Luận án tiến sĩ nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện flavonoid 35 hydroxylase nhằm tăng cường tổng hợp flavonoid ở cây ô đầu aconitum carmichaelii debx

Nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện flavonoid 35 hydroxylase nhằm tăng cường tổng hợp flavonoid ở cây ô đầu Aconitum carmichaelii Debx.

• Tác giả: Hoàng Thị Thu Hoàn
• Người hướng dẫn: GS.TS Chu Hoàng Mậu
• Trường học: Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên
• Chuyên ngành: Di truyền học
• Đề tài: Nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện flavonoid 3’5’ hydroxylase nhằm tăng cường tổng hợp flavonoid ở cây Ô đầu (Aconitum carmichalii Debx.)
• Loại tài liệu: Luận án tiến sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thái Nguyên

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỞ ĐẦU
• 1.1. Đặt vấn đề
• 1.2. Mục tiêu nghiên cứu
• 1.3. Nội dung nghiên cứu
• 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Đặc điểm sinh học của cây Ô đầu
• 2.2. Thành phần dược chất và giá trị dược học ở cây Ô đầu
• 2.3. Nghiên cứu định danh cây Ô đầu
• 3. NUÔI CẤY IN VITRO VÀ CẢM ỨNG TẠO RỄ TƠ Ở CÂY DƯỢC LIỆU
• 3.1. Hệ thống tái sinh đa chồi ở cây dược liệu
• 3.2. Nghiên cứu nuôi cấy rễ tơ ở cây dược liệu
• 4. FLAVONOID VÀ NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN GEN FLAVONOID 3’5’ HYDROXYLASE
• 4.1. Đặc điểm về cấu trúc hóa học và vai trò của flavonoid
• 4.2. Con đường tổng hợp flavonoid ở thực vật
• 4.3. Enzyme flavonoid 3’5’-hydroxylase (F3’5’H)
• 4.4. Biểu hiện gen mã hóa flavonoid 3’5’ hydroxylase
• 5. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 5.1. Vật liệu nghiên cứu
• 5.2. Phương pháp nghiên cứu
• 5.2.1. Nhóm phương pháp định danh loài Ô đầu
• 5.2.2. Nhóm phương pháp nuôi cấy in vitro và cảm ứng tạo rễ tơ in vitro
• 5.2.3. Nhóm phương pháp tách dòng gen và thiết kế vector chuyển gen
• 5.2.4. Nhóm phương pháp chuyển gen và phân tích cây chuyển gen
• 5.2.5. Xử lý số liệu thống kê
• 5.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 6. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 6.1. Kết quả định danh loài Ô đầu (Aconitum carmichaelii)
• 6.1.1. Đặc điểm hình thái các mẫu Ô đầu thu ở Hà Giang
• 6.1.2. Đặc điểm trình tự nucleotide của vùng ITS và các đoạn gen matK, rpoC1, rpoB2. Thảo luận kết quả định danh mẫu Ô đầu
• 6.2. Kết quả thiết lập hệ thống nuôi cấy in vitro và tạo rễ tơ ở cây Ô đầu
• 6.2.1. Thiết lập hệ thống nuôi cấy in vitro phục vụ chuyển gen ở cây Ô đầu
• 6.2.2. Nuôi cấy tạo rễ tơ ở cây Ô đầu
• 6.2.3. Thảo luận kết quả thiết lập hệ thống nuôi cấy in vitro và tạo rễ tơ ở cây Ô đầu
• 6.3. Kết quả phân lập gen, thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa flavonoid 3’5’ hydroxylase và tạo chủng Agrobacterium tumefaciens mang vector chuyển gen thực vật
• 6.3.1. Phân lập gen A F3 5 H từ cây Ô đầu
• 6.3.2. Thiết kế vector chuyển gen thực vật mang gen A F3 5 H
• 6.3.3. Tạo Agrobacterium tumefaciens CV58 chứa vector chuyển gen pCB301_A F3 5 H
• 6.3.4. Thảo luận kết quả thiết kế vector biểu hiện gen A F3 5 H và tạo chủng A. tumefacience mang vector chuyển gen thực vật
• 6.4. Phân tích biểu hiện gen A F3 5 H ở cây thuốc lá
• 6.4.1. Biến nạp di truyền và biểu hiện protein tái tổ hợp F3’5’H ở cây thuốc lá chuyển gen A F3 5 H
• 6.4.2. Hàm lượng flavonoid tổng số trong lá của các dòng thuốc lá chuyển gen
• 6.4.3. Thảo luận kết quả biến nạp và biểu hiện gen A F3 5 H trong cây thuốc lá
• 6.5. Biến nạp di truyền và phân tích biểu hiện gen A F3 5 H ở cây Ô đầu
• 6.5.1. Biến nạp gen uidA vào cây Ô đầu
• 6.5.2. Biến nạp và biểu hiện gen A F3 5 H ở cây Ô đầu
• 6.5.3. Thảo luận kết quả biến nạp và biểu hiện mạnh gen A F3 5 H ở cây Ô đầu
• 7. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC LUẬN ÁN

