Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care

Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó sau khi tiêm vacxin vô hoạt Care, luận văn thạc sĩ VNUA cung cấp thông tin quan trọng về sức khỏe thú y.

• Tác giả: Đỗ Văn Đức
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Thị Lan
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2016
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 1.1. Lời cam đoan
• 1.2. Mục lục
• 1.3. Danh mục các chữ viết tắt
• 1.4. Danh mục bảng
• 1.5. Danh mục hình
• 1.6. Trích yếu luận văn
• 2. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 3. MỤC ĐÍCH CỦA ĐỀ TÀI
• 4. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 4.1. MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ CỦA CHÓ
• 4.1.1. Thân nhiệt (0C)
• 4.1.2. Tần số hô hấp (số lần thở/phút)
• 4.1.3. Tần số tim (lần/phút)
• 4.2. BỆNH CARE Ở CHÓ
• 4.2.1. Khái niệm, lịch sử và địa dư bệnh Care ở chó
• 4.2.2. Dịch tễ học
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu miễn dịch của chó sau tiêm vacxin Care

Nghiên cứu miễn dịch của chó sau khi tiêm vacxin Care là một chủ đề quan trọng trong lĩnh vực thú y. Bệnh Care, do virus Canine Distemper gây ra, là một trong những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm nhất đối với chó. Việc tiêm vacxin Care không chỉ giúp bảo vệ chó khỏi bệnh mà còn đóng vai trò quan trọng trong việc kiểm soát dịch bệnh. Nghiên cứu này nhằm đánh giá hiệu quả của vacxin Care trong việc kích thích hệ miễn dịch của chó.

1.1. Tầm quan trọng của vacxin Care trong phòng bệnh cho chó

Vacxin Care được phát triển nhằm ngăn ngừa bệnh Care ở chó, một bệnh có tỷ lệ tử vong cao. Việc tiêm phòng giúp tạo ra kháng thể, bảo vệ chó khỏi virus. Nghiên cứu cho thấy vacxin này có khả năng kích thích sản sinh kháng thể hiệu quả, từ đó giảm thiểu nguy cơ mắc bệnh.

1.2. Các chỉ tiêu đánh giá miễn dịch sau khi tiêm vacxin

Để đánh giá hiệu quả của vacxin Care, các chỉ tiêu như hàm lượng kháng thể, triệu chứng lâm sàng và phi lâm sàng được theo dõi. Kết quả cho thấy kháng thể xuất hiện trong máu chó sau 21 ngày tiêm và duy trì trong thời gian dài.

II. Vấn đề và thách thức trong nghiên cứu miễn dịch của chó

Mặc dù vacxin Care đã được sử dụng rộng rãi, nhưng vẫn tồn tại nhiều thách thức trong việc đảm bảo hiệu quả của nó. Một số chó không đáp ứng tốt với vacxin, dẫn đến nguy cơ mắc bệnh. Ngoài ra, sự biến đổi của virus cũng là một yếu tố cần được xem xét.

2.1. Tình trạng kháng thể ở chó sau tiêm vacxin

Một số nghiên cứu cho thấy không phải tất cả chó đều tạo ra kháng thể đủ mạnh sau khi tiêm vacxin Care. Điều này có thể do nhiều yếu tố như tuổi tác, tình trạng sức khỏe và chế độ dinh dưỡng của chó.

2.2. Sự biến đổi của virus và ảnh hưởng đến hiệu quả vacxin

Virus Canine Distemper có khả năng biến đổi, điều này có thể làm giảm hiệu quả của vacxin. Việc nghiên cứu các chủng virus mới và phát triển vacxin tương ứng là rất cần thiết để bảo vệ chó khỏi bệnh.

III. Phương pháp nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó sau tiêm vacxin Care

Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp khoa học hiện đại để đánh giá đáp ứng miễn dịch của chó sau khi tiêm vacxin Care. Các phương pháp bao gồm tiêm vacxin, theo dõi triệu chứng lâm sàng và xét nghiệm máu để xác định hàm lượng kháng thể.

