen quan trọng như lectin, proPO, LGBP và TLR2. Lectin là protein tham gia vào quá trình nhận diện và gắn kết với các tác nhân gây bệnh. ProPO là enzyme tiền thân của PO, đóng vai trò quan trọng trong phản ứng miễn dịch. LGBP là protein gắn kết với lipopolysaccharide và β-1,3-glucan, kích hoạt hệ miễn dịch. TLR2 là thụ thể nhận diện các mẫu phân tử liên quan đến mầm bệnh, khởi động phản ứng miễn dịch. Việc đánh giá sự thay đổi trong biểu hiện của các gen này sau khi tôm được cho ăn Oligo-β-Glucan giúp xác định cơ chế kích thích miễn dịch của chất này.

V. Ứng Dụng Oligo Glucan Phòng Bệnh Đốm Trắng Hoại Tử Gan

Nghiên cứu tiến hành thử nghiệm công độc với vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus và virus gây bệnh đốm trắng (WSSV) để đánh giá hiệu quả bảo vệ của Oligo-β-Glucan. Tôm được cho ăn thức ăn bổ sung Oligo-β-Glucan trước khi bị phơi nhiễm với các tác nhân gây bệnh. Kết quả cho thấy Oligo-β-Glucan giúp tăng tỷ lệ sống của tôm và giảm mức độ nghiêm trọng của bệnh, cho thấy tiềm năng ứng dụng trong thực tế.

5.1. Thử nghiệm công độc với Vibrio parahaemolyticus và WSSV

Để đánh giá hiệu quả bảo vệ của Oligo-β-Glucan đối với tôm thẻ chân trắng, các thí nghiệm công độc với vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus (gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính AHPND) và virus gây bệnh đốm trắng (WSSV) đã được thực hiện. Trong các thí nghiệm này, tôm được cho ăn thức ăn bổ sung Oligo-β-Glucan trong một khoảng thời gian nhất định, sau đó được phơi nhiễm với vi khuẩn hoặc virus. Tỷ lệ sống, các triệu chứng bệnh và mức độ nhiễm bệnh được theo dõi và so sánh giữa nhóm tôm được cho ăn Oligo-β-Glucan và nhóm đối chứng (không được cho ăn Oligo-β-Glucan).

5.2. Đánh giá tỷ lệ sống và mức độ nghiêm trọng của bệnh

Tỷ lệ sống là một trong những chỉ số quan trọng nhất để đánh giá hiệu quả bảo vệ của Oligo-β-Glucan đối với tôm thẻ chân trắng. Ngoài ra, mức độ nghiêm trọng của bệnh cũng được đánh giá thông qua các triệu chứng lâm sàng, kết quả xét nghiệm mô bệnh học và mức độ nhiễm vi khuẩn hoặc virus trong cơ thể tôm. Việc so sánh tỷ lệ sống và mức độ nghiêm trọng của bệnh giữa nhóm tôm được cho ăn Oligo-β-Glucan và nhóm đối chứng giúp xác định liệu Oligo-β-Glucan có thực sự có khả năng bảo vệ tôm khỏi bệnh hay không. Các kết quả này cung cấp bằng chứng quan trọng để hỗ trợ việc ứng dụng Oligo-β-Glucan trong thực tế nuôi tôm.

VI. Kết Luận Triển Vọng Oligo Glucan Cho Nuôi Tôm Bền Vững

Nghiên cứu này khẳng định tiềm năng của Oligo-β-Glucan trong việc kích kháng bệnh và nâng cao sức khỏe cho tôm thẻ chân trắng. Việc ứng dụng Oligo-β-Glucan trong nuôi tôm không chỉ giúp giảm thiểu rủi ro dịch bệnh mà còn góp phần vào phát triển ngành nuôi tôm bền vững, an toàn và thân thiện với môi trường. Các nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sản xuất Oligo-β-Glucan và đánh giá hiệu quả trên quy mô lớn.

6.1. Tóm tắt kết quả nghiên cứu và ý nghĩa thực tiễn

Nghiên cứu đã chứng minh rằng Oligo-β-Glucan có khả năng kích thích hệ miễn dịch của tôm thẻ chân trắng, tăng cường khả năng chống lại các tác nhân gây bệnh như vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus và virus gây bệnh đốm trắng (WSSV). Việc sử dụng Oligo-β-Glucan trong thức ăn giúp tăng tỷ lệ sống và giảm mức độ nghiêm trọng của bệnh trên tôm. Kết quả này có ý nghĩa thực tiễn lớn đối với ngành nuôi tôm, mở ra một hướng đi mới trong việc phòng và trị bệnh cho tôm một cách bền vững và thân thiện với môi trường.

