Khám Phá Luận Án Nguyễn Mẹo: Nội Dung và Ý Nghĩa

Luận án của Nguyễn Mẹo tập trung vào việc nghiên cứu tác động của fibrin giàu tiểu cầu (PRF) kết hợp… 199 trang · Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh · 2022.

• Tác giả: Nguyễn Mẹo
• Người hướng dẫn: Ngô Thị Quỳnh Lan
• Trường học: Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Răng Hàm Mặt
• Đề tài: Tác Động Của Fibrin Giàu Tiểu Cầu Kết Hợp Xương Dị Loại Lên Tế Bào Dây Chằng Nha Chu Người Ứng Dụng Trong Điều Trị Viêm Nha Chu
• Loại tài liệu: Luận Án Tiến Sĩ Y Học
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thành Phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• Trang phụ bìa
• Lời cam đoan
• Danh mục chữ viết tắt và thuật ngữ Anh – Việt
• Danh mục bảng
• Danh mục hình
• Danh mục biểu đồ
• Danh mục sơ đồ
• ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Tế bào gốc dây chằng nha chu
• 1.2. Fibrin giàu tiểu cầu
• 1.2.1. Lịch sử phát triển Fibrin giàu tiểu cầu (PRF)
• 1.2.2. Những tiến bộ trong quy trình tạo fibrin giàu tiểu cầu
• 1.2.3. Ảnh hưởng của PRF lên đặc tính sinh học của tế bào dây chằng nha chu
• 1.2.3.1. Ảnh hưởng của PRF lên những đặc tính sinh học của tế bào dây chằng nha chu
• 1.2.3.2. Ảnh hưởng của PRF kết hợp vật liệu ghép thay thế xương lên những đặc tính sinh học của tế bào dây chằng nha chu
• 1.3. Hiệu quả lâm sàng của fibrin giàu tiểu cầu trong điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc
• 1.3.1. Hiệu quả lâm sàng của PRF trong điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc (IBD)
• 1.3.2. Hiệu quả lâm sàng của PRF kết hợp vật liệu ghép thay thế xương trong điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc
• 1.4. Biểu hiện dấu ấn sinh học trong dịch khe nướu khi sử dụng PRF trong điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc
• 2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Nghiên cứu in vitro về hình thái và hóa sinh của A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại
• 2.1.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
• 2.1.2. Dòng tế bào và dụng cụ, thiết bị, hóa chất nghiên cứu
• 2.1.3. Tiến trình thực hiện nghiên cứu
• 2.1.4. Tổ chức nhóm nghiên cứu và kiểm soát sai lệch thông tin
• 2.1.5. Phương pháp phân tích số liệu
• 2.1.6. Đạo đức trong nghiên cứu
• 2.2. Nghiên cứu ứng dụng lâm sàng có nhóm chứng
• 2.2.1. Thời gian và địa điểm tiến hành nghiên cứu
• 2.2.2. Mẫu nghiên cứu
• 2.2.3. Phương tiện nghiên cứu
• 2.2.4. Quy trình nghiên cứu
• 2.2.5. Mô tả các biến số nghiên cứu
• 2.2.6. Tổ chức nhóm nghiên cứu và kiểm soát sai lệch thông tin
• 2.2.7. Phương pháp phân tích số liệu
• 2.2.8. Đạo đức trong nghiên cứu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 3.1. Định lượng các yếu tố tăng trưởng PDGF-AB và VEGF phóng thích từ hỗn hợp dịch chiết A-PRF-XBSM
• 3.1.1. Sự phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF-AB ở từng thời điểm thực nghiệm và tích luỹ theo thời gian
• 3.1.2. Sự phóng thích yếu tố tăng trưởng VEGF ở từng thời điểm thực nghiệm và tích luỹ theo thời gian
• 3.2. Tính an toàn và tác động của hỗn hợp A-PRF-XBSM đối với hPDLSCs
• 3.2.1. Ảnh hưởng của A-PRF kết hợp XBSM lên khả năng sống của hPDLSCs
• 3.2.2. Tác động của A-PRF-XBSM lên sự tăng sinh của hPDLSCs
• 3.3. Hiệu quả lâm sàng và X quang của A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại
• 3.3.1. Tình trạng nha chu lúc ban đầu (T0) trên lâm sàng và phim X quang
• 3.3.2. So sánh thay đổi chỉ số mảng bám (PlI) sau 3 và 6 tháng
• 3.3.3. So sánh thay đổi chỉ số nướu (GI) sau 3 và 6 tháng
• 3.3.4. So sánh thay đổi vị trị bờ nướu (sự tụt nướu - GR) sau 3 và 6 tháng
• 3.3.5. So sánh thay đổi độ sâu túi nha chu (PD) sau 3 và 6 tháng
• 3.3.6. So sánh thay đổi về mất bám dính lâm sàng (CAL) sau 3 và 6 tháng
• 3.3.7. So sánh tiêu mào xương ổ (ACR) trên X quang lúc ban đầu và 6 tháng
• 3.3.8. So sánh lấp khiếm khuyết (DF) trên X quang sau 6 tháng
• 3.4. Mức độ hiện diện những yếu tố tăng trưởng PDGF-BB, VEGF và TGF-β1 trong dịch khe nướu (GCF)
• 3.4.1. Biểu hiện PDGF-BB trong dịch khe nướu
• 3.4.2. Biểu hiện VEGF trong dịch khe nướu
• 3.4.3. Biểu hiện TGF-β1 trong dịch khe nướu
• 4. CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN
• 4.1. Hiệu quả phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF-AB và VEGF trong dịch chiết hỗn hợp A-PRF-XBSM
• 4.2. Tính an toàn và tác động của hỗn hợp A-PRF-XBSM đối với hPDLSCs
• 4.2.1. Chọn nguồn tế bào thực hiện thí nghiệm
• 4.2.2. Ảnh hưởng của A-PRF kết hợp XBSM lên khả năng sống của hPDLSCs
• 4.2.3. Tác động của A-PRF-XBSM lên sự tăng sinh của hPDLSCs
• 4.2.4. Tác động của A-PRF-XBSM lên sự di cư của hPDLSCs
• 4.3. Hiệu quả lâm sàng khi sử dụng A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại trong điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc
• 4.3.1. Bàn luận về đối tượng, phương pháp nghiên cứu
• 4.3.2. Hiệu quả lâm sàng của A-PRF-XBSM thông qua đánh giá các chỉ số nha chu
• 4.3.3. Thay đổi các biến số ACR và DF trên X quang sau 6 tháng
• 4.4. Mức độ hiện diện những yếu tố tăng trưởng PDGF-BB, VEGF và TGF-β1 trong dịch khe nướu (GCF)
• 4.4.1. Bàn luận về phương pháp nghiên cứu
• 4.4.2. Đánh giá sự hiện diện những yếu tố tăng trưởng PDGF-BB, VEGF và TGF-β1 trong dịch khe nướu
• 4.5. Ứng dụng của đề tài, điểm mới và điểm hạn chế
• 4.5.1. Ý nghĩa ứng dụng của đề tài
• 4.5.2. Những điểm mạnh và điểm mới của nghiên cứu
• 4.5.3. Hạn chế của đề tài
• CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng quan về Luận án Nguyễn Mẹo

