Nghiên Cứu Vi Sinh Vật Đối Kháng Với Phytophthora infestans Gây Bệnh Sương Mai Cà Chua

Khóa luận nghiên cứu vi sinh vật đối kháng với nấm Phytophthora infestans gây bệnh sương mai trên cà chua, góp phần bảo vệ cây trồng.

• Tác giả: Lê Huy Mẫn
• Người hướng dẫn: TS. Võ Thị Ngọc Hà
• Trường học: Trường Đại Học Nông Lâm
• Chuyên ngành: Bảo Vệ Thực Vật
• Đề tài: Nghiên Cứu Vi Sinh Vật Đối Kháng Phytophthora infestans Gây Bệnh Sương Mai Cà Chua
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• TÓM TẮT
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Sơ lược về cây cà chua
• 1.2. Giá trị dinh dưỡng và giá trị kinh tế
• 1.3. Tình hình sản xuất trong và ngoài nước
• 1.4. Bệnh sương mai trên cà chua do Phytophthora infestans
• 1.4.1. Phân bố và tác hại
• 1.4.2. Triệu chứng
• 1.5. Tổng quan về Phytophthora infestans
• 1.5.1. Đặc điểm và phân loài khoa học
• 1.5.2. Ký chủ và sự lây lan
• 1.5.3. Quy luật phát sinh và phát triển của bệnh
• 1.5.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình phát sinh phát triển của bệnh
• 1.5.5. Biện pháp phòng trừ
• 1.6. Một số nghiên cứu trong và ngoài nước về vi sinh vật đối kháng
• 2. CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
• 2.2. Dụng cụ, thiết bị máy móc
• 2.3. Môi trường, hóa chất
• 2.4. Vi sinh vật đối kháng
• 2.4.1. Thu thập, phân lập và định danh mẫu nấm Phytophthora infestans
• 2.4.1.1. Thu thập mẫu bệnh
• 2.4.1.2. Phân lập mẫu nấm
• 2.4.1.3. Kiểm tra mẫu nấm được cung cấp bằng đặc điểm hình thái
• 2.4.1.4. Kiểm tra tính gây bệnh của mẫu nấm được cung cấp trên cà chua
• 2.4.2. Thu thập, phân lập và định danh mẫu vi khuẩn có ích trong đất
• 2.4.2.1. Thu thập mẫu vi khuẩn có ích trong đất
• 2.4.2.2. Phân lập mẫu vi khuẩn có ích trong đất
• 2.4.2.3. Định danh vi khuẩn đối kháng trong đất
• 2.4.3. Khảo sát khả năng đối kháng của các dòng vi khuẩn phân lập đối với nấm
• 2.4.3.1. Phương pháp bố trí thí nghiệm
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Kết quả xác định một số nấm gây bệnh dựa vào đặc điểm hình thái học
• 3.1.1. Kết quả phân lập mẫu bệnh sương mai gây hại trên cà chua
• 3.1.2. Định danh nấm gây bệnh dựa vào đặc điểm hình thái
• 3.1.3. Kết quả kiểm chứng tác nhân gây bệnh sương mai theo quy tắc Koch
• 3.2. Kết quả nghiên cứu một số vi sinh vật đối kháng trong đất
• 3.2.1. Kết quả định danh vi khuẩn phân lập trong đất theo đặc điểm hình thái
• 3.2.2. Kết quả định danh vi khuẩn phân lập từ đất theo đặc điểm hình thái
• 3.2.3. Kết quả định danh vi khuẩn bằng một số phản ứng sinh hóa
• 3.2.4. Kết quả đánh giá khả năng đối kháng của các dòng vi sinh vật đối với nấm Phytophthora infestans
• KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng quan về Nghiên Cứu Vi Sinh Vật Đối Kháng Phytophthora infestans

Nghiên cứu về vi sinh vật đối kháng với Phytophthora infestans là một lĩnh vực quan trọng trong bảo vệ thực vật, đặc biệt là trong việc phòng trừ bệnh sương mai cà chua. Bệnh này do Phytophthora infestans gây ra, ảnh hưởng nghiêm trọng đến năng suất và chất lượng cà chua. Việc tìm kiếm các vi sinh vật có ích có khả năng đối kháng với nấm bệnh này không chỉ giúp giảm thiểu sử dụng hóa chất mà còn bảo vệ môi trường. Nghiên cứu này nhằm mục tiêu phân lập và đánh giá khả năng đối kháng của các dòng vi sinh vật trong điều kiện phòng thí nghiệm.

1.1. Ứng dụng của Vi Sinh Vật trong Nông Nghiệp

Vi sinh vật có vai trò quan trọng trong nông nghiệp, đặc biệt là trong việc phòng trừ bệnh hại. Các loại vi sinh vật như Pseudomonas spp. và Bacillus spp. đã được chứng minh có khả năng ức chế sự phát triển của Phytophthora infestans. Việc sử dụng vi sinh vật không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn cải thiện chất lượng đất.

1.2. Tình hình Nghiên Cứu Vi Sinh Vật Đối Kháng

Nghiên cứu về vi sinh vật đối kháng đã được thực hiện ở nhiều nơi trên thế giới. Các nghiên cứu cho thấy rằng việc sử dụng vi sinh vật có thể giảm thiểu đáng kể thiệt hại do bệnh sương mai gây ra. Nhiều dòng vi sinh vật đã được phân lập và đánh giá khả năng đối kháng, mở ra hướng đi mới trong bảo vệ thực vật.

II. Vấn Đề và Thách Thức trong Phòng Trừ Bệnh Sương Mai

Bệnh sương mai do Phytophthora infestans gây ra là một trong những thách thức lớn nhất trong sản xuất cà chua. Bệnh này có thể gây thiệt hại lên đến 70% năng suất nếu không được kiểm soát kịp thời. Việc sử dụng thuốc hóa học để phòng trừ bệnh không chỉ tốn kém mà còn gây ô nhiễm môi trường. Do đó, việc tìm kiếm các biện pháp an toàn và hiệu quả là rất cần thiết.

2.1. Tác Động của Bệnh Sương Mai đến Năng Suất Cà Chua

Bệnh sương mai ảnh hưởng nghiêm trọng đến năng suất cà chua, đặc biệt trong mùa mưa. Theo nghiên cứu, tỷ lệ nhiễm bệnh có thể lên đến 60% ở các vùng trồng cà chua. Điều này không chỉ làm giảm sản lượng mà còn ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm.