6.2. Hướng nghiên cứu tiếp theo và tiềm năng ứng dụng

Các nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sản xuất Oligo-β-Glucan để giảm chi phí và tăng hiệu quả. Ngoài ra, cần có thêm các nghiên cứu đánh giá hiệu quả của Oligo-β-Glucan trên quy mô lớn trong điều kiện nuôi thực tế để xác định liều lượng và phương pháp sử dụng tối ưu. Việc nghiên cứu cơ chế tác động của Oligo-β-Glucan lên hệ miễn dịch tôm cũng rất quan trọng để phát triển các sản phẩm kích thích miễn dịch hiệu quả hơn. Oligo-β-Glucan có tiềm năng lớn để trở thành một thành phần quan trọng trong thức ăn và các sản phẩm phòng bệnh cho tôm thẻ chân trắng, góp phần vào sự phát triển bền vững của ngành nuôi tôm.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Ngành nuôi tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) tại Việt Nam đã phát triển mạnh mẽ với sản lượng đạt khoảng 642,5 nghìn tấn trên diện tích 110 nghìn ha vào năm 2021. Tuy nhiên, dịch bệnh do vi sinh vật gây ra vẫn là thách thức lớn, ảnh hưởng nghiêm trọng đến năng suất và hiệu quả kinh tế. Việc sử dụng kháng sinh và hóa chất khử trùng không còn được khuyến khích do nguy cơ kháng thuốc và ô nhiễm môi trường. Trong bối cảnh đó, các chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc tự nhiên như ß-glucan được xem là giải pháp an toàn, hiệu quả và thân thiện với môi trường để phòng ngừa dịch bệnh.

Luận văn tập trung nghiên cứu ứng dụng hiệu ứng đồng vận của chiếu xạ gamma Co-60 kết hợp xử lý H2O2 để chế tạo oligo-ß-glucan tan trong nước có hoạt tính kích kháng bệnh và thúc đẩy tăng trưởng trên tôm thẻ chân trắng. Nghiên cứu được thực hiện tại Trung tâm Công nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh trong khoảng thời gian từ tháng 10/2020 đến tháng 8/2021. Mục tiêu chính là tạo ra oligo-ß-glucan có khối lượng phân tử thấp (6-48 kDa), đánh giá hiệu quả tăng trưởng, kích thích miễn dịch và khả năng bảo vệ tôm khi thử thách với vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus và virus hội chứng đốm trắng (WSSV).

Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa khoa học và thực tiễn lớn, góp phần phát triển công nghệ bức xạ trong sản xuất oligo-ß-glucan từ nguồn nguyên liệu bã men bia, đồng thời cung cấp giải pháp sinh học an toàn, hiệu quả cho ngành nuôi tôm, nâng cao năng suất và giá trị kinh tế, giảm thiểu ô nhiễm môi trường.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình sau:

• Hiệu ứng đồng vận trong chiếu xạ gamma kết hợp xử lý H2O2: Tác động đồng thời của tia gamma và các gốc tự do hydroxyl (·OH) sinh ra từ H2O2 làm tăng hiệu suất cắt mạch polysaccharide, tạo ra oligo-ß-glucan tan trong nước với khối lượng phân tử thấp hơn, nâng cao hoạt tính sinh học.

• Cơ chế kích thích miễn dịch của ß-glucan trên tôm: ß-glucan liên kết với các thụ thể miễn dịch như lectin, toll-like receptor 2 (TLR2), và lipopolysaccharide-ß-1,3-glucan-binding protein (LGBP) trên tế bào miễn dịch tôm, kích hoạt hệ thống prophenoloxidase (proPO), tăng hoạt độ thực bào, enzyme phenol oxidase (PO), superoxide dismutase (SOD) và biểu hiện các gen miễn dịch, từ đó nâng cao khả năng kháng bệnh.

