MỞ ĐẦU Tình hình chăn nuôi cá sấu vì mục đích thương mại ở Thành phố Hồ Chí Minh phát triển nhanh trong những năm gần đây.HCM và các vùng lân cận là nơi có điều kiện khí hậu phù hợp cho sự phát triển và sinh trưởng của cá sấu, việc phát triển các trại nuôi này có thể xem như một trong những biện pháp phát triển kinh tế. Theo các số liệu được công bố, hiện nay Việt Nam có trên 1.000 trại cá sấu với quy mô khác nhau từ một vài cá thể tới những trại có hàng nghìn cá thể (Sở Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn Tp. Năm 2020 tổng đàn cá sấu trên địa bàn TP.000 con, giảm một nữa so với giai đoạn 2011-2016. Để tạo điều kiện phát triển nghề nuôi cá sấu, góp phần cải thiện đời sống người dân ngoại thành, nâng cao giá trị sản xuất nông nghiệp.HCM ban hành Chương trình phát triển quản lý, phát triển cá sấu trong giai đoạn 2021-2025 (UBND – TP.
Hiện nay, lợi nhuận chủ yếu của người sản xuất cá sấu đến từ bộ da của cá sấu. Trong khi đó các bộ phận có tiềm năng khác như thịt, xương chưa được quan tâm, xem như là một phụ phẩm của ngành chăn nuôi, do đó các bộ phận này cần được khai thác để tăng giá trị từ ngành chăn nuôi và giết mổ cá sấu. Xương là một hệ thống được tái cấu trúc và tái tạo trong suốt quá trình sống. Sự loãng xương diễn ra chủ yếu ở người già do sự giảm khối lượng hay mật độ xương và sự thay đổi cấu trúc vi mô của xương.
Sự tạo xương mới bắt đầu bằng quá trình sinh tổng hợp collagen, sau đó xảy ra quá trình khoáng hóa xương tức canxi hấp thụ vào nền collagen. Canxi tạo độ cứng của xương nhưng giòn, trong khi collagen cung cấp độ chắc và dẻo dai của xương. Cao động vật là phương thuốc truyền thống phòng trị các bệnh về xương, đặc biệt là loãng xương. Hiện nay ở Việt Nam có khá nhiều loại cao được chế biến và thương mại.
Theo các kết quả tiền thăm dò, collagen trong cao đã bị thủy phân (cắt ngắn) một phần do tác dụng của nhiệt khi nấu trong thời gian dài. Theo các nghiên cứu tại Việt Nam và trên thế giới cá sấu là một nguồn cung cấp lượng collagen triển vọng cho nhu cầu ngày càng cao của người tiêu dùng. 2 Ở Việt Nam, hiện nay Công ty TNHH Cá Sấu Hoa Cà là công ty duy nhất nấu cao xương cá sấu làm thực phẩm bổ sung và đã bán ra thị trường. Do công ty nấu cao theo phương pháp truyền thống, nấu xương nguyên trạng ở nhiệt độ cao và nấu trực tiếp trên bếp.
Sau từ 8-12 giờ nấu dịch collagen được lấy ra cô đặc và cho nước mới vào nấu tiếp, cứ thế lặp lại nhiều lần (6-7 lần). Với thời gian và nhiệt độ nấu như thế thì sản phẩm thu được có màu sẫm đen, hiệu suất trích ly thấp do bị cháy ở đáy nồi. Thịt cá sấu dường như được xem là sản phẩm phụ của ngành chăn nuôi cá sấu nên giá bán trên thị trường không đắt hơn nhiều (hoặc thậm chí rẻ hơn) các loại thịt thông thường khác. So với thịt bò, heo, và gà thì thịt cá sấu chứa ít chất béo hơn và nhiều protein hơn (Hoffman và ctv, 2000; Beilken và ctv, 2007).
