Luận văn thạc sĩ công nghệ thực phẩm trích ly co2 siêu tới hạn các hợp chất polyphenol từ lá cây lược vàng callisia fragrans

Luận văn thạc sĩ công nghệ thực phẩm nghiên cứu trích ly CO2 siêu tới hạn polyphenol từ lá cây lược vàng Callisia fragrans, ứng dụng tiềm năng trong ngành thực phẩm.

• Tác giả: Nguyễn Kim Thiên Phúc
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Hữu Hiếu
• Trường học: Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia TP. HCM
• Chuyên ngành: Công nghệ Thực phẩm
• Đề tài: Trích ly CO2 siêu tới hạn các hợp chất polyphenol từ lá cây lược vàng (Callisia fragrans)
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2015
• Địa điểm: TP. Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Hợp chất polyphenol
• 1.2. Hợp chất flavonoid
• 1.3. Giới thiệu về đối tượng nghiên cứu
• 1.3.1. Nguồn gốc cây lược vàng
• 2. CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Dụng cụ - thiết bị - hóa chất
• 2.2. Nội dung nghiên cứu
• 2.2.1. Tách các hợp chất không phân cực
• 2.2.2. Trích ly bằng phương pháp Soxhlet với dung môi ethyl acetate
• 2.2.3. Trích ly bằng phương pháp siêu tới hạn với dung môi CO2 siêu tới hạn
• 2.3. Phương pháp nghiên cứu
• 2.3.1. Xác định độ ẩm của cao dựa theo độ giảm khối lượng khi sấy
• 2.3.2. Phương pháp phân tích hàm lượng hợp chất phenolic tổng
• 2.3.3. Phương pháp phân tích hoạt tính oxi hóa theo ABTS
• 2.3.4. Phương pháp định lượng flavonoid tổng
• 2.3.5. Phương pháp xác định thành phần hóa học của cao chiết bằng GC-MS
• 2.3.6. Phương pháp xác định hàm lượng quercetin và kaemferol
• 2.3.7. Phương pháp xử lý số liệu thực nghiệm
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Ảnh hưởng của tỷ lệ ethanol đến chất lượng cao trích
• 3.2. Ảnh hưởng của lưu lượng tổng (CO2 + ethanol) đến chất lượng cao trích
• 3.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến chất lượng cao trích
• 3.4. Ảnh hưởng của áp suất đến chất lượng cao trích
• 3.5. So sánh chất lượng hai mẫu cao lá lược vàng - CLC và CLE
• 4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• PHỤ LỤC
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Giới thiệu về đề tài

Luận văn tập trung vào việc trích ly CO2 siêu tới hạn các hợp chất polyphenol từ lá cây lược vàng (Callisia fragrans). Mục tiêu chính là khảo sát tính khả thi của phương pháp này so với phương pháp truyền thống như Soxhlet. Polyphenol là nhóm hợp chất có hoạt tính sinh học cao, được ứng dụng rộng rãi trong công nghiệp thực phẩm và dược phẩm. Nghiên cứu này nhằm tối ưu hóa quá trình trích ly để thu được hàm lượng polyphenol cao hơn, đồng thời đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa của dịch chiết.

1.1. Tổng quan về cây lược vàng

Cây lược vàng (Callisia fragrans) có nguồn gốc từ Trung Mỹ, được sử dụng rộng rãi trong y học dân gian nhờ các hợp chất có hoạt tính sinh học như flavonoid và steroid. Nghiên cứu này tập trung vào lá cây, nơi chứa nhiều polyphenol, có tiềm năng ứng dụng trong điều trị các bệnh viêm nhiễm và ung thư.

1.2. Phương pháp trích ly CO2 siêu tới hạn

Phương pháp trích ly CO2 siêu tới hạn được ưa chuộng do tính thân thiện với môi trường và hiệu quả cao trong việc chiết xuất các hợp chất từ thực vật. Nghiên cứu này sử dụng CO2 siêu tới hạn kết hợp với ethanol làm đồng dung môi để tăng hiệu suất trích ly polyphenol từ lá lược vàng.

II. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu được thực hiện bằng cách so sánh hai phương pháp trích ly: Soxhlet sử dụng ethyl acetate và CO2 siêu tới hạn với ethanol. Các thông số như áp suất, nhiệt độ, lưu lượng CO2 và tỷ lệ ethanol được khảo sát để tối ưu hóa quá trình trích ly. Kết quả được đánh giá dựa trên hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, và hoạt tính kháng oxy hóa.

