Luận án nghiên cứu hóa học và hoạt tính sinh học loài An xoa và Màng kiêng tại Việt Nam - ĐHSPHN

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của an xoa và màng kiêng thuộc họ trôm tại Việt Nam, mang lại giá trị cho y học.

• Tác giả: Lê Thị Khánh Linh
• Người hướng dẫn: PGS. Đặng Ngọc Quang
• Trường học: Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội
• Chuyên ngành: Hóa Học Hữu Cơ
• Đề tài: Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học và Hoạt Tính Sinh Học của An Xoa và Màng Kiêng tại Việt Nam
• Loại tài liệu: luận án tiến sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• 1. CHƯƠNG 1: Thực vật họ Trôm
• 1.1. Giới thiệu chung
• 1.2. Thành phần hóa học họ Trôm
• 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM
• 2.1. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu hoạt tính sinh học
• 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Cây An xoa
• 3.2. Cây Màng kiêng
• 3.3. Kết quả docking của các triterpenoid với protein wMUS81
• DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA LUẬN ÁN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu An Xoa và Màng Kiêng tại Việt Nam

Bài viết này tập trung vào việc nghiên cứu khoa học về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của An Xoa (Helicteres hirsuta) và Màng Kiêng (Pterospermum truncatolobatum) tại Việt Nam. An Xoa và Màng Kiêng là hai loại dược liệu quý được sử dụng trong dược học cổ truyền, đặc biệt là trong các bài thuốc dân gian. Tuy nhiên, sự hiểu biết về tác dụng dược lý và độc tính của chúng vẫn còn hạn chế. Nghiên cứu này nhằm mục đích phân tích thành phần các hợp chất có trong hai loại cây này và đánh giá hoạt tính sinh học tiềm năng, từ đó mở ra hướng ứng dụng trong y học hiện đại. Công trình này cũng góp phần bảo tồn và phát huy giá trị của nguồn cây thuốc nam phong phú của Việt Nam. Nghiên cứu được thực hiện tại Phòng nghiên cứu Hóa học các hợp chất thiên nhiên, khoa Hóa học, trường Đại học Sư Phạm Hà Nội.

1.1. Giới Thiệu Chung Về An Xoa và Màng Kiêng

An Xoa (Helicteres hirsuta) và Màng Kiêng (Pterospermum truncatolobatum) thuộc họ Trôm (Sterculiaceae), là những dược liệu tiềm năng tại Việt Nam. An Xoa từ lâu đã được biết đến với công dụng hỗ trợ điều trị các bệnh về gan, trong khi Màng Kiêng ít được nghiên cứu hơn nhưng cũng có những công dụng nhất định trong dược học cổ truyền. Cả hai loại cây này đều chứa nhiều hợp chất tự nhiên có giá trị, cần được khai thác và nghiên cứu sâu hơn. Theo GS. Võ Văn Chi, họ Trôm có 15 chi với 34 loài có thể làm thuốc. Nghiên cứu này được thực hiện tại Việt Nam, nơi có sự đa dạng sinh học cao.

1.2. Tầm Quan Trọng của Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học

Việc xác định thành phần hóa học của An Xoa và Màng Kiêng là bước quan trọng để hiểu rõ hơn về tác dụng dược lý của chúng. Bằng cách phân lập hoạt chất và định danh hợp chất, các nhà khoa học có thể xác định các thành phần chịu trách nhiệm cho các hoạt tính sinh học cụ thể. Điều này giúp tối ưu hóa việc sử dụng dược liệu và phát triển các loại thuốc mới hiệu quả hơn. Các nghiên cứu in vitro và in vivo cũng đóng vai trò quan trọng trong việc đánh giá hoạt tính và độc tính của các hợp chất.

II. Thách Thức Nghiên Cứu Dược Tính An Xoa và Màng Kiêng

Mặc dù có tiềm năng lớn, việc nghiên cứu An Xoa và Màng Kiêng còn đối mặt với nhiều thách thức. Sự khác biệt về thành phần hóa học giữa các mẫu cây thu hái từ các vùng địa lý khác nhau, quy trình chiết xuất và phân tích phức tạp, và sự thiếu hụt các nghiên cứu tiền lâm sàng đầy đủ là những trở ngại chính. Ngoài ra, việc xác định tác dụng phụ của An Xoa và Màng Kiêng, cũng như các tương tác thuốc tiềm năng, cũng cần được quan tâm. Nghiên cứu này tìm cách vượt qua những thách thức này bằng cách sử dụng các phương pháp phân tích hiện đại và thực hiện các thử nghiệm in vitro và in vivo có kiểm soát.

2.1. Sự Biến Động Thành Phần Hóa Học Theo Địa Lý

Thành phần các hợp chất tự nhiên trong An Xoa và Màng Kiêng có thể khác nhau đáng kể tùy thuộc vào điều kiện sinh thái, thổ nhưỡng và khí hậu của khu vực mà chúng sinh trưởng. Sự biến động này gây khó khăn cho việc tiêu chuẩn hóa dược liệu và đảm bảo chất lượng đồng đều của các sản phẩm thuốc. Do đó, cần có các nghiên cứu so sánh thành phần hóa học của các mẫu cây từ các vùng khác nhau để xác định các yếu tố ảnh hưởng đến sự biến đổi này.

2.2. Thiếu Nghiên Cứu Tiền Lâm Sàng và Lâm Sàng

Số lượng nghiên cứu tiền lâm sàng và nghiên cứu lâm sàng về An Xoa và Màng Kiêng còn hạn chế. Điều này gây khó khăn cho việc chứng minh hiệu quả và an toàn của chúng trong điều trị bệnh. Các nghiên cứu sâu hơn về độc tính, dược động học và dược lực học là cần thiết để đưa ra các khuyến cáo sử dụng dựa trên bằng chứng khoa học. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu lâm sàng để đánh giá hiệu quả của An Xoa và Màng Kiêng trong điều trị các bệnh cụ thể ở người.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học An Xoa Màng Kiêng

Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp hiện đại để nghiên cứu thành phần hóa học của An Xoa và Màng Kiêng. Các phương pháp chiết xuất sử dụng dung môi khác nhau được áp dụng để thu được các phân đoạn giàu hợp chất tự nhiên. Sau đó, các kỹ thuật sắc ký như sắc ký cột và sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) được sử dụng để phân lập hoạt chất. Cuối cùng, các phương pháp phổ khối lượng (MS) và cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) được sử dụng để định danh hợp chất và xác định cấu trúc hóa học của chúng.