• Khái niệm chính:

  • Oligo-ß-glucan: Các phân tử ß-glucan có khối lượng phân tử thấp, tan trong nước, dễ hấp thu và có hoạt tính sinh học cao.
  • Khối lượng phân tử (Mw): Thước đo kích thước phân tử, ảnh hưởng đến độ tan và hoạt tính của ß-glucan.
  • Hoạt tính kích kháng bệnh: Khả năng tăng cường miễn dịch và bảo vệ tôm khỏi các tác nhân gây bệnh.
  • Hiệu ứng tăng trưởng: Tác động thúc đẩy sự phát triển về trọng lượng và kích thước của tôm.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu:

  • Nguyên liệu ß-glucan được chiết xuất từ bã men bia, nguồn nguyên liệu giàu ß-glucan chiếm khoảng 60% trọng lượng chất rắn khô.
  • Tôm thẻ chân trắng giống 15 ngày tuổi, trọng lượng ~0,01 g/con, được cung cấp từ công ty chuyên nghiệp, đảm bảo khỏe mạnh, không nhiễm bệnh.
  • Vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus và virus WSSV được sử dụng để thử thách tôm.

• Phương pháp phân tích:

  • Chiếu xạ gamma Co-60 kết hợp xử lý H2O2 ở các nồng độ 1%, 2%, 3% để cắt mạch ß-glucan, tạo oligo-ß-glucan với các khối lượng phân tử khác nhau (6-48 kDa).
  • Xác định khối lượng phân tử bằng sắc ký gel thấm qua (GPC).
  • Đánh giá hiệu quả tăng trưởng qua trọng lượng tôm sau 3 tháng cho ăn thức ăn bổ sung oligo-ß-glucan ở các Mw khác nhau.
  • Đánh giá hoạt tính miễn dịch qua các chỉ số: hoạt độ thực bào (PA), hoạt tính enzyme phenol oxidase (PO), superoxide dismutase (SOD), và biểu hiện gen miễn dịch (Lectin, proPO, LGBP, TLR2) bằng RT-qPCR.
  • Thử thách tôm với V. parahaemolyticus và WSSV ở liều gây chết 70% (LD70) để đánh giá hiệu quả bảo vệ.
  • Cỡ mẫu: Mỗi nghiệm thức gồm 50 con tôm, lặp lại 3 lần, đảm bảo tính đại diện và độ tin cậy.
  • Timeline nghiên cứu: Từ tháng 10/2020 đến tháng 8/2021, bao gồm các giai đoạn chuẩn bị mẫu, chiếu xạ, nuôi thử nghiệm, thu thập và phân tích dữ liệu.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Chế tạo oligo-ß-glucan tan nước với khối lượng phân tử thấp:

   • Oligo-ß-glucan có Mw từ 6 đến 48 kDa được tạo ra bằng phương pháp chiếu xạ gamma kết hợp xử lý H2O2.
   • Hiệu suất thu nhận ß-glucan tan nước đạt khoảng 25-30% tùy theo nồng độ H2O2 và liều chiếu xạ.

2. Hiệu ứng tăng trưởng trên tôm thẻ chân trắng:

   • Oligo-ß-glucan có Mw ~15 kDa ở nồng độ 1000 ppm cho thấy tác dụng thúc đẩy tăng trưởng rõ rệt, tăng trọng lượng tôm lên 25,5% so với đối chứng sau 3 tháng nuôi.
   • So sánh với ß-glucan thương mại, oligo-ß-glucan Mw ~15 kDa có hiệu quả tương đương hoặc vượt trội.

3. Tăng cường miễn dịch không đặc hiệu:

   • Hoạt độ thực bào tăng 15,6% so với đối chứng.
   • Hoạt tính enzyme phenol oxidase và superoxide dismutase tăng lần lượt 0,47 U/mg protein/phút và 0,47 U/mL.
   • Biểu hiện gen miễn dịch LGBP tăng 2,44 lần, proPO tăng 4,49 lần so với đối chứng sau 45 ngày cho ăn.

4. Khả năng bảo vệ tôm khi thử thách với tác nhân gây bệnh:

   • Tỷ lệ sống của tôm được bổ sung oligo-ß-glucan Mw ~15 kDa đạt 67,41% khi thử thách với V. parahaemolyticus và 42,55% khi thử thách với WSSV, cao hơn đáng kể so với nhóm đối chứng.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy oligo-ß-glucan có khối lượng phân tử thấp (~15 kDa) là dạng tối ưu để tăng cường khả năng hấp thu và hoạt tính sinh học trên tôm thẻ chân trắng. Hiệu ứng đồng vận của chiếu xạ gamma và H2O2 đã giúp giảm đáng kể khối lượng phân tử ß-glucan, đồng thời duy trì cấu trúc phân tử cần thiết cho hoạt tính kích thích miễn dịch.