2.2. Những Thách Thức trong Việc Kiểm Soát Bệnh

Việc kiểm soát Phytophthora infestans gặp nhiều khó khăn do khả năng lây lan nhanh chóng của nấm bệnh. Các biện pháp hóa học thường không hiệu quả trong việc ngăn chặn sự phát triển của bệnh, đồng thời còn tạo ra tình trạng kháng thuốc. Do đó, cần có những giải pháp thay thế hiệu quả hơn.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Vi Sinh Vật Đối Kháng

Nghiên cứu này sử dụng phương pháp cấy kép để đánh giá khả năng đối kháng của các dòng vi sinh vật với Phytophthora infestans. Các mẫu vi sinh vật được thu thập từ đất và phân lập trong điều kiện phòng thí nghiệm. Kết quả sẽ giúp xác định các dòng vi sinh vật có khả năng ức chế sự phát triển của nấm bệnh.

3.1. Quy Trình Phân Lập Vi Sinh Vật

Quy trình phân lập vi sinh vật bao gồm thu thập mẫu đất, nuôi cấy và định danh các dòng vi sinh vật. Các dòng vi sinh vật được phân lập sẽ được kiểm tra khả năng đối kháng với Phytophthora infestans thông qua các thí nghiệm cấy kép.

3.2. Đánh Giá Khả Năng Đối Kháng

Khả năng đối kháng của các dòng vi sinh vật sẽ được đánh giá dựa trên tỷ lệ ức chế sự phát triển của Phytophthora infestans. Các dòng vi sinh vật có khả năng ức chế cao sẽ được lựa chọn để nghiên cứu sâu hơn về cơ chế hoạt động và ứng dụng trong thực tiễn.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu và Ứng Dụng Thực Tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy có nhiều dòng vi sinh vật có khả năng đối kháng với Phytophthora infestans. Trong số đó, một số dòng như Pseudomonas spp. và Bacillus spp. cho thấy khả năng ức chế cao. Những kết quả này mở ra hướng đi mới trong việc phát triển các biện pháp sinh học để phòng trừ bệnh sương mai trên cà chua.

4.1. Các Dòng Vi Sinh Vật Đối Kháng Tiềm Năng

Nghiên cứu đã phân lập được 13 dòng vi sinh vật có khả năng đối kháng với Phytophthora infestans. Các dòng này có thể được sử dụng trong các sản phẩm sinh học để bảo vệ cây trồng, giảm thiểu tác động của hóa chất đến môi trường.

4.2. Ứng Dụng trong Thực Tiễn Nông Nghiệp

Việc ứng dụng các dòng vi sinh vật đối kháng trong sản xuất nông nghiệp không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn nâng cao chất lượng sản phẩm. Các sản phẩm sinh học từ vi sinh vật có thể thay thế cho thuốc hóa học, góp phần bảo vệ môi trường và sức khỏe con người.

V. Kết Luận và Tương Lai của Nghiên Cứu

Nghiên cứu về vi sinh vật đối kháng với Phytophthora infestans đã chỉ ra rằng có nhiều dòng vi sinh vật có khả năng ức chế sự phát triển của nấm bệnh. Việc phát triển các biện pháp sinh học trong phòng trừ bệnh sương mai là cần thiết và có tiềm năng lớn trong tương lai. Cần tiếp tục nghiên cứu để tối ưu hóa các ứng dụng thực tiễn của các dòng vi sinh vật này.

5.1. Tầm Quan Trọng của Nghiên Cứu Sinh Học

Nghiên cứu sinh học trong phòng trừ bệnh hại là một xu hướng tất yếu trong nông nghiệp hiện đại. Việc sử dụng vi sinh vật có ích không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn bảo vệ môi trường sống.

5.2. Hướng Nghiên Cứu Tương Lai

Trong tương lai, cần tiếp tục nghiên cứu để phát triển các sản phẩm sinh học từ vi sinh vật đối kháng. Các nghiên cứu này sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng trừ bệnh hại, đồng thời giảm thiểu tác động tiêu cực đến môi trường.

Nội dung chính

Giới thiệu dự án

Cà chua (Solanum lycopersicum L.) là một trong những loại cây thực phẩm có giá trị dinh dưỡng và kinh tế hàng đầu trên toàn cầu. Theo thống kê từ Tổ chức Lương thực và Nông nghiệp Liên Hợp Quốc (FAO), sản lượng cà chua thế giới đạt trên 182 triệu tấn mỗi năm. Tại Việt Nam, vùng chuyên canh rau hoa Lâm Đồng (Đơn Dương, Đức Trọng, Đà Lạt) là vựa cà chua trọng điểm với diện tích canh tác năm 2017 đạt khoảng 6.525 ha, năng suất trung bình 47,98 tấn/ha và sản lượng vượt 310.000 tấn. Tuy nhiên, sản xuất cà chua thương phẩm luôn đối mặt với rủi ro nghiêm trọng từ dịch bệnh, trong đó nguy hiểm nhất là bệnh sương mai (late blight) do vi nấm noãn Phytophthora infestans (Mont.) de Bary thuộc lớp Oomycetes gây ra.

+-----------------------------------------------------------------------------------+
|               HIỆN TRẠNG DỊCH BỆNH SƯƠNG MAI (LATE BLIGHT)                        |
|                                                                                   |
|  Thiệt hại năng suất: 60% - 70% trong điều kiện ẩm độ >90%, nhiệt độ 18-22°C     |
|  Tốc độ lây lan: Cây tàn lụi trong 7 - 10 ngày; 1.620 ha nhiễm bệnh (Lâm Đồng)    |
|  Thách thức: Nấm hình thành tính kháng thuốc hóa học, ô nhiễm đất và tồn dư BVTV |
|  Giải pháp tối ưu: Khai thác vi sinh vật đối kháng bản địa (Pseudomonas, Bacillus)|
+-----------------------------------------------------------------------------------+

Vấn đề thực tiễn (Problem Statement)

Bệnh sương mai có khả năng tàn phá toàn bộ ruộng cà chua trong vòng 7 đến 10 ngày nếu gặp điều kiện sương mù, mưa phùn kéo dài và nhiệt độ mát (18 – 22°C). Thiệt hại năng suất thực tế thường dao động từ 60% đến 70%. Hiện nay, phương thức phòng trừ chủ yếu vẫn dựa vào hóa chất tổng hợp (Mancozeb, Metalaxyl, Dimethomorph). Việc lạm dụng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) hóa học đã dẫn đến ba hệ lụy nghiêm trọng:

1. Tạo áp lực chọn lọc khiến chủng nấm P. infestans kháng thuốc nhanh chóng.
2. Tiêu diệt hệ vi sinh vật bản địa có ích trong đất, gây thoái hóa đất nông nghiệp.
3. Tồn dư hóa chất độc hại trong nông sản, đe dọa trực tiếp sức khỏe người tiêu dùng và rào cản xuất khẩu.

