Nghiên Cứu Ứng Dụng Enzyme Viscozyme L Trong Trích Ly Polyphenol Từ Trà Oolong

• Tác giả: Huỳnh Thị Phương
• Người hướng dẫn: TS. Huỳnh Ngọc Oanh
• Trường học: Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Nghiên Cứu Ứng Dụng Enzyme Viscozyme L Trong Trích Ly Polyphenol Từ Trà Oolong
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2015
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

• LỜI CÁM ƠN
• TÓM TẮT LUẬN VĂN
• LỜI CAM ĐOAN
• 1. CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU
• 1.1. Đặt vấn đề
• 1.2. Mục tiêu nghiên cứu
• 1.3. Nội dung nghiên cứu
• 2. CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Hợp chất polyphenol
• 2.2. Giới thiệu chung về trà
• 2.3. Đặc điểm sinh thái của cây trà (Camellia sinensis) và giống trà Kim Tuyên
• 2.4. Thành phần hóa học chủ yếu trong trà
• 2.5. Một số tính chất chung của hợp chất polyphenol trong trà
• 2.6. Tác dụng sinh học và tiềm năng ứng dụng của hợp chất polyphenol trà
• 2.7. Một số phương pháp trích ly polyphenol
• 2.7.1. Phương pháp trích bằng các dung môi
• 2.7.2. Phương pháp trích bằng các chất lỏng siêu tới hạn
• 2.7.3. Các phương pháp trích ly khác
• 2.7.4. Phương pháp sinh học
• 3. CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
• 3.1. Nguyên vật liệu, hóa chất và thiết bị sử dụng chủ yếu trong nghiên cứu
• 3.2. Enzyme thương mại
• 3.3. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 3.3.1. Khảo sát thành phần nguyên liệu
• 3.3.2. Khảo sát sự ảnh hưởng của các đơn yếu tố đến hoạt động của enzyme
• 3.3.3. Tỷ lệ nguyên liệu và thể tích
• 3.3.4. Ảnh hưởng của hàm lượng enzyme Viscozyme L
• 3.3.5. Ảnh hưởng nhiệt độ đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 3.3.6. Ảnh hưởng thời gian đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 3.3.7. Ảnh hưởng chế độ lắc đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 3.3.8. Quy hoạch thực nghiệm quá trình trích ly polyphenol trà Oolong
• 3.4. Trích ly thu nhận cao trà Oolong
• 3.5. Phương pháp phân tích
• 3.5.1. Các chỉ tiêu cơ bản
• 3.5.2. Định lượng polyphenol tổng dựa vào phản ứng màu với muối tartrate
• 3.5.3. Xác định hàm lượng TF và TR
• 3.5.4. Xác định khả năng chống oxy hóa
• 3.5.5. Xác định khả năng kháng khuẩn
• 3.5.6. Xác định hàm lượng EGCG
• 3.5.7. Định lượng tannin
• 3.5.8. Xác định màu tổng (TLC — total liquor color)
• 3.5.9. Phương pháp xử lý số liệu thống kê
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 4.1. Khảo sát sơ bộ nguyên liệu nghiên cứu
• 4.1.1. Thành phần các chất trong nguyên liệu
• 4.2. Mối quan hệ giữa tỷ lệ theaflavin/thearubigin (TF/TR) với màu sắc dịch trà
• 4.3. Ảnh hưởng của các yếu tố đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 4.3.1. Tỷ lệ nguyên liệu/nước
• 4.3.2. Hàm lượng Viscozyme L
• 4.3.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 4.3.4. Ảnh hưởng của thời gian đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 4.3.5. Ảnh hưởng của chế độ lắc đến hoạt động của enzyme Viscozyme L
• 4.4. Quy hoạch thực nghiệm quá trình trích ly polyphenol trà Oolong
• 4.4.1. Thí nghiệm sàng lọc các yếu tố ảnh hưởng
• 4.4.2. Thí nghiệm trung tâm và tối ưu
• 4.5. Trích ly thu nhận cao trà Oolong
• 4.5.1. Hiệu quả trích ly trà Oolong
• 4.5.2. Hoạt tính sinh học của sản phẩm cao trà Oolong
• 4.5.2.1. Khả năng chống oxy hóa
• 4.5.2.2. Khả năng kháng khuẩn
• 5. CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