Sự gia tăng hoạt độ thực bào và enzyme miễn dịch chứng tỏ oligo-ß-glucan kích hoạt hệ miễn dịch tự nhiên của tôm, phù hợp với các nghiên cứu trước đây về vai trò của ß-glucan trong kích thích miễn dịch thủy sản. Biểu hiện tăng cao của các gen miễn dịch như LGBP và proPO phản ánh sự kích hoạt mạnh mẽ của các con đường miễn dịch quan trọng, góp phần nâng cao khả năng kháng bệnh.

Tỷ lệ sống cao hơn khi thử thách với V. parahaemolyticus và WSSV cho thấy oligo-ß-glucan không chỉ tăng cường miễn dịch mà còn có tác dụng bảo vệ thực tế trong điều kiện công độc. So với các nghiên cứu trước, kết quả này khẳng định tính hiệu quả và an toàn của oligo-ß-glucan từ bã men bia, mở ra hướng ứng dụng rộng rãi trong nuôi tôm công nghiệp.

Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ tăng trọng tôm theo thời gian, biểu đồ hoạt độ enzyme miễn dịch và biểu đồ tỷ lệ sống sau thử thách, giúp minh họa rõ ràng hiệu quả của oligo-ß-glucan.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Ứng dụng oligo-ß-glucan Mw ~15 kDa ở nồng độ 1000 ppm trong thức ăn tôm thẻ chân trắng để thúc đẩy tăng trưởng và nâng cao miễn dịch, áp dụng trong các trại nuôi thương mại trong vòng 3 tháng nuôi.

2. Phát triển quy trình sản xuất oligo-ß-glucan từ bã men bia bằng công nghệ chiếu xạ gamma kết hợp xử lý H2O2 nhằm tận dụng nguồn nguyên liệu sẵn có, giảm chi phí và ô nhiễm môi trường, triển khai trong 1-2 năm tới.

3. Khuyến khích các cơ sở nuôi tôm áp dụng chế phẩm oligo-ß-glucan như một chất kích thích miễn dịch tự nhiên, thay thế dần kháng sinh và hóa chất, góp phần nâng cao chất lượng sản phẩm và bảo vệ môi trường.

4. Tăng cường nghiên cứu mở rộng về liều lượng và thời gian bổ sung oligo-ß-glucan, cũng như đánh giá hiệu quả trên các giai đoạn phát triển khác của tôm để tối ưu hóa hiệu quả sử dụng.

5. Đào tạo và chuyển giao công nghệ cho người nuôi tôm và doanh nghiệp nhằm nâng cao nhận thức và kỹ năng sử dụng oligo-ß-glucan trong nuôi trồng thủy sản, dự kiến thực hiện trong vòng 6-12 tháng.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu và sinh viên ngành công nghệ sinh học, thủy sản: Nghiên cứu cung cấp cơ sở khoa học và phương pháp chế tạo oligo-ß-glucan, đồng thời đánh giá hiệu quả sinh học trên tôm, hỗ trợ phát triển các đề tài liên quan.

2. Doanh nghiệp sản xuất thức ăn thủy sản và chế phẩm sinh học: Thông tin về quy trình sản xuất oligo-ß-glucan từ bã men bia và hiệu quả ứng dụng giúp phát triển sản phẩm mới, nâng cao giá trị kinh tế và cạnh tranh trên thị trường.

3. Người nuôi tôm và các tổ chức quản lý nuôi trồng thủy sản: Cung cấp giải pháp sinh học an toàn, hiệu quả để phòng chống dịch bệnh, tăng năng suất và giảm thiểu sử dụng kháng sinh, phù hợp với xu hướng phát triển bền vững.

4. Cơ quan quản lý môi trường và chính sách nông nghiệp: Nghiên cứu góp phần giảm thiểu ô nhiễm từ bã thải công nghiệp và hóa chất trong nuôi trồng thủy sản, hỗ trợ xây dựng chính sách phát triển ngành nuôi tôm thân thiện môi trường.

Câu hỏi thường gặp

1. Oligo-ß-glucan là gì và tại sao lại quan trọng trong nuôi tôm?
   Oligo-ß-glucan là dạng ß-glucan có khối lượng phân tử thấp, tan trong nước, dễ hấp thu và có khả năng kích thích miễn dịch hiệu quả trên tôm. Nó giúp tăng cường sức đề kháng, giảm tỷ lệ chết do bệnh, đồng thời thúc đẩy tăng trưởng, góp phần nâng cao năng suất nuôi.

