Luận văn thạc sĩ công nghệ thực phẩm nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid thô từ đảng sâm codonopsis javanica blume hook f bằng enzyme và sóng siêu âm

Nghiên cứu nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid từ đảng sâm bằng enzyme và sóng siêu âm, ứng dụng trong công nghệ thực phẩm.

• Tác giả: Trương Hoàng Duy
• Người hướng dẫn: PGS. TS Đống Thị Anh Đào
• Trường học: Đại học Bách Khoa - ĐHQG TP. HCM
• Chuyên ngành: Công nghệ Thực phẩm và Đồ uống
• Đề tài: Nâng Cao Khả Năng Thu Nhận Saponin Triterpenoid Từ Đảng Sâm Bằng Enzyme Và Sóng Siêu Âm
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: TP. Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• MỞ ĐẦU
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Tổng quan về nguyên liệu sâm và Đảng sâm
• 1.2. Đặc điểm vi phẫu của rễ. Nơi sống và phân bố
• 1.3. Thành phần hóa học của rễ cây Đảng sâm. Tổng quan về hợp chất saponin và saponin triterpenoid
• 1.4. Tìm hiểu về sóng siêu âm
• 1.5. Ứng dụng của sóng siêu âm
• 1.6. Tổng quan về enzyme cellulase và pectinase
• 1.6.1. Cơ chế hoạt động của enzyme cellulase
• 1.6.2. Phân loại enzyme cellulase
• 1.6.3. Cơ chế hoạt động của enzyme pectinase
• 1.6.4. Phân loại enzyme pectinase
• 1.7. Phương pháp kiểm tra saponin
• 2. CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Nguyên liệu, dụng cụ, hóa chất
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Khảo sát nguyên liệu đảng sâm
• 2.2.2. Khảo sát quá trình trích ly bằng nước
• 2.2.3. Khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : nước
• 2.2.4. Khảo sát nhiệt độ trích ly
• 2.2.5. Khảo sát thời gian trích ly
• 2.2.6. Khảo sát quá trình trích ly bằng sóng siêu âm
• 2.2.7. Khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : nước ảnh hưởng đến quá trình trích ly bằng sóng siêu âm
• 2.2.8. Khảo sát nhiệt độ siêu âm
• 2.2.9. Khảo sát thời gian siêu âm
• 2.2.10. Khảo sát quá trình thu nhận saponin triterpenoid bằng enzyme cellulase và enzyme pectinase
• 2.2.11. Khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : nước
• 2.2.12. Khảo sát thời gian ủ
• 2.2.13. Khảo sát nhiệt độ ủ
• 2.2.14. Khảo sát nồng độ enzyme
• 2.2.15. Khảo sát kết hợp: xử lý bằng sóng siêu âm trước, xử lý bằng enzyme sau
• 2.2.16. Khảo sát hàm lượng enzyme
• 2.2.17. Khảo sát thời gian xử lý bằng enzyme
• 2.2.18. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu âm
• 2.2.19. Khảo sát nhiệt độ xử lý bằng sóng siêu âm
• 2.2.20. Khảo sát kết hợp: xử lý bằng enzyme trước, xử lý bằng sóng siêu âm sau
• 2.2.21. Khảo sát nồng độ enzyme
• 2.2.22. Khảo sát thời gian xử lý bằng enzyme
• 2.2.23. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu âm
• 2.2.24. Khảo sát nhiệt độ xử lý bằng sóng siêu âm
• 2.2.25. So sánh các điều kiện trích ly ảnh hưởng đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được
• 2.2.26. Bước đầu ứng dụng kỹ thuật vi bao hợp chất saponin triterpenoid thu nhận được
• 2.2.27. Các phương pháp phân tích
• 2.2.27.1. Xác định hàm lượng triterpenoid
• 2.2.27.2. Xác định hoạt tính chống oxy hóa bằng phương pháp DPPH
• 2.2.27.3. Xác định hàm lượng saponin triterpenoid
• 2.2.27.4. Xây dựng đường chuẩn bằng acid oleanolic
• 2.2.28. Xác định saponin triterpenoid trong mẫu. Quy trình trích ly và phân tích mẫu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Kết quả kiểm tra một số chỉ tiêu ban đầu của nguyên liệu
• 3.2. Khảo sát quá trình trích ly saponin triterpenoid bằng nước
• 3.2.1. Khảo sát tỉ lệ nước và nguyên liệu
• 3.2.2. Khảo sát nhiệt độ của nước ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin triterpenoid
• 3.2.3. Khảo sát thời gian ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin triterpenoid
• 3.2.4. Tối ưu hóa quá trình trích ly saponin triterpenoid bằng nước
• 3.3. Khảo sát quá trình trích ly triterpen saponin bằng sóng siêu âm
• 3.3.1. Khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : nước ảnh hưởng đến quá trình trích ly bằng sóng siêu âm
• 3.3.2. Khảo sát nhiệt độ siêu âm ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin
• 3.3.3. Khảo sát thời gian siêu âm ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin
• 3.4. Khảo sát quá trình thu nhận saponin triterpenoid bằng enzyme cellulase và enzyme pectinase
• 3.4.1. Khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : nước
• 3.4.2. Khảo sát thời gian ủ enzyme
• 3.4.3. Khảo sát hàm lượng enzyme
• 3.4.4. Khảo sát sử dụng kết hợp enzyme cellulase, enzyme pectinase và sóng siêu âm
• 3.4.4.1. Xử lý bằng sóng siêu âm trước kết hợp với xử lý bằng enzyme sau
• 3.4.4.2. Khảo sát hàm lượng enzyme
• 3.4.4.3. Khảo sát thời gian ủ enzyme
• 3.4.4.4. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu âm
• 3.4.4.5. Khảo sát nhiệt độ xử lý bằng sóng siêu âm
• 3.4.4.6. Xử lý bằng enzyme trước kết hợp với xử lý bằng sóng siêu âm sau
• 3.4.4.7. Khảo sát nồng độ enzyme
• 3.4.4.8. Khảo sát thời gian xử lý bằng enzyme
• 3.4.4.9. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu âm
• 3.4.4.10. Khảo sát nhiệt độ xử lý bằng sóng siêu âm
• 3.4.5. So sánh các điều kiện trích ly ảnh hưởng đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được
• 3.5. Kết quả chụp SEM
• 3.6. Kết quả kiểm tra sản phẩm vi bao hợp chất saponin triterpenoid
• 3.7. Đánh giá sản phẩm vi bao hợp chất saponin triterpenoid
• 3.8. Kiểm tra và so sánh khả năng chống oxy hóa của hợp chất saponin triterpenoid thô thu nhận được
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Saponin Triterpenoid Đảng Sâm Giới Thiệu Chung