I. Tổng quan về ứng dụng enzyme Viscozyme L trong trích ly polyphenol

Nghiên cứu ứng dụng enzyme Viscozyme L trong trích ly polyphenol từ trà Oolong đang thu hút sự quan tâm lớn trong lĩnh vực công nghệ sinh học. Polyphenol là hợp chất có nhiều lợi ích cho sức khỏe, bao gồm khả năng chống oxy hóa và kháng vi khuẩn. Việc tối ưu hóa quy trình trích ly polyphenol từ trà Oolong không chỉ nâng cao giá trị kinh tế của sản phẩm mà còn góp phần bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng.

1.1. Đặc điểm của trà Oolong và giá trị dinh dưỡng

Trà Oolong, một loại trà truyền thống của Trung Quốc, nổi bật với hương vị đặc trưng và hàm lượng polyphenol cao. Polyphenol trong trà Oolong không chỉ mang lại hương vị mà còn có tác dụng chống oxy hóa mạnh mẽ, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương.

1.2. Enzyme Viscozyme L và vai trò trong trích ly

Enzyme Viscozyme L là một loại enzyme được sử dụng rộng rãi trong ngành thực phẩm để cải thiện hiệu suất trích ly. Enzyme này giúp phá vỡ cấu trúc tế bào thực vật, từ đó tăng cường khả năng giải phóng polyphenol trong trà Oolong.

II. Thách thức trong quá trình trích ly polyphenol từ trà Oolong

Mặc dù có nhiều phương pháp trích ly polyphenol, nhưng vẫn tồn tại nhiều thách thức trong việc tối ưu hóa quy trình. Hiệu suất trích ly thấp và chi phí cao cho dung môi là những vấn đề chính cần giải quyết. Việc sử dụng enzyme Viscozyme L có thể là giải pháp hiệu quả để nâng cao hiệu suất trích ly.

2.1. Hiệu suất trích ly thấp và nguyên nhân

Nhiều phương pháp trích ly hiện tại gặp khó khăn trong việc đạt được hiệu suất cao. Nguyên nhân chủ yếu là do cấu trúc tế bào thực vật khó bị phá vỡ, dẫn đến việc giải phóng polyphenol không hiệu quả.

2.2. Chi phí cao và ảnh hưởng đến sản xuất

Chi phí cho dung môi và quy trình trích ly truyền thống thường cao, ảnh hưởng đến giá thành sản phẩm. Việc tìm kiếm các phương pháp trích ly tiết kiệm chi phí là rất cần thiết để nâng cao tính cạnh tranh trên thị trường.

III. Phương pháp tối ưu hóa quy trình trích ly polyphenol

Nghiên cứu đã áp dụng phương pháp tối ưu hóa quy trình trích ly polyphenol từ trà Oolong bằng enzyme Viscozyme L. Các yếu tố như tỷ lệ nguyên liệu/nước, hàm lượng enzyme, nhiệt độ và thời gian trích ly đã được khảo sát để đạt được hiệu suất tối ưu.

3.1. Tỷ lệ nguyên liệu nước và ảnh hưởng đến hiệu suất

Tỷ lệ nguyên liệu/nước là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến hiệu suất trích ly. Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ 1/26 mang lại kết quả tốt nhất trong việc thu hồi polyphenol.

3.2. Nhiệt độ và thời gian trích ly tối ưu

Nhiệt độ 48°C và thời gian trích ly 135 phút đã được xác định là điều kiện tối ưu để đạt được hàm lượng polyphenol cao nhất trong dịch chiết trà Oolong.

IV. Kết quả nghiên cứu và ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy enzyme Viscozyme L có khả năng tăng hàm lượng polyphenol trong trà Oolong lên đến 23% (w/w). Điều này không chỉ nâng cao giá trị sản phẩm mà còn mở ra cơ hội ứng dụng trong ngành thực phẩm và dược phẩm.

