BOÄ GIAÙO DUÏC VAØ ÑAØO TAÏO. ÑAÏI HOÏC MÔÛ BAÙN COÂNG PT.HCM KHOA COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC. ------------------------ LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Teân ñeà taøi: NGHIEÂN CÖÙU CHEÁ BIEÁN ÑOÀ UOÁNG DINH DÖÔÕNG VAØ CHÖÙC NAÊNG TÖØ RAU, QUAÛ, HAÏT TRUYEÀN THOÁNG GIAØU KHOAÙNG BAÈNG PHÖÔNG PHAÙP LEÂN MEN LACTIC. CHUYEÂN NGHAØNH : VI SINH THÖÏC PHAÅM.
Ngöôøi höôùng daãn : Ts. Leâ Chieán Phöông. SVTT : Tröông Thò Kim Oanh MSSV : 30100321 Khoaù : 2001 – 2005.HCM 2006 Lôøi caûm ôn Em xin chaân thaønh caûm ôn thaày Leâ Chieán Phöông ñaõ taän tình chæ baûo vaø taïo moïi ñieàu kieän thuaän lôïi cho em hoaøn thaønh khoaù luaän naøy. Em xin chaân thaønh caûm ôn coâ Ñoã Thò Tuyeán, thaày Vuõ Vaên Ñoä, chò Nguyeãn Thò Nhö Quyønh, chò Voõ Thanh Trang ñaõ giuùp ñôõ em trong thôøi gian thöïc hieän khoaù luaän.
Em xin chaân thaønh caûm ôn caùc thaày coâ, anh chò vaø caùc baïn ôû vieän sinh hoïc nhieät ñôùi ñaõ ñoäng vieän giuùp ñôõ em trong thôøi gian thöïc hieän khoaù luaän taïi vieän. Em traân troïng bieát ôn caùc thaày coâ khoa Coâng ngheä sinh hoïc tröôøng Ñaïi Hoïc Môû Baùn Coâng Tp.HCM vì nhöõng kieán thöùc thaày coâ ñaõ truyeàn ñaït cho em. Toâi xin chaân thaønh caûm ôn baïn Nhaõ, baïn Loan, baïn Phöôïng cuøng caùc baïn khoa Coâng ngheä sinh hoïc tröôøng Ñaïi Hoïc Môû Baùn Coâng ñaõ gaén boù giuùp ñôõ toâi trong suoát thôøi gian qua. Con xin chaân thaønh caûm ôn gia ñình, choã döïa vöõng chaéc cuûa cuoäc ñôøi con.
Lôøi môû ñaàu Trong nhöõng naêm gaàn ñaây, khi möùc soáng ñöôïc naâng cao, ngöôøi daân ñaõ baét ñaàu chuù yù ñeán böõa aên cuûa mình hôn. Hoï quan taâm tìm kieám nhöõng thöùc aên boå döôõng vaø toát cho söùc khoeû. Gaïo löùc ñöôïc coi laø moät trong nhöõng nguõ coác toát nhaát cho söùc khoeû. Noù chöùa caùc loaïi khoaùng, vitamin, xô caàn thieát cho cô theå vaø ñaëc bieät noù chöùa hôïp chaát polyphenol giuùp cô theå choáng laïi söï laõo hoaù.
Muoái khoaùng laø chaát maø cô theå khoâng coù khaû naêng töï toång hôïp, do ñoù ñöôïc boå sung töø thöïc phaåm haèng ngaøy. Khoaùng laø chaát toái caàn thieát cho cuoäc soáng, cho hoaït ñoäng ña daïng cuûa cô theå treân caû hai khía caïnh taâm vaø sinh lyù. Xô khoâng nhöõng giuùp chuùng ta choáng laïi moät soá beän nhö taùo boùn, giaûm cholesterol… maø noù coøn giuùp chuùng ta giöõ ñöôïc moät cô theå caân ñoái. Leân men lactic laø moät trong nhöõng phöông phaùp baûo quaûn saûn phaåm.
Ngoaøi ra noù coøn laøm taêng höông vò cuûa saûn phaåm. Hoa quaû cuõng laø nguoàn thöïc phaåm toát cho söùc khoeû. Hoa quaû chöùa nhieàu khoaùng vaø xô raát toát cho söùc khoeû. Chuùng laïi chöùa nhieàu chaát choáng oxy hoaù, goùp phaàn giöõ cho teá baøo treû trung laâu hôn.
