Khóa luận tốt nghiệp công nghệ sinh học evaluate the antimicrobial and antioxidant activities of some lacticaseibacillus rhamnosus and streptococcus thermophilus strains

Khóa luận đánh giá hoạt tính kháng khuẩn và chống oxy hóa của một số chủng Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus.

• Tác giả: Truong Ngoc Hai Yen
• Người hướng dẫn: Assoc. Douglas Shyu
• Trường học: Nong Lam University Ho Chi Minh City
• Chuyên ngành: Biotechnology
• Đề tài: Đánh Giá Hoạt Động Kháng Khuẩn và Chống Oxy Hóa của Các Chủng Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus
• Loại tài liệu: Undergraduate thesis
• Năm xuất bản: 2024
• Địa điểm: Thu Duc City

Mục lục chi tiết

• ACKNOWLEDGMENTS
• CONFIRMATION AND COMMITMENT
• ABSTRACT
• TÓM TẮT
• 1. CHƯƠNG 1: OVERVIEW
• 1.1. Synthetic antioxidants such as butylated hydroxytoluene (BHT), butylated hydroxy-anisole (BHA), and n-propyl gallate (PG)
• 1.2. Objective
• 1.3. Contents
• 2. CHƯƠNG 2: OVERVIEW
• 2.1. Introduction of lactic acid bacteria
• 2.2. Application
• 2.3. Introduction of Lacticaseibacillus rhamnosus
• 2.4. Studies related to Lacticaseibacillus rhamnosus
• 2.5. Introduction of Streptococcus thermophilus
• 2.6. Studies related to Streptococcus thermophilus strains
• 2.7. Introduction of reactive oxygen species
• 2.8. Introduction of some pathogenic microorganisms
• 3. CHƯƠNG 3: MATERIALS AND METHODS
• 3.1. Materials and equipment
• 3.2. Preparation of pathogenic
• 3.3. Cell-free supernatants (CFSs) preparation
• 3.4. Intact cells (ICs) preparation
• 3.5. Agar diffusion method
• 3.6. Antibiotic susceptibility testing method
• 3.7. Determination of the DPPH radical scavenging effect
• 3.8. Superoxide anion scavenging activity
• 3.9. Hydroxyl radical scavenging activity
• 4. CHƯƠNG 4: RESULTS AND DISCUSSION
• 4.1. Antibiotic susceptibility testing
• 4.2. DPPH scavenging method
• 4.3. Superoxide anion scavenging ability
• 4.4. Hydroxyl radical scavenging ability
• 5. CHƯƠNG 5: CONCLUSIONS AND SUGGESTIONS
• LIST OF ABBREVIATIONS
• LIST OF TABLES
• LIST OF FIGURES

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Hoạt Động Kháng Khuẩn và Chống Oxy Hóa

Hoạt động kháng khuẩn và chống oxy hóa của các chủng vi khuẩn lactic như Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus đã thu hút sự chú ý của nhiều nhà nghiên cứu. Những vi khuẩn này không chỉ có khả năng ức chế sự phát triển của các vi sinh vật gây bệnh mà còn có tác dụng chống oxy hóa mạnh mẽ. Nghiên cứu này nhằm mục đích đánh giá các hoạt động này, từ đó mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng vi khuẩn lactic trong thực phẩm chức năng và y học.

1.1. Đặc Điểm Của Vi Khuẩn Lacticaseibacillus rhamnosus

Vi khuẩn Lacticaseibacillus rhamnosus là một trong những chủng vi khuẩn lactic phổ biến, được biết đến với khả năng sống sót trong môi trường axit và khả năng kháng lại các tác nhân gây bệnh. Chúng có thể sản xuất axit lactic, giúp bảo quản thực phẩm và cải thiện sức khỏe đường ruột.

1.2. Đặc Điểm Của Vi Khuẩn Streptococcus thermophilus

Streptococcus thermophilus là một vi khuẩn lactic quan trọng trong sản xuất sữa chua và phô mai. Chúng không chỉ giúp lên men mà còn có khả năng kháng khuẩn và chống oxy hóa, góp phần bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng.

II. Vấn Đề và Thách Thức Trong Nghiên Cứu Hoạt Động Kháng Khuẩn

Mặc dù Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus có nhiều tiềm năng, nhưng vẫn tồn tại một số thách thức trong việc nghiên cứu và ứng dụng. Một trong những vấn đề chính là khả năng kháng thuốc của các vi khuẩn gây bệnh, điều này làm giảm hiệu quả của các liệu pháp điều trị hiện tại. Hơn nữa, việc xác định chính xác các cơ chế hoạt động của các chủng vi khuẩn này cũng là một thách thức lớn.