3.1. Quy Trình Chiết Xuất và Phân Tách Hợp Chất

Quy trình chiết xuất và phân tách hợp chất đóng vai trò then chốt trong việc thu được các hoạt chất tinh khiết từ An Xoa và Màng Kiêng. Việc lựa chọn dung môi chiết xuất phù hợp và tối ưu hóa các điều kiện chiết xuất (nhiệt độ, thời gian, tỷ lệ dung môi) là rất quan trọng. Các kỹ thuật sắc ký như sắc ký cột và HPLC cho phép phân tách các hợp chất dựa trên các tính chất vật lý và hóa học khác nhau. Quá trình này đòi hỏi sự cẩn trọng và kỹ năng cao để đảm bảo thu được các phân đoạn chất lượng.

3.2. Ứng Dụng Phổ Khối Lượng và Cộng Hưởng Từ Hạt Nhân

Phổ khối lượng (MS) và cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) là các công cụ mạnh mẽ để định danh hợp chất và xác định cấu trúc hóa học của chúng. Phổ khối lượng cung cấp thông tin về khối lượng phân tử của các hợp chất, trong khi cộng hưởng từ hạt nhân cung cấp thông tin chi tiết về cấu trúc phân tử, bao gồm các liên kết hóa học và các nhóm chức năng. Kết hợp hai phương pháp này cho phép xác định cấu trúc của các hợp chất một cách chính xác và tin cậy.

IV. Đánh Giá Hoạt Tính Sinh Học An Xoa và Màng Kiêng

Sau khi phân lập và định danh các hợp chất tự nhiên, nghiên cứu tiến hành đánh giá hoạt tính sinh học của chúng. Các thử nghiệm in vitro được sử dụng để đánh giá các hoạt tính như kháng viêm, chống oxy hóa, và gây độc tế bào ung thư. Các thử nghiệm in vivo trên động vật được sử dụng để đánh giá hiệu quả điều trị và độc tính của các hợp chất. Kết quả của các thử nghiệm này cung cấp thông tin quan trọng về tiềm năng ứng dụng của An Xoa và Màng Kiêng trong y học.

4.1. Thử Nghiệm In Vitro Kháng Viêm và Chống Oxy Hóa

Các thử nghiệm in vitro về kháng viêm và chống oxy hóa là bước đầu tiên để đánh giá tiềm năng dược lý của An Xoa và Màng Kiêng. Các thử nghiệm kháng viêm đo lường khả năng ức chế các enzyme hoặc các chất trung gian gây viêm. Các thử nghiệm chống oxy hóa đo lường khả năng loại bỏ các gốc tự do, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương do oxy hóa. Kết quả của các thử nghiệm này có thể cung cấp thông tin về cơ chế tác dụng và tiềm năng điều trị các bệnh liên quan đến viêm và oxy hóa.

4.2. Đánh Giá Độc Tính và Hoạt Tính Gây Độc Tế Bào Ung Thư

Việc đánh giá độc tính và hoạt tính gây độc tế bào ung thư là rất quan trọng để xác định tính an toàn và tiềm năng điều trị ung thư của An Xoa và Màng Kiêng. Các thử nghiệm độc tính được thực hiện để xác định liều lượng gây độc hại trên tế bào hoặc động vật. Các thử nghiệm gây độc tế bào ung thư đo lường khả năng ức chế sự phát triển hoặc tiêu diệt các tế bào ung thư. Kết quả của các thử nghiệm này có thể giúp lựa chọn các hợp chất có tiềm năng phát triển thành thuốc chống ung thư.

V. Ứng Dụng Thực Tiễn và Tiềm Năng Phát Triển Dược Liệu

Kết quả nghiên cứu này cung cấp cơ sở khoa học cho việc sử dụng An Xoa và Màng Kiêng trong dược học cổ truyền. Ngoài ra, việc phân lập hoạt chất và đánh giá hoạt tính sinh học mở ra tiềm năng phát triển các loại thuốc mới từ hai loại dược liệu này. Các nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác dụng, dược động học, và dược lực học là cần thiết để đưa các sản phẩm từ An Xoa và Màng Kiêng ra thị trường một cách an toàn và hiệu quả. Cần chú trọng đến các vấn đề về địa chỉ bán An Xoa uy tín, địa chỉ bán Màng Kiêng uy tín, và kiểm soát giá An Xoa, giá Màng Kiêng.

5.1. Cơ Sở Khoa Học cho Sử Dụng Trong Y Học Cổ Truyền

Các nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học cung cấp cơ sở khoa học vững chắc cho việc sử dụng An Xoa và Màng Kiêng trong y học cổ truyền. Việc xác định các hoạt chất có lợi và hiểu rõ cơ chế tác dụng của chúng giúp tối ưu hóa việc sử dụng dược liệu và cải thiện hiệu quả điều trị. Tuy nhiên, cần có sự thận trọng và tư vấn của các chuyên gia y tế trước khi sử dụng An Xoa và Màng Kiêng để điều trị bệnh.

5.2. Hướng Phát Triển Thuốc Mới từ An Xoa và Màng Kiêng

Việc phân lập hoạt chất và đánh giá hoạt tính sinh học mở ra nhiều hướng phát triển thuốc mới từ An Xoa và Màng Kiêng. Các hợp chất có hoạt tính kháng viêm, chống oxy hóa, hoặc gây độc tế bào ung thư có thể được sử dụng làm cơ sở để phát triển các loại thuốc điều trị các bệnh liên quan. Tuy nhiên, cần có các nghiên cứu sâu hơn về dược động học, dược lực học, và độc tính để đảm bảo tính an toàn và hiệu quả của các loại thuốc này.

