Luận án tiến sĩ công nghệ sinh học: Nghiên cứu laccase tái tổ hợp và khả năng khử màu thuốc ...

Trường đại học

Đại học Huế

Chuyên ngành

Công nghệ sinh học

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

luận án tiến sĩ

2022

168
2
0

Phí lưu trữ

45 Point

Mục lục chi tiết

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI

2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU

2.1. Mục tiêu lí thuyết

2.2. Mục tiêu thực nghiệm

3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

4. NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN

5. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

5.1. Giới thiệu chung về laccase

5.2. Cấu tạo của laccase

5.3. Cơ chế xúc tác của laccase

5.4. Đặc tính của laccase

5.5. Các nguồn thu nhận laccase

5.6. Ảnh hưởng của điều kiện nuôi cấy đến khả năng sinh tổng hợp laccase

5.7. Ứng dụng của laccase

5.8. HỆ THỐNG BIỂU HIỆN Pichia pastoris

5.8.1. Giới thiệu chung về hệ thống P.

5.8.2. Ưu, nhược điểm của P. pastoris so với các hệ thống biểu hiện khác

5.8.3. Hệ thống biểu hiện tái tổ hợp tương đồng sử dụng P.

5.9. THUỐC NHUỘM CÔNG NGHIỆP VÀ CÁC BIỆN PHÁP XỬ LÝ

5.9.1. Thuốc nhuộm công nghiệp

5.9.2. Các phương pháp xử lý thuốc nhuộm công nghiệp

5.9.3. Xử lý màu thuốc nhuộm bằng laccase

6. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

6.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

6.1.1. Thu thập mẫu

6.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

6.2.1. Phân lập các chủng nấm mốc có hoạt tính laccase

6.2.2. Khảo sát sinh tổng hợp laccase từ các chủng phân lập

6.2.3. Xác định hoạt độ enzyme laccase

6.2.4. Phương pháp xác định protein ngoại bào

6.2.5. Xác định một số đặc tính của laccase thô từ chủng phân lập

6.2.6. Định danh phân tử chủng nấm phân lập

6.2.7. Phân lập các gen mã hóa laccase

6.2.8. Biểu hiện cFolac1 trong Pichia pastoris

6.2.9. Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến sự biểu hiện laccase tái tổ hợp

6.2.10. Tinh sạch enzyme tái tổ hợp

6.2.11. Điện di SDS – PAGE

6.2.12. Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hoạt độ laccase tái tổ hợp

6.2.13. Thử nghiệm khả năng khử màu thuốc nhuộm tổng hợp

6.2.14. Xử lý thống kê

7. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

7.1. PHÂN LẬP CÁC CHỦNG NẤM MỐC CÓ HOẠT TÍNH LACCASE

7.1.1. Phân lập, làm thuần và giữ giống các chủng nấm mốc

7.1.2. Sàng lọc các chủng nấm mốc sinh tổng hợp laccase

7.1.3. Một số đặc điểm hình thái khuẩn lạc và cuống sinh bào tử của các chủng nấm phân lập

7.1.4. Đánh giá khả năng sinh laccase của chủng nấm phân lập

7.1.5. Khảo sát một số đặc tính của laccase tự nhiên

7.1.6. Định danh vi sinh vật

7.2. TẠO DÒNG CÁC GEN MÃ HÓA LACCASE TỪ F.

7.2.1. Khuếch đại các gen laccase từ cDNA của F.

7.2.2. Tạo dòng các gen mã hóa enzyme laccase trong vector pGEM®T-Easy

7.2.3. Giải trình tự gen laccase

7.3. BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA LACCASE TRONG Pichia pastoris

7.3.1. Tạo dòng cFolac1 vào pGEM®T-Easy và biến nạp vào E.

7.3.2. Tạo dòng vào vector biểu hiện pPICZαA

7.3.3. Tối ưu hóa sự biểu hiện laccase tái tổ hợp

7.3.4. Tinh sạch enzyme

7.3.5. Khảo sát đặc điểm enzyme tái tổ hợp

7.4. THỬ NGHIỆM KHẢ NĂNG PHÂN HỦY THUỐC NHUỘM CÔNG NGHIỆP CỦA LACCASE TÁI TỔ HỢP

7.4.1. PHÂN LẬP CÁC CHỦNG NẤM MỐC CÓ HOẠT TÍNH LACCASE

7.4.2. Môi trường nuôi cấy

7.4.3. Khảo sát một số đặc tính của laccase tự nhiên

7.4.4. PHÂN LẬP CÁC GEN MÃ HÓA LACCASE

7.4.5. BIỂU HIỆN GEN FOLAC1 MÃ HÓA EMZYME TRONG NẤM MEN Pichia pastoris

7.4.6. Biểu hiện gen Folac1

7.4.7. Khảo sát đặc tính enzyme tái tổ hợp

7.4.8. Tối ưu hóa sự biểu hiện laccase tái tổ hợp

7.4.9. THỬ NGHIỆM KHẢ NĂNG PHÂN HỦY THUỐC NHUỘM CÔNG NGHIỆP CỦA LACCASE TÁI TỔ HỢP

8. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Luận án tiến sĩ công nghệ sinh học nghiên cứu tạo laccase tái tổ hợp và thử nghiệm khả năng khử màu một số thuốc nhuộm công nghiệp