Luận văn tốt nghiệp về nghiên cứu thành phần flavonoid trong hoa nhài

Luận văn tốt nghiệp nghiên cứu Luận văn tốt nghiệp nghiên cứu thành phần flavonoid trong hoa nhài, điều tra thực trạng, phân tích số liệu, đề xuất biện pháp cải tiến thực tế.

• Tác giả: Nguyễn Thị Thu Hương
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Hữu Tùng
• Trường học: Đại học Quốc gia Hà Nội
• Chuyên ngành: Dược học
• Đề tài: Nghiên Cứu Thành Phần Flavonoid Trong Hoa Nhài
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU
• DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ, HÌNH VẼ
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CÂY HOA NHÀI
• 1.1. Giới thiệu về cây hoa nhài
• 1.2. Đặc điểm, phân bố
• 1.3. Thành phần hóa học của cây hoa nhài
• 1.4. Công dụng của hoa nhài trong y học cổ truyền
• 1.5. Một số bài thuốc về hoa nhài
• 1.6. Tổng quan về flavonoid
• 1.7. Nguồn gốc của flavonoid
• 1.8. Cấu trúc và phân loại flavonoid
• 1.9. Tác dụng của FeCl3
• 1.10. Tác dụng của NH3
• 1.11. Tác dụng của NaOH đậm đặc và đun nóng
• 1.12. Phản ứng Cyanidin (phản ứng Shinoda hay Villstater)
• 1.13. Tác dụng của antimoin pentachlorid (phản ứng Marini - Bettolo)
• 1.14. Tác dụng của H2SO4 đậm đặc
• 1.15. Tác dụng của acetat chì trung tính hoặc kiềm
• 1.16. Phản ứng ghép đôi với muối diazoni
• 1.17. Phân bố của flavonoid
• 1.18. Tác dụng của flavonoid
• 2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Hóa chất, dung môi
• 2.3. Thiết bị, dụng cụ
• 2.4. Định tính nhóm hoạt chất flavonoid
• 2.5. Phương pháp chiết xuất và phân lập hợp chất
• 2.6. Phương pháp kiểm tra độ tinh khiết của hợp chất JS1
• 2.7. Phương pháp đo phổ xác định cấu trúc chất phân lập JS1
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 3.1. Định tính nhóm hoạt chất flavonoid
• 3.2. Chiết xuất, phân lập
• 3.3. Kiểm tra độ tinh khiết của hợp chất JS1
• 3.4. Xác định cấu trúc chất đã phân lập JS1
• 4. CHƯƠNG 4: VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 4.1. Về thành phần hóa học
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

Tóm tắt

I. Giới thiệu về cây hoa nhài

Cây hoa nhài, thuộc chi Jasminum, là một trong những loài thực vật có giá trị dược liệu cao, đặc biệt là Jasminum sambac. Loài này được trồng phổ biến ở các nước châu Á, có nguồn gốc từ Ấn Độ. Cây hoa nhài có đặc điểm sinh trưởng mạnh mẽ, thường cao từ 1-3 mét, với lá mọc đối và hoa có mùi thơm đặc trưng. Hoa nhài không chỉ được biết đến với vẻ đẹp mà còn với nhiều ứng dụng trong y học cổ truyền. Theo nghiên cứu, hoa nhài chứa nhiều thành phần hóa học có lợi, bao gồm flavonoid, phenolic, và các hợp chất khác, mang lại nhiều tác dụng sinh học như kháng khuẩn, chống viêm và chống oxy hóa. Những tác dụng này đã được chứng minh qua nhiều nghiên cứu khoa học, cho thấy giá trị thực tiễn của hoa nhài trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu tự nhiên.

II. Tổng quan về flavonoid

Flavonoid là một nhóm hợp chất tự nhiên phổ biến trong thực vật, có vai trò quan trọng trong việc bảo vệ cơ thể khỏi các tác nhân gây hại. Chúng có khả năng chống oxy hóa mạnh mẽ, giúp ngăn ngừa các bệnh lý liên quan đến quá trình lão hóa và các bệnh mãn tính. Nghiên cứu cho thấy flavonoid có trong hoa nhài không chỉ có tác dụng chống oxy hóa mà còn có khả năng kháng viêm, kháng khuẩn và hỗ trợ điều trị nhiều bệnh lý khác nhau. Các loại flavonoid như quercetin, rutin và kaempferol đã được xác định trong hoa nhài, cho thấy tiềm năng ứng dụng của chúng trong y học hiện đại. Việc nghiên cứu và chiết xuất flavonoid từ hoa nhài có thể mở ra hướng đi mới trong việc phát triển các sản phẩm chức năng và dược phẩm.

III. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp hiện đại để chiết xuất và phân lập flavonoid từ hoa nhài. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) được áp dụng để định tính các hợp chất có trong dịch chiết ethanolic của hoa nhài. Các mẫu được phân tích bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) để xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất flavonoid. Kết quả cho thấy hoa nhài chứa nhiều hợp chất flavonoid có hoạt tính sinh học, mở ra cơ hội cho việc phát triển các sản phẩm từ thiên nhiên có lợi cho sức khỏe. Việc áp dụng các phương pháp này không chỉ giúp xác định thành phần hóa học mà còn đánh giá được hiệu quả sinh học của các hợp chất chiết xuất.

IV. Kết quả nghiên cứu

Kết quả nghiên cứu cho thấy hoa nhài chứa nhiều loại flavonoid khác nhau, trong đó có rutin và quercetin. Các hợp chất này đã được phân lập thành công và xác định cấu trúc bằng các phương pháp hiện đại. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng chiết xuất từ hoa nhài có khả năng kháng khuẩn mạnh mẽ, đặc biệt là đối với các vi khuẩn gây bệnh như Staphylococcus aureus và Escherichia coli. Ngoài ra, chiết xuất còn cho thấy tác dụng chống oxy hóa đáng kể, giúp bảo vệ tế bào khỏi sự tổn thương do gốc tự do. Những phát hiện này không chỉ khẳng định giá trị dược liệu của hoa nhài mà còn mở ra hướng nghiên cứu mới cho việc phát triển các sản phẩm chức năng từ thiên nhiên.