VI. Kết Luận và Hướng Nghiên Cứu An Xoa Màng Kiêng Tương Lai

Nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của An Xoa và Màng Kiêng đã cung cấp những thông tin quan trọng về tiềm năng dược lý của hai loại dược liệu này. Các nghiên cứu tương lai nên tập trung vào việc xác định cơ chế tác dụng của các hoạt chất, thực hiện các nghiên cứu lâm sàng quy mô lớn, và phát triển các sản phẩm thuốc an toàn và hiệu quả. Việc kết hợp An Xoa và Màng Kiêng kết hợp có thể mở ra những tiềm năng mới trong điều trị bệnh. Đồng thời, cần quan tâm đến việc bảo tồn và phát triển bền vững nguồn tài nguyên cây thuốc nam quý giá của Việt Nam.

6.1. Tổng Kết Các Phát Hiện Quan Trọng của Nghiên Cứu

Nghiên cứu đã thành công trong việc phân lập và định danh một số hợp chất tự nhiên có trong An Xoa và Màng Kiêng, đồng thời đánh giá hoạt tính sinh học của chúng. Các phát hiện quan trọng bao gồm tiềm năng kháng viêm, chống oxy hóa, và gây độc tế bào ung thư của một số hoạt chất. Các kết quả này cung cấp cơ sở khoa học cho việc sử dụng An Xoa và Màng Kiêng trong y học cổ truyền và mở ra tiềm năng phát triển thuốc mới.

6.2. Hướng Nghiên Cứu Sâu Hơn Về Cơ Chế Tác Dụng và Lâm Sàng

Các nghiên cứu tương lai nên tập trung vào việc xác định cơ chế tác dụng của các hoạt chất trong An Xoa và Màng Kiêng. Điều này bao gồm việc xác định các mục tiêu phân tử mà các hợp chất này tác động lên, cũng như các con đường tín hiệu mà chúng ảnh hưởng. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu lâm sàng quy mô lớn để đánh giá hiệu quả và an toàn của An Xoa và Màng Kiêng trong điều trị bệnh ở người. Nên thực hiện so sánh So sánh An Xoa và Màng Kiêng một cách chi tiết.

Nội dung chính

Tổng quan luận án

Bối cảnh dịch bệnh và gánh nặng ung thư toàn cầu ngày càng gia tăng đặt ra yêu cầu cấp thiết về việc tìm kiếm các hợp chất có hoạt tính sinh học từ tự nhiên. Theo số liệu của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) năm 2020, thế giới ghi nhận 19,3 triệu ca mắc mới và 9,96 triệu ca tử vong do ung thư. Tại Việt Nam, mỗi năm có khoảng 200.000 ca mắc mới và khoảng 70.000 người tử vong. Nguồn dược liệu tự nhiên từ hệ thực vật phong phú của Việt Nam (với gần 12.000 loài thực vật bậc cao thuộc 2.256 chi và 305 họ) cung cấp nguồn nguyên liệu hóa học tự nhiên đa dạng cho định hướng phát triển dược chất điều trị.

Trong dân gian, các loài thực vật thuộc họ Trôm (Sterculiaceae) được sử dụng để điều trị nhiều bệnh lý khác nhau. Cây An xoa (Helicteres hirsuta) được sử dụng trong y học cổ truyền để trị sởi, kiết lỵ, các bệnh về gan và tiêu hóa. Tuy nhiên, các nghiên cứu hóa thực vật và hoạt tính sinh học chuyên sâu về từng bộ phận (rễ và thân-lá) của loài này còn hạn chế, trong khi thực trạng khai thác tự nhiên diễn ra ồ ạt. Đối với cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum), các tài liệu khoa học trước đó mới chỉ dừng lại ở việc mô tả phân loại thực vật học mà chưa từng có công bố nào về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học.

Mục tiêu nghiên cứu của luận án được xác định cụ thể gồm:

1. Chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất từ rễ và thân-lá của cây An xoa (Helicteres hirsuta Lour.).
2. Chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất từ thân-lá của cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum Gagnep.).
3. Đánh giá hoạt tính sinh học (gây độc tế bào ung thư, kháng vi sinh vật kiểm định, chống oxy hóa) của các phân đoạn cao chiết và các hợp chất tinh khiết thu được từ hai loài trên.
4. Nghiên cứu tương tác docking phân tử của các hợp chất triterpenoid phân lập được với thụ thể protein endonuclease wMUS81 nhằm định hướng tác nhân ức chế hỗ trợ điều trị ung thư.

Đối tượng và phạm vi nghiên cứu:

• Đối tượng nghiên cứu: Mẫu rễ và thân-lá của cây An xoa (Helicteres hirsuta Lour.) và mẫu thân-lá của cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum Gagnep.) thuộc họ Trôm (Sterculiaceae).
• Phạm vi không gian: Mẫu An xoa được thu hái tại Tà Thiết, xã Lộc Thịnh, huyện Lộc Ninh, tỉnh Bình Phước. Mẫu Màng kiêng được thu hái tại xã Nhất Hòa, huyện Bắc Sơn, tỉnh Lạng Sơn.
• Phạm vi thời gian: Mẫu An xoa thu thập vào tháng 9 năm 2016; mẫu Màng kiêng thu thập vào tháng 3 năm 2018; các thực nghiệm hóa học, sinh học và mô phỏng được hoàn thành trong giai đoạn 2016–2022.

Tổng quan tài liệu và vị trí của luận án

Họ Trôm (Sterculiaceae) được Ventenat ex Salisbury công bố, bao gồm khoảng 68 chi và 1.100 loài, phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới. Tại Việt Nam, GS. Võ Văn Chi ghi nhận họ Trôm có 15 chi với 34 loài được dùng làm thuốc. Các nghiên cứu hóa thực vật trên thế giới tính đến năm 2015 đã phân lập gần 200 hợp chất từ họ Trôm, bao gồm các nhóm alkaloid, phenylpropanoid, flavonoid, terpenoid, quinone, lignan. Một số công trình tiêu biểu gồm:

• Hợp chất alkaloid: cyclopeptide alkaloid như frangufoline và franganine từ loài Melochia corchorifolia; waltherione A từ Melochia chamaedrys và Waltheria douradinha; quinolone alkaloid melovinone từ rễ loài Melochia tomentosa.
• Hợp chất phenylpropanoid: các dẫn xuất cinnamic acid từ lá Theobroma cacao; scopolin và scopoletin từ Scaphopetalum thonneri (Vardamides và cộng sự).
• Hợp chất flavonoid: (+)-catechin, (-)-epicatechin, leucocyanidin từ lá và hạt Theobroma cacao; các dẫn xuất flavonoid mang nhóm sulfate từ Wissadula periplocifolia.
• Hợp chất terpenoid: các khung lupane, friedelane, oleanane, steroid và sesquiterpene.