Do vậy thịt cá sấu là nguyên liệu phù hợp hơn cho việc thủy phân thu nhận dịch protein thủy phân. Bên cạnh giá trị dinh dưỡng truyền thống, sản phẩm protein thủy phân dễ hấp thụ và có các hoạt tính sinh học có lợi cho sức khỏe đã được khẳng định là tính kháng oxi hóa, khả năng bắt giữ gốc tự do, tính ức chế vi sinh gây bệnh và khả năng ức chế enzyme chuyển hóa angiotensin (Vercruysse và ctv, 2005; Faria và ctv, 2008; Di Bernardini và ctv, 2011; Banerjee và Shanthi, 2012). Ngoài ra một số nghiên cứu còn cho thấy collagen thủy phân có thể cải thiện sức khỏe da và giúp chữa lành tổn thương da (Zague, 2008, Zhang và ctv, 2011), chống mệt mỏi (Ding và ctv, 2011). Một nghiên cứu khác cho thấy chuột ăn collagen thủy phân có thể cải thiện được khả năng ghi nhớ (Lu và ctv, 2010).
Vì vậy, nghiên cứu về nghiên cứu phát triển sản phẩm thực phẩm từ nguyên liệu cá sấu bằng kỹ thuật hoá sinh là cần thiết. MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu nhằm phát triển sản phẩm bột dinh dưỡng từ protein thủy phân và cao chiết giàu collagen từ nguyên liệu cá sấu bằng kỹ thuật hóa sinh nhằm gia tăng giá trị về kinh tế và khoa học. 3 Mục tiêu cụ thể - Cải tiến quy trình nấu cao (trích ly collagen) từ xương cá sấu theo hướng ổn định và nâng cao chất lượng cao. - Thiết lập quy trình sản xuất sản phẩm: bột protein thịt cá sấu thủy phân, cao collagen xương cá sấu và đánh giá tác dụng hỗ trợ sức khỏe của sản phẩm dinh dưỡng lên sức khỏe chuột.
NỘI DUNG NGHIÊN CỨU + Cải thiện qui trình trích ly collagen từ xương cá sấu + Nghiên cứu qui trình thủy phân protein thịt cá sấu bằng enzyme protease + Nghiên cứu qui trình sấy phun dịch protein thịt cá sấu thủy phân thành bột + Nghiên cứu công thức sản phẩm dinh dưỡng bổ sung cao cá sấu + Đánh giá an toàn và tác dụng hỗ trợ sức khỏe của sản phẩm dinh dưỡng. PHẠM VI NGHIÊN CỨU Nghiên cứu được thực hiện để tạo ra một loại bột dinh dưỡng từ protein thủy phân và cao chiết giàu collagen từ nguyên liệu thịt và xương cá sấu xiêm (Crocodylus siamensis) được cung cấp bởi Công ty TNHH Cá Sấu Hoa Cà (Quận 12, Tp. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI Ý nghĩa khoa học + Bổ sung thêm dữ liệu nghiên cứu khoa học liên quan đến phân tích, chế biến và ứng dụng trong công nghệ chế biến thực phẩm chức năng. + Nghiên cứu đã làm rõ được ảnh hưởng của các điều kiện trích collagen từ xương cá sấu, ảnh hưởng của loại và tỷ lệ enzyme trong thủy phân protein thịt cá sấu.
+ Nghiên cứu đã phân tích thành phần hóa lý của xương, thành phần acid amin của cao xương. Nghiên cứu cũng đánh giá được an toàn và tác dụng hỗ trợ sức khỏe của sản phẩm tạo cơ sở cho việc ứng dụng thực tiễn trong tương lai. 4 Ý nghĩa thực tiễn + Luận án đã đưa ra được qui trình cải tiến hiệu suất trích ly collagen từ xương cá sấu và xác định được loại enzyme neutral PL có khả năng thủy phân tốt nhất thịt cá sấu từ đó có thể bổ sung phát triển thực phẩm mới. Luận án đã thiết lập quy trình chế biến các sản phẩm thực phẩm.
+ Bổ sung các hoạt chất tốt cho sức khỏe con người, không độc qua thử nghiệm in vivo. + Tận dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền là xương và thịt cá sấu để phát triển các sản phẩm có giá trị về cả kinh tế và sức khỏe. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan về cá sấu Cá sấu là loài bò sát lưỡng cư, sống được trên cạn lẫn dưới nước, ở cả đầm lầy nước ngọt và nước lợ. Ở Việt Nam có hai loài cá sấu, đó là cá sấu nước ngọt hay gọi là cá sấu Xiêm Crocodylus siamensis và cá sấu nước lợ, còn gọi là cá sấu hoa cà Crocodylus porosus thuộc chi Crocodylus, họ Crocodylidae, bộ Crocodilia (Lê Thị Biên và ctv, 2006).