Mục tiêu dự án

1. Thu thập và phân lập thuần khiết: Thu thập mẫu bệnh và mẫu đất vùng rễ tại các vùng chuyên canh cà chua trọng điểm thuộc tỉnh Lâm Đồng (Đức Trọng, Đơn Dương, Đà Lạt); phân lập và làm sạch nấm Phytophthora infestans cùng hệ vi khuẩn vùng rễ.
2. Xác minh tác nhân gây bệnh: Kiểm chứng độc lực và triệu chứng nấm P. infestans theo quy tắc Koch (Koch's postulates) trên mô ký chủ cà chua sống.
3. Định danh vi sinh vật có ích: Xác định đặc tính hình thái, phản ứng sinh hóa của các dòng vi khuẩn phân lập theo khóa phân loại Bergey và hệ thống tiêu chuẩn Schaad.
4. Sàng lọc hiệu suất đối kháng (in vitro): Đánh giá định lượng khả năng ức chế sinh trưởng sợi nấm P. infestans của 19 dòng vi sinh vật qua phương pháp cấy kép đối kháng (Dual culture assay).

Giải pháp kỹ thuật và phạm vi nghiên cứu

Đề tài tiếp cận giải pháp phòng trừ sinh học (Biological Control Agent - BCA) bằng cách khai thác nguồn vi sinh vật vùng rễ đối kháng tự nhiên (Plant Growth-Promoting Rhizobacteria - PGPR). Nghiên cứu tập trung thu thập 18 mẫu bệnh và 6 mẫu đất chuyên canh tại Lâm Đồng, hoàn thiện quy trình phân lập trên môi trường chọn lọc chuyên biệt PSM, đồng thời thử nghiệm đối kháng in vitro trong điều kiện phòng thí nghiệm tiêu chuẩn tại Bộ môn Bảo vệ Thực vật – Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM.

---

Phân tích và thiết kế giải pháp

Phân tích hiện trạng

Phương pháp kiểm soát	Ưu điểm	Nhược điểm / Rủi ro	Đánh giá tính bền vững
Thuốc hóa học tổng hợp (Mancozeb 80WP, Aviso 350SC)	Tác động nhanh, diệt nấm triệt để tức thời	Gây hiện tượng kháng thuốc, ô nhiễm môi trường, độc hại cho nông dân	Rất thấp (Không khuyến khích lạm dụng)
Biện pháp canh tác (Luân canh, tỉa tán, lên luống)	Giảm độ ẩm ruộng, hạn chế nguồn lây ban đầu	Hiệu quả chậm, phụ thuộc điều kiện thời tiết, tốn công lao động	Trung bình (Bắt buộc phối hợp)
Chế phẩm sinh học PGPR (Pseudomonas, Bacillus, Actinobacteria)	Bền vững, an toàn sinh học, kích kháng hệ thống (ISR), cải tạo đất	Cần bảo quản nghiêm ngặt, hiệu lực phụ thuộc chủng bản địa	Rất cao (Xu thế nông nghiệp 4.0)

Phân tích yêu cầu hệ thống thử nghiệm (MoSCoW)

• Must Have (Bắt buộc): Môi trường phân lập chuyên biệt PSM (bổ sung Hymexazol 200 µL/L, Benlate 0,01 g/L, Rifampicin 0,02 g/L); quy trình lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng Koch; công thức tính hiệu suất đối kháng chính xác theo bán kính tản nấm.
• Should Have (Nên có): Chuỗi phản ứng sinh hóa toàn diện (KOH 3%, nhuộm Gram, nhuộm nội bào tử Malachite Green, Oxidase, Catalase, thủy phân tinh bột).
• Could Have (Có thể có): Môi trường huỳnh quang King's B Agar (KBA) để định danh nhanh nhóm vi khuẩn Pseudomonas tiết sắc tố pyoverdine.
• Won't Have (Chưa thực hiện đợt này): Giải trình tự gen 16S rRNA/ITS đa vùng và thử nghiệm đồng ruộng quy mô lớn (in vivo field trial).

Kiến trúc quy trình kỹ thuật và danh mục môi trường nuôi cấy

• Môi trường chọn lọc PSM (Phytophthora Selective Medium): Nền PCA bổ sung kháng sinh Hymexazol (200 µL/L), Benlate (0,01 g/L), Rifampicin (0,02 g/L) nhằm ức chế triệt để nấm tạp và vi khuẩn không mong muốn.
• Môi trường King’s B Agar (KBA): Peptone 20 g/L, Glycerol 10 g/L, $\text{K}_2\text{HPO}_4$ 1,5 g/L, $\text{MgSO}_4\cdot 7\text{H}_2\text{O}$ 1,5 g/L; chuẩn hóa pH 7,2.
• Môi trường khoai tây - cà rốt (PCA) & Khoai tây - dextrose (PDA): Môi trường tiêu chuẩn nhân sinh khối tản nấm phục vụ cấy kép.
• Tiêu chuẩn an toàn sinh học: Vô trùng tuyệt đối ở 121°C, áp suất 1 atm trong 21 phút bằng nồi hấp áp lực cao.