2.1. Quy trình trích ly bằng Soxhlet

Phương pháp Soxhlet sử dụng ethyl acetate làm dung môi để trích ly các hợp chất từ lá lược vàng. Quá trình này được thực hiện trong điều kiện nhiệt độ và thời gian cố định, thu được dịch chiết để phân tích hàm lượng polyphenol và flavonoid.

2.2. Quy trình trích ly bằng CO2 siêu tới hạn

Phương pháp CO2 siêu tới hạn được thực hiện với các thông số tối ưu: áp suất 150 bar, nhiệt độ 45°C, lưu lượng CO2 20 g/phút, và tỷ lệ ethanol 14%. Kết quả cho thấy hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxy hóa tương đương với phương pháp Soxhlet, chứng minh tính khả thi của phương pháp này.

III. Kết quả và đánh giá

Kết quả nghiên cứu cho thấy phương pháp trích ly CO2 siêu tới hạn với ethanol đạt hiệu suất cao trong việc chiết xuất polyphenol từ lá lược vàng. Hàm lượng polyphenol tổng và flavonoid tổng trong dịch chiết tương đương với phương pháp Soxhlet, đồng thời hoạt tính kháng oxy hóa cũng được duy trì ở mức cao.

3.1. So sánh hiệu suất trích ly

Phương pháp CO2 siêu tới hạn cho kết quả tương đương với Soxhlet về hàm lượng polyphenol và flavonoid, nhưng có ưu điểm vượt trội về tính thân thiện với môi trường và an toàn cho người sử dụng.

3.2. Ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu mở ra tiềm năng ứng dụng trích ly CO2 siêu tới hạn trong sản xuất các sản phẩm thực phẩm chức năng và dược phẩm từ lá lược vàng. Phương pháp này có thể thay thế các phương pháp truyền thống sử dụng dung môi hữu cơ độc hại.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Cây lược vàng (Callisia fragrans) là một loại thảo dược có nguồn gốc từ Trung Mỹ, được trồng phổ biến tại nhiều quốc gia như Việt Nam, Nga và Úc. Theo báo cáo của ngành, cây này chứa nhiều hợp chất sinh học có lợi, đặc biệt là các hợp chất polyphenol với hoạt tính kháng oxi hóa cao. Từ năm 2006, cây lược vàng đã được người dân Việt Nam sử dụng rộng rãi trong điều trị các bệnh viêm nhiễm, bệnh dạ dày, tim mạch và thậm chí là ung thư. Tuy nhiên, việc khai thác các hợp chất này một cách hiệu quả và an toàn vẫn còn là thách thức lớn.

Mục tiêu của luận văn là khảo sát sơ bộ quá trình trích ly các hợp chất polyphenol từ lá cây lược vàng bằng phương pháp sử dụng lưu chất CO2 siêu tới hạn, so sánh với phương pháp Soxhlet truyền thống sử dụng dung môi ethyl acetate. Nghiên cứu tập trung vào việc đánh giá ảnh hưởng của các thông số vận hành như áp suất, nhiệt độ, lưu lượng tổng CO2 và ethanol, cũng như tỷ lệ ethanol đến hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa của cao chiết. Phạm vi nghiên cứu được thực hiện tại phòng thí nghiệm trọng điểm của Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG TP. HCM trong năm 2015.

Ý nghĩa của nghiên cứu nằm ở việc phát triển một phương pháp trích ly thân thiện với môi trường, không sử dụng dung môi hữu cơ độc hại, đồng thời nâng cao hiệu quả thu nhận các hợp chất có hoạt tính sinh học từ cây lược vàng. Kết quả nghiên cứu góp phần mở rộng ứng dụng của cây lược vàng trong công nghiệp thực phẩm chức năng và dược phẩm, đồng thời cung cấp dữ liệu khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Luận văn dựa trên hai lý thuyết chính: lý thuyết về hợp chất polyphenol và công nghệ trích ly bằng lưu chất siêu tới hạn.

1. Hợp chất polyphenol: Đây là nhóm hợp chất chứa nhiều vòng benzen với các nhóm hydroxyl, được chia thành ba nhóm chính dựa trên cấu trúc hóa học: nhóm phenol Cs-Ci (axit gallic), nhóm phenol Co-Cs (axit caffeic), và nhóm phenol Cs-Ca-Ce (catechin, flavonoid). Polyphenol có khả năng chống oxi hóa mạnh, ngăn ngừa các gốc tự do, kháng khuẩn, hấp thụ tia cực tím và phòng chống các bệnh tim mạch, ung thư.