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu nuôi cấy in vitro cây Ô đầu

Nghiên cứu nuôi cấy in vitro là một phương pháp quan trọng trong công nghệ sinh học, giúp tăng cường sản xuất các hợp chất có giá trị từ cây Ô đầu (Aconitum carmichaelii Debx.). Cây Ô đầu được biết đến với nhiều thành phần dược liệu quý, trong đó có flavonoid, một nhóm hợp chất có tác dụng sinh học mạnh mẽ. Việc áp dụng công nghệ nuôi cấy in vitro không chỉ giúp bảo tồn giống cây mà còn nâng cao hiệu quả sản xuất dược liệu.

1.1. Đặc điểm sinh học của cây Ô đầu

Cây Ô đầu là một loài thực vật thuộc chi Aconitum, nổi bật với các thành phần dược chất có giá trị. Đặc điểm sinh học của cây Ô đầu bao gồm khả năng sinh trưởng trong điều kiện khắc nghiệt và khả năng sản xuất các hợp chất flavonoid có tác dụng sinh học cao.

1.2. Vai trò của flavonoid trong cây Ô đầu

Flavonoid là các hợp chất thứ cấp quan trọng, đóng vai trò trong việc bảo vệ cây khỏi các tác nhân gây hại. Chúng cũng có tác dụng chống oxy hóa và kháng khuẩn, góp phần nâng cao giá trị dược liệu của cây Ô đầu.

II. Thách thức trong nghiên cứu nuôi cấy in vitro cây Ô đầu

Mặc dù nuôi cấy in vitro mang lại nhiều lợi ích, nhưng vẫn tồn tại nhiều thách thức trong quá trình thực hiện. Các vấn đề như điều kiện nuôi cấy, sự phát triển của mô và khả năng tạo rễ tơ là những yếu tố cần được nghiên cứu kỹ lưỡng để đạt được kết quả tốt nhất.

2.1. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy

Nhiệt độ, độ ẩm, và ánh sáng là những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sự phát triển của mô cây trong điều kiện nuôi cấy in vitro. Việc tối ưu hóa các yếu tố này là cần thiết để đạt được tỷ lệ sống cao và chất lượng cây giống tốt.

2.2. Khó khăn trong việc tạo rễ tơ

Tạo rễ tơ là một trong những thách thức lớn trong nuôi cấy in vitro. Các yếu tố như loại hormone, môi trường nuôi cấy và thời gian nuôi cấy đều có thể ảnh hưởng đến khả năng tạo rễ tơ của cây Ô đầu.

III. Phương pháp nuôi cấy in vitro cây Ô đầu hiệu quả

Để tối ưu hóa quá trình nuôi cấy in vitro, cần áp dụng các phương pháp khoa học và công nghệ hiện đại. Việc lựa chọn môi trường nuôi cấy phù hợp và các hormone sinh trưởng là rất quan trọng để đạt được kết quả tốt nhất.

3.1. Thiết lập môi trường nuôi cấy

Môi trường nuôi cấy cần được thiết kế với các thành phần dinh dưỡng phù hợp để hỗ trợ sự phát triển của mô cây. Sử dụng các loại hormone như BAP và NAA có thể kích thích sự phát triển chồi và rễ.