Luận án của Nguyễn Mẹo tập trung vào việc nghiên cứu tác động của fibrin giàu tiểu cầu (PRF) kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại lên tế bào dây chằng nha chu trong điều trị viêm nha chu. Nghiên cứu này không chỉ cung cấp cái nhìn sâu sắc về cơ chế hoạt động của PRF mà còn đánh giá hiệu quả lâm sàng của nó trong việc tái tạo mô nha chu. Đề tài được thực hiện với mục tiêu rõ ràng, nhằm đánh giá hiệu quả phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF và VEGF từ dịch chiết A-PRF, đồng thời xác định mức độ an toàn và tác động của A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại. Luận án cũng nhấn mạnh tầm quan trọng của việc sử dụng PRF trong điều trị viêm nha chu, một bệnh lý phổ biến có thể dẫn đến mất răng và ảnh hưởng đến chất lượng cuộc sống.

1.1. Đặt vấn đề

Viêm nha chu (VNC) là một bệnh lý nghiêm trọng, ảnh hưởng đến nhiều người trưởng thành. Tác giả Nguyễn Mẹo đã chỉ ra rằng VNC không chỉ gây mất răng mà còn có liên quan đến nhiều bệnh lý toàn thân khác. Việc điều trị VNC thường bao gồm các phương pháp không phẫu thuật và phẫu thuật, tuy nhiên, hiệu quả của các phương pháp này vẫn còn hạn chế. Do đó, nghiên cứu về PRF và khả năng kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại là cần thiết để cải thiện kết quả điều trị. Luận án đã chỉ ra rằng PRF có khả năng thúc đẩy sự tăng sinh và biệt hóa tế bào, từ đó hỗ trợ quá trình lành thương và tái tạo mô nha chu.

1.2. Tác giả và phương pháp nghiên cứu

Tác giả Nguyễn Mẹo đã thực hiện nghiên cứu này với sự hướng dẫn của các chuyên gia trong lĩnh vực y học. Phương pháp nghiên cứu bao gồm cả nghiên cứu in vitro và lâm sàng, nhằm đánh giá hiệu quả của A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại. Nghiên cứu đã sử dụng các chỉ số lâm sàng và X quang để đánh giá tình trạng nha chu của bệnh nhân sau điều trị. Kết quả cho thấy sự kết hợp này không chỉ an toàn mà còn mang lại hiệu quả tích cực trong việc cải thiện tình trạng nha chu.

II. Kết quả nghiên cứu

Luận án đã trình bày chi tiết về kết quả nghiên cứu, đặc biệt là sự phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF và VEGF từ dịch chiết A-PRF. Kết quả cho thấy rằng A-PRF có khả năng phóng thích các yếu tố tăng trưởng này một cách hiệu quả, góp phần vào quá trình tái tạo mô nha chu. Ngoài ra, nghiên cứu cũng chỉ ra rằng A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại có tác động tích cực đến khả năng sống và tăng sinh của tế bào gốc dây chằng nha chu. Những kết quả này không chỉ có ý nghĩa trong việc điều trị viêm nha chu mà còn mở ra hướng đi mới trong nghiên cứu và ứng dụng PRF trong y học.

2.1. Đánh giá lâm sàng

Kết quả lâm sàng cho thấy sự cải thiện rõ rệt về các chỉ số nha chu sau 3 và 6 tháng điều trị. Các chỉ số như độ sâu túi nha chu (PD), chỉ số nướu (GI) và mất bám dính lâm sàng (CAL) đều có sự cải thiện đáng kể. Điều này chứng tỏ rằng việc sử dụng A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại không chỉ an toàn mà còn hiệu quả trong việc điều trị viêm nha chu có tiêu xương. Những kết quả này khẳng định giá trị thực tiễn của nghiên cứu trong việc cải thiện sức khỏe răng miệng cho bệnh nhân.

2.2. Phân tích số liệu

Phân tích số liệu từ nghiên cứu cho thấy sự phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF-AB và VEGF từ dịch chiết A-PRF diễn ra liên tục và có sự tích lũy theo thời gian. Điều này cho thấy A-PRF có khả năng duy trì nồng độ yếu tố tăng trưởng trong một khoảng thời gian dài, từ đó hỗ trợ quá trình lành thương. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại có tác động tích cực đến sự di cư và tăng sinh của tế bào gốc dây chằng nha chu, mở ra hướng đi mới trong điều trị và tái tạo mô nha chu.

III. Bàn luận và kết luận

Luận án của Nguyễn Mẹo đã chỉ ra rằng việc kết hợp A-PRF với vật liệu thay thế xương dị loại có thể mang lại hiệu quả cao trong điều trị viêm nha chu. Nghiên cứu không chỉ cung cấp những thông tin quý giá về cơ chế hoạt động của PRF mà còn mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng các vật liệu sinh học trong y học. Kết quả nghiên cứu có thể được áp dụng rộng rãi trong thực tiễn, giúp cải thiện chất lượng điều trị cho bệnh nhân mắc viêm nha chu. Từ đó, nghiên cứu này không chỉ có giá trị về mặt lý thuyết mà còn có ý nghĩa thực tiễn lớn trong lĩnh vực nha khoa.