2. Phương pháp chiếu xạ gamma kết hợp xử lý H2O2 có ưu điểm gì?
   Phương pháp này giúp cắt mạch ß-glucan hiệu quả, tạo ra sản phẩm oligo-ß-glucan đồng nhất, tinh khiết, không cần chất xúc tác, thân thiện môi trường và dễ dàng kiểm soát quy trình, phù hợp sản xuất quy mô lớn với chi phí hợp lý.

3. Liều lượng oligo-ß-glucan tối ưu cho tôm thẻ chân trắng là bao nhiêu?
   Nghiên cứu cho thấy liều 1000 ppm oligo-ß-glucan với khối lượng phân tử khoảng 15 kDa là tối ưu để tăng trưởng và kích thích miễn dịch trên tôm thẻ chân trắng sau 3 tháng cho ăn.

4. Oligo-ß-glucan có thể thay thế hoàn toàn kháng sinh trong nuôi tôm không?
   Oligo-ß-glucan là chất kích thích miễn dịch tự nhiên, giúp tăng cường sức đề kháng và giảm nguy cơ dịch bệnh, tuy nhiên không phải là thuốc kháng sinh. Nó nên được sử dụng kết hợp với các biện pháp quản lý dịch bệnh tổng hợp để đạt hiệu quả tối ưu.

5. Nguồn nguyên liệu bã men bia có sẵn và có thể ứng dụng rộng rãi không?
   Bã men bia là nguồn nguyên liệu giàu ß-glucan, có sẵn với sản lượng lớn từ ngành công nghiệp bia Việt Nam. Việc tận dụng bã men bia để sản xuất oligo-ß-glucan không chỉ giảm ô nhiễm môi trường mà còn tạo ra sản phẩm giá trị cao, phù hợp ứng dụng rộng rãi trong nuôi trồng thủy sản.

Kết luận

• Đã thành công trong việc chế tạo oligo-ß-glucan tan nước có khối lượng phân tử thấp (6-48 kDa) bằng phương pháp chiếu xạ gamma kết hợp xử lý H2O2 từ bã men bia.
• Oligo-ß-glucan Mw ~15 kDa ở nồng độ 1000 ppm thúc đẩy tăng trưởng tôm thẻ chân trắng lên 25,5% so với đối chứng sau 3 tháng.
• Chế phẩm tăng cường các chỉ số miễn dịch không đặc hiệu như hoạt độ thực bào tăng 15,6%, enzyme PO và SOD tăng đáng kể, cùng với biểu hiện gen miễn dịch tăng gấp 2-4 lần.
• Tỷ lệ sống của tôm khi thử thách với V. parahaemolyticus và WSSV được cải thiện rõ rệt, đạt 67,41% và 42,55% tương ứng.
• Đề xuất ứng dụng oligo-ß-glucan trong nuôi tôm thương mại, phát triển quy trình sản xuất công nghiệp và đào tạo chuyển giao công nghệ trong vòng 1-2 năm tới.

Hành động tiếp theo: Khuyến khích các cơ sở nuôi tôm áp dụng oligo-ß-glucan trong khẩu phần ăn, đồng thời mở rộng nghiên cứu về liều lượng và giai đoạn sử dụng để tối ưu hóa hiệu quả. Liên hệ Trung tâm Công nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh để được hỗ trợ chuyển giao công nghệ và tư vấn kỹ thuật.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Chương 1 TONG QUAN 1. Nguồn nguyên liệu chứa Ø-glucan Ø-glucan là các polysaccharide được tìm thấy bên trong thành tế bào nắm men, vỏ cám của hạt yến mach, lúa mach, lúa mì, trong một số loại nam dược liệu như nam linh chi, nắm lim xanh, nắm maitake và các lọai tảo, rong biển cũng chứa một lượng Ø-glucan tương đối cao Hình 1. Mặt khác, lượng bã nấm men chiếm 1% trong sản xuất bia và hàm lượng Ø-glucan chiếm đến 60% trọng lượng chat rắn khô (Lipke và Ovalle, 1998). Thu nhận Ø-glucan từ bã men bia được xem là sự lựa chọn kinh tế nhất vì chứa hàm lượng Ø-glucan cao, giá thành rẻ với hàng triệu tấn bã thải ra hàng năm từ các nhà máy bia và góp phan giảm thiểu ô nhiễm môi trường.