2.1. Kháng Thuốc Của Vi Khuẩn Gây Bệnh

Sự gia tăng kháng thuốc trong các vi khuẩn gây bệnh như Escherichia coli và Staphylococcus aureus đã làm cho việc điều trị trở nên khó khăn hơn. Điều này nhấn mạnh tầm quan trọng của việc tìm kiếm các phương pháp điều trị mới từ vi khuẩn lactic.

2.2. Cơ Chế Hoạt Động Của Vi Khuẩn Lactic

Việc hiểu rõ cơ chế hoạt động của Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus trong việc kháng khuẩn và chống oxy hóa là rất cần thiết. Nghiên cứu này sẽ giúp xác định các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của chúng trong việc ức chế vi sinh vật gây bệnh.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Hoạt Động Kháng Khuẩn

Nghiên cứu này sử dụng phương pháp thạch khuếch tán để đánh giá hoạt động kháng khuẩn của các chủng Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus. Các thí nghiệm được thực hiện trên nhiều loại vi khuẩn gây bệnh khác nhau, nhằm xác định khả năng ức chế của các chủng này. Kết quả sẽ cung cấp thông tin quan trọng về tiềm năng ứng dụng của chúng trong y học.

3.1. Phương Pháp Thạch Khuếch Tán

Phương pháp thạch khuếch tán là một kỹ thuật phổ biến để đánh giá hoạt động kháng khuẩn. Bằng cách sử dụng môi trường thạch, các nhà nghiên cứu có thể quan sát sự ức chế sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh khi tiếp xúc với các chủng vi khuẩn lactic.

3.2. Các Loại Vi Khuẩn Được Nghiên Cứu

Nghiên cứu này tập trung vào các vi khuẩn gây bệnh như Escherichia coli, Staphylococcus aureus, và Candida albicans. Việc đánh giá khả năng kháng khuẩn của các chủng vi khuẩn lactic đối với những vi khuẩn này sẽ giúp xác định tiềm năng ứng dụng trong thực tiễn.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu Hoạt Động Chống Oxy Hóa

Kết quả nghiên cứu cho thấy các chủng Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus đều có hoạt động chống oxy hóa đáng kể. Các phương pháp như DPPH và hydroxyl radical scavenging đã được sử dụng để đánh giá khả năng này. Kết quả cho thấy rằng dịch chiết từ các chủng vi khuẩn này có khả năng loại bỏ các gốc tự do, góp phần bảo vệ tế bào khỏi tổn thương do oxy hóa.

4.1. Phương Pháp Đánh Giá Hoạt Động Chống Oxy Hóa

Các phương pháp như DPPH và hydroxyl radical scavenging được sử dụng để đánh giá hoạt động chống oxy hóa. Những phương pháp này cho phép xác định khả năng loại bỏ các gốc tự do của các chủng vi khuẩn lactic.

4.2. Kết Quả Hoạt Động Chống Oxy Hóa

Kết quả cho thấy rằng dịch chiết từ Streptococcus thermophilus có hoạt động chống oxy hóa cao hơn so với Lacticaseibacillus rhamnosus. Điều này cho thấy tiềm năng của các chủng vi khuẩn này trong việc phát triển các sản phẩm thực phẩm chức năng.

V. Ứng Dụng Thực Tiễn Của Vi Khuẩn Lactic

Các chủng vi khuẩn lactic như Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus có thể được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực, từ thực phẩm chức năng đến y học. Chúng không chỉ giúp cải thiện sức khỏe đường ruột mà còn có khả năng kháng khuẩn và chống oxy hóa, mở ra nhiều cơ hội mới cho nghiên cứu và phát triển sản phẩm.

5.1. Ứng Dụng Trong Thực Phẩm Chức Năng

Vi khuẩn lactic được sử dụng rộng rãi trong sản xuất thực phẩm chức năng. Chúng giúp cải thiện sức khỏe đường ruột và tăng cường hệ miễn dịch, mang lại lợi ích cho sức khỏe người tiêu dùng.

5.2. Tiềm Năng Trong Y Học

Nghiên cứu về hoạt động kháng khuẩn và chống oxy hóa của các chủng vi khuẩn lactic có thể mở ra hướng đi mới trong điều trị bệnh. Việc phát triển các sản phẩm từ vi khuẩn lactic có thể giúp giảm thiểu sự phụ thuộc vào kháng sinh.