Saponin là thành phần quan trọng trong nhiều loại thực vật, đặc biệt là Đảng sâm Codonopsis javanica. Chúng nổi tiếng với khả năng chống viêm, kháng khuẩn, kháng nấm và ức chế virus. Một số saponin còn có tiềm năng trong điều trị các bệnh như viêm loét dạ dày và viêm da [1]. Đảng sâm đóng vai trò quan trọng trong dược liệu, được ứng dụng rộng rãi trong sản xuất dược phẩm. Theo Đông y, Thượng đảng nhân sâm có thể thay thế nhân sâm trong điều trị thiếu máu, da vàng, bệnh bạch huyết, viêm thượng thận, tiểu ra albumin và phù nề. Ngoài ra, nó còn được sử dụng như một loại thuốc bổ dạ dày, chữa ho, tiêu đờm và lợi tiểu [2].

1.1. Nguồn Gốc và Đặc Điểm Sinh Học Của Đảng Sâm

Đảng sâm (Codonopsis javanica) là một loại dược liệu quý, hiện đang được ghi vào sách đỏ Việt Nam. Điều này cho thấy tầm quan trọng của việc bảo tồn nguồn thực vật này. Trong những năm gần đây, các nhà khoa học đã đạt được thành công trong việc nhân giống và trồng rộng rãi Đảng sâm, mở ra cơ hội khai thác tiềm năng dược liệu của nó một cách bền vững. Việc nghiên cứu sâu hơn về các đặc tính sinh học và thành phần hóa học của Đảng sâm là rất cần thiết.

1.2. Vai Trò Của Saponin Triterpenoid Trong Dược Lý Đảng Sâm

Saponin triterpenoid là một trong những thành phần hóa học quan trọng nhất của Đảng sâm, đóng vai trò then chốt trong các hoạt tính sinh học của dược liệu này. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng saponin triterpenoid có nhiều tác dụng dược lý tiềm năng, bao gồm chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và kháng ung thư. Do đó, việc chiết xuất saponin từ Đảng sâm và nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác động của nó là rất quan trọng để phát triển các sản phẩm dược phẩm và thực phẩm chức năng mới.

II. Thách Thức Trong Chiết Xuất Saponin Từ Đảng Sâm Vấn Đề Cần Giải

Quá trình chiết xuất saponin triterpenoid từ Đảng sâm thường gặp nhiều khó khăn. Các phương pháp truyền thống như sử dụng dung môi hữu cơ có thể gây ô nhiễm môi trường và đòi hỏi thời gian chiết xuất dài. Hiệu suất chiết xuất thường không cao, dẫn đến lãng phí nguyên liệu và giảm hiệu quả kinh tế. Ngoài ra, cấu trúc phức tạp của saponin cũng gây khó khăn cho việc phân lập và tinh chế. Do đó, cần tìm kiếm các phương pháp chiết xuất hiệu quả hơn, thân thiện với môi trường và tiết kiệm chi phí.

2.1. Hiệu Quả Chiết Xuất Saponin Bằng Phương Pháp Truyền Thống

Các phương pháp chiết xuất truyền thống thường sử dụng các dung môi hữu cơ như methanol, ethanol hoặc hexane. Mặc dù các dung môi này có khả năng hòa tan saponin triterpenoid tốt, nhưng chúng lại gây ra nhiều vấn đề về an toàn và môi trường. Thời gian chiết xuất thường kéo dài, và hiệu suất chiết xuất thường không cao do sự cản trở của thành tế bào thực vật và sự phức tạp của ma trận Đảng sâm.

2.2. Hạn Chế Về Độ Tinh Khiết và Khả Năng Ứng Dụng Saponin

Saponin triterpenoid thu được từ các phương pháp chiết xuất truyền thống thường chứa nhiều tạp chất, bao gồm các polysaccharide, protein và các hợp chất phenolic. Điều này làm giảm độ tinh khiết của saponin và hạn chế khả năng ứng dụng của nó trong các lĩnh vực dược phẩm và thực phẩm chức năng. Cần có các quy trình tinh chế phức tạp để loại bỏ các tạp chất này, làm tăng chi phí sản xuất.

III. Enzyme và Sóng Siêu Âm Giải Pháp Nâng Cao Thu Nhận Saponin

Nghiên cứu này tập trung vào việc sử dụng enzyme (cellulase, pectinase) và sóng siêu âm để nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid từ Đảng sâm. Enzyme giúp phá vỡ cấu trúc tế bào, giải phóng saponin. Sóng siêu âm tăng cường quá trình chiết xuất bằng cách tạo ra các bọt khí và vi dòng, thúc đẩy sự xâm nhập của dung môi vào tế bào thực vật. Việc kết hợp hai phương pháp này hứa hẹn mang lại hiệu suất chiết xuất cao hơn, giảm thời gian và chi phí sản xuất, đồng thời thân thiện với môi trường.