Đối với chi Thâu kén (Helicteres): Trên thế giới có khoảng 60 loài; Baker ghi nhận 4 loài ở đảo Java (Indonesia); K. Feng (1989) ghi nhận 10 loài ở Trung Quốc; Thái Lan có 7 loài; Việt Nam ghi nhận 6 loài theo GS. Võ Văn Chi (hoặc 8 loài theo Tardieu-Blot). Năm 2020, Đặng Văn Sơn và cộng sự công bố loài mới Helicteres binhthuanensis tại tỉnh Bình Thuận. Các nghiên cứu hóa thực vật trước đây tập trung vào:

• Loài Helicteres angustifolia: Zong-Tsi Chen (1994) phân lập flavonoid glycoside mới; Chen và cs (2006) phân lập dẫn xuất cinnamic acid; nghiên cứu năm 2008 công bố 3 triterpenoid mới và các dẫn xuất betulinic acid có khả năng gây độc tế bào HepG2, COLO 205, AGS; Wang C. và cs phân lập heligenin A, B và helicterone A; hợp chất methyl helicterate được chứng minh có tác dụng kháng virus viêm gan B và bảo vệ mô gan.
• Loài Helicteres isora: phân lập cucurbitacin B, isocucurbitacin B, rosmarinic acid, helisorin, helisterculin A–B, helicterin A–F; các hoạt chất từ loài này thể hiện khả năng ức chế tế bào ung thư KB, chống oxy hóa và cải thiện độ nhạy của thụ thể insulin.
• Loài Helicteres viscida: tại Việt Nam đã phân lập heliviscin, 7-epi-heligenin B.
• Loài Helicteres hirsuta: Tại Indonesia, nhóm nghiên cứu tại Đại học Ohio (Mỹ) phân lập 6 dẫn xuất lignan từ vỏ cây. Tại Việt Nam, các nghiên cứu tại Kiên Giang phân lập stigmasterol, lupeol, tiliroside, apigenin; Nguyễn Thanh Triết phân lập 2 terpenoid và 3 phenolic có hoạt tính gây độc tế bào CCRF-CEM, HCT116, MDA-MB-231; tại Thừa Thiên Huế phân lập betulin, betulinic acid, alphitolic acid, oleanolic acid, hibiscolacton A; tại Gia Lai phân lập các dẫn xuất có hoạt tính bảo vệ gan.

Đối với chi Pterospermum: Toàn cầu có hơn 70 loài, Việt Nam có 22 loài. Các nghiên cứu trên Pterospermum acerifolium đã phân lập phytoceramide, phytosterol glucoside acylated có hoạt tính tạo xương và kháng tế bào ung thư phổi, tụy; Pterospermum heterophyllum chứa triterpenoid, quinone và chromone kháng các dòng ung thư A549, HCT-8, Bel7402, đồng thời thể hiện tác dụng kháng viêm khớp trên mô hình chuột; Pterospermum yunnanense chứa dẫn xuất naphthol mới.

Khoảng trống nghiên cứu được luận án giải quyết:

• Cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum Gagnep.) hoàn toàn chưa có bất kỳ dữ liệu công bố nào về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học.
• Đối với cây An xoa (Helicteres hirsuta Lour.), các công trình trước đây chỉ khảo sát đơn lẻ từng bộ phận hoặc cao chiết thô, chưa có nghiên cứu so sánh đối chiếu hệ thống giữa rễ và thân-lá thu hái tại khu vực Đông Nam Bộ (Bình Phước).
• Chưa có công trình nào đánh giá khả năng tương tác của các triterpenoid từ hai loài này lên đích phân tử wMUS81 (endonuclease đóng vai trò sửa chữa DNA ở tế bào ung thư).

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Luận án áp dụng hệ thống phương pháp thực nghiệm tiêu chuẩn trong hóa học các hợp chất thiên nhiên kết hợp mô phỏng sinh học phân tử:

• Phương pháp tách chiết và phân lập: Chiết ngâm siêu âm bằng dung môi methanol ở nhiệt độ phòng. Phân bố lỏng–lỏng phân đoạn với các dung môi có độ phân cực tăng dần: n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, butanol và nước. Tinh sạch hợp chất bằng sắc ký bản mỏng (TLC), sắc ký cột (CC) sử dụng pha tĩnh silica gel 60, pha đảo RP-18, rây phân tử Sephadex LH-20, và sắc ký lỏng hiệu năng cao điều chế (Prep. HPLC, Jasco).
• Phương pháp xác định cấu trúc hóa học: Kết hợp phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1D và 2D đo trên máy Bruker Avance 500 MHz ($^1\text{H}$-NMR, $^{13}\text{C}$-NMR, DEPT, HSQC, HMBC, ROESY); phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI-MS) đo trên máy Agilent 1200 LC-MS; phổ khối lượng phân giải siêu cao FT-ICR-MS; phổ nhiễu xạ tia X đơn tinh thể đo trên máy Bruker D8 Advance.
• Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học:
  • Hoạt tính chống oxy hóa: Phương pháp bắt gốc tự do DPPH.
  • Hoạt tính kháng sinh: Phương pháp pha loãng vi lượng xác định nồng độ ức chế vi sinh vật kiểm định theo Hadacek F.
  • Hoạt tính gây độc tế bào ung thư in vitro: Phương pháp đo độ hấp thụ quang học MTT theo mô tả của Scudiero D. và cộng sự trên các dòng tế bào: KB (biểu mô), HepG2 (gan), SK-LU-1 (phổi), Hela (cổ tử cung), SK-Mel-2 (da), AGS (dạ dày), MCF7 (vú).
• Phương pháp mô phỏng Docking phân tử: Mô phỏng tương tác phân tử giữa các triterpenoid phân lập được với miền "winged-helix" ở đầu N của protein tái tổ hợp MUS81 (wMUS81) nhằm xác định thế năng liên kết và các vị trí tương tác acid amin trong túi liên kết.