V. Kết luận và kiến nghị

Nghiên cứu về flavonoid trong hoa nhài đã chỉ ra tiềm năng lớn của loài thực vật này trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu tự nhiên. Các hợp chất flavonoid không chỉ có tác dụng sinh học đa dạng mà còn có thể được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực khác nhau, từ y học đến thực phẩm chức năng. Để phát huy tối đa giá trị của hoa nhài, cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về các hợp chất có trong loài thực vật này, cũng như phát triển các phương pháp chiết xuất hiệu quả hơn. Việc bảo tồn và phát triển cây hoa nhài cũng cần được chú trọng để đảm bảo nguồn nguyên liệu cho các nghiên cứu và ứng dụng trong tương lai.

Nội dung chính

Bối cảnh và vấn đề nghiên cứu

Trong xu hướng phát triển của y dược học hiện đại, việc nghiên cứu và sử dụng các chế phẩm thuốc có nguồn gốc từ thảo dược tự nhiên ngày càng gia tăng nhằm hạn chế các tác dụng không mong muốn từ thuốc tổng hợp hóa dược. Nhóm hợp chất flavonoid là một trong những nhóm hoạt chất chuyển hóa thứ cấp phổ biến và có giá trị sinh học cao trong thực vật bậc cao, đặc biệt tập trung nhiều ở bộ phận hoa. Các hợp chất bioflavonoid đã được chứng minh có nhiều tác dụng sinh học quan trọng như chống oxy hóa, thu dọn gốc tự do, bảo vệ thành mạch, ngăn ngừa xơ vữa động mạch, chống thoái hóa tế bào gan, chống dị ứng, chống viêm và hỗ trợ điều trị đái tháo đường.

Cây hoa nhài có tên khoa học là Jasminum sambac (L.), thuộc họ Nhài (Oleaceae), là loài thực vật phân bố rộng rãi tại châu Á và được trồng phổ biến tại Việt Nam. Theo y học cổ truyền và các công bố quốc tế, hoa nhài chứa nhiều nhóm hoạt chất như carbohydrate, protein, acid amin, tanin, hợp chất phenolic, saponin, steroid và flavonoid, thể hiện các tác dụng dược lý đa dạng (kháng khuẩn, giảm đau, hạ sốt, chống viêm, chống oxy hóa, chống đái tháo đường, bảo vệ niêm mạc dạ dày và ức chế peroxy hóa lipid). Tuy nhiên, tại Việt Nam thời điểm thực hiện đề tài, các công trình nghiên cứu trong nước chủ yếu tập trung vào việc khai thác, chiết xuất tinh dầu từ hoa nhài mà chưa có công bố chuyên sâu về thành phần flavonoid phân lập từ bộ phận hoa của loài cây này.

Khóa luận tốt nghiệp đại học ngành Dược học của sinh viên Nguyễn Thị Thu Hương (Trường Đại học Y Dược – Đại học Quốc gia Hà Nội, 2022) được thực hiện nhằm giải quyết khoảng trống nghiên cứu trên thông qua 02 mục tiêu cụ thể:

1. Định tính nhóm hoạt chất flavonoid trong hoa nhài.
2. Chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc hóa học của 01 hợp chất flavonoid từ hoa nhài.

Đối tượng nghiên cứu là mẫu hoa nhài đã sấy khô của loài Jasminum sambac (L.), thu hái tại tỉnh Hà Nam và được chế biến, sản xuất tại Đội 12, xã Tả Thanh Oai, huyện Thanh Trì, thành phố Hà Nội (cơ sở sản xuất đạt tiêu chuẩn ISO 22000:2018 số HA 282-20 và HACCP CODE: 2003 số 131-20). Mẫu dược liệu thực nghiệm có độ ẩm xác định là 9,25%. Nghiên cứu thực hiện các nội dung thực nghiệm hóa thực vật và phân tích cấu trúc trong năm 2022.

---

Cơ sở lý thuyết và phương pháp

Khung lý thuyết và cơ sở hóa thực vật

Nghiên cứu dựa trên cơ sở phân loại thực vật học của chi Jasminum (khoảng 600 loài thuộc họ Oleaceae) và lý thuyết hóa học các hợp chất thiên nhiên về khung cấu trúc flavonoid. Flavonoid là các hợp chất có cấu trúc cơ bản gồm khung 1,3-diphenylpropan ($C_6-C_3-C_6$), được phân chia thành các phân lớp chính: flavone, flavonol, flavanone, chalcone, aurone, anthocyanidin, isoflavone và rotenoid. Về mặt hóa tính, nhóm chức phenol và dị vòng oxy cho phép thực hiện các phản ứng định tính màu đặc trưng như phản ứng tạo muối kiềm (với $\text{NH}_3$, $\text{NaOH}$), phản ứng khử Cyanidin (phản ứng Shinoda/Willstätter sử dụng $\text{Mg}/\text{HCl}$ đặc) và phản ứng tạo phức màu với ion kim loại ($\text{FeCl}_3$).

Hóa chất, dung môi và trang thiết bị

Hệ thống hóa chất, dung môi và trang thiết bị thực nghiệm được sử dụng đáp ứng tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam V (DĐVN V) và Tiêu chuẩn Quốc gia (TCVN):

Phân loại	Tên hóa chất / Dung môi / Thiết bị	Tiêu chuẩn / Xuất xứ
Dung môi chiết và tách	Ethanol ($\text{EtOH}$), Methanol ($\text{MeOH}$)	TCVN
	$n$-hexan ($\text{Hx}$), Ethyl acetat ($\text{EtOAc}$), $n$-butanol ($\text{BuOH}$)	DĐVN V
	Aceton, Toluen, Acid formic ($\text{FA}$), Nước cất	DĐVN V
Thuốc thử định tính & hấp phụ	$\text{H}_2\text{SO}_4$, $\text{NaOH}$, $\text{HCl}$, $\text{FeCl}_3$, $\text{NH}_3$, Kim loại Magie ($\text{Mg}$)	DĐVN V
	Bản mỏng Silica gel $60\text{ F}{254}$, Pha đảo RP-$\text{C}{18}$, Silica gel $\text{GF}_{254}$	DĐVN V / Merck
Thiết bị phân tích và chiết xuất	Cân phân tích Precisa 262SMA-FR	Thụy Sỹ
	Bể chiết siêu âm Power Sonic 405	Hàn Quốc
	Máy cất quay chân không Rotavapor R-100, Đèn tử ngoại	Nhật Bản
	Tủ sấy Memmert, Tủ hút khí độc	Đức
	Máy đo khối phổ LC/MS/MS Water-API-ISI	Mỹ
	Máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân Bruker ($500\text{ MHz}$ và $600\text{ MHz}$)	Mỹ