2. Công nghệ trích ly bằng lưu chất CO2 siêu tới hạn (SCO2): CO2 ở trạng thái siêu tới hạn (trên 31°C và 73,8 bar) có tính chất trung gian giữa khí và lỏng, giúp hòa tan các hợp chất hữu cơ hiệu quả mà không để lại dung môi độc hại. Phương pháp này có ưu điểm như sản phẩm thu được có chất lượng cao, không gây ô nhiễm môi trường, và có thể điều chỉnh khả năng hòa tan bằng cách thay đổi áp suất và nhiệt độ.

Các khái niệm chính bao gồm: polyphenol tổng, flavonoid tổng, hoạt tính kháng oxi hóa (đo bằng phương pháp ABTS), quercetin, kaempferol, và các thông số vận hành của hệ thống CO2 siêu tới hạn như áp suất, nhiệt độ, lưu lượng CO2 và ethanol.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu chính là các mẫu lá cây lược vàng thu hái tại huyện Hóc Môn, TP. HCM. Lá được xử lý sơ bộ bằng cách rửa sạch, nhúng cồn 70%, phơi khô trong bóng râm, sau đó sấy khô ở 70°C trong 3-4 giờ và nghiền thành bột với độ ẩm trung bình khoảng 8,15%.

Phương pháp trích ly gồm hai kỹ thuật:

• Soxhlet với dung môi ethyl acetate: 15 gam bột lá được chiết trong 350 ml ethyl acetate ở nhiệt độ 80-85°C trong 6 giờ. Dịch chiết được cô quay chân không ở 35°C để thu cao chiết (CLE).

• CO2 siêu tới hạn với đồng dung môi ethanol: Sử dụng hệ thống thiết bị CO2 siêu tới hạn tại phòng thí nghiệm trọng điểm, các thông số vận hành được khảo sát gồm tỷ lệ ethanol (10-20% w/w), lưu lượng tổng CO2 + ethanol (10-20 g/phút), nhiệt độ (40-60°C), và áp suất (100-250 bar). Mẫu bột lá 15 gam được trích ly trong thời gian 60-120 phút, dịch chiết được cô quay chân không thu cao chiết (CLC).

Phân tích hàm lượng polyphenol tổng được thực hiện bằng phương pháp Folin-Ciocalteau, flavonoid tổng bằng phương pháp quang phổ UV-Vis, hoạt tính kháng oxi hóa theo phương pháp ABTS, và định lượng quercetin, kaempferol bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Dữ liệu được xử lý thống kê bằng phân tích phương sai (ANOVA) với cỡ mẫu phù hợp để đảm bảo độ tin cậy.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Ảnh hưởng của tỷ lệ ethanol: Khi tỷ lệ ethanol tăng từ 10% đến 14% (w/w), hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa của cao chiết tăng rõ rệt, đạt giá trị tối ưu tại 14% với polyphenol tổng khoảng 120 mg GAE/g cao chiết và hoạt tính kháng oxi hóa tương đương 85% Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC). Tỷ lệ ethanol trên 14% không làm tăng đáng kể các chỉ số này.

2. Ảnh hưởng của lưu lượng tổng CO2 + ethanol: Lưu lượng tăng từ 12 g/phút đến 20 g/phút làm tăng hàm lượng polyphenol tổng từ khoảng 95 mg GAE/g lên 125 mg GAE/g, đồng thời hoạt tính kháng oxi hóa cũng tăng từ 70% lên 88% TEAC. Lưu lượng 20 g/phút được xác định là tối ưu.

3. Ảnh hưởng của nhiệt độ: Nhiệt độ trích ly từ 40°C đến 45°C làm tăng hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa, đạt đỉnh tại 45°C với polyphenol tổng khoảng 130 mg GAE/g và hoạt tính kháng oxi hóa 90% TEAC. Nhiệt độ trên 45°C có xu hướng làm giảm nhẹ các chỉ số này do sự phân hủy của các hợp chất nhạy nhiệt.

4. Ảnh hưởng của áp suất: Áp suất 150 bar cho kết quả cao nhất với hàm lượng polyphenol tổng đạt khoảng 135 mg GAE/g và hoạt tính kháng oxi hóa 92% TEAC. Áp suất thấp hơn hoặc cao hơn làm giảm hiệu quả trích ly do thay đổi độ hòa tan của CO2 siêu tới hạn.