3.1. Ý nghĩa ứng dụng

Nghiên cứu của Nguyễn Mẹo có ý nghĩa quan trọng trong việc cải thiện phương pháp điều trị viêm nha chu. Việc ứng dụng A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại không chỉ giúp tăng cường hiệu quả điều trị mà còn giảm thiểu thời gian hồi phục cho bệnh nhân. Điều này có thể giúp nâng cao chất lượng cuộc sống cho những người mắc bệnh viêm nha chu, đồng thời giảm thiểu chi phí điều trị trong dài hạn.

3.2. Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp theo

Mặc dù nghiên cứu đã đạt được nhiều kết quả tích cực, nhưng vẫn còn một số hạn chế cần được khắc phục. Cần thực hiện thêm các nghiên cứu lâm sàng quy mô lớn hơn để khẳng định tính hiệu quả và an toàn của A-PRF trong điều trị viêm nha chu. Hướng nghiên cứu tiếp theo có thể tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sản xuất A-PRF và đánh giá tác động của nó trong các bệnh lý nha chu khác.

Nội dung chính

Tổng quan luận án

Bệnh viêm nha chu (VNC) là bệnh lý nhiễm trùng mạn tính đa yếu tố phát sinh do tương tác giữa màng sinh học vi khuẩn và hệ miễn dịch của vật chủ, dẫn tới sự phá hủy cấu trúc nâng đỡ răng gồm nướu, dây chằng nha chu và xương ổ răng. Đây là nguyên nhân hàng đầu gây mất răng ở người trưởng thành và có mối liên hệ mật thiết với nhiều bệnh lý toàn thân. Các liệu pháp điều trị không phẫu thuật (như cạo vôi và xử lý mặt gốc răng) thường chỉ tạo ra sự lành thương bằng biểu mô bám dính dài mà không tái tạo hoàn chỉnh phức hợp mô nâng đỡ. Phương pháp phẫu thuật tái tạo mô có hướng dẫn (GTR) kết hợp ghép vật liệu thay thế xương dị loại nguồn gốc từ bò (XBSM - Bio-Oss) cung cấp khung dẫn tạo xương nhưng thiếu hoạt tính kích tạo xương và các yếu tố biệt hóa tế bào. Fibrin giàu tiểu cầu cải tiến (A-PRF) là chế phẩm tiểu cầu tự thân thế hệ mới, chứa cấu trúc khung fibrin xốp cùng nồng độ cao bạch cầu và các yếu tố tăng trưởng nội sinh (PDGF, VEGF, TGF-β). Mặc dù vậy, sự phóng thích yếu tố tăng trưởng từ phức hợp A-PRF kết hợp XBSM, tác động của phức hợp này lên tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs) và hiệu quả can thiệp trên sang thương tiêu xương theo chiều dọc (IBD) trên lâm sàng vẫn chưa được làm sáng tỏ đầy đủ.

Nghiên cứu của nghiên cứu sinh Nguyễn Mẹo xác định 4 mục tiêu nghiên cứu cụ thể:

1. Đánh giá hiệu quả phóng thích yếu tố tăng trưởng PDGF và VEGF trong dịch chiết A-PRF kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại in vitro.
2. Xác định mức độ an toàn và tác động của A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại qua đánh giá độc tính, mức độ tăng sinh và di cư của tế bào gốc dây chằng nha chu người in vitro.
3. Đánh giá hiệu quả lâm sàng và X quang của A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại sau 3 và 6 tháng điều trị viêm nha chu có tiêu xương theo chiều dọc.
4. Đánh giá mức độ hiện diện những yếu tố tăng trưởng PDGF, VEGF và TGF-β1 trong dịch khe nướu của người bệnh sau phẫu thuật tái tạo mô nha chu khi có và không có sử dụng A-PRF kết hợp vật liệu thay thế xương dị loại.

Về đối tượng và phạm vi nghiên cứu:

• Thực nghiệm in vitro: Nghiên cứu thực hiện từ tháng 01/2020 đến tháng 07/2020 (thời gian tập huấn và định chuẩn từ tháng 10/2019 đến tháng 12/2019) tại Phòng thí nghiệm Kỹ nghệ mô và Vật liệu Y sinh thuộc Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh. Đối tượng thực nghiệm là dòng tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs) thế hệ P3 nuôi cấy chuyển tiếp lên thế hệ P4, kết hợp chế phẩm A-PRF phân lập từ máu ngoại vi của 3 tình nguyện viên khỏe mạnh (24-28 tuổi) và vật liệu xương dị loại Bio-Oss kích thước hạt 250-1000 µm.
• Nghiên cứu can thiệp lâm sàng: Thiết kế thử nghiệm lâm sàng có nhóm chứng được triển khai trên các bệnh nhân mắc viêm nha chu có khiếm khuyết xương theo chiều dọc (IBD), theo dõi đánh giá các thời điểm trước phẫu thuật (T0), sau 3 tháng và sau 6 tháng.

Tổng quan tài liệu và vị trí của luận án

Tổng quan tài liệu của luận án hệ thống hóa các nền tảng sinh học và kết quả nghiên cứu lâm sàng liên quan đến kỹ nghệ mô nha chu:

Về tế bào gốc dây chằng nha chu: Tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs) được Seo và cs (2004) phân lập lần đầu tiên, ghi nhận khả năng biểu hiện các dấu ấn bề mặt của tế bào gốc trung mô và tiềm năng biệt hóa thành nhiều dòng tế bào (xương, mỡ, sụn, nguyên bào xê măng). Năm 2014, nhóm nghiên cứu của Trần Lê Bảo Hà và cs tại Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh đã phân lập và nuôi cấy thành công dòng hPDLSCs mang các dấu ấn CD44, CD73, CD90. Các công trình của Ding và cs (2010), Wada và cs (2009) chỉ ra hPDLSCs có khả năng điều hòa miễn dịch qua trung gian enzym COX-2, prostaglandin E2 (PGE2) và ức chế sự kích hoạt của tế bào B thông qua protein PD-1.