Mẫu thực vật	Bộ phận	Khối lượng tươi	Khối lượng khô	Khối lượng cao tổng MeOH	Ký hiệu các phân đoạn cao
An xoa (H. hirsuta)	Rễ	—	4,5 kg	620 g	RH, RD, RE, RB, RN
An xoa (H. hirsuta)	Thân – lá	100 kg (tổng)	10,0 kg	450 g	TLH, TLD, TLE, TLB, TLN
Màng kiêng (P. truncatolobatum)	Thân – lá	4,0 kg	—	131 g	PH, PD, PE, PB, Nước

Nội dung chính theo từng chương

CHƯƠNG 1. Thực vật họ Trôm

Chương 1 hệ thống hóa các tư liệu tổng quan về đặc điểm thực vật học, phân loại, kinh nghiệm sử dụng dân gian, thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài thuộc họ Trôm (Sterculiaceae), tập trung vào hai chi Helicteres và Pterospermum:

• Tổng quan họ Trôm: Mô tả 68 chi, 1.100 loài, các đặc điểm hình thái thân bụi hoặc thân gỗ, vỏ có chất nhầy có thể kéo sợi, hoa có lông hình sao. Liệt kê chi tiết gần 200 hợp chất thuộc 5 nhóm chính: alkaloid, phenylpropanoid, flavonoid, terpenoid và các hợp chất khác.
• Chi Thâu kén (Helicteres): Trình bày tình hình phân bố địa lý (60 loài trên thế giới, 6–8 loài tại Việt Nam), đặc điểm hóa học của các loài H. angustifolia, H. isora, H. viscida. Tổng hợp các ứng dụng dược lý: kháng ung thư, ức chế virus viêm gan B, kháng viêm, hạ đường huyết.
• Cây An xoa (Helicteres hirsuta Lour.): Tóm tắt các nghiên cứu trước đây tại Indonesia và các vùng sinh thái của Việt Nam (Kiên Giang, Bình Phước, Thừa Thiên Huế, Gia Lai), thống kê các hợp chất phenolic, triterpenoid, sterol đã biết và dữ liệu thử nghiệm hoạt tính sinh học (gây độc tế bào HepG2, CCRF-CEM, HCT116, bảo vệ gan trên mô hình CCl4).
• Chi Pterospermum và cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum Gagnep.): Mô tả 22 loài tại Việt Nam, phân tích thành phần hóa thực vật của P. acerifolium, P. heterophyllum, P. yunnanense, P. semisagittatum. Xác lập cơ sở khoa học về việc cây Màng kiêng là đối tượng chưa từng được khảo sát hóa học.
• Cơ sở lý thuyết Docking phân tử và đích wMUS81: Trình bày vai trò của enzyme endonuclease MUS81 thuộc họ Xpf trong cơ chế sửa chữa đứt gãy sợi kép DNA. Miền xoắn "winged-helix" (wMUS81) điều phối hoạt tính cắt DNA. Việc ức chế wMUS81 làm tăng độ nhạy của tế bào ung thư đối với các thuốc hóa trị (cisplatin, 5-FU, camptothecin, olaparib), khẳng định tính đúng đắn khi lựa chọn wMUS81 làm thụ thể mô phỏng.

CHƯƠNG 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM

Chương 2 mô tả chi tiết địa điểm thu hái mẫu, quy trình xử lý nguyên liệu, quy trình chiết xuất phân đoạn, quy trình phân lập sắc ký, thông số máy đo phổ, quy trình thử nghiệm sinh học và phương pháp tính toán docking:

• Thu thập và xử lý mẫu thực vật:
  • Mẫu An xoa: Thu hái 100 kg tươi tại Bình Phước vào tháng 9/2016, định danh bởi PGS. Đỗ Hữu Thư, lưu tiêu bản số AX10.2016. Tách riêng rễ (4,5 kg khô) và thân-lá (10,0 kg khô). Rễ chiết MeOH thu 620 g cao tổng; phân bố lỏng–lỏng thu các cao phân đoạn: n-hexane (RH: 53,4 g), dichloromethane (RD: 37,18 g), ethyl acetate (RE: 28,01 g), butanol (RB: 123,32 g). Thân-lá chiết MeOH thu 450 g cao tổng; phân bố thu: n-hexane (TLH: 9,12 g), dichloromethane (TLD: 25,17 g), ethyl acetate (TLE: 4,82 g), butanol (TLB: 21,0 g).
  • Mẫu Màng kiêng: Thu hái 4,0 kg tươi tại Lạng Sơn vào tháng 3/2018, định danh bởi ThS. Nghiêm Đức Trọng, lưu tiêu bản số MK03.2018. Thân-lá sấy khô ở 40–60°C, nghiền mịn, chiết MeOH thu 131 g cao tổng; phân bố lỏng–lỏng thu các cao phân đoạn: n-hexane (PH: 1,80 g), dichloromethane (PD: 8,07 g), ethyl acetate (PE: 7,0 g), butanol (PB: 11,2 g).
• Quy trình phân lập:
  • Từ rễ An xoa: Sắc ký cột silica gel và HPLC điều chế các phân đoạn RH, RD, RE phân lập được 9 hợp chất (L1–L9).
  • Từ thân-lá An xoa: Phân tách các phân đoạn TLH, TLD, TLE thu được 5 hợp chất (L10–L14).
  • Từ thân-lá Màng kiêng: Sắc ký cột silica gel kết hợp kết tinh phân đoạn và Prep. HPLC các phân đoạn PH, PD, PE thu được 7 hợp chất (M1–M7).
• Dữ liệu phổ của một số hợp chất tiêu biểu:
  • Hợp chất L1: Betulinic acid methyl ester; $^1\text{H}$-NMR (500 MHz, CDCl3): $\delta$ 4,47 (s, H-29a), 4,60 (s, H-29b), 3,67 (s, 3H, H-31), 3,18 (dd, J = 11,5 và 5,0 Hz, H-3), 2,99 (dt, J = 10,5 và 5,0 Hz, H-19), 1,68 (s, 3H, H-30), 0,96; 0,91; 0,82; 0,76 (s, các nhóm methyl).
  • Hợp chất L3: 3β-Benzoylbetulinic acid (chất mới); phổ FT-ICR-MS cho pic ion phân tử tại m/z 599,3703 $[\text{M}+\text{K}]^+$ (phù hợp với công thức phân tử C37H52O4K).
  • Hợp chất L7: β-Amyrin.
  • Hợp chất L11: 3β-Hydroxyprotosta-17(20),24-dien-21-oic acid.
  • Hợp chất M1: β-Sitosterol; $^1\text{H}$-NMR (500 MHz, CDCl3): $\delta$ 5,36 (s, H-6), 3,52 (m, H-3), 1,01; 0,92; 0,84; 0,83; 0,82; 0,68 (các nhóm methyl); $^{13}\text{C}$-NMR (125 MHz, CDCl3) ghi nhận 29 tín hiệu carbon đặc trưng.
  • Hợp chất M3: Betulonic acid; $^1\text{H}$-NMR (500 MHz, CDCl3): $\delta$ 4,74 (d, J = 1,5 Hz, H-29a), 4,62 (d, J = 1,5 Hz, H-29b), 3,01 (m, H-19), 2,50 (m, H-2), 2,42 (m, H-2), các nhóm methyl xuất hiện tại $\delta$ 1,7; 1,07; 1,02; 1,00; 0,99; 0,93.

CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Chương 3 trình bày các kết quả thực nghiệm về cấu trúc hóa học, sàng lọc hoạt tính sinh học và kết quả mô phỏng docking phân tử:

• Thành phần hóa học cây An xoa: Xác định hoàn chỉnh cấu trúc của 14 hợp chất (L1–L14). Trong đó, L3 (3β-benzoylbetulinic acid) là hợp chất triterpenoid mới lần đầu tiên được phát hiện trong tự nhiên; L1 là betulinic acid methyl ester; L7 là β-amyrin; L11 là dẫn xuất protostane triterpenoid (3β-hydroxyprotosta-17(20),24-dien-21-oic acid); cùng các hợp chất steroid và dẫn xuất phenolic khác.
• Hoạt tính sinh học của các cao chiết cây An xoa:
  • Khảo sát độc tính tế bào trên dòng KB: 8 phân đoạn cao chiết từ rễ (RH, RE, RB, RN) và thân-lá (TLH, TLE, TLB, TLN) được đánh giá. Các cao chiết phân cực kém và trung bình (n-hexane, ethyl acetate) thể hiện khả năng ức chế tế bào KB ở mức khá và mạnh.
  • Hoạt tính chống oxy hóa qua thử nghiệm DPPH và hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của các phân đoạn cao cũng được khảo sát, ghi nhận hiệu lực đáng kể ở các phân đoạn ethyl acetate.
• Hoạt tính gây độc tế bào ung thư của các hợp chất sạch từ An xoa: Thử nghiệm 10 hợp chất (L1, L2, L3, L5, L8, L9, L10, L12, L13, L14) trên 5 dòng tế bào ung thư người gồm SK-LU-1, HepG2, Hela, SK-Mel-2 và AGS. Hợp chất mới L3 cùng các triterpenoid lupane thể hiện hoạt tính ức chế chọn lọc sự phát triển của các dòng tế bào ung thư thử nghiệm.
• Thành phần hóa học cây Màng kiêng: Lần đầu tiên công bố thành phần hóa học của loài Pterospermum truncatolobatum, tinh sạch và xác định cấu trúc 7 hợp chất (M1–M7). Trong đó, xác định rõ cấu trúc của M1 là β-sitosterol, M3 là betulonic acid, cùng các dẫn xuất triterpene và hợp chất liên quan (M2, M4, M5, M6, M7).
• Hoạt tính sinh học của cây Màng kiêng:
  • Khảo sát hoạt tính độc tế bào dòng KB của 4 phân đoạn cao chiết (PH, PD, PE, PB), ghi nhận phân đoạn PD và PE có hoạt tính ức chế rõ rệt.
  • Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư của 3 hợp chất tinh khiết (M3, M4, M7) trên 4 dòng tế bào ung thư: HepG2 (gan), Lu / SK-LU-1 (phổi), KB (biểu mô) và MCF7 (vú). Hợp chất betulonic acid (M3) thể hiện khả năng ức chế tế bào ung thư đáng chú ý.
• Kết quả mô phỏng docking phân tử với protein wMUS81: Tiến hành docking các triterpenoid phân lập được vào cấu trúc không gian của wMUS81. Kết quả chỉ ra các hợp chất khung lupane (như dẫn xuất của betulinic acid, betulonic acid) có năng lượng liên kết thấp, tạo được các liên kết hydro và tương tác kỵ nước bền vững với các acid amin quan trọng trong túi hoạt động của miền winged-helix, chứng minh tiềm năng ức chế endonuclease MUS81.

Mẫu thử	Hợp chất tiêu biểu	Hoạt tính sinh học / Đích tác động	Dòng tế bào thử nghiệm / Thông số
Rễ An xoa	L1, L3 (chất mới), L5, L7, L8, L9	Gây độc tế bào ung thư in vitro, Docking wMUS81	SK-LU-1, HepG2, Hela, SK-Mel-2, AGS, KB
Thân-lá An xoa	L2, L10, L11, L12, L13, L14	Gây độc tế bào ung thư in vitro, chống oxy hóa	SK-LU-1, HepG2, Hela, SK-Mel-2, AGS, KB
Thân-lá Màng kiêng	M1, M2, M3, M4, M5, M6, M7	Gây độc tế bào ung thư in vitro, Docking wMUS81	HepG2, Lu (SK-LU-1), KB, MCF7

Kết quả và những đóng góp mới

Luận án đã đạt được các đóng góp mới về mặt lý luận khoa học và thực tiễn:

1. Đóng góp về hóa học các hợp chất thiên nhiên:
   • Phân lập và xác định cấu trúc 14 hợp chất từ rễ và thân-lá của loài An xoa (Helicteres hirsuta Lour.), trong đó có một hợp chất triterpenoid mới là 3β-benzoylbetulinic acid (L3, C37H52O4), mở rộng dữ liệu hóa học về chi Helicteres.
   • Đây là công trình đầu tiên trên thế giới nghiên cứu thành phần hóa học của loài Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum Gagnep.), phân lập và xác định cấu trúc 7 hợp chất sạch (M1–M7), bổ sung dữ liệu hóa thực vật cho chi Pterospermum.
2. Đóng góp về hoạt tính sinh học và định hướng ứng dụng:
   • Cung cấp bộ số liệu thực nghiệm về hoạt tính gây độc tế bào ung thư của các cao chiết và các hợp chất sạch từ An xoa và Màng kiêng trên nhiều dòng tế bào ung thư người (KB, HepG2, SK-LU-1, Hela, SK-Mel-2, AGS, MCF7).
   • Chứng minh các triterpenoid phân lập từ hai loài thực vật này có ái lực liên kết cao với thụ thể wMUS81 thông qua mô phỏng docking phân tử, mở ra hướng nghiên cứu phát triển các chất ức chế MUS81 tự nhiên nhằm tăng cường hiệu quả cho các phác đồ hóa trị ung thư.