VI. Kết Luận và Tương Lai Của Nghiên Cứu

Nghiên cứu về hoạt động kháng khuẩn và chống oxy hóa của Lacticaseibacillus rhamnosus và Streptococcus thermophilus đã chỉ ra tiềm năng lớn của các chủng vi khuẩn này trong việc phát triển các sản phẩm thực phẩm chức năng và y học. Tương lai của nghiên cứu này hứa hẹn sẽ mang lại nhiều ứng dụng mới, góp phần cải thiện sức khỏe cộng đồng.

6.1. Hướng Nghiên Cứu Tương Lai

Cần tiếp tục nghiên cứu để hiểu rõ hơn về cơ chế hoạt động của các chủng vi khuẩn lactic. Việc phát triển các sản phẩm mới từ vi khuẩn này có thể mang lại nhiều lợi ích cho sức khỏe.

6.2. Ứng Dụng Trong Ngành Công Nghiệp

Các ứng dụng trong ngành công nghiệp thực phẩm và dược phẩm sẽ là một trong những hướng đi quan trọng trong tương lai. Việc khai thác tiềm năng của vi khuẩn lactic có thể giúp phát triển các sản phẩm an toàn và hiệu quả hơn.

Trích đoạn nội dung tài liệu

MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY HO CHI MINH CITY FACULTY OF BIOLOGICAL SCIENCES EVALUATE THE ANTIMICROBIAL AND ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF SOME Lacticaseibacillus rhamnosus AND Streptococcus thermophilus STRAINS. Major : BIOTECHNOLOGY Student name : TRUONG NGOC HAI YEN Student ID : 19126242 Academic year : 2019 - 2023 Thu Duc City, 02/2024. MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY HO CHI MINH CITY FACULTY OF BIOLOGICAL SCIENCES UNDERGRADUATE THESIS EVALUATE THE ANTIMICROBIAL AND ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF SOME Lacticaseibacillus rhamnosus AND Streptococcus thermophilus STRAINS. Supervisor Student Assoc.

DOUGLAS SHYU TRUONG NGOC HAI YEN Assoc. NGUYEN BAO QUOC Thu Duc City, 02/2024. ACKNOWLEDGMENTS First of all, I would like to express my sincere thanks to my two supervisors Assoc. Dr DOUGLAS SHYU and Assoc.

DrNGUYEN BAO QUOC for their patience and wisdom, and for helping me conduct my thesis in a detailed and analytical way. This accomplishment would not have been possible without their guidance and the opportunity they provided me to undertake this project in BT306 lab and TEEP program. I would like to express my profound gratitude for their invaluable advice and patience throughout this journey. The experience of working with them and the other lab members has been truly enriching.

I would also like to extend my deepest gratitude to my labmates in BT306 (NPUST — Taiwan) and RIBE 304 (NLU - Vietnam). Their unwavering support, insightful thoughts, and inspiring ideas played a crucial role in my research. I consider myself fortunate to have such wonderful friends and colleagues by my side throughout this journey. Finally, I cannot express enough gratitude to my family.

Their unconditional support and encouragement have been my anchor during the challenging times. They believed in me, even when I doubted myself, and for that, I am eternally grateful. I am deeply thankful for everything and it's been a privilege learning under their mentorship. CONEIRMATION AND COMMITMENT My name is Truong Ngoc Hai Yen, student ID: 19126242, class: DH19SHD (Phone number: 0797783156, email: [e-mail]), of Biotechnology, Nong Lam University Ho Chi Minh city.

This is my undergraduate thesis which was conducted by myself. I hereby declare that, all the information in this document has been obtained and presented in accordance with academic rules and ethical conduct. I take full responsibility in front of the committee for these commitments. Thu Duc city, February 28", 2024 Student’s signature Truong Ngoc Hai Yen hị ABSTRACT Lactic acid bacteria (LAB) are one of the most significant groups of probiotic organisms, which are frequently used in a variety of fields including medical treatment, food industry, and livestock production.

These bacteria have attracted scientific attention due to their probiotic, antimicrobial and antioxidant properties since they were first discovered by Louis Pasteur in 1857. In this research, the study was conducted to screen the antimicroorganism and antioxidant activities of 8 strains of LAB including 2 species: L. The antimicrobial tests, using agar-diffusion, were carried out against various pathogens like Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella enterica, Enterococcus faecium, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Bacillus cereus, and Candida albicans. Results showed no inhibitory activity against these 7 pathogens.