Nöôùc ta boán muøa ñeàu saün rau quaû, caàn taän höôûng söï öu ñaõi ñoù cuûa thieân nhieân. MUÏC LUÏC Lôøi caûm ôn Lôøi môû ñaàu Muïc luïc Trang PHAÀN 1: TOÅNG QUAN TAØI LIEÄU .1 Vi khuaån lactic .2 Caùc con ñöôøng leân men lactic .1 Leân men lactic ñoàng hình .2 Leân men lactic dò hình .3 Leân men lactic hieáu khí .4 Leân men lactic kî khí .3 Vaøi ñaïi dieän vi khuaån lactic .1 Gioáng streptococcus.2 Gioáng lactobacillus .1 ÖÙng duïng ñeå saûn xuaát döa chua .2 ÖÙng duïng laøm chua quaû.3 ÖÙng duïng trong saûn xuaát nöôùc töông .4 ÖÙng duïng trong saûn xuaát ñaäu phuï .5 ÖÙng duïng ñeå saûn xuaát caùc saûn phaåm leân men töø söõa .6 ÖÙng duïng ñeå uû thöùc aên cho gia suùc .2 Caùc heä enzyme: .2 Cô cheá xuùc taùc .3 Ñaëc ñieåm heä enzyme callulase cuûa caùc gioáng Aspergillus .1 Ñaëc ñieåm chung .2 Tính ñaëc hieäu .3 Cô cheá taùc duïng .4 Moät soá ñaëc tính lyù hoùa cuûa enzy,e glucosamylase .4 Moät soá enzyme thöông phaåm .1 Thaønh phaàn cellulose trong töï nhieân .2 Caáu truùc cellulose .3 Tính chaát lyù hoùa cuûa cellulose .4 Xô thöïc phaåm .2 Vai troø cuûa xô thöïc phaåm .1 Caáu truùc tinh boät .2 Tinh boät bieán tính .2 Coâng ngheä thuûy phaân tinh boät .1 Lòch söû phaùt trieån cuûa quaù trình nghieân cöùu thuûy phaân tinh boät .2 Thuûy phaân baèng acid .3 Thuûy phaân baèng enzyme .2 Moät soá loaïi muoái lactate .6 Hôïp chaát polyphenol.2 Hôïp chaát flavonoi .7 Sô löôïc veà nguyeân lieäu .2 Baøi thuoác veà gaïo löùc muoái meø. 43 PHAÀN 2: NGUYEÂN LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP THÍ NGHIEÄM .2 Cheá bieán saûn phaåm .3 Phöông phaùp xaùc ñònh hoaït tính enzyme .1 Phöông phaùp xaùc ñònh hoaït tính glucosamylase theo phöông phaùp Miller .2 Phöông phaùp xaùc dònh hoaït tính enzyme carbomethyl cellulase .4 Phöông phaùp xaùc ñònh sinh hoùa .1 Phöông phaùp xaùc ñònh ñöôøng toång.2 Phöông phaùp xaùc ñònh ñöôøng khöû .3 Phöông phaùp xaùc ñònh ñaïm toång .4 Phöông phaùp xaùc ñònh ñaïm formol .5 Phöông phaùp xaùc ñònh ñaïm amoniac .6 Phöông phaùp xaùc ñònh ñoä chua .7 Phöông phaùp xaùc xô .8 Phöông phaùp xaùc ñònh tinh boät .9 phöông phaùp ñònh tính flavonoid. 61 PHAÀN 3 KEÁT QUAÛ VAØ BIEÄN LUAÄN .1 Keát quaû xaùc ñònh hoïat tính enzyme .1 Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính glucosamylase theo thôøi gian .2 Keát quaû xaùc dònh hoaït tính glucosamylase theo pH.1 Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính cellulsae theo thôøi gian .2 Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính cellulase theo pH .3 Keát quaû so saùnh hoaït tính enzym glucosamylase cuûa A.2 Keát quaû xaùc ñònh sinh hoùa cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa .1 Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñöôøng toång .2 Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñöôøng khöû .3 Keát quaû xaùc ñònh ñaïm toång .4 Keát quaû xaùc ñònh ñaïm formol .5 Keát quaû xaùc ñònh ñam amoniac .3 Keát quaû xaùc ñònh sinh hoùa cuûa saûn phaåm .1 Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñöôøng toång .2 Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñöôøng khöû .3 Keát quaû xaùc ñònh ñaïm toång .4 Keát quaû xaùc ñònh ñaïm formol .5 Keát quaû xaùc ñònh ñam amoniac .6 Keát quaû xaùc ñònh ñoä chua .7 Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng xô.4 Keát quaû ñònh tính flavonoid.
77 PHAÀN 4 : KEÁT LUAÄN VAØ ÑEÀ NGHÒ. 80 Taøi lieäu tham khaûo. 84 DANH MUÏC CAÙC BAÛNG: Baûng 1 : Thoâng soá söû duïng enzyme termamu\yl Baûng 2 : Tính chaát cuûa AMG Baûng 3 : Thoâng soá söû duïng cuûa AMG Baûng 4 : Thoâng soá söû duïng cuûa enzyme cellusoft L. Baûng 5 : Caùc loaïi muoái khoùang Baûng 6 : Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính glucosamylase theo thôøi gian Baûng 7 : Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính glucosamylase theo pH Baûng 8 : Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính cellulase theo thôøi gian Baûng 9 : Keát quaû xaùc ñònh hoaït tính cellulase theo pH Baûng 10 : Haøm löôïng ñöôøng toång vaø ñöôøng khöû cuûa dòch gaïo löùc sau khi ñöôïc thuûy phaân tinh boät bôûi glucosamylase cuûa A.oryzae vaø enzyme thöông phaåm Baûng 11 : Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñöôøng toång cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch söõa.