3.1. Cơ Chế Tác Động Của Enzyme Cellulase và Pectinase

Enzyme cellulase và pectinase có khả năng phân hủy các thành phần cấu trúc của thành tế bào thực vật, đặc biệt là cellulose và pectin. Việc phá vỡ cấu trúc này giúp giải phóng saponin triterpenoid bị mắc kẹt bên trong tế bào, làm tăng hiệu suất chiết xuất. Cơ chế tác động của enzyme là một quá trình sinh học phức tạp, phụ thuộc vào nhiều yếu tố như pH, nhiệt độ và nồng độ enzyme.

3.2. Ưu Điểm Của Sóng Siêu Âm Hỗ Trợ Chiết Xuất Saponin

Sóng siêu âm hỗ trợ chiết xuất (UAE) là một kỹ thuật tiên tiến, sử dụng năng lượng sóng siêu âm để tăng cường quá trình chiết xuất. Cơ chế tác động của sóng siêu âm bao gồm tạo ra các bọt khí, vi dòng và hiệu ứng nhiệt, giúp phá vỡ thành tế bào, tăng diện tích tiếp xúc giữa dung môi và vật liệu, và thúc đẩy sự khuếch tán của saponin vào dung môi. UAE có nhiều ưu điểm so với các phương pháp chiết xuất truyền thống, bao gồm hiệu suất chiết xuất cao hơn, thời gian chiết xuất ngắn hơn và tiêu thụ dung môi ít hơn.

IV. Nghiên Cứu Kết Hợp Enzyme và Sóng Siêu Âm Kết Quả Thực Nghiệm

Các kết quả nghiên cứu cho thấy việc kết hợp enzyme và sóng siêu âm mang lại hiệu suất chiết xuất saponin triterpenoid cao hơn đáng kể so với việc sử dụng riêng lẻ từng phương pháp. Cụ thể, việc xử lý Đảng sâm bằng sóng siêu âm trước, sau đó xử lý bằng enzyme pectinase cho kết quả tốt nhất, đạt 5972,04mg/100gDW. Điều này chứng tỏ sự kết hợp hiệp đồng giữa hai phương pháp, giúp tối ưu hóa quá trình chiết xuất.

4.1. So Sánh Hiệu Quả Chiết Xuất Saponin Giữa Các Phương Pháp

Nghiên cứu đã so sánh hiệu quả chiết xuất saponin bằng nhiều phương pháp khác nhau, bao gồm sử dụng nước, sóng siêu âm, enzyme cellulase, enzyme pectinase và kết hợp enzyme và sóng siêu âm. Kết quả cho thấy phương pháp kết hợp enzyme và sóng siêu âm cho hiệu suất chiết xuất cao nhất, chứng tỏ tính ưu việt của phương pháp này trong việc thu nhận saponin triterpenoid từ Đảng sâm.

4.2. Tối Ưu Hóa Thông Số Chiết Xuất Bằng Phương Pháp Thực Nghiệm

Để đạt được hiệu suất chiết xuất tối ưu, các thông số chiết xuất như tỉ lệ nguyên liệu:dung môi, pH, nhiệt độ, thời gian ủ enzyme, nồng độ enzyme và thời gian siêu âm đã được tối ưu hóa bằng phương pháp thiết kế thí nghiệm (RSM). Kết quả cho thấy việc kiểm soát các thông số này một cách chính xác là rất quan trọng để đạt được hiệu suất chiết xuất cao nhất và chất lượng saponin triterpenoid tốt nhất.

4.3. Vi Bao Hợp Chất Saponin Triterpenoid Bằng Phương Pháp Sấy Phun

Nghiên cứu cũng đã tiến hành vi bao hợp chất saponin triterpenoid thu được bằng phương pháp sấy phun, sử dụng maltodextrin và gum arabic làm chất mang. Quá trình vi bao giúp bảo vệ saponin khỏi các tác động bên ngoài như ánh sáng, nhiệt độ và oxy hóa, đồng thời cải thiện độ tan và khả năng hấp thụ của saponin. Kết quả phân tích SEM cho thấy các hạt saponin được vi bao có kích thước đồng đều và cấu trúc tốt.

V. Ứng Dụng Thực Tiễn Và Tiềm Năng Phát Triển Của Saponin Đảng Sâm

Việc nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid từ Đảng sâm mở ra nhiều tiềm năng ứng dụng trong các lĩnh vực dược phẩm, thực phẩm chức năng và mỹ phẩm. Saponin triterpenoid có thể được sử dụng để phát triển các sản phẩm có hoạt tính chống viêm, kháng khuẩn, kháng ung thư và chống oxy hóa. Ngoài ra, nó còn có thể được sử dụng như một chất bổ sung dinh dưỡng hoặc một thành phần làm đẹp da.

5.1. Ứng Dụng Trong Y Học Cổ Truyền Và Hiện Đại

Trong y học cổ truyền, Đảng sâm đã được sử dụng hàng ngàn năm để điều trị nhiều bệnh khác nhau. Các nghiên cứu hiện đại đã xác nhận nhiều tác dụng dược lý của Đảng sâm, bao gồm tăng cường hệ miễn dịch, cải thiện chức năng tiêu hóa và bảo vệ tim mạch. Saponin triterpenoid đóng vai trò quan trọng trong các tác dụng này, và việc nâng cao khả năng thu nhận saponin sẽ giúp tăng cường hiệu quả điều trị của Đảng sâm.

5.2. Tiềm Năng Phát Triển Sản Phẩm Thực Phẩm Chức Năng

Saponin triterpenoid có tiềm năng lớn trong việc phát triển các sản phẩm thực phẩm chức năng có lợi cho sức khỏe. Các sản phẩm này có thể giúp tăng cường hệ miễn dịch, cải thiện chức năng tim mạch, bảo vệ gan và giảm nguy cơ mắc các bệnh mãn tính. Việc sử dụng Đảng sâm và saponin triterpenoid trong các sản phẩm thực phẩm chức năng sẽ mang lại lợi ích cho sức khỏe cộng đồng.