Về quá trình phát triển của các thế hệ tiểu cầu cô đặc: Marx và cs (1998) đưa ra khái niệm huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) thế hệ thứ nhất sử dụng chất chống đông, tuy nhiên giải phóng yếu tố tăng trưởng nhanh và sớm kết thúc. Choukroun và cs (2001) phát triển fibrin giàu tiểu cầu (L-PRF) ly tâm ở 3000 vòng/phút trong 10 phút không cần hóa chất chống đông. Sau đó, quy trình ly tâm tốc độ chậm 1300 vòng/phút trong 14 phút tạo ra A-PRF với khung fibrin xốp, phân bố đồng đều bạch cầu và tiểu cầu, giúp kéo dài thời gian phóng thích các yếu tố tăng trưởng PDGF, VEGF so với L-PRF (Choukroun và Ghanaati 2014, Miron và cs 2017). Nghiên cứu của Oliveira và cs (2020) và Ravi và cs (2020) tiếp tục khảo sát ảnh hưởng của lực ly tâm và loại ống nghiệm đến động học giải phóng protein tăng trưởng.

Về tương tác giữa PRF và vật liệu ghép xương: Nghiên cứu của Simonpieri và cs (2009), Castro và cs (2019), Blatt và cs (2021) và Kyyak và cs (2021) xác nhận việc phối hợp hạt xương dị loại (XBSM) với PRF tạo ra cấu trúc liên kết sinh học ("sticky bone"), giải phóng liên tục PDGF, VEGF và TGF-β đến ngày thứ 14, kích thích tăng sinh và di cư nguyên bào xương in vitro.

Về hiệu quả lâm sàng và dấu ấn sinh học dịch khe nướu (GCF): Các nghiên cứu của Sharma và cs (2011), Rosamma và cs (2012), Pradeep và cs (2012), Juneja và cs (2015), Agarwal và cs (2016), Sezgin và cs (2017), Upadhyay và cs (2020), Lei và cs (2020), Bahammam và cs (2021), cùng các công trình trong nước của Phạm Anh Vũ Thụy và cs (2021), Nguyễn Mẹo (2017) đã chứng minh PRF hoặc phức hợp PRF - vật liệu ghép giúp cải thiện độ sâu túi nha chu (PD), mức bám dính lâm sàng (CAL) và lấp khiếm khuyết xương (DF). Các phân tích dấu ấn dịch khe nướu từ Arabaci và cs (2017), Kizildag và cs (2018), Pirebas và cs (2018), Joshi và cs (2019) cho thấy sự gia tăng các yếu tố tăng trưởng PDGF-BB, VEGF, TGF-β1, FGF-2 và BMP-2 trong những tuần đầu sau mổ.

Tác giả / Năm	Thiết kế nghiên cứu	Vật liệu sử dụng	Dấu ấn GFs khảo sát	Kết quả chính
Gamal và cs (2016)	Thử nghiệm song song (30 bệnh nhân)	PRF + XBSM; PRGF + XBSM; XBSM	PDGF-BB, VEGF	GFs tăng ngày 1, 3, 7 và giảm dần ngày 14, 21, 30 ở cả 3 nhóm; khác biệt không có ý nghĩa thống kê giữa các nhóm.
Arabaci và cs (2017)	Nửa miệng (26 bệnh nhân)	PRF + OFD; OFD	PDGF-BB, FGF-2, TGF-β1	Mức GFs tăng ở tuần 2 và giảm ở tuần 4, 6. Nhóm PRF + OFD có nồng độ GFs tuần 2 đến tuần 4 cao hơn có ý nghĩa so với OFD đơn thuần.
Kizildag và cs (2018)	Thử nghiệm song song (32 bệnh nhân)	PRF + OFD; OFD	BMP-2, IGF-1	BMP-2 và IGF-1 tăng ở tuần 1, 2 và giảm ở tuần 4. Nhóm PRF + OFD biểu hiện BMP-2 và IGF-1 tuần 2 cao hơn có ý nghĩa so với nhóm OFD.
Pirebas và cs (2018)	Nửa miệng (25 bệnh nhân)	T-PRF + DFDBA; DFDBA	PDGF-BB, VEGF, FGF-2, ANG, ANT	GFs đạt đỉnh ở ngày 3, giảm dần ở ngày 7, 14, 30. Khác biệt giữa hai nhóm không có ý nghĩa thống kê.
Joshi và cs (2019)	Nửa miệng (20 bệnh nhân)	PRF + β-TCP; Collagen + β-TCP + rhPDGF-BB	PDGF-BB, ALP	Mức PDGF-BB không khác biệt ở ngày 3, 7 nhưng nhóm rhPDGF-BB giảm nhanh ở ngày 14, 30; ALP tăng từ ngày 3 đến 30.
Lei và cs (2020)	Thử nghiệm song song (45 bệnh nhân)	A-PRF + XBSM + GTR; CGF + XBSM + GTR; XBSM + GTR	PDGF-AB, VEGF, TGF-β1	A-PRF giải phóng yếu tố tăng trưởng ổn định đến ngày 14, cải thiện vượt trội các chỉ số PD, CAL và DF sau 6 tháng.
Bahammam và cs (2021)	Thử nghiệm song song (60 bệnh nhân)	PRF; HA; PRF + HA; OFD	VEGF	VEGF tăng ở tất cả các nhóm can thiệp; nhóm PRF + HA đạt hiệu quả giảm PD, tăng CAL và tăng DF tốt hơn các nhóm còn lại.