Baûng 12 : Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñöôøng khöû cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch söõa Baûng 13 : Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñaïm toång cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch söõa Baûng 14 : Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñaïm formol cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch söõa Baûng 15 : Keát quaû xaùc ñònh haøm löôïng ñaïm amoniac cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch söõa Baûng 16 : Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñöôøng toång cuûa saûn phaåm Baûng 17 : Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñöôøng khöû cuûa saûn phaåm Baûng 18 : Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñaïm toång cuûa saûn phaåm Baûng 19 : Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñaïm formol cuûa saûn phaåm Baûng 20 : Keát quaû xaùc dònh haøm löôïng ñam amoniac cuûa saûn phaåm Baûng 21 : Keát quaû xaùc ñònh ñoä chua cuûa maãu Baûng 22 : Keát quaû xaùc ñònh xô cuûa maãu DANH MUÏC CAÙC ÑOÀ THÒ Ñoà thò 1 : Ñoà thò bieåu hieän hoaït tính cuûa glucosamylase theo thôøi gian Ñoà thò 2 : Ñoà thò bieåu hieän hoaït tính cuûa glucosamylase theo pH Ñoà thò 3 : Ñoà thò bieåu hieän hoaït tính cuûa cellulase theo thôøi gian Ñoà thò 4 : Ñoà thò bieåu hieän hoaït tính cuûa cellulase theo pH Ñoà thò 5 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñöôøng toång vaø ñöôøng khöû cuûa dòch gaïo löùc sau khi ñöôïc thuûy phaân tinh boät bôûi glucosamylase cuûa A.oryzae vaø enzyme thöông phaåm Ñoà thò 6 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñöôøng toång cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa. Ñoà thò 7 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñöôøng khöû cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa. Ñoà thò 8 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm toång cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa. Ñoà thò 9 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm formol cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa.
Ñoà thò 10 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm amoniac cuûa dòch gaïo löùc vaø dòch töông söõa. Ñoà thò 11 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñöôøng toång cuûa saûn phaåm Ñoà thò 12 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñöôøng khöû cuûa saûn phaåm Ñoà thò 13 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm toång cuûa saûn phaåm Ñoà thò 14 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm formol cuûa saûn phaåm Ñoà thò 15 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng ñaïm amoniac cuûa saûn phaåm Ñoà thò 16 : Ñoà thò bieåu ñoä chua cuûa saûn phaåm Ñoà thò 17 : Ñoà thò bieåu hieän haøm löôïng xô cuûa saûn phaåm KEÁT LUAÄN VAØ ÑEÀ NGHÒ PHAÀN 1 TOÅNG QUAN TAØI LIEÄU SVTH: Tröông Thò Kim Oanh 1 KEÁT LUAÄN VAØ ÑEÀ NGHÒ 1.1 Vi khuaån lactic: [14 ] 1.1 Phaân loaïi: Theo khoaù phaân loaïi Bergey thì vi khuaån lactic ñöôïc xeáp chung vaøo hoï Lactobacteriaceae. Chuùng ñöôïc chia ra thaønh caùc gioáng: Streptococcus, Pediococcus, Lactobacillus, Leuconostoc. Hình thaùi: Vi khuaån thöôøng coù hai daïng: + Hình caàu: Diplococcus (2 hình caàu), tetracoccus (4 hình caàu), streptococcus (hình caàu chuoåi) + Hình que: Hình que ñôn vaø hình que chuoåi.
Sinh lyù: + Taát caû gram döông, khoâng taïo baøo töû, haàu heát khoâng di ñoäng, khoâng taïo maøng nhaøy, kò khí baét buoäc, thu nhaän naêng löôïng nhôø thaûi ra acid lactic vaø phaân giaûi hydratcacbon. Khaùc vôùi vi khuaån ñöôøng ruoät, vi khuaån lactic laø loaïi leân men baét buoäc, khoâng chöùa cytochrome vaø catalase. + Chuùng coù nhu caàu veà maët dinh döôõng khaù phöùc taïp. Ngoaøi glucose, NH4+, chuùng ñoøi hoûi haøng loaït vitamin: lactoflavin, thiamin, acid pantothenic, acid nitotinic, acid folic, biotin,… vaø caùc acid amin.
Vì theá thöôøng nuoâi caáy chuùng treân moâi tröôøng coù boå sung theâm cao naám men, cao thòt, nöôùc chieát caø chua. Caên cöù vaøo kieåu leân men, ngöôøi ta chia vi khuaån lactic thaønh 2 nhoùm: + Vi khuaån lactic ñoàng hình: saûn phaåm chính cuûa quaù trình leân men lactic ñoàng hình laø acid lactic. + Vi khuaån leân men lactic dò hình: saûn phaåm cuoái cuøng ña daïng nhö acid lactic, ethanol, acid acetic, CO2… Tuyø thuoäc vaøo nhieät ñoä leân men vaø taêng tröôûng toái öu, vi khuaån lactic ñöôïc chia thaønh: vi khuaån öa nhieät vaø vi khuaån öa nhieät vöøa. pH cuõng coù aûnh höôûng ñeán söï phaùt trieån cuûa vi khuaån lactic.