Regarding antioxidant properties, several methods including DPPH scavenging, superoxide scavenging, and hydroxyl radical scavenging were conducted using cell-free supernatant (CFS) and intact cells (ICs) extract. The results showed that all of the target strains possessed antioxidant activity as determined by those methods with both types of extracts, in with the cell-free supernatant displayed higher activity than the intact cell, and S. thermophilus strains showed higher activities in eliminating superoxide and hydroxyl radical when compared to LZ. In addition, antibiotic susceptibility test was also performed, LZ.

rhamnosus was obsered to be resistant to vancomycin (3/3), chloramphenicol (3/3), kanamycin (2/3), and ampicillin (1/3), whereas, S. thermophilus was resistant to kanamycin (5/5), and chloramphenicol (4/5), all 8 studied strains showed low susceptibility to sulfamethoxazole (MIC higher than 256 pg/mL). The findings of this study suggest that the antioxidant characteristics of the studied strains mainly exist outside the cell and can be effectively harnessed by identifying them in the culture supernatant, in with CFSs of S. thermophilus Jt9 was suggested as promise sources against oxidative stress and warrants further investigation.

Keyword: Lacticaseibacillus rhamnosus, Streptococcus thermophilus, lactic-acid bacteria, antimicrobial activities, antioxidant, antibiotic. 1H TÓM TẮT Vi khuẩn lactic (LAB) là một trong những nhóm probiotic quan trọng nhất, thường được sử dụng trong nhiều lĩnh vực bao gồm điều trị y tế, ngành công nghiệp thực pham và chăn nuôi. Những vi khuân này đã thu hút sự chú ý của giới khoa học đo tính chất probiotic, kháng khuẩn và chống oxi hóa của chúng từ khi được Louis Pasteur khám pha ra lần đầu tiên vào năm 1857. Trong nghiên cứu này, việc nghiên cứu được tiên hành dé sàng lọc hoạt động kháng khuẩn, kháng nam và chống oxi hóa của 8 chủng LAB bao gồm2 loài: 7.

Sử dụng phương pháp thạch khuếch tán để thí nghiệm kháng nhiều loại tác nhân như Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella enterica, Enterococcus faecium, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Bacillus cereus, va Candida albicans. Kết quả cho thay không có hoạt động ức chế đối với 7 loại tác nhân này. Đối với tính chất chống oxi hóa, một số phương pháp bao gồm bắt giữ DPPH, gốc superoxide và gốc hydroxyl đã được tiễn hành sử dụng mau dịch nồi (CFS) va dịch tế bào nguyên (ICs). Kết quả cho thấy tất cả các chủng mục tiêu đều có hoạt động chống oxi hóa được xác định bởi những phương pháp này với cả hai loại chiết xuất, trong đó dịch nồi hiển thị hoạt động cao hơn tế bào nguyên, và chung S.

thermophilus hién thi hoạt động cao hon trong việc loại bỏ gốc superoxide và gốc hydroxyl so với chủng L. Ngoài ra, thử nghiệm độ nhạy cảm với kháng sinh cũng được thực hiện, 7. rhamnosus được quan sát có khả năng khang với vancomycin (3/3), chloramphenicol (3/3), kanamycin (2/3), va ampicillin (1/3), trong khi đó, S. thermophilus kháng với kanamycin (5/5), va chloramphenicol (4/5), tat cả 8 chủng được nghiên cứu cho thay độ nhạy thấp với sulfamethoxazole (MIC > 256 pg/mL).

Những phat hiện của nghiên cứu này gợi ý rằng các đặc tính chống oxi hóa của các chủng được nghiên cứu chủ yếu tồn tại bên ngoài tế bào và có thê được khai thác hiệu quả bằng cách xác định chúng trong dịch nồi nuôi cấy, trong đó CFSs của S. thermophilus Jt9 được đề xuất là nguồn tiềm năng chống lại căng thăng oxi hóa và đáng được nghiên cứu thêm. Từ khóa: Lacticaseibacillus rhamnosus, Streptococcus thermophilus, vi khuẩn lactic, hoạt động khang khuẩn, chống oxi hóa, khang sinh. IV TABLE OF CONTENTS Page ACKNOWLEDGMUENIS vss ssnsssssssnssasassssnceess ESiS.5GS:3M913238448eSEESaag93S8Sa§SEE4018iC883,3ã8gã23.00-836 i CONFIRMATION AND COMMITMENT .cececceceeccecceceeeceeceeeceeeeeeeeceseeseeesereereeees 1 ABSTRACT sscccatwosasomminasumnemcuc een mans EE 11 (Ener iv IV.