VI. Kết Luận Hướng Nghiên Cứu Tương Lai Về Chiết Xuất Saponin

Nghiên cứu đã chứng minh tính hiệu quả của việc kết hợp enzyme và sóng siêu âm trong việc nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid từ Đảng sâm. Phương pháp này hứa hẹn mang lại hiệu suất chiết xuất cao hơn, giảm thời gian và chi phí sản xuất, đồng thời thân thiện với môi trường. Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc tìm hiểu sâu hơn về cơ chế tác động của enzyme và sóng siêu âm, cũng như tối ưu hóa quy trình chiết xuất để đạt được hiệu quả cao nhất.

6.1. Tóm Tắt Các Kết Quả Nghiên Cứu Quan Trọng

Nghiên cứu này đã đạt được nhiều kết quả quan trọng, bao gồm xác định hiệu quả chiết xuất của các phương pháp khác nhau, tối ưu hóa thông số chiết xuất bằng phương pháp thiết kế thí nghiệm và phát triển quy trình vi bao hợp chất saponin triterpenoid. Các kết quả này cung cấp cơ sở khoa học vững chắc cho việc phát triển các quy trình chiết xuất saponin triterpenoid hiệu quả và bền vững từ Đảng sâm.

6.2. Đề Xuất Hướng Nghiên Cứu Tiếp Theo Về Saponin Triterpenoid

Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc tìm hiểu sâu hơn về cơ chế tác động của enzyme và sóng siêu âm trong quá trình chiết xuất. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu về phân tích thành phần saponin chi tiết, định lượng saponin triterpenoid chính xác và đánh giá hoạt tính sinh học của saponin thu được. Việc nghiên cứu sâu hơn về cấu trúc saponin triterpenoid và cơ chế tác động của nó sẽ giúp phát triển các ứng dụng mới trong lĩnh vực dược phẩm và thực phẩm chức năng.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Saponin là một nhóm hợp chất glycoside có mặt trong hơn 90 loại thực vật, trong đó có Đảng sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook.), một dược liệu quý được ứng dụng rộng rãi trong y học cổ truyền và công nghiệp thực phẩm chức năng. Tại Việt Nam, Đảng sâm được trồng phổ biến ở tỉnh Lâm Đồng và có giá trị dược liệu cao nhờ chứa hàm lượng saponin triterpenoid đáng kể. Nghiên cứu nhằm nâng cao khả năng thu nhận saponin triterpenoid thô từ Đảng sâm bằng các phương pháp trích ly hiện đại như enzyme cellulase, enzyme pectinase và sóng siêu âm, cũng như kết hợp các phương pháp này để tối ưu hóa hiệu suất thu nhận.

Mục tiêu chính của luận văn là khảo sát và tối ưu hóa các điều kiện trích ly saponin triterpenoid từ rễ Đảng sâm 3 năm tuổi, bao gồm tỷ lệ nguyên liệu và dung môi, nhiệt độ, thời gian trích ly, pH và nồng độ enzyme. Nghiên cứu cũng tiến hành vi bao hợp chất saponin thu nhận được bằng phương pháp sấy phun với chất mang maltodextrin và gum arabic để tạo dạng bột ổn định, thuận tiện cho ứng dụng thực tế.

Phạm vi nghiên cứu tập trung trên nguyên liệu Đảng sâm thu hoạch tại tỉnh Lâm Đồng trong năm 2013-2014, sử dụng các thiết bị hiện đại như máy phát sóng siêu âm ELMASONIC S60 và enzyme thương mại có hoạt tính cao. Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển công nghệ chiết xuất saponin hiệu quả, góp phần nâng cao giá trị kinh tế và ứng dụng dược liệu Đảng sâm trong ngành công nghiệp thực phẩm và dược phẩm.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Luận văn dựa trên các lý thuyết và mô hình nghiên cứu về:

• Saponin triterpenoid: Là nhóm glycoside có aglycone là triterpenoid với cấu trúc vòng ABCDE, gồm các nhóm chính như oleanan, ursan, lupan, dammaran, lanostan và cucurbitan. Saponin có tác dụng sinh học đa dạng như chống viêm, kháng khuẩn, kháng virus và hỗ trợ điều trị các bệnh lý về dạ dày, da liễu.

• Cơ chế hoạt động của enzyme cellulase và pectinase: Cellulase thủy phân cellulose thành glucose qua các enzyme thành phần như endoglucanase, exoglucanase và β-glucosidase. Pectinase thủy phân pectin thành acid galacturonic và các sản phẩm khác, gồm các loại enzyme như pectinesterase, polygalacturonase và lyase, giúp phá vỡ cấu trúc thành tế bào thực vật, tăng hiệu quả trích ly.

• Ứng dụng sóng siêu âm trong trích ly: Sóng siêu âm tạo ra hiệu ứng xâm thực, nhiệt và cơ học giúp phá vỡ tế bào, tăng cường khuếch tán dung môi vào nguyên liệu, từ đó nâng cao hiệu suất trích ly các hợp chất sinh học như saponin.

• Vi bao hợp chất bằng phương pháp sấy phun: Sử dụng maltodextrin và gum arabic làm chất mang để tạo dạng bột ổn định, bảo vệ hoạt tính của saponin và thuận tiện cho bảo quản, vận chuyển.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu: Nguyên liệu Đảng sâm 3 năm tuổi được thu thập từ công ty sâm Cao Lâm, tỉnh Lâm Đồng, bảo quản ở 4°C. Enzyme cellulase (Celulast 1.5L) và pectinase (Pectinex Ultra SP-L) được sử dụng với hoạt tính lần lượt khoảng 700 EGU/g và 2335 PGU/ml.

• Phương pháp phân tích: Hàm lượng saponin triterpenoid được xác định bằng phương pháp quang phổ sử dụng acid oleanolic làm chuẩn, kết hợp sắc ký lớp mỏng và sắc ký khối phổ để định danh hợp chất. Hoạt tính chống oxy hóa được đánh giá bằng phương pháp DPPH.