---

Implementation và kết quả

Quy trình phân lập và thuật toán đánh giá đối kháng

Toàn bộ quy trình thử nghiệm được tiến hành theo phương pháp cấy kép của Ferreira et al. (1991). Vi khuẩn đối kháng được cấy ria thành 2 đường thẳng song song cách tâm đĩa 2,5 cm trên đĩa Petri chứa môi trường PDA. Miếng thạch nấm P. infestans (đường kính 5 mm, nuôi 7 ngày tuổi) được đặt chính giữa tâm đĩa. Thí nghiệm bố trí theo khối hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD) với 3 lần lặp lại cho mỗi nghiệm thức.

import numpy as np

def calculate_antagonistic_efficiency(r_control: float, r_treatment: float) -> float:
    """
    Tính toán hiệu suất đối kháng (Antagonistic Efficiency - AE%)
    theo công thức Moayedi et al. (2009) & phân loại theo Soytong (1988).
    
    Tham số:
    - r_control: Bán kính tản nấm ở nghiệm thức đối chứng (mm)
    - r_treatment: Bán kính tản nấm ở nghiệm thức có vi khuẩn đối kháng (mm)
    """
    if r_control <= 0:
        raise ValueError("Bán kính đối chứng phải lớn hơn 0")
    
    # Công thức: AE(%) = [(C - T) / C] * 100
    ae_percentage = ((r_control - r_treatment) / r_control) * 100
    return round(ae_percentage, 2)

def classify_soytong_scale(ae: float) -> str:
    if ae > 75.0:
        return "Khả năng đối kháng rất cao"
    elif 61.0 <= ae <= 75.0:
        return "Khả năng đối kháng cao"
    elif 51.0 <= ae <= 60.0:
        return "Khả năng đối kháng trung bình"
    else:
        return "Khả năng đối kháng thấp"

# Thực nghiệm tại thời điểm 6 ngày sau cấy (6 NSC)
c_radius = 39.64  # Nghiệm thức đối chứng (DC)
samples = {
    "ĐHT3": 10.40,
    "ĐK-LĐ5": 10.60,
    "ĐK-LĐ7": 10.70,
    "ĐK-LĐ3": 11.20,
    "ĐK-LĐ2": 11.60,
    "ĐK-LĐ6": 11.60,
    "ĐK-LĐ1": 11.70,
    "CCFN1.1": 37.40
}

for strain, t_radius in samples.items():
    efficiency = calculate_antagonistic_efficiency(c_radius, t_radius)
    evaluation = classify_soytong_scale(efficiency)
    print(f"Chủng: {strain:<8} | Bán kính: {t_radius:>5.2f} mm | Hiệu suất: {efficiency:>6.2f}% | Đánh giá: {evaluation}")

Kết quả định danh vi sinh vật đất

Từ 6 mẫu đất thu thập tại Đức Trọng, Đơn Dương và Đà Lạt, nghiên cứu đã phân lập được 13 dòng vi khuẩn thuần khiết (ký hiệu từ ĐK-LĐ1 đến ĐK-LĐ13). Kết hợp với 6 dòng vi sinh vật do phòng thí nghiệm Bộ môn Bảo vệ Thực vật cung cấp, tổng số 19 dòng đã được kiểm tra sinh hóa chi tiết:

+------------------------------------------------------------------------------------------------------+
| KẾT QUẢ ĐỊNH DANH HÌNH THÁI VÀ PHẢN ỨNG SINH HÓA 13 DÒNG VI KHUẨN PHÂN LẬP                            |
+---------+--------+------------+------------+---------+---------+-----------+-------------+-----------+
| Dòng    | KOH 3% | Nhuộm Gram | Nội bào tử | Kị khí  | Oxidase | Catalase  | Thủy phân TB| Phân loại |
+---------+--------+------------+------------+---------+---------+-----------+-------------+-----------+
| ĐK-LĐ1  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ2  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ3  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ4  |   -    |   Gram (+) |     +      |    -    |    +    |     +     |      +      |Bacillus sp|
| ĐK-LĐ5  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ6  |   -    |   Gram (+) |     -      |    -    |    -    |     +     |      +      |Actino.    |
| ĐK-LĐ7  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ8  |   +    |   Gram (-) |     -      |    +    |    -    |     +     |      -      |Enterobacter|
| ĐK-LĐ9  |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ10 |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ11 |   +    |   Gram (-) |     -      |    +    |    -    |     +     |      -      |Enterobacter|
| ĐK-LĐ12 |   +    |   Gram (-) |     -      |    -    |    +    |     +     |      -      |Pseudomonas|
| ĐK-LĐ13 |   -    |   Gram (+) |     -      |    +    |    -    |     +     |      -      |Actino.    |
+---------+--------+------------+------------+---------+---------+-----------+-------------+-----------+

Kết quả khảo sát khả năng đối kháng nấm P. infestans

Dữ liệu ghi nhận bán kính tản nấm và hiệu suất đối kháng (HSĐK) tại các thời điểm 4, 5 và 6 ngày sau cấy (NSC) cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê cao ($p < 0,01$):

STT	Nghiệm thức (Chủng VSV)	Chi / Nhóm phân loại	Bán kính tản nấm (mm) 6 NSC	Hiệu suất đối kháng (%) 4 NSC	Hiệu suất đối kháng (%) 5 NSC	Hiệu suất đối kháng (%) 6 NSC
1	ĐHT3	Pseudomonas sp.	10,40	65,03	69,19	73,39
2	ĐK-LĐ5	Pseudomonas sp.	10,60	64,00	68,60	72,81
3	ĐK-LĐ7	Pseudomonas sp.	10,70	64,30	68,70	72,51
4	ĐK-LĐ3	Pseudomonas sp.	11,20	62,40	67,00	71,35
5	ĐK-LĐ2	Pseudomonas sp.	11,60	61,20	65,60	70,28
6	ĐK-LĐ6	Actinobacteria	11,60	60,70	65,50	70,17
7	ĐK-LĐ1	Pseudomonas sp.	11,70	60,60	65,60	70,14
8	ĐK-LĐ12	Pseudomonas sp.	11,90	60,60	65,30	69,41
9	ĐK-LĐ10	Pseudomonas sp.	12,00	59,70	64,60	69,29
10	ĐK-LĐ13	Actinobacteria	12,30	58,70	63,90	68,39
11	ĐK-LĐ11	Enterobacteriaceae	13,30	56,30	61,50	66,00
12	ĐK-LĐ8	Enterobacteriaceae	13,40	55,60	60,40	65,67
13	ĐK-LĐ9	Pseudomonas sp.	14,30	53,20	58,00	63,30
14	ĐHT1	Enterobacteriaceae	17,80	45,90	48,70	54,50
15	ĐXT6	Bacillus sp.	22,30	26,61	34,56	43,00
16	ĐK-LĐ4	Bacillus sp.	22,40	26,00	33,80	42,50
17	CCLĐ2.1	Pseudomonas sp.	23,40	27,88	34,36	40,10
18	DNH3	Pseudomonas sp.	37,10	1,08	4,00	5,00
19	CCFN1.1	Pseudomonas sp.	37,40	0,39	4,90	4,20
20	Đối chứng (ĐC)	Không chủng VSV	39,64	0,00	0,00	0,00