Phương pháp nghiên cứu thực tế

• Phương pháp định tính sơ bộ: Tiến hành chiết 5 g bột dược liệu bằng $\text{EtOH } 90%$ qua đun cách thủy, lọc nóng và thực hiện 4 phản ứng ống nghiệm: phản ứng tăng màu với hơi $\text{NH}_3$ đặc, phản ứng kiềm hóa với dung dịch $\text{NaOH } 10%$, phản ứng khử Shinoda ($\text{Mg} + \text{HCl}$ đậm đặc) và phản ứng tạo phức chelate với dung dịch $\text{FeCl}_3\text{ } 5%$.
• Phương pháp chiết xuất và phân đoạn: Sử dụng 1,0 kg hoa nhài khô (độ ẩm 9,25%), xay bột thô, thực hiện chiết hỗ trợ sóng siêu âm 3 lần bằng $\text{EtOH } 90%$ ở nhiệt độ phòng (4 giờ/lần). Dịch chiết gộp được cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm thu cắn tổng. Cắn tổng được phân tán trong nước và chiết phân bố lỏng - lỏng lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dần: $n$-hexan, ethyl acetat và $n$-butanol.
• Phương pháp sắc ký phân lập: Cao phân đoạn ethyl acetat được phân tách bằng sắc ký cột cổ điển (CC) pha thường với chất hấp phụ silica gel, rửa giải bằng hệ dung môi $n$-hexan - ethyl acetat theo tỷ lệ phân cực tăng dần từ $100:0$ đến $0:100$. Phân đoạn triển vọng tiếp tục được tinh chế qua cột sắc ký pha đảo Silica gel RP-$\text{C}_{18}$ rửa giải bằng hệ dung môi $\text{MeOH} - \text{H}_2\text{O}$ (tỷ lệ $1:1, 2:1, 3:1...$).
• Phương pháp kiểm tra độ tinh khiết: Sử dụng sắc ký lớp mỏng (TLC) trên bản mỏng silica gel pha thường $60\text{ F}{254}$ (hệ pha động Toluen : $\text{EtOAc}$ : Aceton : $\text{FA} = 5:2:2:1$) và pha đảo RP-$\text{C}{18}$ (hệ pha động Aceton : $\text{H}_2\text{O} = 3:1$), phát hiện vết dưới đèn tử ngoại ở bước sóng $254\text{ nm}$ và phun thuốc thử $\text{H}_2\text{SO}_4\text{ } 10%/\text{EtOH}$ sấy nóng.
• Phương pháp xác định cấu trúc hóa học: Phân tích tính chất cảm quan, phổ tử ngoại (UV), phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI-MS) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân ($^1\text{H-NMR } 600\text{ MHz}$, $^{13}\text{C-NMR } 125\text{ MHz}$, dung môi $\text{DMSO-}d_6$, chất nội chuẩn tetramethylsilan - TMS).

---

Nội dung chính theo từng chương

CHƯƠNG I. Tổng quan về cây hoa nhài

Chương này tổng hợp các tài liệu khoa học về đặc điểm thực vật học, sinh thái, phân bố và 5 giai đoạn phát triển của hoa Jasminum sambac. Về thành phần hóa học, tác giả tổng thuật các nhóm chất đã được công bố trên thế giới trong các bộ phận của cây (tinh dầu, coumarin, iridoid glycoside, peptide jasmintide jS1 và jS2, triterpenoid, phenolic và flavonoid như rutin, quercitrin, isoquercitrin trong lá). Về tác dụng sinh học, chương tổng hợp các bằng chứng thực nghiệm về hoạt tính kháng khuẩn (ức chế Salmonella, Vibrio cholerae, Staphylococcus), diệt ấu trùng muỗi Aedes aegypti, chống viêm, giảm phù chân chuột ở liều $400\text{ mg/kg}$, chống oxy hóa (lọc gốc tự do DPPH, NO, $\text{H}_2\text{O}_2$), chống ung thư trên chuột mang khối u lympho Dalton, bảo vệ dạ dày và hạ đường huyết. Phần tổng quan về flavonoid trình bày chi tiết cấu trúc $C_6-C_3-C_6$, phân loại 8 phân lớp flavonoid, cơ chế các phản ứng hóa học nhận biết và tác dụng dược lý kinh điển của nhóm chất này.

CHƯƠNG II. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu

Chương II mô tả chi tiết nguồn gốc mẫu thực vật hoa nhài sấy khô thu hái tại Hà Nam, các chứng nhận quản lý chất lượng của cơ sở chế biến (ISO 22000:2018, HACCP CODE: 2003). Toàn bộ danh mục 18 hóa chất, dung môi và 15 trang thiết bị được bảng biểu hóa rõ ràng. Chương này chuẩn hóa quy trình thực nghiệm gồm: quy trình 4 phản ứng định tính ống nghiệm; sơ đồ chiết siêu âm 1,0 kg dược liệu bằng $\text{EtOH } 90%$; quy trình chiết phân đoạn thu các cao cắn; quy trình sắc ký cột silica gel pha thường và pha đảo RP-$\text{C}_{18}$; điều kiện sắc ký lớp mỏng kiểm tra độ tinh khiết; và các thông số kỹ thuật vận hành máy đo phổ ESI-MS, phổ NMR.