3.2. Kỹ thuật tạo rễ tơ

Kỹ thuật tạo rễ tơ cần được thực hiện với sự chú ý đến nồng độ hormone và thời gian nuôi cấy. Việc áp dụng các phương pháp như đồng nuôi cấy với R. rhizogenes có thể giúp tăng cường khả năng tạo rễ tơ.

IV. Biểu hiện gen flavonoid 35 hydroxylase ở cây Ô đầu

Biểu hiện gen flavonoid 35 hydroxylase (F3'5'H) là một yếu tố quan trọng trong việc tăng cường tổng hợp flavonoid ở cây Ô đầu. Việc nghiên cứu và tối ưu hóa biểu hiện gen này có thể giúp nâng cao hàm lượng flavonoid trong cây.

4.1. Cấu trúc và chức năng của gen F3 5 H

Gen F3'5'H mã hóa cho enzyme có vai trò quan trọng trong quá trình tổng hợp flavonoid. Enzyme này xúc tác phản ứng chuyển đổi naringenin thành flavonoid, quyết định sản phẩm cuối cùng trong quá trình sinh tổng hợp.

4.2. Phương pháp phân tích biểu hiện gen

Các phương pháp như RT-PCR và Western blot có thể được sử dụng để phân tích biểu hiện gen F3'5'H. Việc xác định nồng độ flavonoid trong cây chuyển gen cũng là một phần quan trọng trong nghiên cứu này.

V. Ứng dụng thực tiễn của nghiên cứu nuôi cấy in vitro cây Ô đầu

Nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện gen flavonoid 35 hydroxylase không chỉ có giá trị trong việc bảo tồn giống cây mà còn mở ra cơ hội phát triển dược liệu mới từ cây Ô đầu. Các ứng dụng này có thể góp phần nâng cao giá trị kinh tế và bảo vệ sức khỏe cộng đồng.

5.1. Tăng cường sản xuất flavonoid

Việc tăng cường sản xuất flavonoid thông qua nuôi cấy in vitro có thể giúp cung cấp nguồn dược liệu phong phú cho ngành dược phẩm. Điều này không chỉ đáp ứng nhu cầu thị trường mà còn bảo tồn các giống cây quý hiếm.

5.2. Đóng góp vào bảo tồn giống cây

Nghiên cứu này có thể giúp bảo tồn giống cây Ô đầu, một loài cây có giá trị dược liệu cao. Việc áp dụng công nghệ sinh học trong bảo tồn giống cây sẽ giúp duy trì nguồn gen quý và phát triển bền vững.

VI. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện flavonoid 35 hydroxylase ở cây Ô đầu mở ra nhiều triển vọng cho ngành dược liệu. Việc áp dụng công nghệ sinh học trong nghiên cứu này không chỉ giúp nâng cao giá trị kinh tế mà còn góp phần bảo vệ sức khỏe cộng đồng.

6.1. Tương lai của nghiên cứu cây Ô đầu

Nghiên cứu về cây Ô đầu sẽ tiếp tục được mở rộng, với mục tiêu phát triển các sản phẩm dược liệu mới. Việc ứng dụng công nghệ sinh học sẽ là chìa khóa để đạt được những thành tựu này.

6.2. Định hướng nghiên cứu tiếp theo

Các nghiên cứu tiếp theo có thể tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình nuôi cấy và biểu hiện gen, nhằm nâng cao hiệu quả sản xuất flavonoid và các hợp chất có hoạt tính sinh học khác từ cây Ô đầu.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Đặt vấn đề Trong những n m qua, kinh nghiệm và tri thức sử dụng cây thuốc để chữa bệnh của ngƣời dân vùng núi cao đã đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ sức khoẻ cộng đồng. Do áp lực khai thác không bền vững để đáp ứng nhu cầu ngày càng t ng cao về dƣợc phẩm nguyên, nhiều cây thuốc quý bị đe dọa và đang có nguy cơ bị tuyệt chủng. Việc thực hiện chủ trƣơng chuyển dịch cơ cấu kinh tế nông nghiệp theo hƣớng sản xuất hàng hoá đa canh và bền vững, nhiều loại giống cây trồng đƣợc đƣa vào sản xuất nông nghiệp bằng những kỹ thuật mới đã và đang đƣợc ngƣời dân ủng hộ và đón nhận. Trong đó, nghiên cứu nhân giống và phát triển các loài cây dƣợc liệu có giá trị kinh tế cao đang là hƣớng đi mới, không những góp phần t ng thêm thu nhập, mà còn đóng góp vào công tác phòng và bảo vệ sức khỏe cộng đồng, đồng thời bảo tồn, phát triển đƣợc tri thức bản địa quý giá của các dân tộc thiểu số về sử dụng các loài cây thuốc Nam, trong đó có cây Ô đầu.

