Nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY tinh khiết để phòng và trị bệnh Newcastle (ND)

Luận văn thạc sĩ nghiên cứu vnua nghiên cứu sản xuất kháng thể igy tinh khiết dùng để phòng và trị bệnh newcastle nd, đánh giá hiện trạng, phân tích vấn đề, đề xuất biện pháp hoàn

• Tác giả: Kouldkieng Vilayvong
• Người hướng dẫn: Pgs. Lê Văn Phan
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY tinh khiết dùng để phòng và trị bệnh Newcastle (ND)
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• MỤC LỤC
• DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC HÌNH
• DANH MỤC BIỂU ĐỒ
• 1. PHẦN 1: TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 1.1. Mục đích nghiên cứu
• 1.2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
• 1.3. Nội dung nghiên cứu
• 1.4. Phương pháp nghiên cứu
• 1.5. Kết quả chính và kết luận
• 2. PHẦN 2: TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 3. PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG - NỘI DUNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 3.2. Nội dung nghiên cứu
• 3.3. Vật liệu nghiên cứu
• 3.4. Phương pháp nghiên cứu
• 3.4.1. Phương pháp gây miễn dịch trên gà
• 3.4.2. Phương pháp lấy và bảo quản huyết thanh
• 3.4.3. Phương pháp xác định hiệu giá kháng thể và độ dài đáp ứng miễn dịch sau khi tiêm vaccine bằng phản ứng HI
• 3.4.4. Phương pháp tách chiết kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng gà
• 3.4.5. Phương pháp xác định đặc tính của kháng thể IgY
• 3.4.6. Phương pháp đánh giá hiệu quả phòng và điều trị bệnh Newcastle
• 3.4.7. Phương pháp xử lý số liệu
• 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh gà trước khi gây miễn dịch
• 4.2. Khảo sát hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh gà sau khi gây miễn dịch
• 4.3. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của gà sau khi gây miễn dịch
• 4.4. Khảo sát hiệu giá kháng thể Newcastle trong lòng đỏ trứng gà được gây miễn dịch
• 4.5. Kết quả theo dõi tỷ lệ trứng của gà
• 4.6. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong lòng đỏ trứng của gà sau khi gây miễn dịch
• 4.7. So sánh hàm lượng kháng thể trong lòng đỏ trứng của lô gà được tiêm vaccine và lô gà được tiêm vaccine kết hợp với virus cường độc vô hoạt
• 4.8. Mối tương quan giữa hiệu giá kháng thể của gà qua huyết thanh và qua lòng đỏ trứng gà
• 4.9. Kết quả tách chiết kháng thể IgY
• 4.10. Khảo sát đánh giá hiệu quả phòng và điều trị của sản phẩm kháng thể IgY
• 4.11. Thông tin trại thử nghiệm
• 4.12. Kết quả phòng và trị bệnh Newcastle bằng chế phẩm kháng thể IgY
• 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY phòng trị bệnh Newcastle

Nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY tinh khiết là một trong những giải pháp tiềm năng để phòng và trị bệnh Newcastle, một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm ở gia cầm. Bệnh Newcastle do virus Paramyxovirus gây ra, có thể lây lan nhanh chóng và gây tỷ lệ chết cao trong đàn gà. Việc phát triển kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng gà không chỉ giúp tăng cường khả năng miễn dịch mà còn giảm thiểu việc sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi.

1.1. Kháng thể IgY và vai trò trong phòng bệnh Newcastle

Kháng thể IgY là một loại kháng thể đặc biệt được tìm thấy trong lòng đỏ trứng gà. Chúng có khả năng ngăn chặn virus Newcastle xâm nhập vào cơ thể gà, từ đó giúp giảm thiểu tỷ lệ mắc bệnh. Nghiên cứu cho thấy rằng kháng thể IgY có thể được sản xuất một cách hiệu quả thông qua việc tiêm vaccine cho gà mẹ, từ đó thu được lòng đỏ trứng chứa kháng thể.