---

Đổi mới và đóng góp

Đột phá kỹ thuật

1. Phân lập thành công tập đoàn vi sinh vật bản địa thích nghi cao: Nghiên cứu đã sàng lọc được 13 dòng vi sinh vật từ chính các vùng dịch bệnh sương mai tại Đơn Dương và Đức Trọng. Vi sinh vật bản địa sở hữu ưu thế cạnh tranh sinh thái vượt trội hơn hẳn các chủng nhập nội khi tái đưa vào đồng ruộng.
2. Hiệu suất ức chế vượt trội: Xác định được nhóm 7 chủng vi sinh vật hàng đầu đạt hiệu suất đối kháng trên 70% ở 6 NSC, dẫn đầu là chủng Pseudomonas sp. ĐHT3 (73,39%), kế đến là ĐK-LĐ5 (72,81%) và ĐK-LĐ7 (72,51%).
3. Đa dạng hóa cơ chế sinh học: Phát hiện xạ khuẩn Actinobacteria (ĐK-LĐ6 đạt 70,17%) và vi khuẩn Pseudomonas có khả năng sinh enzyme ngoại bào phá hủy màng vách tế bào glucan/chitin của nấm noãn.

+---------------------------------------------------------------------------------------+
|              SO SÁNH HIỆU QUẢ VỚI CÁC CÔNG BỐ KHOA HỌC TRƯỚC ĐÂY                       |
+------------------------------+-------------------------+------------------------------+
| Nghiên cứu & Tác giả         | Chủng vi sinh vật       | Hiệu suất ức chế P. infestans|
+------------------------------+-------------------------+------------------------------+
| Trần Tiến Đạt (2022)         | KTLĐ-0104 (Khoai tây)   | 69,65%                       |
| Wang et al. (2020)           | WL-2 (B. subtilis)      | 75,60%                       |
| Trần Ngọc Khánh (2016)       | B5.3-0312 (Bacillus sp) | 83,70%                       |
| Đề tài hiện tại (2022)       | ĐHT3 (Pseudomonas sp.)  | 73,39% (Bản địa Lâm Đồng)    |
| Đề tài hiện tại (2022)       | ĐK-LĐ5 (Pseudomonas sp) | 72,81% (Bản địa Lâm Đồng)    |
+------------------------------+-------------------------+------------------------------+

---

Ứng dụng thực tế và triển khai

Kịch bản ứng dụng trong nông nghiệp công nghệ cao

• Xử lý giá thể và đất vườn ươm: Tưới dịch huyền phù vi khuẩn Pseudomonas sp. (ĐHT3, ĐK-LĐ5) với mật độ $\ge 10^8\text{ CFU/mL}$ vào bầu ươm cây con cà chua trước khi xuất vườn 5–7 ngày, giúp thiết lập quần thể vi sinh bảo vệ rễ sớm.
• Phun phòng định kỳ trong nhà màng/nhà lưới: Phối trộn dịch nuôi cấy xạ khuẩn ĐK-LĐ6 và vi khuẩn ĐHT3 để phun qua lá trong các giai đoạn ẩm độ không khí cao (>85%), ngăn chặn sự nảy mầm của túi bào tử P. infestans.

Phân tích hiệu quả kinh tế (ROI Estimation)

• Chi phí sản xuất chế phẩm sinh học: Ước tính 150.000 – 200.000 VNĐ/ha/lần xử lý.
• Tiết kiệm chi phí thuốc BVTV hóa học: Giảm 40% – 60% số lần phun thuốc hóa học đắt tiền (Metalaxyl, Cymoxanil), tương đương tiết kiệm 2.500.000 – 4.000.000 VNĐ/ha/vụ.
• Giá trị gia tăng: Nông sản đạt chuẩn VietGAP/GlobalGAP, nâng giá bán cà chua thương phẩm từ 15% đến 25%, triệt tiêu hoàn toàn nguy cơ vượt ngưỡng dư lượng thuốc bảo vệ thực vật (MRL).

---

Hạn chế và hướng phát triển

Hạn chế kỹ thuật

1. Phương pháp định danh: Dừng lại ở các phản ứng sinh lý - sinh hóa và khóa phân loại hình thái truyền thống; chưa định danh giải trình tự sinh học phân tử gen 16S rRNA cho vi khuẩn và vùng ITS cho xạ khuẩn.
2. Quy mô thử nghiệm: Dữ liệu mới ghi nhận ở mức độ in vitro (đĩa Petri) và lây nhiễm mô lá tách rời; chưa kiểm chứng trên cây cà chua hoàn chỉnh trong điều kiện nhà kính và đồng ruộng biến động nhiệt ẩm.

Hướng nghiên cứu tiếp theo

• Giải trình tự gen 16S rRNA để xác định chính xác tên loài của các dòng ưu tú: ĐHT3, ĐK-LĐ5, ĐK-LĐ7, ĐK-LĐ6.
• Chiết tách và phân tích sắc ký (HPLC-MS) các hợp chất kháng sinh thứ cấp như Phenazine, 2,4-Diacetylphloroglucinol (DAPG), Pyrrolnitrin do các dòng Pseudomonas tiết ra.
• Nghiên cứu công nghệ tạo hạt nano sinh học hoặc chất mang (Talc powder, than bùn) để sản xuất chế phẩm dạng bột hòa nước (WP) hoặc dạng lỏng cô đặc (SC) có hạn sử dụng trên 12 tháng.

