Phân lập và xác định đặc tính sinh học của virus PEDV ở lợn nuôi tại Thái Nguyên và Hưng Yên

• Tác giả: Trần Thị Nhàn
• Người hướng dẫn: PGS. Lê Văn Phan
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Phân lập và xác định một số đặc tính sinh học của chủng PEDV (Porcine Epidemic Diarrhea Virus) ở lợn nuôi tại Thái Nguyên và Hưng Yên
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2018
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 2. DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• 3. DANH MỤC BẢNG BIỂU
• 4. DANH MỤC HÌNH
• 5. TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 6. THESIS ABSTRACT
• 7. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 8. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI
• 9. PHẠM VI NGHIÊN CỨU
• 10. NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI, Ý NGHĨA KHOA HỌC HOẶC THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
• 11. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 11.1. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ VIRUS GÂY DỊCH TIÊU CHẢY CẤP TRÊN LỢN (PEDV)
• 11.2. Hình thái cấu trúc và bộ gen virus
• 11.3. Các loại protein cấu trúc của PEDV
• 11.4. Đặc tính nuôi cấy của virus PED trên tế bào
• 11.5. Tính không đồng nhất
• 11.6. Tình hình nghiên cứu trong nước và nước ngoài
• 11.6.1. Nghiên cứu trong nước
• 11.6.2. Nghiên cứu nước ngoài
• 11.7. Tình hình sử dụng vắc-xin phòng PED trên thế giới và Việt Nam
• 11.7.1. Trên thế giới
• 11.7.2. Tại Việt Nam
• 12. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 12.1. Địa điểm nghiên cứu
• 12.2. Thời gian nghiên cứu
• 12.3. Đối tượng - Vật liệu nghiên cứu
• 12.4. Đối tượng - Nguyên liệu nghiên cứu
• 12.5. Môi trường, hóa chất
• 12.6. Thiết bị, dụng cụ dùng trong phòng thí nghiệm
• 12.7. Nội dung nghiên cứu
• 12.8. Phương pháp nghiên cứu
• 12.8.1. Phương pháp thu thập và xử lí mẫu
• 12.8.2. Phương pháp phân lập virus PED trên tế bào Vero
• 12.8.3. Phương pháp kiểm tra vô trùng và thuần khiết
• 12.8.4. Phương pháp RT – PCR
• 12.8.5. Phương pháp chuẩn độ hiệu giá virus (TCID50/ml)
• 12.8.6. Phương pháp kiểm tra tính độc
• 12.8.7. Phương pháp chẩn đoán nhanh PEDV bằng PED-Ag test kit
• 12.8.8. Phương pháp xác định đường cong sinh trưởng của virus
• 12.8.9. Phương pháp giải trình tự gen
• 12.8.10. Phương pháp xây dựng cây sinh học phân tử
• 13. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 13.1. Kết quả thu thập mẫu bệnh phẩm dương tính với PEDV trên lợn
• 13.2. Kết quả phân lập virus từ các mẫu bệnh phẩm trên tế bào Vero
• 13.3. Kết quả phân lập PEDV
• 13.4. Kết quả kiểm tra vô trùng và thuần khiết của hai chủng virus phân lập
• 13.5. Kết quả xác định một số đặc tính sinh học của chủng PEDV phân lập
• 13.5.1. Khả năng thích nghi và gây bệnh tích tế bào của 2 chủng PEDV phân lập
• 13.5.2. Hiệu giá 2 chủng virus PED phân lập
• 13.5.3. Đường cong sinh trưởng của 2 chủng virus PED
• 13.6. Kết quả xác định độc lực của 2 chủng PEDV
• 13.7. Kết quả phân tích giải trình tự gen S của 2 chủng PEDV
• 13.8. Kết quả so sánh tương đồng về nucleotide và axit amin
• 14. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tổng quan về virus PEDV và tác động của nó ở lợn

Virus PEDV (Porcine Epidemic Diarrhea Virus) là một loại virus RNA thuộc họ Coronaviridae, gây ra bệnh tiêu chảy cấp ở lợn. Bệnh này có thể gây tử vong cao, đặc biệt là ở lợn con dưới 7 ngày tuổi. Tại Việt Nam, virus này đã gây ra nhiều thiệt hại kinh tế cho ngành chăn nuôi lợn. Nghiên cứu về virus PEDV là cần thiết để hiểu rõ hơn về đặc tính sinh học của nó và tìm ra các biện pháp phòng ngừa hiệu quả.