5. So sánh hai phương pháp trích ly: Cao chiết bằng CO2 siêu tới hạn với ethanol (CLC) có hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng và hoạt tính kháng oxi hóa tương đương hoặc cao hơn so với cao chiết bằng Soxhlet với ethyl acetate (CLE). Cụ thể, polyphenol tổng của CLC đạt 135 mg GAE/g so với 130 mg GAE/g của CLE; hoạt tính kháng oxi hóa của CLC là 92% TEAC so với 88% TEAC của CLE.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy việc sử dụng lưu chất CO2 siêu tới hạn kết hợp ethanol làm đồng dung môi là phương pháp hiệu quả để trích ly các hợp chất polyphenol từ lá cây lược vàng. Sự gia tăng hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxi hóa theo các thông số vận hành phù hợp phản ánh khả năng điều chỉnh độ hòa tan của CO2 siêu tới hạn thông qua áp suất, nhiệt độ và tỷ lệ ethanol.

So với phương pháp Soxhlet truyền thống, phương pháp CO2 siêu tới hạn không chỉ giảm thiểu việc sử dụng dung môi hữu cơ độc hại mà còn bảo toàn tốt hơn các hợp chất nhạy nhiệt và dễ bị phân hủy. Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ thể hiện mối quan hệ giữa các thông số vận hành và hàm lượng polyphenol tổng, cũng như bảng so sánh các chỉ số chất lượng cao chiết giữa hai phương pháp.

Các kết quả này phù hợp với các nghiên cứu trước đây về trích ly polyphenol từ các nguyên liệu thực vật khác bằng CO2 siêu tới hạn, đồng thời mở ra hướng ứng dụng công nghệ xanh trong ngành công nghệ thực phẩm và dược phẩm.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Tối ưu hóa quy trình trích ly CO2 siêu tới hạn: Đề nghị các đơn vị nghiên cứu và sản xuất áp dụng điều kiện vận hành tối ưu gồm áp suất 150 bar, nhiệt độ 45°C, lưu lượng tổng 20 g/phút và tỷ lệ ethanol 14% để đạt hiệu quả cao nhất về hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxi hóa trong vòng 60-120 phút.

2. Phát triển sản phẩm thực phẩm chức năng từ cao chiết lược vàng: Khuyến khích các doanh nghiệp thực phẩm chức năng sử dụng cao chiết từ phương pháp CO2 siêu tới hạn để sản xuất các sản phẩm có lợi cho sức khỏe, đặc biệt là các sản phẩm chống oxi hóa và hỗ trợ điều trị các bệnh mãn tính.

3. Đào tạo và chuyển giao công nghệ: Các trường đại học và viện nghiên cứu nên tổ chức các khóa đào tạo về công nghệ trích ly bằng lưu chất siêu tới hạn cho cán bộ kỹ thuật và doanh nghiệp nhằm thúc đẩy ứng dụng rộng rãi công nghệ này.

4. Nghiên cứu sâu hơn về các hợp chất hoạt tính: Đề xuất tiếp tục nghiên cứu phân tích chi tiết các hợp chất flavonoid như quercetin, kaempferol và các hợp chất khác trong cao chiết để đánh giá tác dụng sinh học cụ thể, từ đó phát triển các sản phẩm dược liệu có hiệu quả cao.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu và sinh viên ngành Công nghệ Thực phẩm, Dược học: Luận văn cung cấp dữ liệu thực nghiệm và phương pháp phân tích chi tiết về trích ly hợp chất polyphenol bằng công nghệ lưu chất siêu tới hạn, hỗ trợ nghiên cứu chuyên sâu và phát triển đề tài.

2. Doanh nghiệp sản xuất thực phẩm chức năng và dược phẩm: Thông tin về quy trình trích ly và điều kiện tối ưu giúp doanh nghiệp áp dụng công nghệ xanh, nâng cao chất lượng sản phẩm và giảm thiểu tác động môi trường.

3. Cơ quan quản lý và phát triển công nghệ: Cung cấp cơ sở khoa học để xây dựng chính sách hỗ trợ phát triển công nghệ trích ly hiện đại, thúc đẩy đổi mới sáng tạo trong ngành công nghiệp sinh học.

4. Người tiêu dùng quan tâm đến sản phẩm thảo dược: Hiểu rõ hơn về nguồn gốc, thành phần và lợi ích của các sản phẩm chiết xuất từ cây lược vàng, từ đó lựa chọn sản phẩm an toàn và hiệu quả.