Ô đầu, Phụ tử chứa những thành phần có độc tính cao nhƣng vẫn đƣợc cho là những vị thuốc quý, đƣợc dùng phổ biến trong y dƣợc học cổ truyền phƣơng Đông. Vị thuốc Ô đầu là củ mẹ và Phụ tử là củ con của một số loài thuộc chi Aconitum [1], [3]. Hiện nay trên thế giới đang có nhiều nghiên cứu về chi Aconitum nhằm phát triển các sản phẩm theo hƣớng nâng cao hiệu quả sử dụng các loài thuộc chi này trong phòng và trị bệnh. Ở Việt Nam, cây Ô đầu (Aconitum carmichaelii Debx.) đƣợc tìm thấy mọc hoang ở vùng núi cao phía Bắc Việt Nam, nhƣ Yên Bái, Lào Cai, Lai Châu [3] và sau đó cây Ô đầu đã đƣợc đƣa vào trồng ở Hà Giang, Lào Cai, Lai Châu từ những n m 70 thế kỷ XX.

Hiện nay, cây Ô đầu đƣợc trồng nhiều ở huyện Quản Bạ, Đồng V n, tỉnh Hà Giang và đƣợc ngƣời dân địa phƣơng sử dụng theo kinh nghiệm làm thuốc chữa các loại bệnh về xƣơng khớp hoặc nấu cháo n để t ng cƣờng sức khoẻ. N m 2013, Thủ tƣớng Chính phủ đã phê duyệt quy hoạch tổng thể phát triển dƣợc liệu đến n m 2020 và định hƣớng đến n m 2030, theo đó cây Ô đầu LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 2 đƣợc quy hoạch trồng tại tỉnh Hà Giang [19]. Để phát triển nguồn dƣợc liệu Ô đầu, ngoài chiến lƣợc mở rộng vùng trồng, t ng n ng suất và sản lƣợng, việc ứng dụng công nghệ sinh học trong mục đích t ng sinh khối rễ và củ Ô đầu thông qua nuôi cấy rễ tơ phục vụ thu nhận các hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học mang tính thời sự và đang đƣợc quan tâm nghiên cứu. Flavonoid là các hợp chất thứ cấp chính đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì cân bằng oxy hóa khử trong tế bào thực vật.

Nhiều loại flavonoid có đặc tính kháng khuẩn, chống oxy hóa và chống ung thƣ [12]. Flavonoid trong chi Aconitum đƣợc quan tâm trong nghiên cứu phát triển dƣợc phẩm hiện đại, và flavonoid 3'5'- hydroxylase (F3'5'H) là một enzyme chìa khóa xúc tác các phản ứng cuối cùng trong quá trình sinh tổng hợp các hợp chất flavonoid ở cây Ô đầu. F3′5′H, một thành viên của họ Cytochrome P450, liên kết với phần màng microomal, phụ thuộc vào NADPH và O2, và nhạy cảm với chất ức chế [139], [106]. F3'5'H tham gia phản ứng chuyển naringenin thành flavonoid [5], [106], [139], [178].