Tảo Nấm dược liệu Ø-glucan là polysaccharide của các đơn phân D-glucose nối với nhau bằng liên kết glycoside tạo thành chuỗi polymer đài. Tùy vào nguồn thu nhận mà Ø-glucan có sự khác biệt về cầu trúc không gian ba chiều, khối lượng phân tử và tỷ lệ phân nhánh. Vị trí liên kết trong chuỗi đã hình thành những hợp chất với tên gọi khác nhau như agar [Ø-(1. Sự khác biệt về cấu trúc có ý nghĩa lớn đối với hoạt tính của Ø-glucan.

Vi dụ, Ø-glucan từ vỏ yến mạch có khả năng kháng khuan va ký sinh trùng, giảm cholesterol và chống đông máu, làm giảm nguy co mắc bệnh tim (Mantovani và ctv, 2008). Ø-glucan trong nam lớn tập trung chủ yếu ở vách tế bào, gồm (1,3)-6-glucan chứa hoặc không chứa các nhánh (1,4)-6-glucan hoặc (1,6)-£-glucan, chiếm 15 —45% trong lượng khô. Hoạt tính được quan tâm nhiều của Ø-glucan là khả năng tăng cường miễn dịch và kháng u (Lê Mai Hương, 2016). Trong tế bao nam men, Ø-glucan nằm sau màng tế bào, làm ôn định và duy tri hình dang của tế bảo.

Ø-glucan có độ polymer hóa trung bình là 1,500 đơn phan, tương đương với khối lượng phân tử ee. Ø-glucan thường không tan ¬ Hình 1. Các Ø-glucan có hoạt tính sinh học thường có Mw lớn, vẫn chưa rõ các f-glucan có Mw thấp có hoạt tính sinh học hay không nhưng các Ø-glucan ngắn dưới 5 — 10 kDa thường không hoạt động (Zhang và ctv, 2005). Ung dung Trong ngành thực phẩm, Ø-glucan từ nam men được sử dung như một chất phụ gia sản xuất các loại salad, nước sốt, sữa chua, bột bánh đẻo v.

nhờ khả năng giữ nước cao và không tao gel, thích hợp làm nguồn xơ thực phẩm. Khi qua ruột già, /- glucan sẽ bị phân hủy bởi một hệ vi khuẩn ruột kết nhưng khả năng giữ nước van được đảm bảo. Quá trình lên men vi khuẩn trong ruột giả tạo ra các acid béo chuỗi ngắn có lợi cho tế bào nhay lót và ruột kết nói chung, cải thiện tiêu hóa (Phạm Việt Cường, 2005). Trong y dược, hoạt tính tăng cường miễn dịch của Ø-glucan được được quan tâm nhiều hơn cả.

Từ những năm 1960, việc nghiên cứu Ø-glucan bat đầu từ thuốc Zymosan với tác dụng điều hòa miễn dịch được sử dụng khắp Âu-Mỹ của hang Sigma Chemical (Phạm Việt Cường, 2005). Ø-glucan còn đem đến nhiều lợi ich trong phòng chống và điều trị ung thư, giảm cholesterol, hỗ trợ giảm đường huyết, giảm di ứng, giảm các tác dụng phụ như chứng suy tủy sau khi xạ trị (Vetvicka, 2011), có lợi cho tiêu hóa, kích thích, phục hồi đáng kể một lượng máu. Đến nay, Ø-glucan thường được chỉ định cho các bệnh ung thư, tiêu đường, mỡ máu cao và dùng dé tăng sức dé kháng cho người già và trẻ nhỏ. Thực phẩm Mỹ phẩm Sees hows 2 be Qeape fe Chan nuôi Hình 1.

Sản phẩm /-glucan sử dung trong các lĩnh vực khác nhau Trong lĩnh vực chăn nuôi thủy hải sản, Ø-glucan đang là giải pháp hiệu qua, an toàn và thân thiện với môi trường thay thế các nhất kháng sinh nhờ tác dụng kích thích miễn dịch khi bổ sung vào thức ăn cho tôm, cá. Theo Nguyễn Thành Tâm và Nguyễn Thị Kim Nguyệt (2012), b6 sung 0,2% Ø-glucan vào thức ăn cá lóc bông giúp làm tăng tỷ lệ sống, tốc độ tăng trưởng, khối lượng và hệ số miễn dịch của cá. Trong mỹ phẩm, Ø-glucan được ưu tiên lựa chọn với tác dụng hỗ trợ tái tạo tế bào, làm lành vết thương, chống viêm nhiễm, đây lùi nếp nhăn và sự lão hóa. £-glucan còn có trong các sản pham cải thiện, giữ độ ẩm cho tóc.