Câu hỏi thường gặp

1. Phương pháp CO2 siêu tới hạn có ưu điểm gì so với Soxhlet?
   Phương pháp CO2 siêu tới hạn không sử dụng dung môi hữu cơ độc hại, bảo toàn tốt các hợp chất nhạy nhiệt, cho sản phẩm chất lượng cao và thân thiện với môi trường. Ví dụ, cao chiết từ CO2 siêu tới hạn có hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxi hóa cao hơn hoặc tương đương Soxhlet.

2. Tại sao cần sử dụng đồng dung môi ethanol trong trích ly CO2 siêu tới hạn?
   Ethanol giúp tăng khả năng hòa tan các hợp chất polyphenol phân cực trong CO2 siêu tới hạn, tránh hiện tượng nghẹt đường ống và nâng cao hiệu quả trích ly. Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ ethanol 14% là tối ưu.

3. Các thông số vận hành ảnh hưởng thế nào đến chất lượng cao chiết?
   Áp suất, nhiệt độ, lưu lượng tổng và tỷ lệ ethanol đều ảnh hưởng đến khả năng hòa tan và thu nhận polyphenol. Ví dụ, áp suất 150 bar và nhiệt độ 45°C cho kết quả cao nhất về hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxi hóa.

4. Cao chiết từ lá lược vàng có thể ứng dụng trong lĩnh vực nào?
   Cao chiết có thể dùng trong sản xuất thực phẩm chức năng, dược phẩm hỗ trợ điều trị các bệnh viêm nhiễm, tim mạch, ung thư, cũng như mỹ phẩm chống oxi hóa.

5. Làm thế nào để đảm bảo chất lượng cao chiết khi sản xuất quy mô lớn?
   Cần kiểm soát chặt chẽ các thông số vận hành, sử dụng nguyên liệu chuẩn, và áp dụng các phương pháp phân tích định kỳ để đảm bảo hàm lượng polyphenol và hoạt tính kháng oxi hóa đạt chuẩn.

Kết luận

• Phương pháp trích ly bằng lưu chất CO2 siêu tới hạn với đồng dung môi ethanol là giải pháp hiệu quả, thân thiện môi trường để chiết xuất polyphenol từ lá cây lược vàng.
• Điều kiện vận hành tối ưu gồm áp suất 150 bar, nhiệt độ 45°C, lưu lượng tổng 20 g/phút và tỷ lệ ethanol 14% cho hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa cao nhất.
• Cao chiết bằng CO2 siêu tới hạn có chất lượng tương đương hoặc vượt trội so với phương pháp Soxhlet truyền thống.
• Nghiên cứu mở ra hướng ứng dụng công nghệ xanh trong sản xuất thực phẩm chức năng và dược phẩm từ cây lược vàng.
• Các bước tiếp theo bao gồm tối ưu quy trình sản xuất quy mô lớn và nghiên cứu sâu hơn về tác dụng sinh học của các hợp chất chiết xuất.

Để khai thác tối đa tiềm năng của cây lược vàng, các nhà nghiên cứu và doanh nghiệp nên phối hợp triển khai ứng dụng công nghệ trích ly lưu chất siêu tới hạn, đồng thời phát triển các sản phẩm có giá trị gia tăng cao, đáp ứng nhu cầu thị trường và bảo vệ sức khỏe cộng đồng.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1. - Ga 111 1S 1111191 1E H111 1g ng ng: | CHƯƠNG 2. Hợp chat polyphienolL.---¿-¿- ¿6+ SE +E+EEE£E#E£EEEESEEEEEEEEvErkrkererkrrerered 3 2. Hop chất flaVOnnOid.

Tác dụng sinh học của FÏaVOnOIỞ. Giới thiệu về đối tượng nghiên CỨu. Nguồn gốc cây lược vàng. ¿+ 5c St t2 2x v2 2x1 2xx Errrreee 5 2.

Thành phan hóa học chi Callisia. Tác dụng sinh học của cây lược VAN. Một số ứng dụng của lược VANS. Các phương pháp trich Ly.

Phương pháp SoxÏ€(. Phương pháp sử dung lưu chất CO2 siêu tới hạn. NGUYEN LIEU VA PHƯƠNG PHAP NGHIÊN CỨU. Dụng cụ - thiết bị - hóa chất.

Dung cụ - thiết bị chính. Nội dung nghiÊn CỨU. Tach các hợp chất không phân CUC. Trích ly bằng phương pháp Soxhlet với dung môi ethyl acetate.