• Thiết kế thí nghiệm: Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly gồm tỷ lệ nguyên liệu:nước (1:5 đến 1:9 w/v), nhiệt độ (50-90°C), thời gian trích ly (1-3 giờ), pH (4-6), nồng độ enzyme (0,5-2% w/v), và thứ tự kết hợp giữa enzyme và sóng siêu âm (siêu âm trước/enzyme sau và enzyme trước/siêu âm sau). Các thí nghiệm được thực hiện theo kế hoạch thực nghiệm tối ưu hóa (RSM) và phân tích phương sai để xác định điều kiện tối ưu.

• Timeline nghiên cứu: Nghiên cứu được tiến hành từ tháng 6/2013 đến tháng 5/2014, bao gồm giai đoạn khảo sát nguyên liệu, tối ưu hóa quy trình trích ly, vi bao hợp chất và đánh giá sản phẩm.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Hiệu quả trích ly bằng enzyme đơn lẻ:

   • Enzyme cellulase thu nhận được hàm lượng saponin triterpenoid là 4941 mg/100g DW.
   • Enzyme pectinase cho kết quả cao hơn với 5187,97 mg/100g DW, tăng khoảng 5% so với cellulase.

2. Hiệu quả trích ly bằng sóng siêu âm và nước:

   • Trích ly bằng nước thu được 2374,52 mg/100g DW saponin.
   • Sử dụng sóng siêu âm đơn lẻ nâng hàm lượng lên 2937,66 mg/100g DW, tăng khoảng 23,6% so với nước.

3. Kết hợp enzyme và sóng siêu âm:

   • Phương pháp sóng siêu âm trước, enzyme cellulase sau thu được 5698,63 mg/100g DW, cao hơn 15,3% so với enzyme cellulase đơn lẻ.
   • Enzyme cellulase trước, sóng siêu âm sau thu được 5498,76 mg/100g DW.
   • Sóng siêu âm trước, enzyme pectinase sau đạt hàm lượng cao nhất 5972,04 mg/100g DW, tăng 15,2% so với enzyme pectinase đơn lẻ.
   • Enzyme pectinase trước, sóng siêu âm sau thu được 5531,34 mg/100g DW.

4. Vi bao hợp chất saponin:

   • Sử dụng maltodextrin và gum arabic làm chất mang, phương pháp sấy phun tạo thành dạng bột ổn định, giữ được hoạt tính chống oxy hóa của saponin.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy việc kết hợp sóng siêu âm với enzyme cellulase hoặc pectinase làm tăng đáng kể hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được so với việc sử dụng từng phương pháp riêng lẻ. Hiệu ứng xâm thực của sóng siêu âm giúp phá vỡ cấu trúc tế bào rễ Đảng sâm, tạo điều kiện thuận lợi cho enzyme tiếp cận và thủy phân các thành phần polysaccharide trong thành tế bào, từ đó giải phóng saponin hiệu quả hơn.

So sánh với các nghiên cứu trước đây trên nhân sâm và các loại thảo dược khác, kết quả này phù hợp với xu hướng ứng dụng công nghệ enzyme kết hợp sóng siêu âm để nâng cao hiệu suất chiết xuất các hợp chất sinh học quý giá. Việc vi bao hợp chất saponin bằng sấy phun với maltodextrin và gum arabic không chỉ giúp bảo vệ hoạt tính mà còn tạo ra sản phẩm dạng bột dễ sử dụng và bảo quản, mở rộng ứng dụng trong thực phẩm chức năng.

Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ so sánh hàm lượng saponin thu nhận theo từng phương pháp trích ly, cũng như bảng phân tích các điều kiện tối ưu ảnh hưởng đến hiệu quả trích ly. Hình ảnh kính hiển vi điện tử quét (SEM) minh họa sự thay đổi bề mặt nguyên liệu sau xử lý cũng hỗ trợ giải thích cơ chế tác động của sóng siêu âm và enzyme.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Ứng dụng công nghệ kết hợp enzyme và sóng siêu âm trong sản xuất:

   • Động từ hành động: Triển khai quy trình trích ly kết hợp sóng siêu âm trước và enzyme pectinase sau để tối ưu hàm lượng saponin.
   • Target metric: Tăng ít nhất 15% hàm lượng saponin thu nhận so với phương pháp truyền thống.
   • Timeline: 6-12 tháng để thử nghiệm quy mô pilot.
   • Chủ thể thực hiện: Các doanh nghiệp dược liệu và công ty công nghệ thực phẩm.

2. Phát triển sản phẩm bột saponin vi bao:

   • Động từ hành động: Áp dụng kỹ thuật sấy phun với maltodextrin và gum arabic để tạo dạng bột ổn định.
   • Target metric: Giữ hoạt tính chống oxy hóa trên 90% sau bảo quản 6 tháng.
   • Timeline: 3-6 tháng nghiên cứu và phát triển sản phẩm mẫu.
   • Chủ thể thực hiện: Phòng R&D các công ty thực phẩm chức năng.

3. Nghiên cứu mở rộng về các loại enzyme khác và điều kiện trích ly:

   • Động từ hành động: Khảo sát thêm các enzyme hỗ trợ khác và điều chỉnh pH, nhiệt độ để tối ưu hóa quy trình.
   • Target metric: Tăng hiệu suất trích ly thêm 5-10%.
   • Timeline: 12 tháng nghiên cứu bổ sung.
   • Chủ thể thực hiện: Các viện nghiên cứu và trường đại học.

4. Đào tạo và chuyển giao công nghệ:

   • Động từ hành động: Tổ chức các khóa đào tạo kỹ thuật cho cán bộ kỹ thuật và doanh nghiệp.
   • Target metric: Ít nhất 3 khóa đào tạo trong 1 năm.
   • Timeline: 12 tháng.
   • Chủ thể thực hiện: Trường đại học, viện nghiên cứu và các tổ chức hỗ trợ phát triển công nghiệp.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Các nhà nghiên cứu và sinh viên ngành Công nghệ Thực phẩm và Dược liệu:

   • Lợi ích: Hiểu rõ về quy trình trích ly saponin bằng enzyme và sóng siêu âm, áp dụng vào nghiên cứu và phát triển sản phẩm mới.

