Nghiên Cứu Sự Lưu Hành Của Virus Gây Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm Ở Gà (CIAV) Tại Hà Nội

Nghiên cứu sự lưu hành của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà tại Hà Nội và vùng phụ cận, cung cấp thông tin quan trọng cho ngành chăn nuôi.

• Tác giả: Nguyễn Quốc Doanh
• Người hướng dẫn: PGS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên Cứu Sự Lưu Hành Của Virus Gây Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm Ở Gà Tại Hà Nội
• Loại tài liệu: luận văn
• Năm xuất bản: 2017
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 1.1. Lời cam đoan
• 1.2. Mục lục
• 1.3. Danh mục chữ viết tắt
• 1.4. Danh mục bảng
• 1.5. Danh mục hình
• 1.6. Trích yếu luận văn
• 1.7. Thesis abstract
• 1.8. Tính cấp thiết của đề tài
• 1.9. Mục tiêu nghiên cứu
• 1.10. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài
• 1.11. Tổng quan tài liệu
• 1.11.1. Tình hình nghiên cứu về virus gây ức chế miễn dịch
• 1.11.2. Hiểu biết về CIAV và bệnh do CIAV gây ra
• 1.11.3. Lịch sử và địa dư bệnh
• 1.11.4. Đặc điểm dịch tễ học
• 1.11.5. Biện pháp kiểm soát bệnh
• 1.12. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
• 1.12.1. Đối tượng nghiên cứu
• 1.12.2. Nội dung nghiên cứu
• 1.12.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
• 1.12.4. Vật liệu nghiên cứu
• 1.12.5. Phương pháp nghiên cứu
• 1.12.5.1. Phương pháp lấy mẫu
• 1.12.5.2. Phương pháp tách chiết ADN
• 1.12.5.3. Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV
• 1.12.5.4. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử
• 1.13. Kết quả và thảo luận
• 1.13.1. Kết quả xác định sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận
• 1.13.2. Kết quả tối ưu hóa phản ứng PCR để xác định CIAV
• 1.13.3. Sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận
• 1.13.4. Kết quả PCR phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm
• 1.13.5. Kết quả giải trình tự gen CIAV
• 1.13.6. Kết quả phân tích một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của CIAV
• 1.13.7. Kết quả phân loại genotype của CIAV
• 1.13.8. Kết quả so sánh trình tự amino acid giữa các nhóm di truyền của CIAV
• 1.13.9. Kết quả nghiên cứu quá trình biến đổi amino acid của protein VP1
• 1.14. Kết luận và đề nghị
• Tài liệu tham khảo

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Virus Gây Bệnh Thiếu Máu Gà Tại Hà Nội

Nghiên cứu về virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) tại Hà Nội và vùng phụ cận là một bước tiến quan trọng trong việc bảo vệ ngành chăn nuôi gia cầm. Bệnh thiếu máu truyền nhiễm (CIA) do CIAV gây ra, đặc trưng bởi tình trạng thiếu máu do tủy xương không sản sinh đủ tế bào máu, teo các cơ quan lympho, dẫn đến suy giảm miễn dịch và dễ mắc các bệnh kế phát. Nghiên cứu này nhằm xác định sự lưu hành của CIAV và phân tích đặc điểm dịch tễ học phân tử của virus, cung cấp cơ sở khoa học cho các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả. Theo "chiến lược phát triển chăn nuôi đến năm 2020", việc kiểm soát dịch bệnh là yếu tố then chốt để đạt được mục tiêu tăng trưởng đàn gà.

1.1. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu CIAV Trong Chăn Nuôi Gà

Nghiên cứu CIAV có ý nghĩa quan trọng trong việc bảo vệ sức khỏe đàn gà và năng suất chăn nuôi. Bệnh gây ra bởi virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà có thể gây thiệt hại lớn về kinh tế do giảm tăng trọng, tăng tỷ lệ chết và giảm hiệu quả sử dụng thức ăn. Việc hiểu rõ về sự lưu hành và đặc điểm của virus giúp các nhà khoa học và người chăn nuôi đưa ra các biện pháp phòng ngừa và kiểm soát bệnh hiệu quả hơn. Nghiên cứu này cung cấp thông tin quan trọng về tình hình dịch tễ học bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà tại Hà Nội.