Sự hydro hóa vị trí 5' bởi F3'5'H là một phản ứng quan trọng vì nó quyết định sản phẩm cuối cùng trong quá trình sinh tổng hợp flavonoid của thực vật [97], [178], do đó, việc t ng cƣờng biểu hiện gen F3 5 H sẽ làm t ng nồng độ và hoạt tính của enzyme F3’5’H và dẫn đến t ng tích lũy flavonoid trong thực vật. Cho đến nay, đã có một số báo cáo về phân tích biểu hiện của gen F3'5'H của một số loài thực vật khác nhau, nhƣ Dạ yến thảo [82], Bạch quả [170], Trà [95], [178].tuy nhiên, chƣa có báo cáo nào về kết quả phân tích biểu hiện gen F3 5 H của cây Ô đầu. Nhƣ vậy, hai cách tiếp cận làm t ng hàm lƣợng các chất có hoạt tính sinh học đƣợc lựa chọn là ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật làm t ng sinh khối và kỹ thuật biểu hiện gen chìa khóa làm t ng tích lũy hàm lƣợng hợp chất thứ cấp trong cây chuyển gen. Xuất phát từ những lý do trên chúng tôi đã lựa chọn và tiến hành đề tài luận án: ―Nghiên cứu nuôi cấy in vitro và biểu hiện flavonoid 3’5’- hydroxylase nhằm tăng cƣờng tổng hợp flavonoid ở cây Ô đầu (Aconitum carmichaelii Debx.

LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Mục tiêu nghiên cứu 2. Xác định đƣợc một số điều kiện thích hợp trong nuôi cấy in vitro và cảm ứng tạo rễ tơ ở cây Ô đầu. Chứng minh đƣợc sự biểu hiện của gen mã hóa Flavonoid 3’5’ hydroxylase của cây Ô đầu (Aconitum carmichaelii Debx.) làm t ng sự tích lũy flavonoid trong cây chuyển gen.

Nội dung nghiên cứu 1) Nghiên cứu định danh loài từ các mẫu Ô đầu thu tại một số địa phƣơng của tỉnh Hà Giang bằng phƣơng pháp hình thái so sánh và mã vạch DNA. Thu thập mẫu Ô đầu từ hai huyện Hoàng Su Phì và Quản Bạ (Hà Giang), trồng tại vƣờn thí nghiệm làm vật liệu nghiên cứu. Định danh loài Ô đầu (A.) bằng phƣơng pháp hình thái so sánh và tra cứu trên cơ sở dữ liệu thực vật quốc tế, kết hợp với một số chỉ thị phân tử DNA nhƣ ITS, matK, rpoC1, rpoB2. 2) Nghiên cứu thiết lập hệ thống nuôi cấy in vitro và tạo rễ tơ ở cây Ô đầu.

Tạo nguyên liệu khởi đầu trong nuôi cấy in vitro từ đoạn thân cây Ô đầu. Cảm ứng tạo đa chồi và cây Ô đầu in vitro qua nghiên cứu ảnh hƣởng của BAP và kinetin, ảnh hƣởng của α-NAA và IBA, ảnh hƣởng của giá thể. Nghiên cứu lựa chọn vật liệu nuôi cấy tạo rễ tơ và điều kiện thích hợp cho cảm ứng tạo rễ tơ cây Ô đầu. Khảo sát môi trƣờng nhân nuôi t ng sinh khối rễ tơ cây Ô đầu.

3) Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa Flavonoid 3’5’hydroxylase và tạo chủng Agrobacterium tumefaciens mang vector chuyển gen thực vật. Phân lập, tách dòng và xác định trình tự gen A F3 5 H từ cây Ô đầu (A. Thiết kế vector biểu hiện gen thực vật mang gen A F3 5 H từ cây Ô đầu và tạo vi khuẩn A. tumefaciens tái tổ hợp chứa vector chuyển gen A F3 5 H.

4) Nghiên cứu biến nạp và biểu hiện gen A F3 5 H ở cây Thuốc lá. LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] 4 Biến nạp di truyền gen A F3 5 H vào mô lá Thuốc lá và tạo cây Thuốc lá chuyển gen. Phân tích biểu hiện gen A F3 5 H của cây Ô đầu trên cây Thuốc lá chuyển gen, cụ thể là xác nhận sự có mặt và sự phiên mã, dịch mã của gen chuyển A F3 5 H trong cây chuyển gen; so sánh hàm lƣợng flavonoid giữa cây chuyển gen và cây không chuyển gen. 5) Nghiên cứu biến nạp và biểu hiện gen A F3 5 H ở cây Ô đầu.