1.2. Tình hình bệnh Newcastle tại Việt Nam

Bệnh Newcastle đã trở thành một vấn đề nghiêm trọng trong ngành chăn nuôi gia cầm tại Việt Nam. Tình hình dịch bệnh diễn ra phức tạp, với nhiều ổ dịch xuất hiện ở các tỉnh thành. Việc áp dụng các biện pháp phòng ngừa như tiêm vaccine và nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY là cần thiết để bảo vệ đàn gà khỏi bệnh tật.

II. Thách thức trong việc phòng trị bệnh Newcastle bằng kháng thể IgY

Mặc dù kháng thể IgY có nhiều ưu điểm, nhưng việc sản xuất và ứng dụng chúng trong phòng trị bệnh Newcastle vẫn gặp phải một số thách thức. Các yếu tố như chất lượng vaccine, điều kiện nuôi dưỡng và sức khỏe của gà mẹ đều ảnh hưởng đến hiệu quả sản xuất kháng thể IgY.

2.1. Khó khăn trong việc sản xuất kháng thể IgY

Quá trình sản xuất kháng thể IgY yêu cầu kỹ thuật cao và điều kiện nuôi dưỡng gà mẹ phải đảm bảo. Nếu gà mẹ không được tiêm vaccine đúng cách hoặc không có chế độ dinh dưỡng hợp lý, hiệu quả sản xuất kháng thể sẽ bị giảm sút.

2.2. Vấn đề bảo quản và sử dụng kháng thể IgY

Kháng thể IgY sau khi tách chiết cần được bảo quản trong điều kiện thích hợp để duy trì hoạt tính sinh học. Việc bảo quản không đúng cách có thể dẫn đến mất hoạt tính của kháng thể, làm giảm hiệu quả trong việc phòng trị bệnh Newcastle.

III. Phương pháp sản xuất kháng thể IgY hiệu quả cho bệnh Newcastle

Để sản xuất kháng thể IgY hiệu quả, cần áp dụng các phương pháp khoa học hiện đại. Việc tiêm vaccine cho gà mẹ, thu thập lòng đỏ trứng và tách chiết kháng thể là các bước quan trọng trong quy trình này.

3.1. Quy trình tiêm vaccine cho gà mẹ

Quy trình tiêm vaccine cho gà mẹ cần được thực hiện theo đúng hướng dẫn của nhà sản xuất. Việc tiêm vaccine đúng thời điểm sẽ giúp gà mẹ tạo ra kháng thể IgY hiệu quả nhất, từ đó nâng cao khả năng miễn dịch cho đàn gà con.

3.2. Tách chiết kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng

Sau khi thu thập lòng đỏ trứng, quá trình tách chiết kháng thể IgY cần được thực hiện cẩn thận để đảm bảo độ tinh khiết. Các phương pháp như điện di hoặc sắc ký có thể được áp dụng để tách chiết kháng thể IgY một cách hiệu quả.

IV. Ứng dụng kháng thể IgY trong phòng và trị bệnh Newcastle

Kháng thể IgY đã được chứng minh là có hiệu quả trong việc phòng và trị bệnh Newcastle. Nghiên cứu cho thấy rằng việc sử dụng kháng thể IgY giúp giảm tỷ lệ mắc bệnh và cải thiện sức khỏe cho đàn gà.

4.1. Kết quả nghiên cứu về hiệu quả của kháng thể IgY

Nghiên cứu cho thấy rằng đàn gà được tiêm kháng thể IgY có tỷ lệ hồi phục nhanh chóng và sức khỏe được cải thiện rõ rệt. Các chỉ số về hiệu giá kháng thể trong huyết thanh và lòng đỏ trứng đều cho thấy sự gia tăng đáng kể sau khi sử dụng kháng thể IgY.