CHƯƠNG III. Kết quả nghiên cứu

Chương này công bố các số liệu và hình ảnh thực nghiệm thu được:

• Kết quả định tính: Dịch chiết hoa nhài phản ứng dương tính rất rõ với $\text{NH}_3$ (chuyển màu vàng đậm), $\text{NaOH}$ (xuất hiện tủa vàng), $\text{FeCl}_3\text{ } 5%$ (chuyển dung dịch màu xanh đen) và phản ứng dương tính rõ với phép thử Cyanidin (chuyển dung dịch sang màu đỏ vàng), khẳng định sự có mặt của nhóm flavonoid.
• Kết quả chiết xuất và phân lập: Từ 1,0 kg hoa nhài khô, cất thu hồi dung môi dịch chiết tổng thu được 128 g cắn chiết $\text{EtOH}$. Quá trình chiết phân đoạn thu được 15 g cao $n$-hexan, 42 g cao ethyl acetat và 36 g cao $n$-butanol. Từ 40 g cao ethyl acetat đưa lên cột sắc ký silica gel pha thường, thu được 8 phân đoạn (PĐ1 đến PĐ8). Phân đoạn 3 (PĐ3, khối lượng 2,8 g) được tiếp tục phân lập trên cột silica gel pha đảo RP-$\text{C}_{18}$, thu được 11 mg hợp chất ký hiệu là JS1.
• Kiểm tra độ tinh khiết: Trên cả 2 hệ bản mỏng sắc ký lớp mỏng pha thường và pha đảo, hợp chất JS1 đều chỉ xuất hiện một vết đơn sắc nét dưới đèn UV $254\text{ nm}$ và khi hiện màu bằng $\text{H}_2\text{SO}_4\text{ } 10%$, chứng minh hợp chất đã đạt độ tinh khiết cao.
• Xác định cấu trúc hóa học JS1: Hợp chất JS1 là dạng bột màu vàng. Phổ ESI-MS cho pic ion phân tử $[M-H]^-$ tại $m/z\text{ } 301$, tương ứng với khối lượng phân tử $M = 302$, công thức phân tử xác định là $\text{C}{15}\text{H}{10}\text{O}_7$. Phổ $^{13}\text{C-NMR}$ cho tín hiệu của 15 carbon, trong đó có 1 nhóm carbonyl tại $\delta_C\text{ } 175,8\text{ ppm}$ (C-4). Phổ $^1\text{H-NMR}$ chỉ ra hệ thống 5 proton thơm gồm 3 proton ghép đôi hệ ABX trên vòng B: $\text{H-2}'$ ($\delta_H\text{ } 7,68\text{ ppm}, d, J = 2,4\text{ Hz}$), $\text{H-5}'$ ($\delta_H\text{ } 6,88\text{ ppm}, d, J = 8,4\text{ Hz}$), $\text{H-6}'$ ($\delta_H\text{ } 7,54\text{ ppm}, dd, J = 2,4; 8,4\text{ Hz}$) và 2 proton vòng A ghép đôi meta: $\text{H-6}$ ($\delta_H\text{ } 6,18\text{ ppm}, d, J = 2,4\text{ Hz}$), $\text{H-8}$ ($\delta_H\text{ } 6,40\text{ ppm}, d, J = 2,4\text{ Hz}$), cùng tín hiệu nhóm $5\text{-OH}$ liên kết hydro mạnh tại $\delta_H\text{ } 12,48\text{ ppm}$. Kết hợp đối chiếu phổ thực nghiệm với tài liệu chuẩn, hợp chất JS1 được xác định chính xác là Quercetin ($3,5,7,3',4'\text{-pentahydroxyflavone}$).

CHƯƠNG IV. Bàn luận

Chương IV phân tích, đánh giá tính phù hợp của các phương pháp nghiên cứu đã lựa chọn:

• Về phương pháp nghiên cứu: Đánh giá phương pháp chiết siêu âm là tối ưu ở quy mô phòng thí nghiệm do tính đơn giản, hiệu suất cao và hạn chế tối đa sự biến đổi nhiệt phân của hoạt chất; sự phối hợp giữa sắc ký cột pha thường và pha đảo RP-$\text{C}_{18}$ giúp phân tách hiệu quả hoạt chất có độ phân cực trung bình - cao; sắc ký lớp mỏng là công cụ kiểm tra độ tinh khiết nhanh, tin cậy; kỹ thuật cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) kết hợp khối phổ (MS) cung cấp bằng chứng cấu trúc tuyệt đối.
• Về thành phần hóa học: Tác giả nhấn mạnh Quercetin tuy đã từng được tìm thấy trong lá cây hoa nhài từ các nghiên cứu quốc tế, nhưng đây là lần đầu tiên hợp chất này được phân lập và xác định cấu trúc trực tiếp từ bộ phận hoa của loài Jasminum sambac tại Việt Nam, góp phần làm sáng tỏ thành phần hóa học thực vật và cung cấp cơ sở khoa học cho hoạt tính chống oxy hóa của dược liệu.

CHƯƠNG V. Kết luận và kiến nghị

Tổng kết việc hoàn thành 2 mục tiêu nghiên cứu (định tính thành công nhóm flavonoid và phân lập, xác định cấu trúc của Quercetin từ hoa nhài). Đồng thời, đưa ra 3 kiến nghị định hướng cho các nghiên cứu tiếp theo.

---

Kết quả và đóng góp

Số liệu thực nghiệm tổng hợp

1. Kết quả định tính sơ bộ nhóm flavonoid trong dịch chiết hoa nhài

STT	Phản ứng định tính	Hiện tượng thực nghiệm	Kết quả
1	Phản ứng với hơi $\text{NH}_3$ đặc	Giấy lọc chuyển màu vàng đậm hơn rõ rệt	+++
2	Phản ứng với dung dịch $\text{NaOH } 10%$	Xuất hiện tủa màu vàng	+++
3	Phản ứng Cyanidin ($\text{Mg} + \text{HCl}$ đặc)	Dung dịch chuyển sang màu đỏ vàng	++
4	Phản ứng với dung dịch $\text{FeCl}_3\text{ } 5%$	Dung dịch chuyển sang màu xanh đen	+++

(Ghi chú: ++ là dương tính rõ; +++ là dương tính rất rõ).