V LIST OF ABBREV LATIONS tesssssscessesonssnnessssnsersaense srenevesnecsssesrovesssopseaspeeeseseneneseeons vill LIST OF TABLES, apssssscsssssssnanassasnuxenssevaxasx ences snssassaaranesazsnasanecennsansans aessasenaweanectoansaneaseaes x LIST OF 0600. 21121221129 HH 1H HH HH re 1 PS Ocul geen rece terete ecrete eect eee tere cre cere sere eer ee ee 1 Bee CỊDĐ]GGV eee ee ee ee ee 2 1,8, CHÍ cence ccscaren sen neneeseninemccnme miner es orem EEE nen 2 CHAPTER. REV IE W sevcssssesosssrensaneswenesuaewaanesnonwseweevevsaniavessvectoupeusavses 3 2. Introduction of lactre acid, baCteia .ÔỎ 3 21D ip PM CaO ssysggisotcSgBISS NIQLDDEIEERRGRIGEESIEOESRNMSGSEEIEDEEEEEGDHEDSSIEESREIGHSEEGITGDHESUSHQĐĐĐSN0 008,86) 2.

Introduction of Lacticaseibacillus rhamnosus .-cS+cS-cSsesseseeeerrrrrrrrrrxre 4 22iLa OVERVIEW Gd TAR ON OTN Y serevecemsaraccsnrenersnemmanuamenuneemmma re EE! 4 2. Studies related to Lacticaseibacillus rhaMMOSUS. Introduction of Streptococcus thermophilus .1 OVELVIEW atid TAXONOMY serene sczsnernrsenaseaen nremecnenamene ua emannnmneeenenes 6 23D CAPAC LE TIS UI OS brestecoses retin emetic ne etme tc 00023200100 eo a 2.3 Studies related to Streptococcus thermophilus strains. Introduction of reactive OXYGEN SD€CI€S.

Introduction of some pathogenic microorganisms. 9 các su ESC METI GHIA C OIE a. ce cs Sa Oc Sa Soe aces Sasa ec Seen Seale eae 10 2 Sida SIPHVLOCOCCUS QUTCUS cecsmexcxssrecscraceratemivemeraintnronscte ca acc 10 2D A HD GHI scacosnssnanonwansassavansinnsstoasnanstnn vom notoanendinns sontetiencisheuisuntnineantisntwaseatsine 11 DicDid iEEFLCPOCOCOUS [AE CTU excess tạng tp oes gOI8Si10ã83033dl-83IS8900988400801046188i-20EMNGQGESRIGERGSINGGIHERGESSSSE 11 2. BACIIUS GBIl€ lút 161013341335813511158113113183XãS533S1553G333S835358S3885553513E51136L43XEXAEEBSBL35584355E 13 CHAPTER 3.

MATERIALS AND METHODS. Time aTBTĐldEESOEESÍUWPcsscessseoitirsiedsdgoBztndtgisEtiski8niuteSiu5guzz00g0n80018i030g308/430'5q00:E.qu25ogg244inSG 14 3. Materials and equipment 8. WE CLO OTS ATISTIG toss ses ss s6 1á hồ HH5 H6 senza nu SS: E514g838930538.

Required tools, equipments and chemicaÌS. MethodS cress eeaun arenes ease neey rent cemmanan anne teaadn deters ence asmaretiniauecuees 15 3. thermophilus stra1ms. Preparation of pathogenic ImICTOOTØATIISINS.

Cell-free supernatants (CFSs) preparatIOI.34, Intact cells: (ICs) DEGIDMESIOH ssssavsosczttasbeioiostsittgidtoglsstGsttoasiitilststBiBE4loiriogigs4e 16 323. Agar Gitius one tho so: csssxssisssssecLsrse15220256051E88863833495%38160630018645u08135gi601E6340123014i083. Antibiotic susceptibility testing method. Determination of the DPPH radical scavenging effect.