Nghiên cứu về ảnh hƣởng của các yếu tố đến hiệu quả chuyển gen cây Ô đầu thông qua biến nạp gen chỉ thị uidA vào cây Ô đầu. Biến nạp di truyền gen A F3 5 H vào chồi Ô đầu thông qua A. tumefaciens và tạo cây Ô đầu chuyển gen. Phân tích biểu hiện gen A F3 5 H ở cây Ô đầu chuyển gen thông qua phân tích PCR, RT-PCR, Western blot và ELISA.

Đánh giá sự tích lũy hàm lƣợng flavonoid trong cây chuyển gen. Những đóng góp mới của luận án Luận án là công trình nghiên cứu có hệ thống, từ định danh các mẫu Ô đầu thu thập ở Hà Giang đến thiết lập hệ thống tái sinh in vitro phục vụ chuyển gen đến cảm ứng tạo rễ tơ và nhân nuôi t ng sinh khối rễ tơ ở loài Ô đầu. Từ tách dòng phân tử gen A F3 5 H từ cây Ô đầu và thiết kế vector biểu hiện gen ở thực vật đến nghiên cứu biến nạp di truyền và phân tích biểu hiện gen A F3 5 H ở cây chuyển gen. Những đóng góp mới cho khoa học của luận án thể hiện cụ thể là: 1) Các mẫu Ô đầu thu tại huyện Quản Bạ và Hoàng Su Phì, tỉnh Hà Giang, Việt Nam thuộc cùng loài A.

carmichaelii, chi Aconitum, họ Hoàng Liên (Ranunculaceae) đƣợc định danh bằng sự kết hợp giữa phƣơng pháp hình thái so sánh và mã vạch DNA. 2) Xác định đƣợc điều kiện thích hợp cho nuôi cấy in vitro và tạo đƣợc các dòng rễ tơ từ rễ cây Ô đầu in vitro làm vật liệu phục vụ chọn dòng rễ tơ chuyển gen. 3) Lần đầu tiên trên thế giới gen A F3 5 H từ cây Ô đầu đƣợc biến nạp và biểu hiện thành công trên cây thuốc lá và cây Ô đầu. Sự biểu hiện mạnh của gen A F3 5 H đã làm t ng hàm lƣợng flavonoid trong cây chuyển gen.

Kết quả nghiên cứu của luận án là báo cáo đầu tiên trên thế giới và ở Việt Nam về phân tích biểu hiện gen A F3 5 H của cây Ô đầu. LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài luận án Cách tiếp cận cải thiện hàm lƣợng flavonoid bằng kỹ thuật chuyển gen mã hóa enzyme chìa khóa A F3 5 H trong quá trình tổng hợp flavonoid và tạo dòng rễ tơ in vitro ở cây Ô đầu có ý nghĩa về khoa học và thực tiễn. Về mặt khoa học Kết quả phân tích biểu hiện gen trên cây Thuốc lá và cây Ô đầu là cơ sở cho các nghiên cứu t ng cƣờng biểu hiện gen A F3 5 H ở các loài dƣợc liệu khác trong mục đích làm t ng sự tích lũy flavonoid trong các bộ phận của thực vật.

Gen A F3 5 H từ cây Ô đầu đƣợc nghiên cứu trong công trình này có thể đƣợc coi là một ứng cử viên để t ng cƣờng tích lũy flavonoid trong thực vật bằng công nghệ gen. Kết quả nghiên cứu nuôi cấy in vitro và cảm ứng tạo rễ tơ là cơ sở ứng dụng công nghệ này vào việc nâng cao hàm lƣợng và hiệu quả thu nhận các hợp chất có hoạt tính sinh học ở cây Ô đầu và một số loại cây dƣợc liệu khác. Về mặt thực tiễn Các dòng rễ tơ và dòng cây Ô đầu chuyển gen làm vật liệu cho chọn giống Ô đầu có hàm lƣợng flavonoid cao.