Tác dụng của Ø-glucan trên tôm Nuôi tôm là một trong những ngành sản xuất thủy sản phát triển nhanh nhất và có đóng góp lớn vào kinh tế và nguồn dinh dưỡng của con người (Castillo-Juárez và ctv, 2015). Vì vậy, kiểm soát địch bệnh cùng an toàn sinh học là những vấn đề quan trọng nhất, cần thiết cho sự phát triển bền vững của ngành nuôi tôm. Ø-glucan đã được chứng minh là có thé cải thiện sức khỏe va sự tăng trưởng của tôm nuôi (Sajeevan và ctv, 2009; Song và ctv, 2005; Wang và ctv, 2010) đang được quan tâm như một giải pháp an toàn và hiệu quả chống lai dịch bệnh do các vi sinh vat gây ra. Hoạt động miễn dịch của tôm chủ yếu dựa vào hệ miễn dịch tự nhiên gồm hàng rào vật lý là lớp vỏ kitin, miễn dịch dịch thể và miễn dịch tế bảo (Anderson, 1992).

Khi tác nhân gây bệnh khác xâm nhập, chúng sẽ gặp một hệ thống phòng vệ bâm sinh liên quan đến các phan ứng tế bào và dịch thé bao gồm quá trình thực bảo, tạo nốt, bao bọc, tổng hợp các peptid kháng khuan, đông máu, giải phóng các protein phan ứng với stress va hệ thông hoạt hóa prophenoloxydase (proPO) dẫn đến sự melanin hóa (Takahashi và ctv, 1995; Jiravanichpaisai va ctv, 2006, Fridovich, 1995). Hoạt động của enzyme phenol oxidase (PO), enzyme superoxide dismutase (SOD), hoạt độ thực bao thường được sử dung dé đánh giá tinh trang sức khỏe và miễn dịch của tôm (Le Moullac và Haffner, 2000; Rodriguez và Le Moullac, 2000). Ø-glucan kích hoạt hệ thống miễn dịch của tôm với vai trò là protein nhận biết đặc biệt gồm lipopolysaccharide và Ø-1,3-glucan-binding protein (LGBP) và /- glucan-binding protein (@GBP) trên tế bào bạch cau, là một chìa khóa của phản ứng miễn dịch dẫn đến việc kích hoạt hệ thống proPO. Sự gia tăng biểu hiện của gen LGBP làm tăng hiệu suất hoạt động miễn dịch, các enzyme tiêu hóa và tăng trưởng.

Khi phát hiện vi khuẩn hoặc vật lạ, Ø-glucan sẽ phát tín hiệu kích thích bạch cầu có hạt thực hiện quá trình tiêu giảm hạt, giải phóng ra enzyme PO hoạt hóa hệ thống proPO sang dạng hoạt động. Enzyme này sẽ chuyên hóa phenol thành quinone và các chất trung gian khác có thể gây độc cho các vi sinh vật lạ (Sritunyalucksana và ctv, 1990). Sản phẩm cuối cùng của hệ thống proPO là melanin có đặc tính kháng khuẩn trực tiếp bằng cách bao lấy vi khuẩn hoặc vật lạ và phóng thích ra ngoài lớp vỏ kitin (Lee và Soderhall, 2002). f-glucan kích hoạt các tế bào miễn dịch (đại thực bảo, tế bào tua) bằng cách liên kết với các thụ thể trên bề mặt là dectin-1 (lectin) và toll-like receptor (TLR), complement receptor 3, scavenge receptors và lactosylceramide (Brown va Gordon, 2005).

Lectin là một ho glycoprotein hoặc protein có một hoặc nhiều vùng chức năng, nhưng có chung một vùng bám carbonhydrate. Lectin tham gia vào hàng rao đầu tiên chống lại mầm bệnh, điều khiển miễn dịch và ngăn chặn sự tự miễn. Dectin-1 nhận dạng Ø-(1,3)/(1,6)-glucan từ nam, thực vật và vi khuẩn nhưng không phan ứng với Ø-(1,4)-glucan hoặc a-mannan (Palma va ctv, 2006; Brown va ctv, 2002). Thụ thé Toll receptor (7LRs) cũng là một ho protein nhận biết tồn tại từ rất lâu ở các động vật khác nhau, có thể nhận ra các vi sinh vật đa dạng gồm nam, vi khuan, virus va động vật nguyên sinh (Chen, 2007).