Khoảng trống học thuật luận án lựa chọn giải quyết: Chưa có công trình nghiên cứu đầy đủ về động học giải phóng yếu tố tăng trưởng PDGF và VEGF từ dịch chiết A-PRF kết hợp XBSM ở các nồng độ khác nhau (100%, 20%, 4%), tác động trực tiếp của phức hợp này lên độc tính, khả năng tăng sinh và di cư của tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs), đồng thời đánh giá song hành hiệu quả lâm sàng, X-quang cắt lớp hình nón (CBCT) và định lượng cytokin dịch khe nướu trong điều trị khuyết hổng xương theo chiều dọc.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết và phân loại sử dụng

• Lý thuyết tái tạo mô nha chu và kỹ nghệ mô: Dựa trên sự tương tác ba thành phần: tế bào gốc (hPDLSCs), chất mang/giá thể (Bio-Oss) và tín hiệu sinh học (yếu tố tăng trưởng tự thân PDGF-AB, VEGF, TGF-β1 từ A-PRF).
• Phân loại bệnh viêm nha chu: Sử dụng hệ thống phân loại AAP/EFP 2017 dựa trên các giai đoạn (Stage I đến IV) và mức độ tiến triển (Grade A, B, C).
• Phân loại khiếm khuyết trong xương: Phân loại theo Goldman và Cohen (1958) dựa trên số vách xương còn lại của khuyết hổng (1 vách, 2 vách, 3 vách hoặc tổn thương phối hợp).

Phương pháp nghiên cứu in vitro

• Điều chế vật liệu: A-PRF được tạo bằng máy ly tâm PC-02 từ máu toàn phần không chất chống đông ở 1300 vòng/phút trong 14 phút. Khối A-PRF được cắt nhỏ và phối trộn với hạt Bio-Oss (kích thước 250-1000 µm) để thu nhận dịch chiết hỗn hợp A-PRF-XBSM ở các nồng độ nguyên chất 100%, pha loãng 20% và 4% trong môi trường DMEM/F12.
• Định lượng PDGF-AB và VEGF: Sử dụng bộ kit miễn dịch gắn enzym ELISA SimpleStep (Sigma-Aldrich: mã RAB0396 cho PDGF và RAB0507 cho VEGF; ngưỡng phát hiện 2,1 pg/mL) tại các mốc thời gian 1 giờ, 6 giờ, 1 ngày, 3 ngày, 5 ngày và 7 ngày; đọc mật độ quang (OD) ở bước sóng 450 nm, lặp lại 3 lần cho mỗi mẫu.
• Đánh giá khả năng sống và độc tính tế bào: Thực hiện thử nghiệm MTT trên hPDLSCs thế hệ P4 theo tiêu chuẩn quốc tế ISO 10993-5:2009. Đo mật độ quang tại bước sóng 570 nm sau 24 giờ ủ dịch chiết, tính tỷ lệ tăng trưởng tương đối (%RGR): $$%RGR = \frac{OD_{570e}}{OD_{570d}} \times 100%$$ (trong đó $OD_{570e}$ là mật độ quang nhóm thử nghiệm, $OD_{570d}$ là mật độ quang nhóm chứng trắng).

%RGR	Mức độ độc tế bào theo ISO 10993-5:2009	Kết luận an toàn sinh học
$\ge 100%$	Mức 0	Hoàn toàn không gây độc
$75% - 99%$	Mức 1	Không gây độc
$50% - 74%$	Mức 2	Độc tính nhẹ (chấp nhận được)
$25% - 49%$	Mức 3	Độc tính trung bình
$1% - 24%$	Mức 4	Độc tính nặng
$0%$	Mức 5	Độc tính hoàn toàn

• Đánh giá sự tăng sinh tế bào: Nuôi cấy hPDLSCs trong các môi trường thử nghiệm (chứng dương CM có FBS, chứng âm M- không FBS, dịch chiết A-PRF-XBSM 100%, 20%, 4%), đếm số lượng tế bào sống trên buồng đếm tế bào dưới kính hiển vi quang học tại ngày 1, 3, 5, 7.
• Đánh giá sự di cư tế bào: Thực hiện mô hình tạo vết rạch vô bào (scratch assay) trên đĩa 6 giếng. Đo diện tích vùng vô bào tại thời điểm 0 giờ và 24 giờ bằng phần mềm xử lý hình ảnh Image-Analysis J 1.45S (National Institutes of Health, Hoa Kỳ) phối hợp kính hiển vi đảo pha CKX53 và hệ thống CellSens (Olympus, Nhật Bản).

Phương pháp nghiên cứu ứng dụng lâm sàng

• Thiết kế: Thử nghiệm lâm sàng có nhóm chứng so sánh phẫu thuật tái tạo mô nha chu có sử dụng A-PRF kết hợp XBSM và màng Bio-Gide với nhóm chứng không sử dụng A-PRF.
• Các chỉ số lâm sàng đo lường qua máng định chuẩn (Stent) tại T0, sau 3 tháng và sau 6 tháng:
  • Chỉ số mảng bám (PlI) và Chỉ số nướu (GI) theo tiêu chuẩn Silness và Löe (1964).
  • Tụt nướu (GR): khoảng cách từ bờ nướu đến đường nối men - xê măng (CEJ).
  • Độ sâu túi nha chu khi thăm dò (PD): khoảng cách từ bờ nướu đến đáy túi.
  • Mất bám dính lâm sàng (CAL): khoảng cách từ CEJ đến đáy túi nha chu.
• Đánh giá X-quang: Sử dụng kỹ thuật chụp cắt lớp chùm tia hình nón (CBCT) trước phẫu thuật và sau 6 tháng để xác định mức tiêu mào xương ổ (ACR) và độ lấp khiếm khuyết xương (DF) bằng milimét và phần trăm.
• Đánh giá hóa sinh dịch khe nướu: Thu thập GCF bằng que giấy thấm nha chu chuyên dụng đặt vào đáy túi nha chu trong 30 giây tại các thời điểm theo dõi, lưu trữ trong dung dịch đệm ở ống eppendorf để định lượng nồng độ PDGF-BB, VEGF và TGF-β1.

