I. Chất điều hòa sinh trưởng
Nghiên cứu tập trung vào việc khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng như 2,4-D và NAA kết hợp với kinetin lên sự hình thành và tăng trưởng của mô sẹo cây dừa cạn. Kết quả cho thấy, 2,4-D có hiệu quả cao hơn trong việc kích thích sự tăng sinh mô sẹo so với NAA. Điều này được thể hiện qua chỉ số tăng trưởng mô sẹo cao hơn ở các môi trường có bổ sung 2,4-D. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng, nồng độ tối ưu của 2,4-D là 1,0 và 2,0 mg/l, giúp mô sẹo có dạng xốp và tăng sinh mạnh mẽ.
1.1. Ảnh hưởng của 2 4 D
2,4-D được chứng minh là có khả năng kích thích sự hình thành và tăng sinh mô sẹo hiệu quả. Kết quả nghiên cứu cho thấy, mô sẹo được tạo ra từ trụ hạ diệp và đốt thân in vitro trên môi trường có 2,4-D 2,0 mg/l có chỉ số tăng trưởng cao nhất. Điều này khẳng định vai trò quan trọng của 2,4-D trong việc tạo mô sẹo phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo.
1.2. Ảnh hưởng của NAA
Mặc dù NAA cũng có khả năng kích thích sự hình thành mô sẹo, nhưng hiệu quả thấp hơn so với 2,4-D. Mô sẹo được tạo ra trên môi trường có NAA có dạng đặc và tăng sinh chậm hơn. Điều này cho thấy, NAA không phải là lựa chọn tối ưu cho việc tạo mô sẹo trong nghiên cứu này.
II. Tăng trưởng cây dừa cạn
Nghiên cứu đã khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng lên sự tăng trưởng cây dừa cạn thông qua việc tạo mô sẹo và huyền phù tế bào. Kết quả cho thấy, mô sẹo được tạo ra từ trụ hạ diệp có thời gian tạo sẹo ngắn hơn so với đốt thân và lá non. Điều này chứng tỏ, nguồn nguyên liệu khởi đầu có ảnh hưởng lớn đến sự hình thành và tăng trưởng của mô sẹo.
2.1. Ảnh hưởng của nguồn nguyên liệu
Nguồn nguyên liệu khởi đầu đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành mô sẹo. Trụ hạ diệp được chứng minh là nguồn nguyên liệu tốt nhất, giúp rút ngắn thời gian tạo sẹo và tăng hiệu suất tăng trưởng. Điều này mở ra hướng nghiên cứu mới trong việc tối ưu hóa quy trình tạo mô sẹo từ các nguồn nguyên liệu khác nhau.
2.2. Tăng trưởng huyền phù tế bào
Huyền phù tế bào được hình thành và tăng sinh ổn định sau 3 tuần nuôi cấy. Thể tích tế bào khởi đầu ảnh hưởng lớn đến sự tăng trưởng của huyền phù tế bào, với thể tích 2,0 ml tế bào khởi đầu/20 ml môi trường lỏng cho hiệu quả cao nhất. Điều này khẳng định tầm quan trọng của việc tối ưu hóa mật độ tế bào khởi đầu trong quy trình nuôi cấy.
III. Sinh tổng hợp alkaloid
Nghiên cứu đã khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng lên sự sinh tổng hợp alkaloid trong mô sẹo và huyền phù tế bào. Kết quả cho thấy, vinblastine và vincristine được tổng hợp trong mô sẹo và huyền phù tế bào trên các môi trường có 2,4-D. Điều này chứng tỏ, 2,4-D không chỉ kích thích sự tăng sinh mô sẹo mà còn thúc đẩy quá trình sinh tổng hợp các alkaloid thực vật có giá trị y học cao.
3.1. Định tính và định lượng alkaloid
Vinblastine được phát hiện trong mô sẹo trên tất cả các môi trường có 2,4-D, trong khi vincristine chỉ xuất hiện trong mô sẹo và huyền phù tế bào trên môi trường có 2,4-D 1,5 mg/l. Điều này cho thấy, nồng độ 2,4-D có ảnh hưởng lớn đến sự sinh tổng hợp các alkaloid thực vật.
3.2. Ứng dụng thực tiễn
Nghiên cứu này mở ra tiềm năng lớn trong việc sản xuất các alkaloid thực vật như vinblastine và vincristine từ mô sẹo cây dừa cạn. Đây là giải pháp hiệu quả để đáp ứng nhu cầu về các hợp chất tự nhiên có giá trị y học cao, thay thế cho phương pháp chiết xuất truyền thống từ cây nguyên vẹn.