1.2. Mục Tiêu Và Phạm Vi Nghiên Cứu Về Virus Thiếu Máu Gà

Mục tiêu chính của nghiên cứu là xác định sự lưu hành của CIAV ở đàn gà tại Hà Nội và vùng phụ cận, đồng thời nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của virus. Phạm vi nghiên cứu bao gồm việc thu thập mẫu bệnh phẩm từ các trang trại gà, phân tích bằng phương pháp PCR, giải trình tự gen và phân tích di truyền của virus. Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp thông tin chi tiết về các chủng virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà đang lưu hành và sự biến đổi gen của chúng.

II. Thách Thức Kiểm Soát Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm Ở Gà

Kiểm soát bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIA) là một thách thức lớn đối với ngành chăn nuôi gia cầm. Bệnh không chỉ gây ra các triệu chứng lâm sàng rõ rệt như thiếu máu, xuất huyết mà còn gây suy giảm miễn dịch, làm tăng nguy cơ mắc các bệnh kế phát. Sự đa dạng di truyền của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) cũng là một yếu tố gây khó khăn trong việc phát triển vaccine hiệu quả. Do đó, việc nghiên cứu và hiểu rõ về các yếu tố dịch tễ học và đặc điểm di truyền của virus là rất quan trọng để đưa ra các biện pháp kiểm soát bệnh hiệu quả.

2.1. Ảnh Hưởng Của Suy Giảm Miễn Dịch Do CIAV Gây Ra

CIAV gây suy giảm miễn dịch ở gà, làm giảm khả năng chống lại các tác nhân gây bệnh khác. Điều này dẫn đến việc gà dễ mắc các bệnh kế phát như nhiễm trùng đường hô hấp, tiêu chảy và các bệnh do vi khuẩn, virus hoặc nấm gây ra. Suy giảm miễn dịch cũng làm giảm hiệu quả của vaccine, khiến cho việc phòng bệnh trở nên khó khăn hơn. Theo nghiên cứu, ức chế miễn dịch mở đường cho nhiều bệnh kế phát xảy ra, làm giảm hiệu lực của vaccine.

2.2. Sự Đa Dạng Di Truyền Của Virus Gây Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm

CIAV có sự đa dạng di truyền tương đối cao, với nhiều chủng virus khác nhau lưu hành trên thế giới. Sự khác biệt về trình tự gen giữa các chủng virus có thể ảnh hưởng đến tính gây bệnh và khả năng đáp ứng miễn dịch của gà. Việc giải trình tự gen và phân tích di truyền của các chủng virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà là rất quan trọng để hiểu rõ về sự tiến hóa và lây lan của virus.

2.3. Yếu Tố Nguy Cơ Gây Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm Ở Gà

Nhiều yếu tố có thể làm tăng nguy cơ mắc bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà, bao gồm: tuổi gà (gà con dễ mắc bệnh hơn), tình trạng miễn dịch (gà không có miễn dịch thụ động từ mẹ dễ mắc bệnh hơn), điều kiện vệ sinh chuồng trại kém, mật độ nuôi cao và stress. Việc xác định và kiểm soát các yếu tố nguy cơ này là rất quan trọng để giảm thiểu tỷ lệ mắc bệnh và thiệt hại kinh tế.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Virus Thiếu Máu Truyền Nhiễm Tại Hà Nội

Nghiên cứu về virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) tại Hà Nội sử dụng các phương pháp hiện đại để xác định sự lưu hành và đặc điểm di truyền của virus. Các phương pháp bao gồm lấy mẫu bệnh phẩm, tách chiết ADN, tối ưu hóa phản ứng PCR để chẩn đoán CIAV và nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử. Việc áp dụng các phương pháp này giúp thu thập thông tin chính xác và chi tiết về tình hình bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà tại khu vực nghiên cứu.

3.1. Quy Trình Lấy Mẫu Bệnh Phẩm Gà Nghi Nhiễm CIAV

Quy trình lấy mẫu bệnh phẩm đóng vai trò quan trọng trong việc đảm bảo tính chính xác của kết quả nghiên cứu. Mẫu bệnh phẩm được lấy từ các trang trại gà có biểu hiện lâm sàng nghi ngờ mắc bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà, bao gồm các mẫu máu, tủy xương và các cơ quan lympho. Mẫu được bảo quản và vận chuyển đúng cách để đảm bảo chất lượng ADN.