Nội dung chính theo từng chương

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

Chương 1 phân tích cấu trúc giải phẫu học và sinh học phân tử của mô nha chu, tập trung vào đặc tính của dòng tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs). Luận án trình bày lịch sử phát triển các thế hệ tiểu cầu cô đặc từ PRP đến L-PRF, A-PRF và i-PRF, phân tích rõ sự khác biệt về lực ly tâm, cấu trúc mạng lưới fibrin và động học phóng thích các yếu tố tăng trưởng nội sinh. Tác giả tổng hợp toàn diện các bằng chứng in vitro và in vivo về tương tác giữa PRF và các loại xương ghép (đặc biệt là XBSM), phân loại viêm nha chu theo AAP 2017, các hình thái tiêu xương theo chiều dọc (IBD) theo Goldman (1958) và tổng kết các nghiên cứu sử dụng dấu ấn sinh học dịch khe nướu (GCF) để đánh giá quá trình lành thương.

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Chương 2 mô tả chi tiết hai hợp phần nghiên cứu:

• Hợp phần in vitro: Chuẩn hóa quy trình nuôi cấy hPDLSCs P3 sang P4, quy trình phân lập A-PRF và phối trộn Bio-Oss để tạo dịch chiết 100%, 20%, 4%. Thiết lập các thử nghiệm định lượng ELISA đối với PDGF-AB và VEGF; kiểm tra độc tính tế bào MTT theo tiêu chuẩn ISO 10993-5:2009; theo dõi tăng sinh tế bào bằng buồng đếm tại các ngày 1, 3, 5, 7; định lượng tốc độ di cư qua phần trăm thu hẹp diện tích vết rạch bằng ImageJ 1.45S sau 24 giờ.
• Hợp phần lâm sàng: Tiêu chuẩn lựa chọn và loại trừ bệnh nhân viêm nha chu có IBD, kỹ thuật phẫu thuật lật vạt làm sạch (OFD), ghép phức hợp A-PRF-XBSM kết hợp màng collagen Bio-Gide, quy trình thu thập GCF không xâm lấn và kỹ thuật chụp phim CBCT để đo lường các biến số ACR và DF.

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

Chương 3 trình bày các số liệu thực nghiệm in vitro và can thiệp lâm sàng:

• Động học phóng thích GFs: Nồng độ PDGF-AB và VEGF được giải phóng liên tục từ dịch chiết A-PRF-XBSM ở các nồng độ, đạt đỉnh trong các khoảng thời gian đầu và duy trì sự tích lũy tăng dần qua các mốc 1h, 6h, 1 ngày, 3 ngày, 5 ngày đến 7 ngày.
• An toàn sinh học và phản ứng tế bào: Thử nghiệm MTT cho thấy tỷ lệ tăng trưởng tương đối (%RGR) ở các nhóm dịch chiết A-PRF-XBSM nằm trong ngưỡng độ độc 0-1, khẳng định vật liệu không gây độc tế bào. Số lượng tế bào hPDLSCs tăng sinh rõ rệt theo thời gian khảo sát từ ngày 1 đến ngày 7, cao hơn nhóm đối chứng âm không có huyết thanh (M-). Diện tích vùng vô bào trong thử nghiệm di cư giảm có ý nghĩa sau 24 giờ ở các nhóm tiếp xúc dịch chiết hỗn hợp so với nhóm chứng âm.
• Hiệu quả lâm sàng và X-quang: Các chỉ số PlI và GI giảm mạnh sau 3 và 6 tháng. Độ sâu túi nha chu (PD) giảm có ý nghĩa thống kê, mức bám dính lâm sàng (CAL) được cải thiện rõ rệt tại thời điểm 3 tháng và 6 tháng. Phim CBCT sau 6 tháng ghi nhận mức gia tăng lấp khiếm khuyết xương (DF) và hạn chế tiêu mào xương ổ (ACR) ở nhóm can thiệp.
• Dấu ấn sinh học GCF: Định lượng PDGF-BB, VEGF và TGF-β1 trong dịch khe nướu cho thấy nồng độ các yếu tố này tăng cao trong giai đoạn lành thương sớm sau phẫu thuật và có xu hướng ổn định dần theo thời gian.

CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN

Chương 4 tập trung thảo luận cơ chế tương tác sinh học giữa khung fibrin của A-PRF và các hạt xương xốp Bio-Oss. Tác giả giải thích hiện tượng phóng thích kéo dài của các yếu tố tăng trưởng là nhờ mạng lưới fibrin hoạt động như một bể chứa sinh học, bảo vệ protein không bị thoái giáng enzyme sớm. Tác động thúc đẩy hPDLSCs tăng sinh và di cư được phân tích dựa trên con đường tín hiệu hóa ứng động của PDGF và VEGF. Trên khía cạnh lâm sàng, việc phối hợp A-PRF giúp tăng cường lành thương mô mềm sớm, giảm phù nề, hỗ trợ màng GTR duy trì không gian tạo xương và kích thích tân tạo mạch máu nuôi dưỡng khối ghép xương dị loại. Luận án đối chiếu kết quả với các nghiên cứu của Gamal (2016), Arabaci (2017), Lei (2020), Bahammam (2021) và chỉ ra các điểm đồng thuận cũng như khác biệt về mặt phương pháp luận.

Kết quả và những đóng góp mới

Đóng góp về mặt khoa học cơ bản (In vitro)

• Cung cấp bằng chứng thực nghiệm về động học phóng thích các yếu tố tăng trưởng PDGF-AB và VEGF từ hỗn hợp A-PRF kết hợp XBSM (Bio-Oss) ở các tỷ lệ nồng độ dịch chiết khác nhau (100%, 20%, 4%) kéo dài đến ngày thứ 7.
• Chứng minh tính an toàn sinh học tuyệt đối của phức hợp A-PRF-XBSM dựa trên tiêu chuẩn ISO 10993-5:2009, xác nhận phức hợp không gây độc tính cho tế bào gốc dây chằng nha chu người (hPDLSCs).
• Khẳng định dịch chiết hỗn hợp A-PRF-XBSM có khả năng kích thích mạnh mẽ sự tăng sinh và thúc đẩy sự di cư của hPDLSCs vào vùng tổn thương mô phỏng sau 24 giờ.