4.1. Hoạt tính sinh học của polyphenol trong trà Oolong

Polyphenol trong trà Oolong có khả năng chống oxy hóa mạnh mẽ, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương. Nghiên cứu cho thấy dịch chiết trà Oolong có hoạt tính kháng oxy hóa cao hơn so với dịch chiết không có enzyme.

4.2. Ứng dụng trong ngành thực phẩm và dược phẩm

Hàm lượng polyphenol cao trong trà Oolong có thể được ứng dụng trong sản xuất thực phẩm chức năng và dược phẩm, mang lại lợi ích sức khỏe cho người tiêu dùng.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu ứng dụng enzyme Viscozyme L trong trích ly polyphenol từ trà Oolong đã mở ra hướng đi mới cho ngành công nghiệp thực phẩm. Việc tối ưu hóa quy trình trích ly không chỉ nâng cao giá trị sản phẩm mà còn góp phần bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng.

5.1. Tương lai của nghiên cứu enzyme trong thực phẩm

Nghiên cứu về enzyme trong thực phẩm sẽ tiếp tục phát triển, mở ra nhiều cơ hội mới cho việc cải thiện chất lượng sản phẩm và nâng cao giá trị dinh dưỡng.

5.2. Khuyến nghị cho các nghiên cứu tiếp theo

Cần tiếp tục nghiên cứu để tối ưu hóa các yếu tố khác trong quy trình trích ly, đồng thời khảo sát thêm các loại enzyme khác có thể ứng dụng trong trích ly polyphenol từ các nguyên liệu khác.

Tổng quan nghiên cứu

Trà Oolong là một trong những loại trà lên men một phần, có giá trị kinh tế và sức khỏe cao nhờ hàm lượng polyphenol phong phú. Tại Công ty Cầu Tre, nguyên liệu chính để sản xuất trà Oolong là đọt trà (1 tôm 2 lá), trong khi phần còn lại của cây trà, gọi là trà xén cành, thường được tiêu thụ với giá thấp mặc dù hàm lượng các hợp chất sinh học không giảm đáng kể. Polyphenol, đặc biệt là các flavonoid như catechin và dẫn xuất, là nhóm hợp chất quan trọng nhất trong trà, có tác dụng chống oxy hóa và kháng khuẩn, góp phần nâng cao giá trị dinh dưỡng và ứng dụng trong y dược, thực phẩm chức năng và mỹ phẩm.

Mục tiêu nghiên cứu là ứng dụng enzyme Viscozyme L để trích ly tối ưu hợp chất polyphenol từ trà Oolong sản xuất từ trà xén cành Kim Tuyên, nhằm nâng cao hàm lượng polyphenol trong dịch chiết và phát triển quy trình sản xuất cao trà Oolong có hoạt tính sinh học cao. Nghiên cứu được thực hiện trong khoảng thời gian từ tháng 1 đến tháng 6 năm 2015 tại Trường Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh, phối hợp với nhà máy sản xuất trà Công ty Cầu Tre, Bảo Lộc.

Việc tối ưu hóa quá trình trích ly polyphenol không chỉ giúp nâng cao hiệu quả sử dụng nguyên liệu phụ phẩm trà xén cành mà còn góp phần đa dạng hóa sản phẩm trà Oolong, tăng giá trị kinh tế và đáp ứng nhu cầu ngày càng cao về sản phẩm có lợi cho sức khỏe. Các chỉ số đánh giá bao gồm hàm lượng polyphenol tổng, hoạt tính chống oxy hóa DPPH, hàm lượng EGCG và khả năng kháng khuẩn đối với các chủng vi khuẩn Gram dương như Staphylococcus aureus và MRSA.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình sau:

• Lý thuyết về hợp chất polyphenol trong trà: Polyphenol là nhóm hợp chất phenol phức tạp, bao gồm flavonoid (catechin, epicatechin, EGCG...), acid phenolic và tannin, có khả năng chống oxy hóa mạnh mẽ và tác dụng sinh học đa dạng. Các hợp chất này chịu ảnh hưởng bởi giống trà, điều kiện sinh trưởng và quá trình chế biến.