2. Kết quả chiết phân đoạn từ 1,0 kg hoa nhài khô (độ ẩm 9,25%)

Phân đoạn chiết	Khối lượng thu được (g)	Tỷ lệ so với cắn tổng (%)
Cắn chiết tổng $\text{EtOH } 90%$	128,0	100,00
Cao phân đoạn $n$-hexan	15,0	11,72
Cao phân đoạn Ethyl acetat ($\text{EtOAc}$)	42,0	32,81
Cao phân đoạn $n$-butanol ($\text{BuOH}$)	36,0	28,13

3. Dữ kiện phổ NMR của hợp chất JS1 (Quercetin) đo trong $\text{DMSO-}d_6$

Vị trí Carbon	$\delta_C$ tài liệu chuẩn (ppm)	$\delta_C$ thực nghiệm (ppm, $125\text{ MHz}$)	Loại nhóm Carbon	$\delta_H$ thực nghiệm (ppm, $600\text{ MHz}$, độ bội, $J\text{ in Hz}$)
2	146,7	146,7	C	-
3	136,2	135,7	C	-
4	176,3	175,8	C	-
5	161,1	160,7	C	-
6	98,7	98,2	CH	6,18 ($d, J = 2,4\text{ Hz}$)
7	164,3	164,0	C	-
8	93,8	93,3	CH	6,40 ($d, J = 2,4\text{ Hz}$)
9	156,6	156,1	C	-
10	103,5	102,9	C	-
$1'$	122,4	121,9	C	-
$2'$	115,5	115,0	CH	7,68 ($d, J = 2,4\text{ Hz}$)
$3'$	145,5	145,0	C	-
$4'$	148,1	147,7	C	-
$5'$	116,1	115,6	CH	6,88 ($d, J = 8,4\text{ Hz}$)
$6'$	120,5	119,9	CH	7,54 ($dd, J = 2,4; 8,4\text{ Hz}$)
5-OH	-	-	-	12,48 ($s$)

Đóng góp khoa học của khóa luận

• Cung cấp bằng chứng thực nghiệm về sự hiện diện của nhóm hoạt chất flavonoid trong hoa nhài tại Việt Nam thông qua các phản ứng hóa học chuẩn tắc.
• Xây dựng thành công quy trình chiết xuất siêu âm và phân lập sắc ký cột 2 bước (pha thường và pha đảo RP-$\text{C}_{18}$) để tách chiết flavonoid từ phân đoạn cao ethyl acetat.
• Lần đầu tiên phân lập và xác định đầy đủ cấu trúc hóa học của hợp chất flavonoid Quercetin từ bộ phận hoa của loài Jasminum sambac (L.) tại Việt Nam, bổ sung dữ liệu hóa thực vật học cho chi Jasminum.

---

Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp

Hạn chế của nghiên cứu

Theo nội dung tác giả trình bày, đề tài mang tính chất là một nghiên cứu bước đầu về thành phần hóa thực vật của hoa nhài:

• Mới chỉ tập trung phân lập và xác định cấu trúc của 01 hợp chất flavonoid đơn lẻ (Quercetin) từ phân đoạn cao ethyl acetat.
• Chưa tiến hành phân lập các thành phần flavonoid khác còn hiện diện trong phân đoạn ethyl acetat cũng như các phân đoạn cao chiết khác ($n$-butanol, $n$-hexan).
• Chưa tiến hành định lượng hàm lượng Quercetin và tổng hàm lượng flavonoid trong mẫu hoa nhài.

Hướng nghiên cứu tiếp theo (Đề xuất của tác giả)

1. Tiếp tục mở rộng nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất flavonoid khác có trong hoa nhài.
2. Xây dựng phương pháp định lượng để xác định hàm lượng của các flavonoid chính trong hoa nhài.
3. Nghiên cứu tối ưu hóa và xây dựng quy trình chiết xuất các hợp chất flavonoid từ nguồn dược liệu hoa nhài nhằm định hướng ứng dụng thực tiễn.

---

Giá trị tham khảo

Khóa luận là tài liệu tham khảo chuyên môn cho:

• Sinh viên và học viên chuyên ngành Dược học, Hóa dược, Hóa thực vật: Tham khảo phương pháp xây dựng quy trình chiết siêu âm dược liệu, kỹ thuật phân đoạn lỏng - lỏng và phương pháp sắc ký cột kết hợp pha thường (Silica gel) và pha đảo (RP-$\text{C}_{18}$) để phân lập hoạt chất thiên nhiên.
• Nghiên cứu viên lĩnh vực Hóa học các hợp chất thiên nhiên: Cung cấp tài liệu quy chuẩn về dữ liệu giải phổ khối lượng (ESI-MS) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân một chiều ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$) của khung flavonol (Quercetin) đo trong dung môi $\text{DMSO-}d_6$.
• Các nhà nghiên cứu phát triển sản phẩm dược liệu: Cung cấp cơ sở khoa học về mặt hóa thực vật để phát triển các nghiên cứu đánh giá hoạt tính chống oxy hóa hoặc tiêu chuẩn hóa nguyên liệu từ hoa nhài Jasminum sambac.

---

Câu hỏi thường gặp

1. Nguồn gốc mẫu dược liệu hoa nhài sử dụng trong nghiên cứu đáp ứng tiêu chuẩn gì?

Mẫu hoa nhài (Jasminum sambac (L.)) được thu hái tại tỉnh Hà Nam, sau đó được sấy khô và chế biến tại cơ sở ở Đội 12, xã Tả Thanh Oai, huyện Thanh Trì, Hà Nội. Nhà máy sản xuất đạt tiêu chuẩn quản lý chất lượng ISO 22000:2018 (số HA 282-20) và HACCP CODE: 2003 (số 131-20). Mẫu dược liệu thực nghiệm có độ ẩm xác định là 9,25%.

2. Quy trình chiết xuất và hiệu suất thu nhận các phân đoạn cao chiết từ hoa nhài diễn ra như thế nào?

Từ 1,0 kg hoa nhài khô, tác giả thực hiện chiết siêu âm 3 lần với $\text{EtOH } 90%$ (4 giờ/lần ở nhiệt độ phòng), thu được 128 g cắn chiết tổng. Tiến hành chiết phân bố lỏng - lỏng thu được 3 phân đoạn cao cắn: phân đoạn $n$-hexan (15 g), phân đoạn ethyl acetat (42 g) và phân đoạn $n$-butanol (36 g).