Kiến nghị và giải pháp đề xuất từ luận án:

• Cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về cơ chế phân tử của các hợp chất có hoạt tính cao (đặc biệt là hợp chất mới L3 và betulonic acid M3) trên các mô hình in vivo.
• Đề xuất giải pháp bảo tồn, khai thác bền vững nguồn tài nguyên cây An xoa tại Bình Phước, tránh tình trạng khai thác kiệt quệ do các tin đồn thiếu căn cứ khoa học.
• Tiếp tục nghiên cứu mở rộng các bộ phận khác và các chất có hàm lượng nhỏ của cây Màng kiêng tại Lạng Sơn.

Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp

Hạn chế của luận án:

• Khảo sát hoạt tính sinh học của các hợp chất sạch chủ yếu dừng lại ở mức in vitro (xác định nồng độ ức chế trên các dòng tế bào ung thư nuôi cấy) và mô phỏng in silico (docking phân tử), chưa có điều kiện thử nghiệm thực tế trên mô hình động vật sống (in vivo).
• Khối lượng mẫu Màng kiêng thu thập ban đầu còn hạn chế (4 kg tươi), dẫn đến hàm lượng một số chất phân lập được rất thấp, chưa đủ để thử nghiệm hoạt tính sinh học trên tất cả các dòng tế bào và đích phân tử.

Hướng nghiên cứu tiếp:

• Thử nghiệm đánh giá cơ chế ức chế enzyme MUS81 thực tế bằng các kỹ thuật sinh học phân tử in vitro để kiểm chứng kết quả docking.
• Mở rộng thu hái nguyên liệu cây Màng kiêng để phân lập thêm các cấu tử vi lượng và bán tổng hợp các dẫn xuất nhằm nâng cao hoạt tính sinh học.

Giá trị tham khảo

Luận án là tài liệu tham khảo có giá trị chuyên môn đối với:

• Nghiên cứu sinh, học viên cao học và sinh viên chuyên ngành Hóa học Hữu cơ, Hóa dược và Hóa học các hợp chất thiên nhiên: Cung cấp quy trình chiết xuất, sắc ký phân lập các triterpenoid khó tách và bộ dữ liệu phổ chi tiết ($^1\text{H}$-NMR, $^{13}\text{C}$-NMR, 2D-NMR, FT-ICR-MS, X-ray) của các hợp chất khung lupane, oleanane, protostane.
• Các nhà nghiên cứu dược lý và sinh học phân tử: Tham khảo phương pháp sàng lọc hoạt tính gây độc tế bào và hướng tiếp cận mô phỏng docking trên đích phân tử endonuclease wMUS81 trong phát triển thuốc hỗ trợ điều trị ung thư.
• Các cơ quan quản lý dược liệu và tài nguyên sinh vật: Cung cấp dẫn liệu khoa học xác thực về giá trị thực của cây An xoa và Màng kiêng, hỗ trợ định hướng quy hoạch, bảo tồn và sử dụng hợp lý nguồn tài nguyên thực vật rừng tại Việt Nam.

Câu hỏi thường gặp

1. Hợp chất mới được phát hiện trong luận án có tên là gì và cấu trúc của nó được xác định bằng những phương pháp nào? Hợp chất mới được phân lập từ rễ cây An xoa (Helicteres hirsuta) là 3β-benzoylbetulinic acid (ký hiệu L3). Cấu trúc của hợp chất được xác định dựa trên phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1D và 2D ($^1\text{H}$-NMR, $^{13}\text{C}$-NMR, HSQC, HMBC, ROESY) và phổ khối lượng phân giải siêu cao FT-ICR-MS với pic ion $[\text{M}+\text{K}]^+$ tại m/z 599,3703, phù hợp với công thức phân tử C37H52O4K.

2. Cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum) được thu hái ở đâu và luận án đã phân lập được những hợp chất nào từ loài này? Mẫu thân-lá cây Màng kiêng được thu hái tại xã Nhất Hòa, huyện Bắc Sơn, tỉnh Lạng Sơn vào tháng 3 năm 2018 (mẫu tiêu bản MK03.2018). Luận án đã phân lập và xác định cấu trúc của 7 hợp chất ký hiệu từ M1 đến M7, trong đó có β-sitosterol (M1) và betulonic acid (M3).

3. Đích phân tử wMUS81 là gì và tại sao luận án lại chọn đích này để mô phỏng docking? wMUS81 là miền xoắn "winged-helix" ở đầu N của protein endonuclease MUS81 (thuộc họ endonuclease Xpf). Enzyme này tham gia quá trình sửa chữa đứt gãy DNA trong tế bào. Việc ức chế wMUS81 làm giảm khả năng tự sửa chữa DNA của tế bào ung thư, từ đó làm tăng độ nhạy cảm của chúng đối với các loại thuốc hóa trị (như 5-fluorouracil, cisplatin, camptothecin). Luận án lựa chọn wMUS81 để docking nhằm tìm kiếm các chất ức chế tự nhiên có tiềm năng hỗ trợ điều trị ung thư.

4. Dữ liệu phổ nào chứng minh cấu trúc của hợp chất L1 (betulinic acid methyl ester) và M3 (betulonic acid)?

• Hợp chất L1 được chứng minh qua phổ $^1\text{H}$-NMR với tín hiệu hai proton olefin ngoại vòng tại $\delta$ 4,47 và 4,60 ppm (H-29a, H-29b), nhóm carbomethoxy tại $\delta$ 3,67 ppm (s, 3H, H-31), proton gắn carbon mang nhóm hydroxyl tại $\delta$ 3,18 ppm (H-3) và proton H-19 tại $\delta$ 2,99 ppm.
• Hợp chất M3 được chứng minh qua phổ $^1\text{H}$-NMR với hai proton olefin tại $\delta$ 4,74 và 4,62 ppm (H-29a, H-29b), proton H-19 tại $\delta$ 3,01 ppm, các proton kề nhóm carbonyl tại $\delta$ 2,50 và 2,42 ppm (H-2), cùng 6 nhóm methyl đơn đặc trưng của khung lupane.