• Mô hình enzyme trích ly sinh học: Enzyme Viscozyme L chứa các carbohydrase như cellulase, hemicellulase, xylanase giúp phá vỡ thành tế bào thực vật, tăng khả năng giải phóng polyphenol vào dung môi nước. Việc tối ưu các yếu tố như tỷ lệ nguyên liệu/nước, hàm lượng enzyme, nhiệt độ, thời gian và chế độ lắc ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu quả trích ly.

• Khái niệm hoạt tính sinh học: Đánh giá hoạt tính chống oxy hóa dựa trên khả năng quét gốc tự do DPPH và hoạt tính kháng khuẩn thông qua phương pháp khuếch tán đĩa thạch với các chủng vi khuẩn gây bệnh.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu: Nguyên liệu chính là trà xén cành Kim Tuyên 27, được thu hoạch và chế biến theo quy trình sản xuất trà Oolong tại nhà máy Công ty Cầu Tre, Bảo Lộc. Enzyme Viscozyme L thương mại được sử dụng với hoạt tính khoảng 100 đơn vị Fungal Beta-Glucanase/ml.

• Phương pháp phân tích: Hàm lượng polyphenol tổng được xác định bằng phản ứng màu với muối tartrate, hàm lượng TF và TR bằng phương pháp chiết tách dung môi ethyl acetate và n-butanol, hoạt tính chống oxy hóa bằng phương pháp quét gốc DPPH, hàm lượng EGCG bằng HPLC, khả năng kháng khuẩn bằng phương pháp khuếch tán đĩa thạch.

• Thiết kế thí nghiệm: Sử dụng phương pháp quy hoạch thực nghiệm yếu tố toàn phần (Plackett-Burman) để sàng lọc các yếu tố ảnh hưởng chính, tiếp theo là thiết kế hỗn hợp tâm xoay (CCD) trong phần mềm Minitab 16 để tối ưu hóa các yếu tố: tỷ lệ nguyên liệu/nước, hàm lượng Viscozyme L, nhiệt độ, thời gian và chế độ lắc.

• Cỡ mẫu và lặp lại: Mỗi nghiệm thức được thực hiện ngẫu nhiên với 3 lần lặp lại để đảm bảo độ tin cậy số liệu. Phân tích phương sai (ANOVA) được áp dụng để kiểm định ý nghĩa thống kê với mức p < 0.05.

• Timeline nghiên cứu: Khảo sát sơ bộ và sàng lọc yếu tố trong tháng 1-3/2015, tối ưu hóa và thực nghiệm xác nhận trong tháng 4-5/2015, đánh giá hoạt tính sinh học và hoàn thiện báo cáo trong tháng 6/2015.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Ảnh hưởng của các yếu tố đến quá trình trích ly polyphenol:

   • Tỷ lệ nguyên liệu/nước tối ưu là 1/26 (w/v), vượt trội so với các tỷ lệ khác như 1/5 đến 1/30.
   • Hàm lượng enzyme Viscozyme L tối ưu là 0.06 ml/g nguyên liệu, cao hơn mức 0.04 ml/g cho hiệu quả trích ly thấp hơn.
   • Nhiệt độ trích ly tối ưu là 48°C, vượt trội so với các mức 30-80°C, đảm bảo hoạt tính enzyme cao và ổn định polyphenol.
   • Thời gian trích ly tối ưu là 135 phút, dài hơn các thời gian ngắn hơn nhưng không gây phân hủy polyphenol.
   • Chế độ lắc 100 rpm giúp tăng hiệu quả trích ly so với trạng thái tĩnh hoặc lắc nhẹ.

2. Hàm lượng polyphenol tổng thu được:

   • Dưới điều kiện tối ưu, hàm lượng polyphenol tổng đạt hơn 23% (w/w) trong dịch chiết, cao hơn khoảng 15-20% so với điều kiện không sử dụng enzyme.
   • Hàm lượng polyphenol trong dịch chiết có Viscozyme L là 52.68% chất khô hòa tan, so với 40.57% ở mẫu không enzyme.