2. Doanh nghiệp sản xuất dược liệu và thực phẩm chức năng:

   • Lợi ích: Áp dụng công nghệ trích ly hiệu quả, nâng cao chất lượng sản phẩm, giảm chi phí sản xuất.

3. Các viện nghiên cứu và trung tâm công nghệ sinh học:

   • Lợi ích: Tham khảo phương pháp tối ưu hóa trích ly hợp chất sinh học quý giá, phát triển công nghệ mới.

4. Cơ quan quản lý và phát triển ngành dược liệu, thực phẩm chức năng:

   • Lợi ích: Đánh giá tiềm năng công nghệ, hỗ trợ chính sách phát triển ngành dược liệu bền vững.

Câu hỏi thường gặp

1. Tại sao kết hợp enzyme và sóng siêu âm lại hiệu quả hơn so với dùng riêng lẻ?
   Sóng siêu âm tạo hiệu ứng xâm thực phá vỡ cấu trúc tế bào, giúp enzyme dễ dàng tiếp cận và thủy phân polysaccharide thành phần thành tế bào, từ đó giải phóng saponin nhiều hơn. Ví dụ, phương pháp sóng siêu âm trước, enzyme pectinase sau tăng hàm lượng saponin lên đến 5972 mg/100g DW, cao hơn 15% so với enzyme đơn lẻ.

2. Enzyme cellulase và pectinase có vai trò gì trong trích ly saponin?
   Cellulase thủy phân cellulose thành glucose, phá vỡ thành tế bào; pectinase thủy phân pectin làm mềm thành tế bào, tăng khả năng khuếch tán dung môi. Cả hai enzyme phối hợp giúp giải phóng saponin hiệu quả hơn.

3. Phương pháp vi bao có ưu điểm gì?
   Vi bao giúp bảo vệ hoạt tính saponin khỏi tác động môi trường, tăng độ ổn định, dễ dàng bảo quản và sử dụng trong thực phẩm chức năng dưới dạng bột hòa tan.

4. Nhiệt độ và thời gian trích ly ảnh hưởng thế nào đến hàm lượng saponin?
   Nhiệt độ và thời gian trích ly cần được tối ưu để tránh phân hủy saponin. Nghiên cứu cho thấy nhiệt độ khoảng 60-70°C và thời gian 2 giờ là điều kiện tối ưu cho hiệu quả trích ly cao.

5. Có thể áp dụng quy trình này cho các loại thảo dược khác không?
   Có, nguyên lý kết hợp enzyme và sóng siêu âm có thể áp dụng cho nhiều loại thảo dược chứa saponin hoặc các hợp chất sinh học khác để nâng cao hiệu suất chiết xuất.

Kết luận

• Nghiên cứu đã thành công trong việc tối ưu hóa quá trình trích ly saponin triterpenoid thô từ Đảng sâm bằng enzyme cellulase, pectinase và sóng siêu âm, riêng và kết hợp.
• Phương pháp kết hợp sóng siêu âm trước và enzyme pectinase sau cho hàm lượng saponin cao nhất, đạt 5972,04 mg/100g DW, tăng khoảng 15% so với enzyme đơn lẻ.
• Vi bao hợp chất saponin bằng sấy phun với maltodextrin và gum arabic tạo ra sản phẩm dạng bột ổn định, giữ được hoạt tính sinh học.
• Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa thực tiễn trong phát triển công nghệ chiết xuất dược liệu và sản phẩm thực phẩm chức năng.
• Đề xuất triển khai ứng dụng công nghệ trong sản xuất, nghiên cứu mở rộng và đào tạo chuyển giao công nghệ trong 1-2 năm tới.

Call-to-action: Các doanh nghiệp và viện nghiên cứu nên phối hợp triển khai thử nghiệm quy mô lớn và phát triển sản phẩm ứng dụng từ công nghệ trích ly kết hợp enzyme và sóng siêu âm để nâng cao giá trị dược liệu Đảng sâm.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1: TONG QUAN. Tổng quan về nguyên liệu sâm và Đảng sâm.-- + + SE exeeeeeeeeee 4 LL. 6 RUN M6 ta oo. Đặc điểm vi phẫu của rỄ.

Nơi sống và phân bỒ. --- + xxx E1 1111915111111 111 111gr rreg 7 1. Thành phan hóa học của rễ cây Dang sâm. Tổng quan về hợp chat saponin va saponin triterpenoid.

Khai miGM SAPONIN. Saponin trIfCTD€TOIC. Công dụng CUA SaDOTIT. (01001010101 111131331111111999333 11111111 ng ng và 16 1.

Tim hiểu vé sóng siêu AM. Thiết bi phát sóng siêu âm .- - - E E5 SE ct v1 E111 Erxreeo 19 1. Ứng dụng của sóng siêu âim.- - - - EE+ESEExSxSScvcv cv E1 g1 xrxrees 20 1. Tong quan về enzyme cellulsae va pecfintase.-- 0200101010111 1111388111111119993351 11111111 ng ng vờ 22 IE N0)6 2 n8.

Cơ chế hoạt động của enzyme cellulase. Phân loại enzyme celÏulaaSe. Enzyme oi ae. Cơ chế hoạt động của enzyme pectiTiaSe.

Phân loại enzyme Pectinase. Phương pháp kiểm tra SapOnin.- + SE BE gErrrerees 28 CHƯƠNG 2: VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. Nguyên liệu, dụng cụ, hóa CHAt cccceccccssescscssesesescescscssescseseesesesscssscssescsessescseeees 29 “8È NNQuUy@n HEU oe —--. Dụng cu, thiết bị, hóa Chat .-- -- ccxxSt k3 SE EE9E9E9 5111 111 1111 cEnEnrrrrree 29 2.