Superoxide anion scavenging aCfIVIẨY.-- --- - -c- c- + ss xxx nh ng ngư 19 3. Hydroxyl radical scavenging aC{IVIẨY.3210: SafIsHo:atalysistHiGNO(SiocessssesrenasosibndiiriooodgusientddioinsiibditSoifui9c500gi8080gi0u020g60004:nil 20 CHAPTER 4. RESULTS AND DISCUSSION. Antibiotic susceptibility testing 1077.

24 425i HHGXIOA7iL tGE HD ee 26 4. 1)P PH, scavenging method ns. eanuerumeomnsore onan 26 VI 4. Superoxide anion scavenging abIÏIfY.

Hydroxyl radical scavenging abIÏIEV. CONCLUSIONS AND SUGGESTIONS. CONCLUSIONS sccercunamenenecemmnsesew aces eee 35 5. -EiTSG22IG7100A3100380071/30000258/8545-02i-L302HE4E4208220i06.c cee cececcesceseeseeseesessesececenecsccnesaeesecseesecaeesesaesacssensesscsecseesecsecaesaeeaeeaeeatesenaeseeee vii LIST OF ABBREVIATIONS A : Ampicillin AA : Ascorbic acid ANOVA : Analysis of Variance ATCC : American type culture selection atm : Standard atmosphere BHA : Butylated Hydroxyanisole BHT : Butylated Hydroxyltoluene BP : Breakpoint CAT : Catalase CEF : Cefotaxime CFS : Cell-free supernatant CFU : Colony forming unit CH : Chloramphenicol CIP : Ciprofloxacin DNA : Deoxyribonucleic acid DPPH : 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl E : Erythromycin EFSA : European Food Safety Authority et al.

: and others GPx : Glutathione peroxidase GR : Glutathione reductase GRAS : Generally recognized as safe HRS : Hydroxyl radical scavenging vill ICs : Intact cells K : Kanamycin LA : Lactic Acid LAB : Lactid acid bacteria MBC : Minimal Bactericidal Concentration MIC : Minimal Inhibitory Concentration MRS : De Man, Rogosa, and Sharpe medium NA : Nutrient Agar NPUST : National Pingtung University of Science and Technology OD : Optical density PBS : Phosphate buffer saline PG : n-propyl gallate QPS : Qualified presumption of safety RI : Rifampicin ROS : Reactive oxygen species SOD : Superoxide dismutase SU : Sulfamethoxazole TE : Tetracycline UV : Ultraviolet V : Vancomycin 1X LIST OF TABLES Page Table 3. Microbialogical breakpoints categorising bacteria as resistant. Minimum inhibitory concentration (MIC) values. Minimum bactericidal concentration (MBC) values.----- --+- 22 LIST OF FIGURES Page Figure 2.

Antimicrobial subtances of LAB.- - c5 St Sx St ssrsrksrrsrrrrrrrree 3 Figure 2. Proposed modes of action of probiotic LAB antioxidants. Colony morphology and cell morphology of L. Colony morphology of S.

thermophilus Jt1, Jt4, Jt5, Jt9. 96-wells plate with MIC experiment of S. thermophilus Jt\ after 24 hours incubated. st Si ee ie creel en es ee eto 22 Figure 4.

Inhibition growth of pathogens by L.cccceeceeeeeeeeee teens 25 Figure 4. Inhibition growth of pathogens by supernatant of S. Inhibition growth of pathogens by suspension of S. DPPH free radical scavenging activity (0).

96-wells plate with DPPH scavenging by ICs of L. Superoxide anion scavenging activity (9). 96-wells plate with superoxide anion scavenging by CEFSs. Hydroxyl scavenging activity (%) .eceeceeceeeeeeeeeeeeeteeeeeeteteeetettteteene dL Figure 4.

96-wells plate with hydroxyl scavenging by CFSs of S. icc ti i i ee i lsat edb gone. che 31 XI CHAPTER 1. Overview Synthetic antioxidants such as butylated hydroxytoluene (BHT), butylated hydroxy-anisole (BHA), and n-propyl gallate (PG) exhibit strong antioxidant against various oxidation systems; however, their use in food also have adverse effects such as liver damage and carcinogenic effects, which led to be restricted or prohibited in certain countries (Osuntoki, 2010).

Besides that, after the discovered revolution in the “golden era”, the main problems of chemotherapy were possessed when some exciting compounds (such as tetracyclines, cephalosporins, aminoglycosides, and macrolides) are in danger of losing their efficacy because of the increase in microbial resistance (Mayers, 2009) which led to the overuse of antimicrobial products and the growing emergence of various resistant pathogens.