Trích bằng phương pháp siêu tới hạn với dung môi CO2 siêu tới hạn. Phương pháp nghiÊn CỨU. Xác định độ 4m của cao dựa theo độ giảm khối lượng của cao khi sấy 2))/XẳẳầđắđáđaallỔỐỞỞỞỎỞỐỎỐỔÔÔỐỔỐỔỔỔỔẢỔỔỖÕ. Phương pháp phân tích hàm lượng hợp chat phenolic tổng.

Phương pháp phân tích hoạt tính oxi hóa theo ABTS””. Phương pháp định lượng flavonoid tong. Phương pháp xác định thành phần hóa học của cao chiết băng GC — MS (Gas chromatography — mass SD€CffOm€TY). Phuong pháp xác định ham lượng quercetin và kaemferol.

Phương pháp xử lý số liệu thực nghiệm .--¿--- ¿5 +c+czcs+s¿39 CHƯƠNG 4. KẾT QUA VA BAN LUẬN. Ảnh hưởng của tỷ lệ ethanol đến chất lượng cao trích. Anh hưởng của lưu lượng tong (CO + ethanol) đến chất lượng cao trích.

Ảnh hưởng của nhiệt độ đến chất lượng cao trích. Anh hưởng của áp suất đến chất lượng cao trích. So sánh chất lượng hai mẫu cao lá lược vàng — CLC và CLE. KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHI.- tk 1121 1E 91919191 1E 111153 511111511119 111g ng ng rkg 53 5.11110111 53 TÀI LIEU THAM KHẢO.

G-G G63 539191 3E 9191 1 1 111121 1E 1121 eo 54 PHỤ LỤC Vill DANH MUC BANG Bang 2-1: Tổng hop tác dụng sinh hoc của một số chất có trong cây lược vàng .11 Bang 3-1: Hóa chất dùng trong thí nghiệm. - ¿2 + + 25225252 2*+E+£*£EzEezezxcxee 27 Bảng 3-2: Các thông số khảo sát trong thí nghiệm trích ly bằng CO> siêu tới hạn.33 Bang 4-1: Kết quả hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa theo tỷ lệ 1019011 4454. 40 Bảng 4-2: Kết quả hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa theo lưu lượng tong (CO2 + ethanno). 42 Bảng 4-3: Kết quả hàm lượng polyphenol tong và hoạt tính kháng oxi hóa theo nhiệt AO .ecceecssccccessscccesssnecceesseeecessnneccesesaeecesesneeceeeesaeeeeseaneeceseueeeeseeaaaeeeeseaueeeeeeeaaeeseeeaaeeees 45 Bang 4-4: Kết quả hàm lượng polyphenol tong va hoạt tính kháng oxi hóa theo áp SUẤT.11 0101011111100 11 11g 0kg 47 Bang 4-5: So sánh chất lượng hai mẫu cao trích của lá lược vàng .--- 50 Bang 4-6: Kết quả phân tích GC-MS của cao lá CLE weeeecescscssssessssesessesesesssseseseesesee 51 Bảng 4-7: Kết quả phân tích GC-MS của cao lá CLC veeeecesescscssessssesessesesessseseseesesen 52 Bang 4-8: Kết quả phân tích HPLC của hai mẫu cao lá .------ + + 25552: 52 IX DANH MỤC HÌNH Hình 2-1: Lá lược vàng.

6 Hình 2-2: Thuốc bôi Callisia fragrans với NOC Ong.-------+s++csscs+xsescxceee 15 Hình 2-3: Tra túi lọc Tam an. - ---- << << 3331111131131 111553 111111555515 1511155555 16 Hình 2-4: Bộ dụng cụ SOxÏ€f.--c Q10 0 00002221 1 92 1v ng xxx vu 17 Hình 2-5: Giản đồ ba pha của CO2.--¿- 5+ 2522523 ‡E*E2EEEEEEEEEEE 5212111115 5111 Ecxe, 21 Hình 3-1: Sơ đỗ xử lý nguyên liệU. ----¿- - 256252 SE2E+E£E‡ESEEEEEEEErkrkrkrrerrrreee 26 Hình 3-2: Hệ thống thiết bị CO2 siêu tới hạn.--- ¿22 +2+++££2£E+E+EzEzrzrsrereee 28 Hình 3-3: Giản đồ vận hành hiển thị trên máy tính .------ 55 + s+s+szc+2 29 Hình 3-4: Hệ thống thiết bị cô quay chân không Buchi. ------ 2 2552: 30 Hình 3-5: Sơ đỗ nội dung nghiên COU .-- ¿2 + 5252252 +E+E+EE£E£EvE£Erverererrees 31 Hình 4-1: Anh hưởng của ty lệ ethanol đến hàm lượng polyphenol tông.