3. Hoạt tính chống oxy hóa và kháng khuẩn:

   • Hoạt tính quét gốc DPPH của dịch chiết có Viscozyme L đạt IC50 là 215.62 µg/ml, tốt hơn so với 301 µg/ml của mẫu không enzyme.
   • Hàm lượng EGCG trong cao trà Oolong đạt 36.62% chất khô hòa tan, là thành phần chính góp phần vào hoạt tính sinh học.
   • Cao trà Oolong có khả năng ức chế vi khuẩn Gram dương Staphylococcus aureus và MRSA ở nồng độ 50 mg/ml, thể hiện tiềm năng ứng dụng trong bảo quản và y dược.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy enzyme Viscozyme L có vai trò quan trọng trong việc phá vỡ cấu trúc tế bào thực vật, giải phóng polyphenol hiệu quả hơn so với phương pháp trích ly truyền thống. Nhiệt độ và thời gian trích ly được tối ưu nhằm cân bằng giữa hoạt tính enzyme và sự ổn định của polyphenol, tránh phân hủy do nhiệt hoặc oxy hóa.

So sánh với các nghiên cứu trước đây, hàm lượng polyphenol và hoạt tính chống oxy hóa đạt được trong nghiên cứu này cao hơn hoặc tương đương, chứng tỏ hiệu quả của phương pháp sinh học trích ly enzyme. Việc sử dụng enzyme cũng giúp giảm lượng dung môi và thời gian trích ly, phù hợp với xu hướng sản xuất sạch và thân thiện môi trường.

Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ bề mặt đáp ứng thể hiện ảnh hưởng tương tác giữa các yếu tố (tỷ lệ nguyên liệu/nước, hàm lượng enzyme, nhiệt độ, thời gian) đến hàm lượng polyphenol, cũng như bảng so sánh hoạt tính DPPH và hàm lượng EGCG giữa các mẫu.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Áp dụng quy trình trích ly enzyme Viscozyme L trong sản xuất cao trà Oolong:

   • Thực hiện theo điều kiện tối ưu: tỷ lệ nguyên liệu/nước 1/26, enzyme 0.06 ml/g, nhiệt độ 48°C, thời gian 135 phút, chế độ lắc 100 rpm.
   • Mục tiêu tăng hàm lượng polyphenol tổng lên trên 23% và nâng cao hoạt tính chống oxy hóa.
   • Thời gian triển khai: 6 tháng để điều chỉnh quy trình và đào tạo nhân viên.

2. Phát triển sản phẩm cao trà Oolong dạng bột và paste:

   • Sử dụng dịch chiết enzyme để cô đặc, sấy phun hoặc cô quay thu sản phẩm dạng bột hòa tan và paste.
   • Đánh giá chất lượng sản phẩm qua các chỉ tiêu hoạt tính sinh học và độ ổn định.
   • Chủ thể thực hiện: bộ phận R&D và sản xuất của nhà máy.

3. Mở rộng nghiên cứu ứng dụng enzyme trích ly cho các nguyên liệu phụ phẩm trà khác:

   • Khảo sát hiệu quả trích ly polyphenol từ các loại bã trà xanh, lá già, nhằm nâng cao giá trị sử dụng nguyên liệu.
   • Thời gian nghiên cứu: 12 tháng.

4. Tăng cường kiểm soát chất lượng và đánh giá hoạt tính sinh học định kỳ:

   • Thiết lập quy trình kiểm tra hàm lượng polyphenol, EGCG và hoạt tính chống oxy hóa trong từng lô sản phẩm.
   • Đảm bảo sản phẩm đạt tiêu chuẩn chất lượng và an toàn thực phẩm.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Các nhà nghiên cứu và sinh viên ngành Công nghệ Sinh học, Hóa học thực phẩm:

   • Học hỏi phương pháp ứng dụng enzyme trong trích ly hợp chất sinh học từ nguyên liệu thực vật.
   • Áp dụng mô hình tối ưu hóa quy trình bằng phần mềm Minitab.

2. Doanh nghiệp sản xuất trà và thực phẩm chức năng:

   • Nâng cao hiệu quả sử dụng nguyên liệu phụ phẩm trà, đa dạng hóa sản phẩm cao trà có hoạt tính sinh học.
   • Tối ưu hóa quy trình sản xuất thân thiện môi trường, giảm chi phí dung môi.