77s được hoạt hóa bởi sự lây nhiễm vi khuẩn, virus và các chất kích thích hệ miễn dich. Tác dụng kích thích miễn dich của f-glucan có thé biết được thông qua mức độ biểu hiện của các gen miễn dịch dectin-1, TLR2, LGBP, BGBP. Ø-glucan có tác dụng kích thích miễn dịch trên tôm ở các giai đoạn từ ấu tring đến tôm trưởng thành. Ø-glucan không gây anh hưởng xấu đến quá trình sinh sản mà còn làm tăng khả năng kháng với virus hội chứng đốm trắng trên tôm đẻ trứng và có thé truyền khả năng này sang ấu trùng (Song và ctv 1998; Huang và ctv 1999).

Các phương pháp sử dụng Ø-glucan cho tôm như tiêm, ngâm hay trộn vào thức ăn đều có hiệu quả tăng cường khả năng miễn dịch của tôm. Đối với tôm bố mẹ hoặc tôm ôm trứng, Ø-glucan được bồ sung bằng phương pháp tiêm (Song và ctv, 1998; Huang và ctv, 1999) hoặc đường miệng (Chang vả ctv, 2000). Ngâm đối với tôm ấu trùng (Song và ctv, 1998) hoặc tôm ở giai đoạn gần trưởng thành (Sung và ctv, 1996; Pais va ctv, 2008; Campa-Córdova va ctv, 2007). Tôm ở giai đoạn PL có thé bổ sung qua đường miệng (Sajeevan va ctv, 2009).

Ảnh hưởng của Ø -glucan đối với bệnh trên tôm do vi sinh vat gây ra Loài Glucan Liều Cách dùng Hiệu quả Tăng ty lệ sông với V. indicus fC -3)-glucan 10 mg/kg Cho an parahaemolyticus L. vannamei : Tăng tỷ lệ sống với V. Ø(1-3)-glucan - Cho ăn 8 tuân Tôm con anginolytic F.

chinensis Tăng ty lệ sống với V. vannamei Ø-glucan từ S. Giảm ty lệ chết với V. 2 g/kg Cho ăn 18 ngày Tôm con cerevisiae anginolytic B (1-3)-Glucan Cho an 15 (PL) hoac , - M.

japonicus 50 mg/kg Tăng ty lệ sông với WSSV từ S. sake 100 g/kg Cho ăn 40 ngày Tăng tỷ lệ sống với WSSV Ø-glucan với khả năng tăng cường miễn dịch trở thành tâm điểm cho nhiều nghiên cứu chống lại các bệnh do vi khuẩn và virus (Bang 1.1) gây ra trên tôm. vannamei đã tăng khả năng sông sót khi tiêm mỗi tuân với liều gây chết 50% của Vibrio sp. 90-69B3 sau 4 tuần cho uống Ø-glucan ở liều 10 g/kg (Burgents và ctv, 2010).

Nghiên cứu của Chang (2011) về khả năng đáp ứng miễn dịch và tỷ lệ sống đối với Vibrio alginolyticus của L. vannamei khi kết hợp cho ăn Ø-glucan là tăng 20% tỷ lệ sống so với tôm không bổ sung Ø-glucan. Sajeevan (2006) đã cải thiện khả năng sống sót của tôm he An Độ F. indicus ở giai đoạn trưởng thành với WSSV khi cho ăn 10% sinh khối C.

sake trong 28 ngày. Tác giả Norma (2021) cũng cho kết quả về hiệu quả bảo vệ đáng kê, tỷ lệ sông sót của tôm L. vannamei là 66% với chê độ ăn bô sung Ø-glucan từ nắm men biển D. humillis khi WSSV được tiêm vào.

Tình hình nghiên cứu Ø-glucan trên thế giới và ở Việt Nam Lich sử nghiên cứu Ø-glucan trên thế giới được chia làm hai nhánh. Nhánh đầu tiên diễn ra chủ yêu ở Âu Mỹ và nhánh thứ hai tại Nhật Bản.