Theo báo cáo từ chương trình phát triển cá sấu và động vật hoang dã của UBND Tp.HCM (2021), số lượng cá sấu tại Việt Nam trong hơn 20 năm qua phát triển nhanh, chủ yếu là loài cá sấu nước ngọt Crocodylus siamensis.1 Phân loại khoa học - Giới: Animalia - Ngành: Chortada - Lớp: Sauropsida - Bộ: Crocodilia - Họ: Crocodylidae - Chi: Crocodylus - Loài: C.Siamensis Cá sấu là loài bò sát lớn, thường sinh sống trong môi trường sông hồ có dòng nước chảy chậm. Nguồn thức ăn khá đa dạng. Chúng sống trên một diện tích rộng của các khu vực nhiệt đới như Châu Phi, Châu Á, Bắc Mỹ và Châu Đại Dương.2 Vị trí, phân loại và phân bố của cá sấu Cá sấu là loài động vật có xương sống, thuộc lớp bò sát (Reptile), bộ cá sấu (crocodilians), gồm 3 họ chính: Alligatoridae, Crocodiliae và Gavialidae được phân thành 7 nhóm và 21 loài. Các đặc điểm để phân biệt giữa 3 họ này dựa vào kích thước cơ thể, hình dạng mõm, sự sắp xếp của răng, hình dạng tổ, đặc tính của da và phân bố địa lý.1 Cá sấu Hoa Cà (crocodylus prosus) Phân bố: Australia, Bangladesh, Brunei, Myanmar, Cambodia, Indonesia, Philippines, Thailand, Việt Nam.
Đây là một trong những loài cá sấu có kích thước lớn nhất, trung bình dài 6 – 7m, hung dữ, tấn công người. Chúng sinh sống ở khu vực ven bờ biển nước lợ và các vùng nước ngọt như cửa sông, đầm lầy… Trước nay chúng có vùng phân bố rộng tại Đông Nam Á. Tại Việt Nam, cá sấu nước lợ phân bố từ Vũng Tàu, Cần Thơ đến Kiên Giang, Côn Đảo… do tình trạng săn bắt quá mức nên loài này đang bị đe dọa tuyệt chủng, hiện không còn thấy ngoài tự nhiên mà chỉ còn khoảng 70 con nuôi tại Cần Giờ. Cá sấu Hoa Cà cái trưởng thành từ 6-10 tuổi, dài 2,2 - 2,5m.
Chúng làm tổ đẻ trứng vào mùa mưa, mỗi lần khoảng 40- 60 trứng và ấp nở trong 80 – 90 ngày. Bộ da của cá sấu Hoa Cà có giá trị thương phẩm cao nhất.2 Cá sấu Xiêm (crocodylus siamensis) Cá sấu Xiêm sinh sống ở các vùng đầm lầy nước ngọt, hồ, sông, suối có dòng chảy chậm. Kích thước nhỏ, chiều dài tối đa có thể lên tới 4m, trung bình khoảng 3m. Chúng giao phối từ tháng 12 đến tháng 3, mỗi năm đẻ 1 lần từ tháng 4 đến tháng 10, đào hố làm tổ trước khi đẻ khoảng 1 tuần.
Mỗi lần đẻ khoảng 20 – 50 trứng và ấp nở sau 75 – 85 ngày. Trước đây cá sấu nước ngọt được tìm thấy nhiều ở sông Đồng Nai, Tây Nguyên và khắp Nam bộ. Do hiện tượng săn bắt quá mức nên phạm vi sống thu hẹp dần và còn thấy rất ít ở Kontum, Đaklak. Đây là loài cá sấu dễ thuần hóa và nuôi dưỡng, hiện đang được chú ý phát triển trong chăn nuôi cá sấu lấy da và thịt thương phẩm tại Việt Nam.3 Tình hình chăn nuôi cá sấu trên thế giới và Việt Nam 1.1 Tình hình nuôi cá sấu trên thế giới Cá sấu là động vật quý hiếm, sau chiến tranh thế giới thứ hai, cá sấu bị coi là những con vật có hại ở nhiều nơi mọi người được phép tự do săn bắt vì vậy chúng ngày một khan hiếm.