4.2. Thực tiễn ứng dụng kháng thể IgY tại các trại gà

Nhiều trại gà đã áp dụng kháng thể IgY trong việc phòng trị bệnh Newcastle và đạt được kết quả khả quan. Việc sử dụng kháng thể IgY không chỉ giúp giảm thiểu tỷ lệ chết mà còn cải thiện năng suất chăn nuôi.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu kháng thể IgY

Nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY tinh khiết là một bước tiến quan trọng trong việc phòng và trị bệnh Newcastle. Với những kết quả khả quan, việc ứng dụng kháng thể IgY trong chăn nuôi gia cầm hứa hẹn sẽ mang lại nhiều lợi ích.

5.1. Tương lai của nghiên cứu kháng thể IgY

Nghiên cứu về kháng thể IgY sẽ tiếp tục được mở rộng để tìm ra các phương pháp sản xuất hiệu quả hơn. Việc cải tiến quy trình sản xuất và ứng dụng kháng thể IgY trong thực tiễn sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng trị bệnh Newcastle.

5.2. Khuyến nghị cho ngành chăn nuôi gia cầm

Ngành chăn nuôi gia cầm cần chú trọng đến việc áp dụng các biện pháp sinh học như sử dụng kháng thể IgY để phòng trị bệnh. Điều này không chỉ giúp bảo vệ sức khỏe đàn gà mà còn nâng cao chất lượng sản phẩm chăn nuôi.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KOULDKIENG VILAYVONG NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT KHÁNG THỂ IGY TINH KHIẾT DÙNG ĐỂ PHÒNG VÀ TRỊ BỆNH NEWCASTLE (ND) Ngành: Thú y Mã số: 8640101 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Lê Văn Phan NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CẢM ĐOAN Tôi xin cảm đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệu, kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng được công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tôi xin cảm đoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc. Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn KouldKieng Vilayvong i LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CẢM ƠN Qua thời gian học tập và rèn luyện tại Học viện Nông nghiệp Việt Nam, dưới sự giúp đỡ, dạy dỗ tận tình của các thầy, cô giảng viên Khoa Thú Y về kiến thức chuyên môn cũng như tư cách đạo đức của người Thạc sĩ thú y trong thời đại mới.

Tôi đã có thể trưởng thành hơn về cả mặt nhận thức và học thuật. Nhân dịp hoàn thành luận văn tốt nghiệp chuyên ngành Thạc sĩ thú y, cho phép tôi được bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc nhất tới các thầy, cô giảng viên. Xin được gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến PGS. Lê Văn Phan giảng viên bộ môn Vi sinh vật-Truyền nhiễm, Phó trưởng Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú Y-Khoa Thú Y-Học viện Nông nghiệp Việt Nam, đã tạo điều kiện và tận tình giúp đỡ, trang bị kiến thức chuyên môn để tôi có đủ năng lực hoàn thành khóa luận.

Xin được cảm ơn tới toàn thể anh chị nhân viên Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú Y-Khoa Thú Y-Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình hướng dẫn và tạo điều kiện cho tôi thực tập và làm việc tại Bệnh viện. Tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc nhất đến gia đình, bạn bè, những người đã luôn động viên, sát cánh cùng tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn tốt nghiệp này. Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn KouldKieng Vilayvong ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] MỤC LỤC Lời cảm đoan. ii Mục lục.

iii Danh mục chữ viết tắt. vi Danh mục bảng. vii Danh mục hình. viii Danh mục biểu đồ.

ix Trích yếu luận văn. Tính cấp thiết của đề tài. Mục tiêu nghiên cứu của đề tài. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn.

Ý nghĩa khoa học. Ý nghĩa thực tiễn. Tổng quan tài liệu. Lịch sử nghiên cứu bệnh Newcastle.

Giới thiệu chung về bệnh. Lịch sử bệnh và tình hình bệnh ở trên thế giới và ở Việt Nam. Một vài nét khái quát về virus newcastle. Hình thái và cấu trúc của virus Newcastle.