Đóng góp về mặt thực tiễn và lâm sàng

• Đưa ra quy trình ứng dụng lâm sàng phối hợp giữa A-PRF tự thân, hạt xương dị loại Bio-Oss và kỹ thuật GTR trong phẫu thuật điều trị sang thương tiêu xương theo chiều dọc (IBD) ở bệnh nhân viêm nha chu.
• Chứng minh hiệu quả cải thiện rõ rệt các chỉ số nha chu mô mềm (giảm độ sâu túi nha chu PD, tăng mức bám dính lâm sàng CAL, kiểm soát tụt nướu GR) sau 3 và 6 tháng theo dõi.
• Xác thực khả năng tái tạo mô cứng thông qua việc tăng tỷ lệ lấp đầy khiếm khuyết xương (DF) và kiểm soát tiêu mào xương ổ (ACR) trên hình ảnh X-quang CBCT ba chiều sau 6 tháng.
• Xác định động thái biểu hiện của các cytokin tăng trưởng (PDGF-BB, VEGF, TGF-β1) trong dịch khe nướu (GCF) như những dấu ấn sinh học phản ánh tiến trình lành thương và tái tạo mô nha chu sau can thiệp phẫu thuật.

Kiến nghị và đề xuất

• Ứng dụng quy trình phối hợp A-PRF và XBSM vào thực hành điều trị chuyên sâu các tổn thương khiếm khuyết trong xương do viêm nha chu tại các cơ sở răng hàm mặt.
• Tiếp tục mở rộng các nghiên cứu đa trung tâm với cỡ mẫu lớn hơn và theo dõi dài hạn (12-24 tháng) để đánh giá độ bền vững của bám dính mô liên kết và xương tái tạo.

Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp

Về mặt hạn chế:

• Nguồn A-PRF trong thực nghiệm in vitro được lấy từ 3 tình nguyện viên trẻ tuổi khỏe mạnh, chưa phản ánh đầy đủ sự biến thiên sinh học của các yếu tố tăng trưởng ở bệnh nhân cao tuổi hoặc có bệnh lý nền.
• Thời gian theo dõi lâm sàng và X-quang CBCT dừng lại ở mốc 6 tháng, chưa ghi nhận kết quả mô học trực tiếp trên người (do rào cản đạo đức y sinh học).
• Thử nghiệm in vitro chỉ khảo sát hai yếu tố PDGF-AB và VEGF trong dịch chiết, chưa định lượng toàn bộ các cytokin khác hiện diện trong khối fibrin.

Về hướng nghiên cứu tiếp:

• Khảo sát sâu hơn các con đường truyền tín hiệu phân tử và biểu hiện gen tạo xương (như RUNX2, OCN, OPN, ALP) của hPDLSCs khi tiếp xúc với hỗn hợp A-PRF-XBSM.
• Thực hiện các thử nghiệm đánh giá sự kết hợp giữa các biến thể PRF dạng lỏng (i-PRF) với vật liệu ghép xương và theo dõi lâm sàng dài hạn sau 12 đến 24 tháng.

Giá trị tham khảo

Luận án là tài liệu chuyên khảo có giá trị ứng dụng cao cho nhiều nhóm đối tượng:

• Bác sĩ chuyên khoa Răng Hàm Mặt và Nha chu: Tham khảo quy trình chế chế tạo A-PRF tại ghế điều trị, kỹ thuật phối trộn hạt xương Bio-Oss tạo khối liên kết sinh học và phương pháp phẫu thuật tái tạo khiếm khuyết xương theo chiều dọc kết hợp màng GTR.
• Học viên sau đại học, nghiên cứu sinh ngành Răng Hàm Mặt và Kỹ nghệ mô Y sinh: Sử dụng làm mẫu chuẩn phương pháp luận nghiên cứu kết hợp giữa mô hình tế bào in vitro (nuôi cấy hPDLSCs, thử nghiệm MTT chuẩn ISO 10993-5:2009, scratch assay, ELISA) và thử nghiệm lâm sàng đối chứng.
• Giảng viên và nhà nghiên cứu nha học: Cung cấp nguồn tài liệu tham khảo chi tiết về cơ chế sinh học phân tử của quá trình lành thương mô nha chu và giá trị chẩn đoán của các dấu ấn sinh học trong dịch khe nướu (GCF).

Câu hỏi thường gặp

1. A-PRF được điều chế theo quy trình và thông số kỹ thuật nào trong luận án?
A-PRF được điều chế từ máu ngoại vi của người hiến khỏe mạnh, chứa trong ống nghiệm thủy tinh 10 ml không có chất chống đông, ly tâm ngay trên máy PC-02 với tốc độ 1300 vòng/phút trong thời gian 14 phút theo quy trình cải tiến của Choukroun.

2. Tiêu chuẩn quốc tế nào được sử dụng để đánh giá mức độ an toàn và độc tính tế bào của dịch chiết A-PRF-XBSM?
Luận án áp dụng tiêu chuẩn quốc tế ISO 10993-5:2009 về đánh giá độc tính in vitro của trang thiết bị y tế thông qua thử nghiệm MTT, xác định tỷ lệ tăng trưởng tương đối (%RGR) của tế bào gốc hPDLSCs.

3. Phần mềm nào được sử dụng để định lượng mức độ di cư của tế bào hPDLSCs trong thử nghiệm in vitro?
Mức độ di cư của tế bào gốc hPDLSCs vào vùng vô bào được đo lường và phân tích định lượng bằng phần mềm xử lý hình ảnh Image-Analysis J 1.45S (National Institutes of Health, Bethesda, MD, Hoa Kỳ) dựa trên các ảnh chụp từ kính hiển vi đảo pha Olympus CKX53.

4. Những dấu ấn sinh học nào được định lượng trong dịch khe nướu (GCF) của bệnh nhân sau phẫu thuật?
Ba dấu ấn sinh học tăng trưởng được thu thập bằng băng giấy thấm nha chu và định lượng trong dịch khe nướu bao gồm: PDGF-BB (Platelet-derived growth factor-BB), VEGF (Vascular endothelial growth factor) và TGF-β1 (Transforming growth factor-β1).