---

Đối tượng hưởng lợi

+------------------------------------------------------------------------------------------------------+
| ĐỐI TƯỢNG HƯỞNG LỢI VÀ GIÁ TRỊ THỰC TIỄN TỪ ĐỀ TÀI                                                   |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+
| Nhóm đối tượng        | Giá trị định lượng và Lợi ích mang lại                                       |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+
| Sinh viên / Học viên  | Nắm vững bộ quy trình chuẩn phân lập Oomycetes và vi khuẩn PGPR; bộ tư liệu  |
| ngành BVTV & CNSH     | thực nghiệm về phản ứng sinh hóa vi sinh vật chuẩn xác.                      |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+
| Doanh nghiệp BVTV     | Sở hữu bộ chủng giống bản địa (ĐHT3, ĐK-LĐ5) có hoạt lực ức chế >72% để phát |
| & Khởi nghiệp Nông    | triển dòng sản phẩm thuốc trừ bệnh sinh học thế hệ mới.                      |
| nghiệp sinh học       |                                                                              |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+
| Nông dân chuyên canh  | Giải pháp thay thế thuốc hóa học an toàn, giảm nguy cơ cháy lá sương mai,    |
| cà chua & khoai tây   | bảo vệ sức khỏe và đáp ứng tiêu chuẩn xuất khẩu nông sản sạch.               |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+
| Nhà nghiên cứu vi sinh| Bổ sung cơ sở dữ liệu vi sinh vật đối kháng vùng đất Tây Nguyên vào ngân hàng|
| nông nghiệp           | nguồn gen vi sinh vật có ích Việt Nam.                                       |
+-----------------------+------------------------------------------------------------------------------+

---

Câu hỏi thường gặp

1. Yêu cầu kỹ thuật cốt lõi để nuôi cấy và duy trì hoạt lực của dòng Pseudomonas sp. ĐHT3 là gì?

Dòng Pseudomonas sp. ĐHT3 phát triển tối ưu trên môi trường King’s B Agar hoặc Nutrient Agar ở nhiệt độ 28 – 30°C, pH dao động từ 6,8 đến 7,2. Để lưu trữ lâu dài mà không mất hoạt tính kháng nấm, cần bảo quản sinh khối vi khuẩn trong dung dịch Glycerol 30% ở nhiệt độ -80°C.

2. Vì sao Phytophthora infestans lại khó phân lập hơn các loại nấm gây bệnh thông thường?

P. infestans là sinh vật ký sinh chuyên tính hoặc bán chuyên tính thuộc ngành Oomycota, có tốc độ phát triển sợi nấm chậm hơn nhiều so với nấm hoại sinh (Mucor, Rhizopus, Fusarium). Do đó, bắt buộc phải sử dụng môi trường chọn lọc PSM chứa hỗn hợp kháng nấm và kháng sinh (Hymexazol, Benlate, Rifampicin) để triệt tiêu các loài phát triển nhanh.

3. Cơ chế phân tử chính giúp Pseudomonas và Actinobacteria ức chế nấm P. infestans là gì?

Cơ chế kép bao gồm:

• Tiết chất kháng sinh và siderophore: Cạnh tranh sắt tự do qua sắc tố huỳnh quang pyoverdine và ức chế tổng hợp protein màng nấm.
• Tiết enzyme ngoại bào: Tiết $\beta$-1,3-glucanase, protease và cellulase thủy phân trực tiếp thành phần glucan/cellulose cấu tạo nên vách tế bào Oomycetes (khác với vách chitin của nấm thật).

4. Có thể phối trộn chung chế phẩm vi khuẩn đối kháng với thuốc BVTV hóa học được không?

Tuyệt đối không pha trộn chung chế phẩm vi khuẩn sống với các loại thuốc trừ khuẩn gốc đồng hoặc kháng sinh nông nghiệp (Streptomycin, Kasugamycin). Tuy nhiên, có thể phun xen kẽ với thuốc trừ nấm hóa học theo lịch trình cách nhau tối thiểu 5–7 ngày.

5. Thời gian hoàn vốn (ROI) khi đầu tư dây chuyền sản xuất chế phẩm sinh học từ các chủng này là bao lâu?

Với quy mô sản xuất bán công nghiệp (lên men pilot 500L/mẻ), chi phí đầu tư ban đầu ước tính khoảng 300 – 500 triệu VNĐ. Dựa trên nhu cầu tiêu thụ tại vùng rau Lâm Đồng, thời gian thu hồi vốn dự kiến từ 18 đến 24 tháng.

---

Kết luận

Đề tài khóa luận tốt nghiệp "Phân lập và nghiên cứu một số vi sinh vật đối kháng với nấm Phytophthora infestans gây bệnh sương mai cà chua" đã giải quyết trọn vẹn bài toán thực tiễn trong quản lý dịch hại nông nghiệp bền vững. Công trình không chỉ chuẩn hóa thành công quy trình phân lập tác nhân gây bệnh nguy hiểm P. infestans theo quy tắc Koch, mà còn phát hiện và tuyển chọn được tập đoàn vi sinh vật đất bản địa ưu tú tại Lâm Đồng. Nổi bật nhất là các dòng ĐHT3 (73,39%), ĐK-LĐ5 (72,81%), ĐK-LĐ7 (72,51%) thuộc chi Pseudomonas và dòng xạ khuẩn ĐK-LĐ6 (70,17%).

Kết quả nghiên cứu là luận cứ khoa học vững chắc và là nguồn vật liệu sinh học giá trị cao mở đường cho việc nghiên cứu sản xuất thuốc trừ bệnh sinh học nguồn gốc nội địa, góp phần giảm thiểu ô nhiễm hóa chất, nâng cao chất lượng nông sản xuất khẩu và xây dựng nền nông nghiệp tuần hoàn bền vững. Các doanh nghiệp sinh học nông nghiệp và viện nghiên cứu quan tâm có thể tiếp tục liên kết thử nghiệm in vivo quy mô lớn nhằm nhanh chóng đưa chế phẩm ra thương trường.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Chương 1 TONG QUAN TAI LIEU 1.1 Sơ lược về cây cà chua 1.1 Phân loài khoa học Cà chua có tên khoa học là: Solanum lycopersicum L thuộc ho Solanaceae Danh pháp 2 phan là: Solanum lycopersicum L. Nguồn gốc: Mỹ 1.2 Giá trị dinh dưỡng và giá trị kinh tế Cà chua thuộc loại rau ăn qua, quả ca chua ngoài giá trị dinh dưỡng cao được sử dụng dé ăn tươi, nau nướng, là nguyên liệu cho chế biến hàng chục loại sản phẩm khác nhau, còn có giá trị được lý không thể phủ nhận. Sản xuất cà chua là ngành hiệu quả cao do nhu cầu tiêu dùng tăng đây cũng là cây có tiềm năng về năng suất hơn các cây trồng khác (Trần Khắc Thi, 2012). Theo bộ Y tế - cục An toàn thực phẩm lợi ích của cà chua đối với sức khỏe bao gồm cải thiện thị lực; khỏe dạ dày; én định huyết áp - đường huyết; đẹp dáng - sáng da; phòng tránh nhiễm trùng đường tiết niệu.