3. Hợp chất JS1 được phân lập từ phân đoạn nào và có đặc điểm cảm quan, khối lượng ra sao?

Hợp chất JS1 được phân lập từ 40 g cao phân đoạn ethyl acetat thông qua sắc ký cột silica gel pha thường (thu 8 phân đoạn) và tiếp tục tinh chế phân đoạn PĐ3 (2,8 g) qua sắc ký cột silica gel pha đảo RP-$\text{C}_{18}$. Hợp chất JS1 thu được có khối lượng 11 mg, tồn tại dưới dạng bột màu vàng và đạt độ tinh khiết đơn vết trên cả sắc ký lớp mỏng pha thường lẫn pha đảo.

4. Dữ liệu phổ nào chứng minh cấu trúc hóa học của hợp chất JS1 là Quercetin?

• Khối phổ (ESI-MS): Xuất hiện pic ion phân tử $[M-H]^-$ tại $m/z\text{ } 301$, xác định công thức phân tử là $\text{C}{15}\text{H}{10}\text{O}_7$ ($M = 302$).
• Phổ $^{13}\text{C-NMR}$ ($125\text{ MHz}$): Thể hiện đủ 15 tín hiệu carbon, đặc trưng với tín hiệu carbonyl C-4 tại $\delta_C\text{ } 175,8\text{ ppm}$.
• Phổ $^1\text{H-NMR}$ ($600\text{ MHz}$): Xác định 5 proton thơm gồm 2 proton ghép meta trên vòng A ($\text{H-6}$ tại $\delta_H\text{ } 6,18\text{ ppm}$ và $\text{H-8}$ tại $\delta_H\text{ } 6,40\text{ ppm}$, $J = 2,4\text{ Hz}$), 3 proton hệ ABX trên vòng B ($\text{H-2}'$ tại $7,68\text{ ppm}$, $\text{H-5}'$ tại $6,88\text{ ppm}$, $\text{H-6}'$ tại $7,54\text{ ppm}$) và tín hiệu proton nhóm $5\text{-OH}$ tại $12,48\text{ ppm}$. Các dữ kiện phổ này trùng khớp hoàn toàn với dữ liệu của Quercetin.

5. Đóng góp khoa học mới nhất về mặt hóa thực vật của khóa luận này là gì?

Mặc dù Quercetin đã được ghi nhận có trong lá của cây hoa nhài ở các nghiên cứu quốc tế trước đây, nhưng khóa luận này là công trình đầu tiên tại Việt Nam phân lập và xác định cấu trúc thành công Quercetin từ bộ phận hoa của loài Jasminum sambac (L.).

---

Kết luận

Khóa luận tốt nghiệp đại học ngành Dược học của tác giả Nguyễn Thị Thu Hương đã hoàn thành đầy đủ hai mục tiêu nghiên cứu đề ra về mặt thực nghiệm hóa thực vật trên đối tượng hoa nhài (Jasminum sambac (L.)). Nghiên cứu đã chứng minh sự hiện diện của nhóm hoạt chất flavonoid bằng các phản ứng định tính hóa học đặc trưng, đồng thời xây dựng quy trình chiết siêu âm và sắc ký cột phân lập thành công 11 mg hợp chất Quercetin từ phân đoạn cao ethyl acetat. Kết quả phổ nghiệm ESI-MS và NMR đã xác định chính xác cấu trúc của Quercetin, đánh dấu lần đầu tiên hoạt chất này được phân lập từ hoa nhài tại Việt Nam và tạo tiền đề khoa học cho các nghiên cứu định lượng, chiết xuất hoạt chất tiếp theo.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG I. Tổng quan về cây hoa nhài 1. Giới thiệu về cây hoa nhài 1. Phân loại Jasminum là một chi có khoảng 600 loài cây nhỏ và dây leo trong họ Oleaceae.

Theo giá trị dược liệu cao, Jasminum sambac là một trong những loài được trồng nhiều nhất ở các nước Châu Á [25]., thường được gọi là hoa nhài và có nguồn gốc từ Ấn Độ [32]. Tên khoa học: Jasminum sambac (L. Hình ảnh cây hoa nhài 2 Luan van 1. Đặc điểm, phân bố Jasminum sambac được phân bố ở châu Á- nhiệt đới và châu Á- ôn đới.

Nó là một trong những loài được trồng nhiều nhất ở các nước châu Á [4]. Cây mọc rải rác hoặc bụi, cao 1-3 m, mọc phân nhánh [4]. Lá mọc đối hoặc thành chùm ba lá, toàn bộ hình elip hoặc hình elip rộng đến hình cầu, tù hoặc nhọn, kích thước thay đổi, lớn tới 9cm và rộng 6cm. Phía trên mặt lá sáng bóng, phía dưới có gân nổi rõ.

Cuống lá ngắn, mọc đối [4]. Hoa có mùi thơm, trong cụm hoa có vài hoa, cuống lên đến 6mm, lá bắc thẳng dài tới 6mm. Đài hoa 5-9, cánh dài 1cm, hình chữ V. Tràng hoa màu trắng, đơn giản hoặc kép, ống dài 1cm, thùy từ 5-9 thuôn dài, nhọn hoặc tù, hoặc có vân dưới [4].

Hoa nhài chỉ nở trong một ngày, kéo dài đến 20 giờ. Hoa thường nở vào ban đêm, thường vào khoảng 6 đến 8 giờ tối [32]. Quá trình phát triển của hoa nhài Hoa được chia thành năm giai đoạn phát triển: (1) giai đoạn hình thành cánh mà tất cả các cánh hoa đều gần như nhau, (2) giai đoạn đầu ra hoa, tức là cánh hoa bên ngoài bắt đầu phản xạ ra bên ngoài, (3) giai đoạn mở hoa trong đó tất cả các cánh hoa trở nên phản xạ và sẵn sàng mở hoàn toàn, (4) giai đoạn mở hoa hoàn toàn, tất cả các cánh hoa mở hoàn toàn với một nửa số cánh hoa trở nên rũ xuống, và (5) giai đoạn hóa già bắt đầu, tức là cánh hoa bắt đầu héo [32]. Quả mọng, đơn hoặc không có hạt, hình cầu, đường kính 6mm, màu đen khi chín, được bao quanh bởi các răng đài [4].