1.1. Đặc điểm sinh học của virus PEDV

Virus PEDV có cấu trúc gen RNA đơn sợi, kích thước khoảng 28kb, với nhiều khung đọc mở (ORF) mã hóa cho các protein cấu trúc. Đặc tính sinh học của virus này bao gồm khả năng lây nhiễm cao và gây bệnh nặng cho lợn con.

1.2. Tình hình dịch bệnh PED tại Thái Nguyên và Hưng Yên

Tại Thái Nguyên và Hưng Yên, dịch bệnh PED đã bùng phát mạnh mẽ, gây thiệt hại lớn cho người chăn nuôi. Việc nghiên cứu và phân lập virus PEDV từ thực địa là cần thiết để có biện pháp phòng ngừa hiệu quả.

II. Vấn đề và thách thức trong nghiên cứu virus PEDV

Mặc dù đã có nhiều nghiên cứu về virus PEDV, nhưng vẫn còn nhiều thách thức trong việc phân lập và xác định các đặc tính sinh học của virus này. Sự biến đổi gen của virus và sự khác biệt giữa các chủng virus là một trong những vấn đề lớn.

2.1. Khó khăn trong việc phân lập virus PEDV

Phân lập virus PEDV từ mẫu bệnh phẩm là một quá trình phức tạp, đòi hỏi kỹ thuật cao và điều kiện phòng thí nghiệm nghiêm ngặt. Nhiều mẫu bệnh phẩm không đạt yêu cầu do tạp nhiễm.

2.2. Sự biến đổi gen của virus PEDV

Virus PEDV có khả năng biến đổi gen nhanh chóng, dẫn đến sự xuất hiện của các chủng mới. Điều này gây khó khăn trong việc phát triển vắc-xin hiệu quả và quản lý dịch bệnh.

III. Phương pháp nghiên cứu virus PEDV hiệu quả

Để nghiên cứu virus PEDV, các phương pháp hiện đại như RT-PCR, nuôi cấy tế bào và giải trình tự gen được áp dụng. Những phương pháp này giúp xác định chính xác sự hiện diện và đặc tính của virus.

3.1. Phương pháp thu thập và xử lý mẫu

Mẫu bệnh phẩm được thu thập từ lợn con bị tiêu chảy và xử lý bằng kỹ thuật RT-PCR để xác định sự có mặt của virus PEDV. Quá trình này đảm bảo độ chính xác cao trong việc phân lập virus.

3.2. Phương pháp nuôi cấy tế bào Vero

Nuôi cấy tế bào Vero là phương pháp chính để phân lập virus PEDV. Tế bào Vero cho phép virus phát triển và sinh sản, từ đó thu thập được virus để nghiên cứu.

IV. Kết quả nghiên cứu và ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy đã phân lập thành công hai chủng virus PEDV từ mẫu bệnh phẩm. Những chủng này có khả năng gây bệnh cao và có thể được sử dụng để phát triển vắc-xin phòng bệnh.

4.1. Kết quả phân lập virus PEDV

Hai chủng virus PEDV đã được phân lập thành công từ mẫu bệnh phẩm, cho thấy hiệu giá virus đạt cao và không có tạp nhiễm. Điều này mở ra cơ hội cho việc nghiên cứu sâu hơn về virus.

4.2. Ứng dụng trong sản xuất vắc xin

Các chủng virus PEDV phân lập được sẽ là nguồn nguyên liệu quan trọng cho việc phát triển vắc-xin phòng bệnh tiêu chảy cấp ở lợn, giúp giảm thiểu thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi.

V. Kết luận và triển vọng nghiên cứu virus PEDV

Nghiên cứu về virus PEDV là rất quan trọng trong việc kiểm soát dịch bệnh và phát triển vắc-xin hiệu quả. Các kết quả đạt được từ nghiên cứu này sẽ là cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo.

5.1. Tầm quan trọng của nghiên cứu virus PEDV

Nghiên cứu virus PEDV không chỉ giúp hiểu rõ hơn về đặc tính sinh học của virus mà còn hỗ trợ trong việc phát triển các biện pháp phòng ngừa hiệu quả.

5.2. Hướng đi tương lai trong nghiên cứu

Cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về các chủng virus PEDV mới và phát triển các vắc-xin hiệu quả hơn để bảo vệ đàn lợn khỏi dịch bệnh.