5. Các biến số nào được khảo sát trên phim chụp cắt lớp hình nón CBCT để đánh giá hiệu quả tái tạo mô cứng sau 6 tháng?
Hai biến số chính trên phim CBCT gồm: Mức tiêu mào xương ổ (ACR - Alveolar crest resorption) và Độ lấp khiếm khuyết xương (DF - Defect fill) tính theo kích thước milimét và tỷ lệ phần trăm lấp đầy khuyết hổng.

Kết luận

Luận án Tiến sĩ Y học của tác giả Nguyễn Mẹo đã giải quyết một cách có hệ thống cơ sở khoa học và hiệu quả thực tiễn của việc phối hợp fibrin giàu tiểu cầu cải tiến (A-PRF) với xương dị loại nguồn gốc từ bò (XBSM) trong kỹ nghệ mô nha chu. Nghiên cứu khẳng định phức hợp A-PRF-XBSM phóng thích ổn định các yếu tố tăng trưởng PDGF và VEGF, tuyệt đối an toàn sinh học và kích thích mạnh mẽ khả năng sống, tăng sinh và di cư của tế bào gốc dây chằng nha chu người in vitro. Trên lâm sàng, phẫu thuật tái tạo mô sử dụng phức hợp này kết hợp màng GTR mang lại sự cải thiện vượt trội về bám dính lâm sàng mô mềm và mức lấp đầy khiếm khuyết xương trên phim CBCT sau 6 tháng, đi kèm với sự gia tăng các dấu ấn sinh học GCF có lợi cho quá trình lành thương. Đây là công trình nghiên cứu toàn diện, đóng góp thiết thực cho cả lý thuyết kỹ nghệ mô và thực hành lâm sàng nha khoa hiện đại.

Trích đoạn nội dung tài liệu

ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm nha chu (VNC) là một bệnh nhiễm trùng mạn tính đa yếu tố do phức hợp các loài vi khuẩn tương tác với mô và tế bào của vật chủ gây giải phóng các chất trung gian gây viêm, dẫn đến sự phá hủy cấu trúc mô nha chu gồm nướu, xương ổ và dây chằng nha chu. VNC là nguyên nhân hàng đầu gây mất răng, ảnh hưởng đến chất lượng cuộc sống ở người trưởng thành 6. VNC là một bệnh lý rất phổ biến, trên thế giới tỷ lệ VNC ở người lớn thay đổi từ 10-60% tuỳ thuộc vào tiêu chuẩn chẩn đoán 40. Ở Việt Nam, 96,8% người trưởng thành mắc bệnh viêm nướu và viêm nha chu, tỷ lệ người có cao răng và túi nha chu từ trung bình đến sâu lần lượt là 63,7% và 31,8% 5.

Hơn nữa, VNC cũng đã được xác định có liên quan đến một số bệnh toàn thân; do đó việc kiểm soát hay điều trị VNC không chỉ giúp giữ răng mà còn dự phòng bệnh toàn thân và những biến chứng của chúng 50. Điều trị VNC gồm điều trị không phẫu thuật và điều trị phẫu thuật tuỳ thuộc vào tính chất, mức độ của bệnh, các yếu tố tại chỗ và toàn thân cũng như yêu cầu của bệnh nhân. Điều trị nha chu không phẫu thuật như lấy cao răng và xử lý mặt chân răng có hiệu quả trong sửa chữa những khiếm khuyết liên quan đến bệnh và ngăn sự viêm nha chu tiến triển [102]. Tuy nhiên, sự lành thương sau phương pháp điều trị này thường xảy ra biểu mô bám dính kéo dài, có thể dễ tái phát túi nha chu và chỉ tái tạo phần nhỏ mô nha chu.

Tái tạo mô có hướng dẫn (GTR), GTR kết hợp với ghép xương với mức độ điều trị cao hơn; phương pháp này sử dụng màng chắn ngăn tế bào biểu mô tăng sinh bám dính vào bề mặt chân răng trong giai đoạn lành thương, cho phép tế bào dây chằng nha chu và xương ổ răng hình thành xê măng mới và bám dính mô liên kết mới; đây là phương pháp điều trị hứa hẹn vì tạo được khoảng trống cho sự di cư của tế bào dây chằng nha chu (DCNC) và ngăn hình thành biểu mô bám dính kéo dài, nhưng vẫn thiếu tính dẫn tạo tế bào và yếu tố gây biệt hóa tế bào [143]. Để một điều trị có được đặc tính dẫn tạo xương và yếu tố giúp biệt hóa tế bào DCNC cần ứng dụng yếu tố tăng trưởng kích thích các tế bào chịu trách nhiệm trong tái tạo mô nha chu trong đó có sử dụng fibrin giàu tiểu cầu [59]. 2 Fibrin giàu tiểu cầu (PRF) là vật liệu sinh học thuộc thế hệ thứ hai của tiểu cầu cô đặc chứa những yếu tố tăng trưởng tự thân như PDGF, VEGF, TGF-β có tiềm năng thúc đẩy sự tăng sinh, biệt hóa và di cư của nguyên bào sợi nướu, tế bào DCNC và nguyên bào xương [31]. Những nghiên cứu in vitro cũng cho thấy sử dụng PRF riêng lẻ thúc đẩy sự tăng sinh, di cư và biệt hóa tế bào gốc DCNC thành mô xương [133].

Tuy nhiên tác động của PRF khi kết hợp với vật liệu thay thế xương dị loại lên tế bào gốc DCNC cho đến nay vẫn chưa được sáng tỏ; đây là nguồn tế bào quan trọng trong tái tạo mô nha chu. Vật liệu ghép thay thế xương nhằm để tăng tái tạo xương quanh khiếm khuyết nha chu với kết quả có thể dự đoán được; trong đó vật liệu ghép thay thế xương dị loại có nguồn gốc từ bò (XBSM) được sử dụng phổ biến bởi tính tương hợp sinh học của vật liệu thường được chọn trong điều trị VNC, hầu hết những nghiên cứu cho thấy sử dụng XBSM cho kết quả thành công về mô học và lâm sàng [105].