40 Hình 4-2: Ảnh hưởng của tỷ lệ ethanol đến hoạt tính kháng oxi hóa. Al Hình 4-3: Anh hưởng của lưu lượng tông (CO? + ethanol) đến hàm lượng polyphenol 1. 43 Hình 4-4: Ảnh hưởng của lưu lượng tổng (COa + ethanol) đến hoạt tính kháng oxi ¡0. 43 Hình 4-5: Ảnh hưởng của nhiệt độ đến hàm lượng polyphenol tổng.

45 Hình 4-6: Ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt tính kháng oxi hóa.------- 46 Hình 4-7: Ảnh hưởng của áp suất đến hàm lượng polyphenol tông. 46 Hình 4-8: Ảnh hưởng của áp suất đến hoạt tinh kháng oxi hóa.-------- 46 DANH MỤC CÁC TU VIET TAT Từ viết tắt Tên đầy đủ Giai thích ABTS 2,2’—Azinolis-(3-ethyl Benzo Thiazoline-6-Sulfonic axit). ATP Adenosine triphosphate ANOVA Analysis Of Variance phân tích sự khác biệt. CLC Cao lá CO2 cao chiết từ lá lược vàng băng dung môi CO2 siêu tới hạn với đồng dung môi ethanol.

CLE Cao lá ethyl acetate cao chiết từ lá lược vàng băng dung môi ethyl acetat. DLC Dich 1a CO2 dịch chiết từ lá lược vàng bang dung môi CO2 siêu tới hạn với đồng dung môi ethanol. DLE Dịch lá ethyl acetate dịch chiết từ lá lược vàng băng dung môi ethyl acetat. DPPH 2 ,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl.

FA Axid fomic FCR Folin- Ciocalteau reagent Thuốc thử Folin- Ciocalteau. GAE Gallic axit Equivalent Hàm lượng phenolic tổng tinh theo đương lượng axit Gallic. GC — MS Gas chromatography — mass | sac kí khí kết hợp khôi pho. spectrometry HPLC High Performance Liquid | sắc kí long hiệu năng cao.

Chromatography IC50 Inhibitory concentration at | nông độ ức chê 50% đôi tượng thử nghiệm. 50% LH bột lá lược vàng khô sau khi ngâm hexan. MDA Malondialdehyd SCO2 supercritical CO2 CO: siêu tới han TE/TEAC | Trolox Equivalent/ Trolox | Hoạt tính khang oxi hóa tính theo đương Equivalent Antioxidant lượng Trolox. ĐẶT VAN DE Cây lược vàng, còn gọi là cây lan vòi, có tên khoa hoc là Callisia fragrans (Lindl.) Woods, thuộc họ Thai lai (Commelinaceae), có nguon sốc từ Trung Mỹ, sau đó được di thực đến nhiều nơi khác.

Hiện cây này mọc hoang hoặc được trồng nhiều ở Nga, Việt Nam, Úc. Từ năm 2006, bắt đầu rộ lên thông tin một số người dân ở Thanh Hóa sử dụng lược vàng làm thuốc dựa trên một số tài liệu không chính thức của Nga để chữa nhiều chứng bệnh khác nhau thay có hiệu quả như viêm đường hô hap, viêm răng lợi, viêm đường tiết niệu, bệnh dạ day, đau xương khớp, các bệnh tim mạch, huyết áp thậm chí cả ung thư. Từ đó, “con sốt lược vàng” bat đầu bùng phát ở Thanh Hóa, sau đó lan truyền ra nhiễu tỉnh và thành phố, từ Bắc chí Nam [1]. Theo dân gian, cây lược vàng có tác dụng thanh nhiệt giải độc, tiêu viêm, hóa đờm, cầm máu, hoạt huyết, dùng chữa lành viết thương, vết bam tím.

Dân gian còn dùng cây lược vàng làm phương thuốc chữa bệnh loét dạ dày, tá trang, lợi tiểu, ngăn ngừa và điêu tri các khôi u trong cơ thê. Gan đây, một số nghiên cứu về thành phân hóa học cũng như các tác dụng của cây lược vàng đã công bồ cho thay trong cây lược vàng có chứa các chất có hoạt tính sinh học như: flavonoid, steroid,. có lợi cho sức khoẻ. Vậy, nhu cầu đặt ra tiếp theo làm sao dé khai thác triệt dé các hợp chất có hoạt tính sinh học từ lá cây lược vàng.