Đặc tính sinh học của virus Newcastle. Dịch tễ học. Phòng bệnh Newcastle. Đáp ứng miễn dịch chống virus newcastle.

Đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu. 23 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Đáp ứng miễn dịch đặc hiệu. Miễn dịch chống bệnh Newcastle.

Kháng thể IGY. Kháng thể IgY là gì?. Chuyển IgY vào lòng đỏ trứng. Cấu chúc kháng thể của IgY.

Tách chiêt IgY từ lòng đỏ trứng gà. 31 Phần 3 Đối tượng - nội dung - phương phápnghiên cứu. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu.

Vật liệu nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu. Phương pháp gây miễn dịch trên gà. Phương pháp lấy và bảo quản huyết thanh.

Phương pháp xác định hiệu giá kháng thể và độ dài đáp ứng miễn dịch sau khi tiêm vaccine bằng phản ứng HI. Phương pháp tách chiết kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng gà. Phương pháp xác định đặc tính của kháng thể IgY. Phương pháp đánh giá hiệu quả phòng và điều trị Newcastle.

Phương pháp xử lý số liệu. Kết quả và thảo luận. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh gà trước khi gây miễn dịch. Khảo sát hiệu giá kháng thể newcastle trong huyết thanh gà sau khi gây miễn dịch.

Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của gà sau khi gây miễn dịch. Khảo sát hiệu giá kháng thể newcastle trong lòng đỏ trứng gà được gây miễn dịch. Kết quả theo dõi tỷ lệ trứng của gà. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong lòng đỏ trứng của gà sau khi gây miễn dịch.

51 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. So sánh hàm lượng kháng thể trong lòng đỏ trứng của lô gà được tiêm vaccine và lô gà được tiêm vaccine kết hợp với virus cường độc vô hoạt. Mối tương quan giữa hiệu giá kháng thể của gà qua huyết thanh và qua lòng đỏ trứng gà. Kết quả tách chiết kháng thể IgY.

Khảo sát đánh giá hiệu quả phòng và điều trị của sản phẩm kháng thể IgY. Thông tin trại thử nghiệm. Kết quả phòng và trị bệnh Newcastle bằng chế phẩm kháng thể IgY. Kết luận và kiến nghị.

62 Tài liêu tham khảo. 68 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt APMV Avian paramyxovirus ARN Acid ribonucleic CPE Cytophathic Effect F Funsion protein FAO Food Agriculture Organization HA Haemagglutination test HGKT Hiệu giá kháng thể HI Haemagglutination Inhibition test HN Haemagglutinin neuraminidase IgA Immunoglobulins A IgD Immunoglobulin d IgE Immunoglobulin e IgY Yolk Immunoglobulin IgG Immuno Globulin G IgM Immuno Globulin M IPCI Intracerebral pathogenicity index IVPI Intravenous pathogenicity index KDa Kilodalton L Large protein LD50 Lethal Dose 50 LĐT Lòng đỏ trứng M Matrix protein MDT Mean Death Time NK Nature kill NP Nuclecapsid protein OIE Office International Epizooties PBS Phosphate buffered saline µl Microlit µg Microgarm SDS Sodium Doecyl Sulfate TN Thí nghiệm vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC BẢNG Bảng 2. So sánh một số đặc tính của kháng thể (KT) sản xuất từ huyết thanh động vật (IgG) và kháng thể sản xuất từ trứng gia cầm (IgY) (Schade et al. Quy trình gây miễn dịch cho gà bằng vaccine sau khi bắt về.

Trình tự tiến hành phản ứng HA. Trình tự phản ứng HA để chuẩn độ 4 HA. Trình tự tiến hành phản ứng HI để đánh giá kháng thể chủ động của gà sau khi gây miễn dịch. Trình tự tiến hành phản ứng HI để đánh giá kháng thể thụ động chuyền qua lòng đỏ trứng.

Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể của gà hậu bị mới bắt về trước khi gây miễn dịch. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của lô gà thí nghiệm I, thí nghiệm II và lô đối chứng. Theo dõi tình hình đẻ của gà. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong lòng đỏ trứng của lô gà thí nghiệm I, thí nghiệm II và lô đối chứng.

Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà và trong lòng đỏ trứng (trên cùng 1 lô gà) ở lô TN I và lô TN II. Thông tin về chế phẩm kháng thể IgY dùng để phòng và trị bệnh Newcastle. Kết quả phòng và trị bệnh Newcastle bằng chế phẩm kháng thể IgY. 61 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC HÌNH Hình 2.

Cấu trúc của virus Newcastle. Phương thức lây lan chủ yếu của bệnh Newcastle. Minh họa sự phân bố các loại kháng thể trong trứng gà. Cấu trúc kháng thể IgG và IgY.

Quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm kháng thể IgY tại Học viện Nông Nghiệp Viêt Nam (Thú Y). Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu HI. Điện di kháng thể IgY trên gel SDS-PAGE sau tách chiết. Kết quả mổ khám gà mắc bệnh Newcastle.

Kết quả mổ khám gà mắc bệnh Newcastle. 59 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4. Biến động hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của gà lô thí nghiệm (TN I, TN II) và lô đối chứng. Hiệu giá kháng thể trong lòng đỏ trứng của gà lô thí nghiệm I, lô gà thí nghiệm II và lô đối chứng.

Hiệu giá kháng thể trong lòng đỏ trứng của lô gà thí nghiệm I và lô gà thí nghiệm II sau khi gây miễn dịch. So sánh hiệu giá kháng thể trung bình trong huyết thanh và trong lòng đỏ trứng của gà lô TN I sau khi gây miễn dịch. So sánh hiệu giá kháng thể trung bình trong huyết thanh và trong lòng đỏ trứng của gà lô TN II sau khi gây miễn dịch. 56 ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Kouldkieng VILAYVONG Tên luận văn: Nghiên cứu sản xuất kháng thể IgY tinh khiết dùng để phòng và trị bệnh Newcastle (ND) Ngành: Thú Y Mã số: 8640101 Tên cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam A.

Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của gà trước và sau khi tiêm vaccine Newcaste. - Đánh giá mối tương quan hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh và trong lòng đỏ trứng gà. - Nghiên cứu tách chiết kháng thể IgY đặc hiệu cho virus Newcastle từ lòng đỏ trứng gà và ứng dụng trong phòng và trị bệnh Newcastle. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu - Địa điểm nghiên cứu: Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú Y- Bệnh viện thú y-Ngô Xuân Quảng-Trâu Quỳ-Gia Lâm-Hà Nội.

- Thời gian nghiên cứu: 10/2018-9/2019. Vật liệu nghiên cứu: - Vaccine Newcastle: Vaccine vô hoạt nhũ dầu COR4+IB+ND+EDS của công ty Intervet. - Virus cường độc vô hoạt Newcastle phân lập từ thực địa (do Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú Y-Khoa học thú y cung cấp). - Kháng nguyên chuẩn Newcastle cho phản ứng HI (được cung cấp bởi Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú Y-Khoa Thú Y-Học viện Nông nghiệp Việt Nam).

- Gà hậu bị (khỏe mạnh về lâm sàng) giống gà Isa Brown 16 tuần tuổi. - Trang thiết bị, hóa chất thí nghiệm dùng trong chẩn đoán, xét nghiệm Newcastle của Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học Thú y-Khoa Thú Y- Học viện Nông nghiệp Việt Nam. - Các nguyên vật liệu khác: chuồng nuôi, thức ăn nước uống cho gà. Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của gà trước và sau khi tiêm vaccine Newcaste.

x LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] - Đánh giá mối tương quan hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh và trong lòng đỏ trứng gà.