3. Chuyên gia phát triển sản phẩm mỹ phẩm và dược phẩm:

   • Khai thác nguồn polyphenol tự nhiên có hoạt tính chống oxy hóa và kháng khuẩn cao.
   • Phát triển nguyên liệu đầu vào cho các sản phẩm chống lão hóa, bảo vệ da.

4. Cơ quan quản lý chất lượng và an toàn thực phẩm:

   • Tham khảo tiêu chuẩn đánh giá hàm lượng polyphenol và hoạt tính sinh học trong sản phẩm trà.
   • Xây dựng quy định và hướng dẫn kiểm soát chất lượng sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên.

Câu hỏi thường gặp

1. Enzyme Viscozyme L có vai trò gì trong quá trình trích ly polyphenol?
   Viscozyme L chứa các carbohydrase giúp phá vỡ thành tế bào thực vật, tăng khả năng giải phóng polyphenol vào dung môi nước, nâng cao hiệu quả trích ly so với phương pháp truyền thống.

2. Điều kiện trích ly tối ưu được xác định như thế nào?
   Thông qua thiết kế thực nghiệm yếu tố toàn phần và hỗn hợp tâm xoay, các yếu tố tỷ lệ nguyên liệu/nước, hàm lượng enzyme, nhiệt độ, thời gian và chế độ lắc được khảo sát và tối ưu dựa trên hàm lượng polyphenol tổng thu được.

3. Hoạt tính chống oxy hóa của dịch chiết được đánh giá ra sao?
   Hoạt tính chống oxy hóa được đo bằng khả năng quét gốc tự do DPPH, với chỉ số IC50 thể hiện nồng độ mẫu cần thiết để ức chế 50% gốc tự do, mẫu có enzyme đạt IC50 thấp hơn mẫu không enzyme, chứng tỏ hiệu quả cao hơn.

4. Cao trà Oolong có khả năng kháng khuẩn như thế nào?
   Cao trà Oolong chứa polyphenol và EGCG có khả năng ức chế vi khuẩn Gram dương Staphylococcus aureus và MRSA ở nồng độ 50 mg/ml, cho thấy tiềm năng ứng dụng trong bảo quản và y học.

5. Nghiên cứu này có thể áp dụng cho các loại trà khác không?
   Phương pháp trích ly enzyme có thể được điều chỉnh và áp dụng cho các loại trà khác hoặc nguyên liệu thực vật chứa polyphenol, tuy nhiên cần khảo sát điều kiện tối ưu riêng biệt cho từng loại nguyên liệu.

Kết luận

• Đã xác định được điều kiện tối ưu sử dụng enzyme Viscozyme L trích ly polyphenol từ trà Oolong sản xuất từ trà xén cành Kim Tuyên với tỷ lệ nguyên liệu/nước 1/26, enzyme 0.06 ml/g, nhiệt độ 48°C, thời gian 135 phút và chế độ lắc 100 rpm.
• Hàm lượng polyphenol tổng thu được đạt trên 23% (w/w), cao hơn đáng kể so với phương pháp không sử dụng enzyme.
• Dịch chiết có hoạt tính chống oxy hóa mạnh với IC50 DPPH là 215.62 µg/ml và hàm lượng EGCG đạt 36.62% chất khô hòa tan.
• Cao trà Oolong có khả năng kháng khuẩn hiệu quả đối với Staphylococcus aureus và MRSA, mở ra hướng ứng dụng trong y dược và bảo quản thực phẩm.
• Đề xuất áp dụng quy trình trích ly enzyme trong sản xuất cao trà Oolong, đồng thời mở rộng nghiên cứu ứng dụng cho nguyên liệu phụ phẩm trà khác nhằm nâng cao giá trị kinh tế và phát triển sản phẩm đa dạng.

Học viên và các nhà nghiên cứu được khuyến khích tiếp tục phát triển quy trình và ứng dụng kết quả nghiên cứu vào sản xuất thực tế, góp phần nâng cao giá trị ngành trà và sức khỏe cộng đồng.