Hơn thế nữa, Cà chua còn hỗ trợ hệ tiêu hóa - tuần hoàn - tiết niệu - miễn dịch; làm giảm các loại cholesterol có hai trong mau; hỗ trợ cân bằng dịch nội môi giúp tất cả quá trình chuyên hóa trong cơ thê hoạt động tốt nhất. Qua đó giúp cơ thé thải loại các độc tố, làm giảm sự oxy hóa, làm chậm quá trình lão hóa mô tế bao. Trong thành phần dưỡng chat của cà chua, rất nhiều chất chống oxy hoá đã được chứng minh có khả năng phòng chống nhiều dạng ung thư khác nhau và Cà chua còn là nguồn giàu các vitamin - khoáng chất có tác dụng phòng chống bệnh tim mạch, hô hấp, tiêu hóa. Cây cà chua yêu cầu ánh sáng tương đối cao và nhiệt độ cao đề phát triển nhanh và chất lượng tốt.

Tuy nhiên, trong quá trình trồng trọt, năng suất rất có thé bị hạn chế bởi khả năng đậu trái của cây do sâu bệnh hại tan công. Năng suất mỗi cây sẽ đạt từ 3,6 — 4,5 kg trái khi cây sinh trưởng bình thường. Những sản lượng này chỉ có thể tăng lên bằng cách giữ cho cây sống và năng suất trong thời gian dài hơn (Jones, 1980). Không đáng ngạc nhiên, năng suất cao nhất khi kéo dai được thời gian sản xuất, thu hoạch bat đầu vào tháng 4 và tiếp tục đến cuối tháng 10.

Năng suất cao nhất được nhìn thấy ở những vùng khí hậu khô với đất màu mỡ và nước tưới dồi dào, dịch hại được quản lý hợp ly (Stevens, 1986).3 Tình hình sản xuất trong và ngoài nước Cà chua ngày càng phô biến và nhanh chóng được mở rộng quy mô trồng trot trong nửa thế kỷ qua. Ngày nay nó được tiêu thụ nhiều hơn ở Hoa Kỳ và Châu Âu. Sản lượng cà chua đã tăng 164% trong 40 năm trên toàn thế giới và tiêu thụ cà chua trên thế giới đã tăng 314% (FAO, 2008). Lượng tiêu thụ trên thế giới tăng với tốc độ trung bình 3% hàng năm (Xinhua, 2007).

Trên thực tế, sản lượng cà chua trên thế giới là khoảng 123,6 triệu tan quả tươi được sản xuất trên 4,5 triệu ha. Bản dữ liệu này được tham chiếu đến 166 quéc gia (FAO, 2008). Trung Quốc là nước chủ yếu về cả diện tích canh tác (1.103 ha) và sản lượng (32,5 tan) với năng suất trung bình là 23. Hai quốc gia dẫn đầu về năng suất quả trên một ha là Hà Lan (472.779 kg/ha) và Anh (418.631 kg/ha), với diện tích thu hoạch lần lượt là 1.396 ha và 190 ha (FAO, 2008).

Trong thập kỷ qua, sản lượng cà chua đề chế biến đã tăng nhanh chóng từ 25 lên 36 triệu tấn (Colvine, 2008). Theo Vụ Nông nghiệp - Tổng cục Thống kê từ 1997 - 2009, diện tích trồng cà chua của Việt Nam có sự gia tăng liên tục từ 7.540 ha, ước chừng 40% diện tích ở phía Nam với diện tích khoảng 9.000 ha, trong đó Lâm Đồng có diện tích lớn nhất khoảng 7. Trong tương lai diện tích trồng cà chua sẽ có xu hướng tiếp tục tăng. Diện tích trồng cà chua ở Việt Nam chủ yếu tập trung ở đồng bằng, trung du Bắc Bộ (Hà Nội, Hà Bắc, Hải Phòng,.) và ở miền Nam, tập trung chủ yếu ở Lâm Đồng (Đơn Dương, Đức Trọng, Lâm Hà), Tiền Giang, Long An, Cần Thơ, Tây Ninh,.

năng suất đạt 25 - 40 tan/ha, bình quân 2 kg/người/năm. Theo Chi cục trồng trọt và Bảo vệ thực vật tỉnh Lâm Đồng (2017), diện tích sản xuất cà chua năm 2017 của tỉnh ước đạt 6.525 ha, năng suất khoảng 47,98 tan/ha và sản lượng đạt 310.2 Bệnh sương mai trên cà chua do Phytophthora infestans 1.1 Phân bố và tác hại Theo Cabi (2022) hau hết các địa điểm ở Châu A, Đông Nam A va Uc, Châu Phi, Châu Mỹ và Châu Âu đều có thể bị bệnh sương mai, bệnh lây lan do củ giống khoai tây được nhập từ khu vực có bệnh sương mai dai dang va củ giống phân bố khắp nơi trên thế giới, do đó sự xuất hiện của P. infestans đôi khi liên quan chặt chẽ đến sự phân bố của củ giống khoai tây hơn là quần thể mầm bệnh bản địa. Bất kỳ nơi nào nhận củ giống từ khu vực có bệnh sương mai cũng có khả năng bị bệnh sau đó lây lan cho các cây ký chủ khác.