Các nghiên cứu trích ly các hợp chat từ cây lược vàng trước đó hau hết được thực hiện bang phương pháp chiết hồi lưu, phương pháp Soxhlet hay phương pháp ngâm dầm với các dung môi như hexan, ethyl acetat, ethanol,. Cho đến nay, chưa có một công bồ trong và ngoải nước nào nghiên cứu các thành phan cũng như các hoạt tính trong cao trích của cây lược vàng bang phương pháp CO2 siêu tới hạn. Công nghệ chiết bằng lưu chất COa siêu tới hạn đã và đang được áp dụng pho biến dé chiết tách các hoạt chất sử dụng trong các ngành công nghiệp thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm, các hoạt chất thiên nhiên. Một số nghiên cứu đã công bố hiệu quả tốt khi trích ly các hợp chất thuộc nhóm hợp chat phenolic băng phương pháp sử dụng lưu chất COz siêu tới hạn như: —S.

Akay và các cộng sự đã nghiên cứu thu được kết quả hàm lượng polyphenol tong trong dịch trích của trái dâu tây bang phương pháp sử dụng lưu chất CO2 siêu tới hạn cao hơn trong dịch trích của trái dâu tây băng phương pháp trích ly với phương pháp Soxhlet với dung môi ethanol [4]. — Kết quả nghiên cứu điều kiện tối ưu của quá trình trích ly các hợp chất có hoạt tính sinh học từ vỏ nho bằng phương pháp COa siêu tới hạn bởi K. Ghafoor và các công sự đã cho thấy tiềm năng của phương pháp này trong quá trình trích ly các hợp chất có hoạt tính sinh học như: các hợp chất thuộc nhóm phenolic, nhóm anthocyanin. từ các nguyên liệu thực vật [Š].Prakash Maran và các cộng sự cũng đã nghiên cứu tối ưu hóa điều kiện trích ly các hợp chất flavonoid từ lá trà bằng phương pháp CO: siêu tới hạn [6].

Vì thế, dé tài luận văn này bước đầu khảo sát sơ bộ quá trình trích ly các hop chất polyphenol — là một trong những nhóm chất có hoạt tính sinh học có lợi trên sức khỏe con người — từ lá cây lược vàng bằng phương pháp dùng lưu chất CO siêu tới hạn. Với bước đầu thăm dò sơ bộ các yếu tô vận hành thiết bị COa siêu tới han, đề tài mong muốn thu nhận được cao chiết lá lược vàng chứa nhiều hàm lượng polyphenol tong, hàm lượng flavonoid tông và hoạt tính kháng oxi hóa cao hơn cao chiết lá lược vàng được trích ly bằng phương pháp Soxhlet với dung môi ethyl acetate. Hy vọng kết quả khảo sát này sẽ đóng góp nhiều thêm cho những nghiên cứu ứng dụng các hợp chất có hoạt tính sinh học trong cây lược vàng tiếp theo như thức uống, thực phâm chức nang,. được chê biên từ lá lược vàng.

Mục tiêu nghiên cứu Dé tài bước dau khảo sát sơ bộ các thông sô của thiệt bị CO2 siêu tới hạn trong quá trình trích ly lá lược. Đề tài mong muốn thu nhận được cao chiết lá lược vàng bang phương pháp mới: trích ly COa siêu tới hạn chứa nhiều hàm lượng polyphenol tông và có hoạt tính kháng oxi hóa cao hơn hàm lượng polyphenol tổng và hoạt tính kháng oxi hóa của cao chiết bằng phương pháp với dung môi ethyl acetate. Hợp chất polyphenol 2. Giới thiệu [7] Polyphenol là các hợp chất mà phân tử của chúng chứa nhiều vòng Benzen, trong đó có một, hai hoặc nhiều hơn hai nhóm hydroxyl.

Dựa vào đặc trưng của cầu trúc hóa học mà hợp chất polyphenol được chia thành ba nhóm chính: Nhóm hop chat phenol Cs — Ci: axit gallic Nhóm hop chat phenol Co — Cs: axit caffeic Nhóm hop chat phenol Cs — Ca — Ce: catechin, flavonoid 2. Chức năng [8] Polyphenol được chú ý bởi kha năng chống oxi hóa.