Dụng cu, thiẾt bị. - SE TT T111 111 11111 11g ng greg 29 2.--csc t2 tt HH Hee 30 2. Phuong phap nghien 0006) 0-4. Khảo sát nguyên liệu dang sâm.

Khao sát quá trình trích ly bằng nưỚC. Khảo sát ti lệ nguyên lIỆU:ƯỚC. Khảo sát nhiệt độ trích ly. Khảo sát thời gian trich Ïy.- -- << -cc c1 1100011111111 1 11111 1kg ng.

Khảo sát quá trình trích ly bằng sóng siêu âm. Khao sát tỉ lệ nguyên lIỆU:ƯỚC. Khảo sát nhiệt độ siêu âm. Khảo sát thời ø1an SIÊU Âm.

Khảo sát quá trình thu nhận saponin triterpenoid bằng enzyme cellulase và ENZYME PECINASE 00008885888. Khảo sát tỉ lệ nguyên lIỆU : TƯỚC. Khao Sat PHo oe. Khảo sát thời ø1an Ủ.

Khao sát nhiệt dO Ủ. Khảo sát nồng độ enZyme. -- c3 SE#E9E9 5 SE gen greg 37 2. Đánh giá ảnh hưởng của các yếu tô đến quá trình trích ly bang enzyme va IỤNh 8P.

Khao sát kết hop: xử lý bang sóng siêu âm trước, xử lý bang enzyme sau. Khao sát hàm lượng €nZzVI©. Khảo sát thời gian xử ly bằng enZyime. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu AM.

Khảo sát nhiệt độ xử ly băng sóng siêu âm.- --csx+x+x xe eeeeeeseee 41 2. Khảo sát kết hop: xử lý bang enzyme trước, xử lý bang sóng siêu âm sau. Khảo sát nồng độ enZyIme. - - - k+kkSESEEE#E9E9 SE SE gvcvcưcggvnegerreg 41 2.

Khảo sát thời gian xử lý bằng enZyime. Khảo sát thời gian xử lý bằng sóng siêu AM. Khảo sát nhiệt độ xử ly băng sóng siêu âm. So sánh các điều kiện trích ly ảnh hưởng đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC.

Bước đầu ứng dung kỹ thuật vi bao hợp chat saponin triterpenoid thu nhận UOC tly MAN SAM 0000777. Các phương pháp phân tÍch.-c-+ct 2tr2 re 45 2. Xác định hàm lượng trO. Xác định hoạt tính chống oxy hóa bằng phương pháp DPPH.

Xác định hàm lượng saponin frIterpeno1d. Xây dựng đường chuẩn bang acid oleanoli€. - 5s ss+s+x+x+xex+esesese 45 2. Xác định saponin triterpenoid trong mẫu.

Quy trình trích ly và phân tích mẫyu.-- 2= +sE+E+E£E+E+E£eEeEeEeeeererseeed 47 CHƯƠNG 3: KET QUA VA BAN LUẬN. Kết quả kiểm tra một số chỉ tiêu ban đầu của nguyên liệu. Khảo sát quá trình trích ly saponin triterpenoid bằng nước. Khảo sát tỉ lệ nước và nguyên lIỆU.

Khảo sát nhiệt độ của nước ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin triterpenoid DANG NUGC. Khao sát thời gian ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin triterpenoid 015i. Tối ưu hóa quá trình trích ly saponin triterpenoid bang nước. Khảo sát quá trình trích ly triterpen saponin bang sóng siêu âm.

Khao sát tỉ lệ nguyên liệu:nước ảnh hưởng đến quá trình trích ly saponin triterpenoid bằng sóng siêu âim. Khảo sát nhiệt độ siêu âm ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin 0815899010207. Khảo sát thời gian siêu âm ảnh hưởng đến quá trình thu nhận saponin 0815899010207. Khảo sát quá trình thu nhận saponin triterpenoid bằng enzyme cellulase và ENZYME PECINASE 00008885888.

Khảo sát tỉ lệ nguyên lIỆU:ƯỚC. Khao Sat na. Khao sát thời ø1an Ủ €ñZVIT€. Khảo sát hàm lượng ©€nzV1e.

Enzyme ce€lÏUÌSG. Khao sát sử dụng kết hop enzyme cellulsase, enzyme pectinase va sóng siêu âm —. Xử lý bằng siêu âm trước kết hợp với xử lý bang enzyme sau. Khảo sát hàm lượng enzyIme.

Khao sát thời 21a Ủ ©IZVIT€. Khảo sát thời ø1an SIGU AM 00. Khao sat nhiệt độ siêu âm. Xử ly bang enzyme trước kết hợp với xử ly bằng sóng siêu âm sau.

Khao sát hàm lượng enzyIme. Khảo sát thời Ø1an Ủ ©IZVIT€. Khảo sát thời ø1an SIÊu Âm. Khao sát nhiệt độ siêu âm.

So sánh các điều kiện trích ly anh hưởng đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. - ------- CC E2 2111111303099 111v vn net 103 3. So sánh các điều kiện trích ly ảnh hưởng đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. - ------- CC E2 2111111303099 111v vn net 103 3.

Kết quả chụp SEÌM. Kết quả kiểm tra sản phẩm vi bao hợp chat saponin triterpenoid. Đánh giá sản phẩm vi bao hợp chất saponin triterpenoid. Kết quả chụp SEÌM.

Kiểm tra và so sánh khả năng chống oxy hóa của hợp chất saponin triterpenoid thô thu nhận được.- - -- + + - + <1 E111 net 108 CHUONG 4: KET LUẬN VÀ KIÊN NGHI o. ï0 111 TÀI LIEU THAM KHẢO. 2i te Sa 3e S8 EESEEE+ESEEEESEEEEEEEESEEeErErereerseersrrees 112 DANH MỤC HÌNH Hình 1. Vi phẫu Dang sâm Trung Qu6c .-¿- - 5 S+E+E+ESESEEEESEEcE+EeEeeeeeesree 7 Hinh 1.