3.2. Tối Ưu Hóa Phản Ứng PCR Để Chẩn Đoán CIAV Chính Xác

Phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction) là một phương pháp quan trọng để phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm. Để đảm bảo tính chính xác và độ nhạy của phản ứng, cần tối ưu hóa các thông số như nồng độ mồi, nhiệt độ ủ và thời gian kéo dài mạch. Việc sử dụng mồi đặc hiệu cho gen VP1 của CIAV giúp phát hiện virus một cách chính xác.

3.3. Giải Trình Tự Gen Và Phân Tích Dịch Tễ Học Phân Tử CIAV

Giải trình tự gen của CIAV là một bước quan trọng để xác định các chủng virus đang lưu hành và phân tích sự biến đổi gen của chúng. Trình tự gen VP1 được sử dụng để so sánh với các chủng virus khác trên thế giới và xây dựng cây phát sinh chủng loại. Phân tích dịch tễ học phân tử giúp hiểu rõ về nguồn gốc và sự lây lan của virus.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu Sự Lưu Hành Virus Thiếu Máu Gà Tại Hà Nội

Kết quả nghiên cứu cho thấy virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) lưu hành rộng rãi tại các trang trại gà ở Hà Nội và vùng phụ cận. Tỷ lệ dương tính với CIAV trong các mẫu bệnh phẩm là khá cao, cho thấy bệnh là một vấn đề đáng quan tâm đối với ngành chăn nuôi gia cầm tại khu vực này. Phân tích di truyền của các chủng virus cho thấy sự đa dạng tương đối về mặt di truyền.

4.1. Tỷ Lệ Lưu Hành CIAV Tại Các Trang Trại Gà Ở Hà Nội

Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ lưu hành CIAV tại các trang trại gà ở Hà Nội là khá cao. Trong số các trang trại được kiểm tra, phần lớn đều có sự hiện diện của virus. Điều này cho thấy bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà là một vấn đề phổ biến và cần được quan tâm.

4.2. Phân Tích Di Truyền Các Chủng Virus CIAV Phân Lập Được

Phân tích di truyền của các chủng virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà phân lập được cho thấy sự đa dạng tương đối về mặt di truyền. Các chủng virus này có sự khác biệt về trình tự gen VP1, cho thấy sự tiến hóa và biến đổi của virus.

4.3. So Sánh Các Chủng CIAV Với Các Chủng Vaccine Hiện Có

So sánh các chủng virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà phân lập được với các chủng vaccine hiện có cho thấy sự khác biệt về trình tự gen. Điều này có thể ảnh hưởng đến hiệu quả của vaccine trong việc bảo vệ gà khỏi bệnh. Cần có các nghiên cứu tiếp theo để đánh giá hiệu quả của vaccine đối với các chủng virus đang lưu hành.

V. Ứng Dụng Thực Tiễn Nghiên Cứu Virus Gây Bệnh Thiếu Máu Gà

Nghiên cứu về virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) có nhiều ứng dụng thực tiễn trong việc phòng chống dịch bệnh và nâng cao hiệu quả chăn nuôi gia cầm. Kết quả nghiên cứu cung cấp thông tin quan trọng cho việc xây dựng các biện pháp phòng ngừa và kiểm soát bệnh hiệu quả, đồng thời giúp lựa chọn vaccine phù hợp để bảo vệ đàn gà.

5.1. Xây Dựng Biện Pháp Phòng Ngừa Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm

Dựa trên kết quả nghiên cứu, có thể xây dựng các biện pháp phòng ngừa bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà hiệu quả, bao gồm: tăng cường vệ sinh chuồng trại, kiểm soát các yếu tố nguy cơ, sử dụng vaccine phù hợp và thực hiện các biện pháp an toàn sinh học.

5.2. Lựa Chọn Vaccine Phù Hợp Để Bảo Vệ Đàn Gà Khỏi CIAV

Kết quả phân tích di truyền của các chủng virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà giúp lựa chọn vaccine phù hợp để bảo vệ đàn gà khỏi bệnh. Cần lựa chọn vaccine có chứa các chủng virus tương đồng với các chủng đang lưu hành để đảm bảo hiệu quả bảo vệ.