3 Luan van Đối với cây moc leo, các nhánh con có góc cạnh, hình elip đơn giản với các lá hình trứng dài tới 10 cm, nhọn hoặc tù, gốc tròn hoặc hình khối, lá gần như bóng với các đường gân nổi rõ, cuống lá hình mác, ngắn, hình cung. Hoa thơm, đài hoa thùy tuyến tính, cánh dài 6-7 mm, tràng hoa màu trắng, thường gấp đôi, các thùy thuôn dài gần giống hình lông chim, hình tù dài như ống [4]. Thành phần hóa học của cây hoa nhài Tính chất hóa lý của tinh dầu Jasminum sambac (hoa nụ kép) màu vàng trong và vàng nhạt, chiết suất 1,47 ở 20°C và 1,49 ở 20°C; điểm đông tụ là 17°C và 17,25°C; độ quay quang học là +3,30 ở 20°C và +3,50 ở 20°C; trọng lượng riêng là 0,956 ở 20°C và 0,9850 ở 20°C; số acid là 6,85 và 6,89 và số este tương ứng là 242,58 và 240,02 [2]. Phân tích hóa thực vật sơ bộ của Jasminum sambac có sự hiện diện của carbohydrate, protein, axid amin, coumarin, glicozit, tannin, các hợp chất phenolic, flavonoid, phenol, saponin, steroid, chất béo, tinh dầu, dầu cố định, terpines, nhựa và axit salicylic [2].

Phân tích sắc ký lớp mỏng (TLC) dịch chiết ethanoic của hoa nhài được sàng lọc để tìm các loại hợp chất khác nhau, được thực hiện với các hệ pha động khác nhau sử dụng thuốc thử thích hợp làm chất chuẩn [25]. Phương pháp TLC dịch chiết ethanolic của hoa nhài Thử nghiệm Tiêu Pha động Phun thuốc Phát Màu chuẩn thử hiện sắc Alkaloids Atropine Toluene: ethyl Dragendorff Visible Đốm acetate: màu da dimethylamine cam trên (70: 20: 10) nền màu vàng Anthraquinones Rhein Ethyl acetate: KOH UV 366 Vàng/ methol: nước nm cam/ đỏ 4 Luan van (81: 11: 8) Antioxidants Vit E Ethyl acetate: DPPH Visible Đốm toluene (50: trắng 50) trên nền tím Coumarins Coumarin Toluene: ethyl KOH UV 366 Xanh acetate (90: 10) nm lam nhạt/ xanh lục Essential oils Eugenol Toluene: ethyl Anisaldehyd Heat Đỏ tím acetate (93: 7) e sunfuric 100oC acid Visible Flavonoids Rutin Ethyl acetate: Natural UV 366 Cam/ formic acid: Product nm vàng/ acetic acid: (NP/PEG) xanh lá nước cây/ mờ (100: 11: 11: 27) Cardiac Ouabain Acetate: Kedde Visible Hồng/ glycosides methanol: vàng/ nước tím (81: 11: 8) Phenolics Catechol Toluene: ethyl Ferric Visible Màu acetate (97: 3) chloride xanh đen Saponins Saponin Butanol: ethyl Anisaldehyd Visible Màu acetate: acetic e sunfuric xanh da acid: nước acid trời 5 Luan van (10,8: 3,6: 0,2: 2,7) Tanin Gallic Methanol: Ferric Visible Màu acid ethyl acetate: chloride xanh acetic acid đen (10: 90: 0,1) Phân tích TLC chỉ ra rằng chiết xuất etanolic của hoa nhài chứa hỗn hợp của coumarin, glycoside, tinh dầu, flavonoid, phenol, saponin và steroid. Tuy nhiên không phát hiện được alkaloids, anthraquinone và tannin [25]. Phân tích hóa thực vật của chiết xuất ethanolic của hoa nhài Các hợp chất Kết quả Alkaloids - Anthraquinones - Antioxidants + Coumarins + Cardiac glycosides + Essential oils + Flavonoids + Phenolics + Saponins + Steroids + Tanin - 6 Luan van Acid dotriacontanoic, dotriacontanol, acid oleanolic, daucosterol, hesperidin, [+] - jasminoid A, B, C, và D đã được phân lập từ rễ của cây Jasminum sambac [4].

Rutin, quercitrin, isoquercitrin, quercitrin-3 dirhamnoglycoside, kaempherol-3 rhamnoglycoside, a-amyrin, B-sitisterol được xác định trong lá của hoa nhài [4]. ChloroCoumarin, dẫn xuất Coumarin và kaempferol, một dẫn xuất flavonoidal đã được xác định trong lá của Jasminum sambac [21]. Trimeric iridoidal glycoside, sambacoside A, molihuasides A-E được phân lập từ hoa của Jasminum sambac [31]. Một họ peptide giàu Cysteine thực vật mới, jasmintide được phân lập từ Jasminum sambac.

Hai jasmintide 27 axit amin [jS1 và jS2] đã được xác định ở cấp độ gen và protein [8]. 2,3-Dihydro-Benzofuran, 1-Nonadecene, 2, 6, 10 Trimethyl, 14-Ethylene- 14-Pentadecne, 1-Nonadecene, 1-Heptacosanol, alpha-Tocopherol-.-D mannoside, Nonacosane đã được phân lập từ lá và 1-Nonadecene, Nonadecyl trifluoroacetate, 1-Heptacosanol, 1-Heptacosanol, 1-Heptacosanol, E-14- Hexadecenal được phân lập từ thân cây Jasminum sambac [16]. Benzyl 6-0-beta-D-xylopyranosyl-beta-D-gluco pyranoside (beta- primeveroside), 2-phenylethyl beta primeveroside và 2-phenylethyl 6-0-alpha-L rhamnopyranosyl-beta-D-glucopyranoside [beta rutinoside] được phân lập như tiền chất tạo mùi thơm của rượu benzyl và 2-phenylethanol từ nụ hoa của cây Jasminum sambạc [13]. Các hợp chất có trong hoa Jasminum sambac tạo hương thơm là: Benzyl alcohol, Cycloheptasiloxane tetradecamethyl-Methyl benzoate, Linalool, Benzyl acetate, Indole, Cyclohexasiloxanedodecamethyl- Hexadeca methyl cyclooctasiloxane.