5. Luận án đã thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào trên những dòng ung thư người nào? Luận án đã thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào trên 7 dòng tế bào ung thư người: KB (ung thư biểu mô), HepG2 (ung thư gan), SK-LU-1 (ung thư phổi), Hela (ung thư cổ tử cung), SK-Mel-2 (ung thư da), AGS (ung thư dạ dày) và MCF7 (ung thư vú).

Kết luận

Luận án tiến sĩ của tác giả Lê Thị Khánh Linh đã thực hiện nghiên cứu chuyên sâu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài thực vật họ Trôm là An xoa (Helicteres hirsuta) và Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum). Công trình đã phân lập và làm sáng tỏ cấu trúc của 21 hợp chất, trong đó phát hiện một hợp chất mới là 3β-benzoylbetulinic acid từ cây An xoa và công bố những dữ liệu hóa thực vật đầu tiên về cây Màng kiêng. Kết quả đánh giá độc tính tế bào trên nhiều dòng ung thư in vitro cùng mô phỏng docking phân tử với protein wMUS81 đã cung cấp cơ sở khoa học xác thực cho việc định hướng sử dụng và phát triển nguồn dược liệu tự nhiên của Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1. Thực vật họ Trôm 1. Giới thiệu chung Họ Trôm (Sterculiaceae) có 68 chi với khoảng 1100 loài phân bố chủ yếu ở các vùng nhiệt đới, cận nhiệt và ôn đới [1], trong đó có chi Helicteres, Pterospermum. Ventenat ex Salisbury đã tìm ra họ Trôm.

Cho đến nay, một vài công trình nghiên cứu phân loại các chi họ Trôm như của Backer C. Ở Việt Nam, GS. Võ Văn Chi đã ghi nhận họ Trôm có 15 chi với 34 loài có thể làm thuốc [5]. Thực vật họ Trôm là các cây thân bụi hoặc thân gỗ.

Vỏ thân cây thường tiết ra chất nhầy và có thể kéo thành sợi. Ở một số loài, có sự khác nhau về hình thái giữa lá của cây non và lá của với cây trưởng thành. Ngoài ra tùy và tuổi của cây, lá của chúng có nhiều hình dạng, kích thước khác nhau và thường rụng sớm. Hoa của các loài này mọc đơn độc thành từng cụm, thường có lông [6].

Thành phần hóa học họ Trôm Theo thống kê đến năm 2015, gần 200 hợp chất đã được tinh sạch từ các cây họ Trôm. Chúng có thể được phân loại thành các nhóm hợp chất alkaloid, phenyl propanoid, flavonoid, terpenoid và các hợp chất khác như hydrocarbon, quinone, đường, lactone, phenolic, lignan, amide và amine với một số hoạt tính sinh học đáng chú ý như khả năng gây độc tế bào, kháng sinh, kháng viêm, chống oxi hóa. Cụ thể như sau: Nhóm 1: Các hợp chất alkaloid Alkaloid trong các cây họ Trôm có các khung chính là các quinolone, cyclopeptide, pseudooxindol và purine,… Trong đó, cyclopeptide là các hợp chất chính của chi Melochia. Sau đó, ba cyclopeptide alkaloid khác là frangufoline (3) và franganine (4) cũng được phát hiện trong lá loài Melochia corchorifolia của Ấn Độ [9].nam luan an tien si TIEU LUAN MOI download : [e-mail] moi nhat (LUAN.nam 4 O O O O O O NH NH HN HN HN HN O O N N 2 1 3 4 Ngoài ra, hợp chất waltherione A (5) là một alkaloid tách từ rễ cây M.

chamaedrys và thân cây Waltheria douradinha thu hái ở Brazil [10], [11]. Cũng từ loài Waltheria douradinha này, ba alkaloid (6-8) đã được phân lập [12]. O O O O O O O O OH OH N N H H 5 6 O O O O OH N N H H 7 8 Năm 1978, một hợp chất quinolone alkaloid mới là melovinone (3,7,8- trimethoxy-2-methyl-5(5’-phenylpentyl)-4-quinolinone, 9) và các chất cũ (10-12) được tìm thấy trong rễ của cây M.nam luan an tien si TIEU LUAN MOI download : [e-mail] moi nhat (LUAN.nam 5 O O O OCH3 H3CO N N H H OCH3 10 9 O O O O H3CO N N H H OCH3 12 11 Nhóm 2: Các hợp chất phenyl propanoid Các dẫn xuất của cinnamic acid (13-16) được tìm thấy trong lá loài Theobroma cacao [14]. Ngoài ra, Vardamides và cộng sự đã tìm ra scopolin (17) và scopoletin (18) trong loài Scaphopetalum thonneri [15].

O O HO OH OH HO HO 13 14 HO COOH HO COOH O O HO O OH O OH OH OH HO HO 15 16 OH HO OH HO O O O HO H3CO O O O 18 H3CO 17 (LUAN.nam luan an tien si TIEU LUAN MOI download : [e-mail] moi nhat (LUAN.nam 6 Nhóm 3: Các hợp chất flavonoid (+)-catechin (19), (-)-epicatechin (20) và leucocyanidin (21) là các flavan được tinh sạch từ lá và hạt cây Theobroma cacao trồng ở Liverpool (Vương quốc Anh) [14]. OH OH HO O HO O OH OH OH OH OH OH 19 20 OH HO O OH OH OH OH 21 Đặc biệt, bốn flavonoid có chứa nhóm sulfate (22-25) và các flavonoid khác (24-32) được tìm thấy trong loài Wissadula periplocifolia thu hái ở Brazil. Một số hợp chất có khả năng ức chế mạnh sự phát triển của tế bào ung thư [16]. X1=OSO3H, X2= OH, X3= H và X4=OCH3 24.

X1=OSO3H, X2= X3= H và X4=OCH3 25.