5.3. Nâng Cao Hiệu Quả Chăn Nuôi Gà Thông Qua Kiểm Soát CIAV

Kiểm soát bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà giúp nâng cao hiệu quả chăn nuôi gia cầm bằng cách giảm tỷ lệ chết, tăng tăng trọng và cải thiện hiệu quả sử dụng thức ăn. Điều này góp phần tăng lợi nhuận cho người chăn nuôi và đảm bảo nguồn cung thực phẩm an toàn cho cộng đồng.

VI. Kết Luận Và Hướng Nghiên Cứu Về Virus Thiếu Máu Gà Tương Lai

Nghiên cứu về virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (CIAV) tại Hà Nội đã cung cấp những thông tin quan trọng về sự lưu hành và đặc điểm di truyền của virus. Kết quả nghiên cứu là cơ sở khoa học cho việc xây dựng các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả. Tuy nhiên, cần có các nghiên cứu tiếp theo để hiểu rõ hơn về sự tiến hóa và lây lan của virus, cũng như đánh giá hiệu quả của các biện pháp kiểm soát bệnh.

6.1. Tóm Tắt Kết Quả Nghiên Cứu Về CIAV Tại Hà Nội

Nghiên cứu đã xác định được sự lưu hành rộng rãi của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà tại Hà Nội và vùng phụ cận. Phân tích di truyền của các chủng virus cho thấy sự đa dạng tương đối về mặt di truyền. Kết quả nghiên cứu là cơ sở khoa học cho việc xây dựng các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả.

6.2. Hướng Nghiên Cứu Tiếp Theo Về Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm

Các hướng nghiên cứu tiếp theo về bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà bao gồm: nghiên cứu về cơ chế gây bệnh của virus, đánh giá hiệu quả của các biện pháp kiểm soát bệnh, phát triển vaccine mới và nghiên cứu về sự tiến hóa và lây lan của virus.

6.3. Đề Xuất Giải Pháp Kiểm Soát Bệnh Thiếu Máu Truyền Nhiễm

Để kiểm soát bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà hiệu quả, cần thực hiện đồng bộ các giải pháp, bao gồm: tăng cường vệ sinh chuồng trại, kiểm soát các yếu tố nguy cơ, sử dụng vaccine phù hợp, thực hiện các biện pháp an toàn sinh học và tăng cường giám sát dịch bệnh.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN QUỐC DOANH NGHIÊN CỨU SỰ LƯU HÀNH CỦA VIRUS GÂY BỆNH THIẾU MÁU TRUYỀN NHIỄM Ở GÀ (CHICKEN INFECTIOUS ANEMIA VIRUS - CIAV) TẠI HÀ NỘI VÀ VÙNG PHỤ CẬN Ngành: Thú y Mã số: 60.01 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ TS. Nguyễn Thị Thu Hằng NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 c LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng dùng để bảo vệ lấy bất kỳ học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc.

Hà Nội, ngày tháng năm2017 Tác giả luận văn Nguyễn Quốc Doanh i c LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ, động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi được bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc PGS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ và TS. Nguyễn Thị Thu Hằng đã tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo Đội Kiểm Dịch Động Vật Lưu Động – Chi Cục Thú Y Hà Nộiđã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài và học tập. Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày tháng năm2017 Tác giả luận văn Nguyễn Quốc Doanh ii c MỤC LỤC Lời cam đoan.

ii Mục lục. iii Danh mục chữ viết tắt.v Danh mục bảng. vi Danh mục hình. vii Trích yếu luận văn.

viii Thesis abstract. Tính cấp thiết của đề tài. Mục tiêu nghiên cứu. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài.

Tổng quan tài liệu. Tình hình nghiên cứu về virus gây ức chế miễn dịch. Hiểu biết về ciav và bệnh do ciav gây ra. Lịch sử và địa dư bệnh.

Đặc điểm dịch tễ học. Biện pháp kiểm soát bệnh. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu.

Nội dung nghiên cứu. Địa điểm và thời gian nghiên cứu. Vật liệu nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu.

Phương pháp lấy mẫu. Phương pháp tách chiết ADN. Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử.

Kết quả và thảo luận. Kết quả xác định sự lưu hành ciav ở đàn gà nuôi tại hà nội và vùng phụ cận. Kết quả tối ưu hóa phản ứng PCR để xác định CIAV. Sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận.