[Z] -3-Hexenyl 7 Luan van benzoate, N-Acetyl Methyl anthranilate, Cyclohexasiloxane, [E] -Methyl jasmonete Benzyl benzoate và Isophytol [4] Chiết xuất ethanol của lá Jasminum sambac, chứa Bicyclo [2.1] heptane- 2,5-diol, 1,7,7 trimethyl – [2-endo, 5-ex; Phenol, H 3 ,5-bis [1,1 dimetylete]-, 1- Octadecyne; Acid hexadecanoic; 2- [4H] - Benzofuranone, 5,6,7,7A Tetrahydro- 6-Hy; R-Limonene; 1-Octadecyne; Acid eicosanoic, metyl este; 9- Acid octadecenoic [Z] n-Acid hexadecenoic, Acid hexadecenoic; Ancol etylic; Acid octadecenoic; 9- Axit octadecenoic, metyl este, [E] - Phytol; Tetradecenal, [Z] - 9 Acid octadecenoic [Z]; Di-n-octyl phthalate; Squalene và 2,5,7,8-Tetramethyl-2 - 4,8,12-Trimethylridecy [9]. Công dụng của hoa nhài trong y học cổ truyền Hoa của Jasminum sambac được sử dụng để điều chế tinh dầu và làm trà hoa nhài. Hoa có vị đắng, hăng, tính mát, bổ huyết, nhuận phế, chữa phong nhiệt, bạch đới, cảm ngứa, sốt, hết nôn, có tác dụng chữa các bệnh về mắt, miệng, dùng chữa bệnh ngoài da, phong, ung nhọt. Hoa cũng được sử dụng để điều trị tiêu chảy, đau bụng, viêm kết mạc, hen suyễn, ung thư, chữa lành vết thương, đau răng và viêm da.

Những chiếc lá đã được sử dụng để chữa lành vết thương [4]. Hoa và lá cũng được sử dụng trong y học dân gian để ngăn ngừa và điều trị ung thư vú. Hoa được phụ nữ sử dụng khi ủ như một loại thuốc bổ vì nó hỗ trợ ngăn ngừa ung thư vú và cầm máu tử cung. Cây đã được đưa vào các chế phẩm thảo dược để điều trị chứng mất trí và chứng động kinh [4].

Toàn cây được coi là thuốc tẩy giun sán, lợi tiểu và tiêu độc [4]. Ở Malaya, phụ nữ dùng hoa ngâm rửa khuôn mặt. Những bông hoa được sử dụng như một loại thuốc đắp lên ngực của phụ nữ để giảm tiết sữa. Lá và rễ của cây được sử dụng theo truyền thống để điều trị viêm, sốt và đau [4].

Dầu hoa nhài có một loạt các ứng dụng y học và được sử dụng trong nước hoa, xà phòng, hương liệu và ngành công nghiệp mỹ phẩm. Về mặt y học, nó được 8 Luan van sử dụng để điều trị da khô, nhờn, kích ứng và nhạy cảm, họ khó chịu, giảm đau cơ và điều trị bong gân, chống trầm cảm, sát trùng, chống co thắt, an thần và bổ tử cung [4]. Các bộ phận được sử dụng là: hoa, rễ, lá [4]. Tác dụng dược lý Tác dụng kháng khuẩn Hiệu quả kháng khuẩn của chất chiết xuất petroleum ether, chloroform, ethyl acetate và ethanol của lá Jasminum sambac đã được kiểm tra đối với Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa cũng như chống lại Aspergillus niger, Aspergillus flavus bằng phương pháp khuếch tán nấm Candida albicans.

Vùng ức chế trung bình được tạo ra bởi các chất chiết xuất trong các thử nghiệm khuếch tán đĩa nằm trong khoảng từ 5- 27 mm. Các chiết xuất etanol của Jasminum sambac cho thấy hoạt tính kháng khuẩn cao nhất, trong khi ethyl acetat, petroleum ether và chloroform cho thấy hoạt tính kháng khuẩn vừa phải đối với các chủng vi sinh vật được thử nghiệm [4]. Hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất butanol của hoa Jasminum sambạc được đánh giá chống lại vi khuẩn gây bệnh cho người: Salmonella, Staphylococcus, Pseudomonas, Vibrio cholera, Streptococcus, Corynebacterium, Enterobacter aerogenes, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris và Escherichia coli. Nó cho thấy hoạt tính kháng khuẩn chống lại Salmonella (14 mm), Vibrio cholera (15 mm), Streptococcus (14 mm), Corynebacterium (12 mm), Proteus vulgaris (14 mm) và coli (13 mm) [29].

Tác dụng diệt côn trùng Các hoạt động diệt ấu trùng của chiết xuất ethanolic [100, 200, 500 ppm] của bốn loài thực vật Philippine (Citrus microcarpa, Chromolaena odorata, Nephelium lappaceum, và Jasminum sambac) đã được đánh giá chống lại ấu trùng giai đoạn thứ ba của muỗi sốt xuất huyết, Aedes aegypti. Dịch chiết etanolic của 9 Luan van Jasminum sambac gây ra tỷ lệ chết 11,3, 13,3 và 26,7% ở nồng độ 100, 200, 500 ppm tương ứng sau 72 giờ [28]. Tác dụng giảm đau, hạ sốt và chống viêm Chiết xuất ethanol [50%] của lá cây Jasminum sambac đã được nghiên cứu về hoạt tính chống viêm bằng cách sử dụng carrageenan gây phù chân sau và mô hình u hạt ở chuột. Chiết xuất [100, 200 và 400 mg/kg bw] làm giảm đáng kể tình trạng phù chân và trọng lượng u hạt phụ thuộc vào liều lượng.

Dịch chiết ở 400 mg/kg bw, thể hiện hoạt tính chống viêm tiềm năng, có thể so sánh với dichlofenac [15]. Tác dụng chống oxy hóa Tiềm năng chống oxy hóa của chiết xuất hydroalcoholic của lá Jasminum sambac đã được kiểm tra bằng cách sử dụng xét nghiệm DPPH, việc loại bỏ oxit nitric và hydrogen peroxide đã được xác định. Tổng công suất khử và khả năng chống oxy hóa của chiết xuất hydrocacbon cũng được đánh giá.