Bệnh sương mai (late blight) gây hai boi Phytophthora infestans bệnh được ghi nhận đầu tiên do Payen (Pháp, 1847) là một trong những bệnh gây hai ở hau hết các vùng cà chua trên toàn thế giới. Bệnh gây hại nghiêm trọng và có ảnh hưởng lớn tới năng suất (giảm 60 - 70%) và phẩm chất trên cà chua ở một số vùng Hà Nội, Hải Phòng, Lào Cai, Đà Lạt. Bệnh nặng trong mùa mưa ở các vùng cao có khí hậu ôn hòa: Mộc Châu - Sơn La, Sapa - Lào Cai, Đà Lat - Lâm Đồng (Nguyễn Văn Viên, 1998). Trong vụ đông xuân 2008 - 2009 có nhiều đợt lạnh theo sau đó là những ngày mưa phùn hoặc 4m độ bão hoà khá thích hợp cho sự phát triển của nắm sương mai nên bệnh đã xuất hiện các vùng trồng rau thuộc tinh Lâm Đồng bệnh xuất hiện quanh năm tỉ lệ hại cao phát triển nhanh.

Vào tháng 7 năm 2009 tại 2 huyện Đơn Dương và Đức Trọng diện tích nhiễm bệnh đã lên tới 1620 ha trong đó 50 ha nhiễm nặng, trong 1 tuần diện tích nhiễm bệnh đã tăng thêm 100 ha (Trung tâm khuyến nông khuyến ngư Việt Nam, 2009).2 Triệu chứng Theo tài liệu của Vũ Triệu Mân (2007) cho biết: Bệnh sương mai có nguồn gốc phát sinh đầu tiên ở Nam Mỹ, sau đó ở Châu Âu vào năm 1830 và trở thành nạn dịch nghiêm trọng ở Tây Au trong những năm 1845 - 1848. Ở Việt Nam, bệnh sương mai gây hại phô biến ở các vùng trồng khoai tây, cà chua và ớt và gây tác hại lớn nhất so với các loại nam hại khác trên các cây trồng trên. Triệu chứng trên lá: Bệnh thường xuất hiện đầu tiên ở mép chóp lá tạo vết xám xanh nhạt sau đó lan rộng vào phiên lá. Phân giữa vêt bệnh chuyên màu nâu đen và xung 5 quanh vết bệnh thường có lớp cành bào tử màu trắng xốp bao phủ như một lớp mốc trắng như muối làm cho lá chết lụi nhanh chóng.

Ở mặt dưới lá, vết bệnh có một lớp mốc trắng như sương (phân sinh bào tử). Bệnh nhẹ lá hơi bị cháy, bệnh nặng có thể làm toàn bộ phiến lá bị cháy khô. Triệu chứng trên thân cành: Bị bệnh từng đoạn dài, vỏ và ruột thân lúc đầu màu nâu hoặc thâm đen, sau đó thối ướt màu nâu đen. Chỗ bị bệnh nhỏ tóp lại có khi chỉ một phía thân bị thối.

Khi 4m ướt, trên vết bệnh có lớp nam trắng như sương muối bao phủ. Phía trên chỗ bị bệnh, lá héo dần. Cành, thân bị bệnh dễ bị gãy gục làm tán cây xơ xác. Triệu chứng trên quả: Bệnh thường xuât hiện ở mặt trên của quả, trên quả có những dom màu xanh xám, có vẻ ướt, vết bệnh lớn dân, chuyên sang mau trang đục sau đó chuyên sang màu nâu, hơi lõm, quả nhăn nheo, có viên rõ và bên trong có thê bị thôi.

Bệnh nhẹ quả hơi nám và cứng, bệnh nặng quả không phát triển được, sau đó bị rụng.1 Các triệu chứng của bệnh sương mai ca chua A, B, D. Triệu chứng ban đầu bệnh sương mai trên lá C. Triệu chứng bệnh trên qua 1.3 Tống quan về Phytophthora infestans 1.1 Đặc điểm và phân loài khoa học Nam gây bệnh sương mai được Anton de Bary xác định là Phytophthora infestans một loài Oomycetes. Nam sinh sản vô tính thông qua túi bào tử có hình elip đến hình quả chanh với một cuống nhỏ.

Túi bào tử có kích thước 29 - 36 x 19 -22 um. Bao tử nảy mam hoặc trực tiếp tạo thành ống mam (ở nhiệt độ 15 - 24°C), hoặc gián tiếp qua động bào tử (ở nhiệt độ dưới 18°C). Domain: Eukaryota Kingdom: Chromista Phylum: Oomycota Class: Oomycetes Order: Peronosporales Family: Peronosporaceae Genus: Phytophthora Species: Phytophthora infestans 1.2 Ký chủ và sự lây lan Mặc dù thường được coi là có phạm vi ký chủ hạn chế nhưng P. infestans đã được báo cáo là có thể gây nhiễm trên một số lượng lớn các loài.

Erwin và Ribeiro (1996) liệt kê 89 loài ký chu, hơn 25% trong số nay được đưa vao vì việc lây nhiễm nhân tạo có xuất hiện vết bệnh. Trong nông nghiệp, hai ký chủ quan trọng nhất của loài này là khoai tây và cả chua. infestans là một mầm bệnh có khả năng tàn phá ở hầu hết các vùng trồng khoai tây ( Cox và Large, 1960). Nó cũng là một mầm bệnh nghiêm trọng trên cà chua ở những nơi có khí hậu mát mẻ hơn.

Ngoài những loại cây nông nghiệp quan trọng trên toàn cầu nay, P. infestans còn tan công các loài cây họ cà hoang da ở châu Mỹ. Nó được báo cáo về một số lượng lớn các loài họ cà ở miền trung Mexico ( Rivera-Pena và Molina-Galan, 1989 ), trên cây muồng đêm (Solanum sarrachoides) ở khắp châu Mỹ, và trên dưa lê (S. muricatum) ở Andes của Nam Mỹ ( Turkensteen, 1978 ).

Một số quan thé P. infestans đã được xác định là phát triển khác nhau trên các cây ký chủ khác nhau. Ở Ecuador, tồn tại hai quần thé P. infestans cô thé duoc phan biét bằng các mau isoenzyme đối với glucose-6-phospahte isomerase ( Erselius va ctv, 2000).

Một quan thé (EC-1) chi được tim thấy trên khoai tây và quan thé khác (US-1) chỉ được tìm thấy trên cà chua. Các ưu tiên tương tự cũng được báo cáo từ các dòng phân lập được thu thập ở Pháp và Mỹ ( Legard và ctv, 1995 ; Lebreton va ctv, 1999 ).