Kết quả PCR phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm. Kết quả giải trình tự gen ciav. Kết quả phan tíchmột số đặc điểm dịch tễ học phân tử của ciav. Kết quả phân loại genotype của CIAV.

Kết quả so sánh trình tự animo acid giữa các nhóm di truyền của CIAV. Kết quả nghiên cứu quá trình biến đổi aminoacid của protein VP1. Kết luận và đề nghị. 43 Tài liệu tham khảo.

49 iv c DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt ALV Avian Leucosis Virus ARV Avian Reovirus CAA Chicken Anemia Agent CAV Chicken Anemia Virus CIA Chicken Infectious Anemia CIAV Chicken Infectious Anemia Virus CPE Cytophathogenic Effect DNA Deoxyribonucleic acid ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay FAdV4 Fowl Adenovirus serotype 4 IBDV Infectious Bursal Disease Virus IBDV infectious bural disease virus IBH inclusion body hepatitis IFN interferon IL-1 Interleukin-1 IL-2 Interleukin-2 MDCC Marek’s disease chicken cel MDV Marek’s Disease Virus PCR Deoxyribonucleic acid PCV Packed Cell Volume REV Reticuloendotheliosis Virus TCID50 50% Tissue Culture Infective Dose v c DANH MỤC BẢNG Bảng 3. Trình tự mồi đặc hiệu phát hiện và giải trình tự gen VP1. Chu trình nhiệt của phản ứng PCR. Bố trí thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ mồi.

Trình tự gen tham chiếu. Tổng hợp tình hình thu thập mẫu gà theo lứa tuổi. Kết quả PCR phát hiện CIAV trong mẫu bệnh phẩm. Kết quả kiểm tra CIAV ở các lứa tuổi gà .32 vi c DANH MỤC HÌNH Hình 2.

Gà bệnh bị xuất huyết ở cánh, ngực; mào nhợt nhạt do thiếu máu. Bệnh tích xuất huyết đặc trưng. Gan, thận nhạt màu. Sơ đồ các vùng gen của CIAV được nhân lên bởi mồi CAVVP3F/CAV2.

Tối ưu hóa nhiệt độ bắt mồi của phản ứng PCR. Tối ưu nồng độ mồi của phản ứng PCR. Gà bị xuất huyết ở cánh, dưới da, cơ. Gan sưng, tụ huyết hoặc xuất huyết.

Thận sưng to, nhạt màu. Tuyến ức bị teo, xuất huyết. Minh họa kết quả phản ứng PCR phát hiện CIAV. Kết quả PCR giải trình tự gencủa chủng phân lập C20.

Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 1- 110. Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 111- 440. Trình tự gen của 26 chủng CIAV từ vị trí 141- 609. Kết quả so sánh mức tương đồng nucleotide giữa 26 chủng CIAV.

Cây phát sinh chủng loại của CIAV. Trình tự amino acid protein VP1 của CIAV. Trình tự amino acid protein VP1 của CIAV. Sự thay đổi amino acid của VP1 ở các nút dẫn tới nhánh CIAV lưu hành ở Việt Nam .42 vii c TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Quốc Doanh Tên Luận văn: “Nghiên cứu sự lưu hành của virus gây bệnh thiếu máu truyền nhiễm ở gà (Chicken Infectious Anemia Virus - CIAV) tại Hà Nội và vùng phụ cận”.

Ngành: Thú y Mã số: 60.01 Tên cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: - Xác định được có hay không có sự lưu hành của CIAV ở đàn gà thuộc địa bàn nghiên cứu. - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của CIAV. Nội dung nghiên cứu Trong khuôn khổ nghiên cứu của đề tài, chúng tôi thực hiện các nội dung sau: - Xác định sự lưu hành CIAV ở đàn gà nuôi tại Hà Nội và vùng phụ cận. - Giải trình tự gen mã hóa protein VP1 của CIAV.