Cau trúc hóa hoc cơ bản của saponin (a: triterpenoid; b: steroid). Cau trúc cơ bản của Triterpenoid sapogenins với vòng ABCDE. Công thức cầu tạo của nhóm oleanann.-- 2-5 + 2 2 +E+E+E+Ee£+E+EeEsreei 11 Hình 1. Công thức cấu tạo của nhóm ursan (a: ursan, b: œ-amyrin).

Công thức cầu tạo của nhóm lupan.-- s22 + + +EE+E+E+E+EeErkzxeesreee 12 Hình 1. Công thức cầu tạo của nhóm hopan.- - 2-2-2 +E+E+E+E+EeE+E+Eeesreei 13 Hình 1. Công thức cau tao của nhóm dammaran. Công thức cấu tạo của nhóm lanosfan.

Công thức cấu tạo của nhóm cucurbitan.-- - 2 2+s+s+s+Ee£e+e+xeesreee 15 Hình 1. Công thức cau tao saponin Ï~4.--¿- + + s+x+k+k+EeEEE+EeEeEererkrkrrerees 17 Hình 1. Cơ chế phá vỡ tế bao vật liệu của xâm thực bang sóng siêu âm. Sơ đồ tác dung của enzyme pectinase lên pectin.

Sơ đồ phân loại enzyme pecfifiaSe.- 5-5 + + xxx +keveeeeeeesee 27 Hình 2. Mẫu đảng sâm 3 năm tuÔi. -- - - k+k+k+k#E#E#ESEEEk SE cvcvcvgvgvrerree 29 Hình 2. ----¿- + SE k* SE SE EEEEEE11311 1111111111111 1 1e.

Đường chuẩn acid oleano liC. - + 2s + +E+EE+E+E+E+ESEEEE+EEEeEeEerkrkrrerees 46 Hình 2. Quy trình trích ly và phân tích mẫu .---- ¿+5 +E+E+e£sE+EeEeeeerersesed 49 Hình 3. Ảnh hưởng của tỉ lệ nguyên liệu:nước trích ly đến.- - <<: 51 ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được.

Anh hưởng của nhiệt độ trích ly đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. Anh hưởng của thời gian trích ly đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. Mặt đáp ứng hàm lượng saponin triterpenoid theo tỉ lệ nguyên liệu:nước VA NIE AG eee. Mat đáp ứng ham lượng saponin triterpenoid theo thời gian và nhiệt độ.

Ảnh hưởng của tỉ lệ nguyên liệu : nước đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng sóng siêu AM. Ảnh hưởng của nhiệt độ siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. Anh hưởng của thời gian siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận ƯỢC. Mặt đáp ứng hàm lượng saponin triterpenoid theo.- - - - -----<- 67 tỉ lệ nguyên liệu : nước và nhiỆt đỘ.

Mặt đáp ứng ham lượng.----- 5555522222115 5EEEEssesssssss 67 saponin triterpenoid theo thời gian và nhiệt đỘ. Ảnh hưởng của tỉ lệ nguyên liệu:nước đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme celÏuÌaSe. Ảnh hưởng của tỉ lệ nguyên liệu:nước đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme pectÏniase. Ảnh hưởng của pH đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme ceÍÏUÌ4SG.

Anh hưởng của pH đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bằng enzyme pD€CfiflASe. Anh hưởng của thời gian ủ đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme cellulaS€.- -- - s + kEESEEE#E#E#ESESEEE SE vn gerree 73 Hình 3. Ảnh hưởng của thời gian ủ đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bằng enzyme p€Cfi'IAS€. Ảnh hưởng của nhiệt độ ủ đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme cellulaS€.- -- - s + kEESEEE#E#E#ESESEEE SE vn gerree 75 Hình 3.

Ảnh hưởng của nhiệt độ ủ đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bằng enzyme p€Cfi'IAS€. Ảnh hưởng của hàm lượng enzyme đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme ceÏÏUÌSG. + xxx #EEEEEeEeEererererees 77 Hình 3. Ảnh hưởng của hàm lượng enzyme đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme p€CfÏTIASG.

+ SE EE E1 EErerees 78 Hình 3. Mat đáp ứng hàm lượng saponin triterpenoid theo hàm lượng enzyme và thời gian ủ enzyme Cellulase. Mặt đáp ứng ham lượng saponin triterpenoid theo ham lượng enzyme va thoi Gian U ENZYME PeCTINASE -. Anh hưởng hàm lượng enzyme đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được khi trích ly bang enzyme cellulase và sóng siêu âm.

Ảnh hưởng hàm lượng enzyme đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được khi trích ly bang enzyme pectinase và sóng siêu âm. Anh hưởng của thời gian ủ enzyme đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme cellulase và sóng siêu âm. Anh hưởng của thời gian ủ enzyme đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase vả sóng siêu âm. Ảnh hưởng của thời gian siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme cellulase và sóng siêu âm.

Ảnh hưởng của thời gian siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase vả sóng siêu âm. Ảnh hưởng của nhiệt độ siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bằng enzyme cellulase và sóng siêu âm. Ảnh hưởng của nhiệt độ siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bằng enzyme pectinase và sóng siêu âm. Ảnh hưởng của hàm lượng enzyme đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme cellulase và sóng siêu âm.

Ảnh hưởng của hàm lượng enzyme đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase vả sóng siêu âm. Ảnh hưởng của thời gian ủ enzyme đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được băng enzyme cellulase và sóng siêu âm. Anh hưởng của thời gian ủ enzyme đến ham lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase vả sóng siêu âm. Anh hưởng của thời gian siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme cellulase và sóng siêu âm.

Ảnh hưởng của thời gian siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase và sóng siêu âm. Ảnh hưởng của nhiệt độ siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme cellulase và sóng siêu âm. Ảnh hưởng của nhiệt độ siêu âm đến hàm lượng saponin triterpenoid thu nhận được bang enzyme pectinase và sóng siêu âm .