- Phân tích một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của CIAV. Phương pháp: Phương pháp lấy mẫu; Phương pháp tách chiết ADN; Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR chẩn đoán CIAV; Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử. Kết quả chính và kết luận: (1) Trong số 14 trại kiểm tra có đến 13 trại (tỷ lệ 92,86%) phát hiện có sự lưu hành của CIAV; chỉ duy nhất 01 trại (tỷ lệ 7,14%) âm tính với kết quả PCR phát hiện CIAV. Trong tổng số 124 mẫu bệnh phẩm của gà có triệu chứng lâm sàng được kiểm tra thì tỷ lệ phát hiện được CIAV rất cao (63 mẫu dương tính, tỷ lệ 50,81%).

(2) Đã giải trình tự gen thành công phân đoạn gen VP1 của CIAV. 26 chủng CIAV được lựa chọn để giải trình tự có mức tương đồng rất cao về trình tự nucleotide, từ 96,8% đến 100%. (3) Qua phân tích đặc điểm dịch tễ học phân tử dựa vào trình tự gen mã hóa protein VP1, có thể kết luận: - Các chủng CIAV lưu hành có sự đa dạng tương đối về mặt di truyền. - Các chủng này nằm ở nhánh di truyền khác với các chủng virus vacxin.

viii c THESIS ABSTRACT Name of Master student: Nguyen Quoc Doanh Thesis title: “Researchthe prevalence of Chicken Infectious Anemia Virus - CIAVof chicken in Hanoi and surrounding areas”. Major:Veterinary Medicine Code:60.01 Name of Institute: Vietnam National University of Agriculture. Research Objectives Determiningthe prevalence of CIAVof chicken in Hanoi and surrounding areas. Researching molecular epidemiological characteristics of CIAV.

Research contents: - Determining the prevalence of CIAVof the chicken in Hanoi and surrounding areas. - Sequencingprotein VP1 geneof CIAV. - Researching molecular epidemiological characteristics of CIAV. Methodology - Sampling method; - DNA extraction method; - PCR for identifying CIAV; - Methods for researching molecular epidemiological characteristics of CIAV.

Results: (1) By using PCR,13 farms (92.86%)of tested 14 farms were CIAV positive; there was only one farm (7.14%) was CIAVnegative; In total124 samples of chickenwhich had clinical symptoms,there were 63 CIAV positive samples (50.81%); (2) 26 sequencing of VP1gene of CIAVin this study sharedfrom 96.8% to 100% nucleotide identity. (3) By phylogenetic analysis based on nucleotide sequences of VP1 gene of CIAV showed that: - CIAV strains in this study have geneticvariation; - These strains were located in different branches of phylogenetic tree with vaccine virus strains. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Trước diễn biến phức tạp của bệnh, dịch gia cầm trên thế giới và ở Việt Nam, rất nhiều các nhà khoa học đã tập trung nghiên cứu các vấn đề mới.Sự xuất hiện của một số bệnh mới và ảnh hưởng của chúng tới khả năng miễn dịch của vật nuôi đã gây ra những hậu quả nghiêm trọng cho ngành chăn nuôi và đang trở thành vấn đề gây quan tâm cho những nhà khoa học làm việc trong ngành Thú y trên thế giới và ở Việt Nam. Một loạt câu hỏi được đưa ra cần có câu trả lời: nguyên nhân nào dẫn tới sự suy giảm miễn dịch? Cơ chế nào gây suy giảm miễn dịch? Những dấu hiệu hay phương pháp chẩn đoán sự suy giảm miễn dịch? Biện pháp kiểm soát và giảm thiểu ảnh hưởng của sự suy giảm miễn dịch? Câu trả lời nằm ở những yếu tố gây ức chế miễn dịch, trong đó có vai trò của một số virus.

Theo “chiến lược phát triển chăn nuôi đến năm 2020” đã được Thủ tướng phê duyệt tại Quyết định số 10/2008/QĐ-TTg, định hướng phát triển đến năm 2020 tổng đàn gà tăng bình quân trên 5% năm, đạt khoảng 300 triệu con, trong đó đàn gà công nghiệp chiếm khoảng 33%. Tăng trưởng về quy mô đàn gia cầm cũng làm gia tăng áp lực dịch bệnh, kéo theo nguy cơ xuất hiện nhiều dịch bệnh mới. Nhận thức được tính nguy hiểm của nhóm virus gây ức chế miễn dịch như: ức chế miễn dịch mở đường cho nhiều bệnh kế phát xảy ra (Subler et al., 2006), làm giảm hiệu lực của vacxin (Sun et al.