3.1. Quy trình tiêm vacxin và theo dõi chó thí nghiệm

Chó thí nghiệm được chia thành hai nhóm: nhóm tiêm vacxin và nhóm đối chứng. Sau khi tiêm, chó được theo dõi chặt chẽ để ghi nhận các triệu chứng lâm sàng và phản ứng miễn dịch.

3.2. Phương pháp xét nghiệm hàm lượng kháng thể trong máu

Hàm lượng kháng thể được xác định thông qua các phương pháp xét nghiệm như ELISA và RT-PCR. Những phương pháp này giúp đánh giá chính xác khả năng đáp ứng miễn dịch của chó sau khi tiêm vacxin.

IV. Kết quả nghiên cứu về miễn dịch của chó sau tiêm vacxin Care

Kết quả nghiên cứu cho thấy vacxin Care có khả năng kích thích sản sinh kháng thể hiệu quả. Sau 21 ngày tiêm, hàm lượng kháng thể trong máu chó tăng cao, cho thấy hệ miễn dịch đã được kích hoạt.

4.1. Sự xuất hiện của kháng thể trong máu chó

Kháng thể kháng CDV xuất hiện trong máu chó sau 21 ngày tiêm vacxin. Điều này cho thấy vacxin đã kích thích hệ miễn dịch hoạt động hiệu quả.

4.2. Theo dõi triệu chứng lâm sàng sau khi tiêm vacxin

Các triệu chứng lâm sàng của chó được theo dõi sau khi tiêm vacxin. Kết quả cho thấy chó không có triệu chứng nghiêm trọng, cho thấy vacxin an toàn và hiệu quả.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu miễn dịch chó

Nghiên cứu miễn dịch của chó sau khi tiêm vacxin Care đã chỉ ra rằng vacxin có khả năng kích thích hệ miễn dịch hiệu quả. Tuy nhiên, cần tiếp tục nghiên cứu để cải thiện hiệu quả của vacxin và đảm bảo an toàn cho chó.

5.1. Tầm quan trọng của việc phát triển vacxin mới

Việc phát triển các loại vacxin mới phù hợp với các chủng virus hiện tại là rất cần thiết. Điều này sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng bệnh cho chó.

5.2. Hướng nghiên cứu trong tương lai

Nghiên cứu cần tập trung vào việc tìm hiểu sâu hơn về cơ chế hoạt động của vacxin và cách thức virus biến đổi. Điều này sẽ giúp cải thiện các biện pháp phòng ngừa và điều trị bệnh Care ở chó.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Bệnh Care (Canine Distemper - CD) do virus Canine Distemper (CDV) gây ra là một trong những bệnh truyền nhiễm cấp tính nguy hiểm hàng đầu trên loài chó với tốc độ lây lan nhanh và độc lực rất cao. Tại Việt Nam, dịch bệnh được ghi nhận từ năm 1920 và nhanh chóng phân bố trên diện rộng, gây thiệt hại nghiêm trọng cho đàn chó nuôi. Theo thống kê dịch tễ học, tỷ lệ mắc bệnh cao nhất xảy ra ở chó con giai đoạn 3 đến 6 tháng tuổi, dao động từ 25% đến trên 30%, trong đó tỷ lệ tử vong đối với chó phát bệnh lên tới 50% đến 90%, thậm chí đạt 100% nếu không được điều trị kịp thời.

Mặc dù thị trường thú y hiện có hơn 17 loại vacxin phòng bệnh Care, song phần lớn là các chế phẩm nhập khẩu thương mại từ nước ngoài. Sự khác biệt về đặc tính kháng nguyên giữa các chủng virus thực địa lưu hành tại Việt Nam và các chủng virus sản xuất vacxin ngoại nhập là nguyên nhân chính khiến hiệu lực bảo hộ tại nhiều địa phương chưa đạt mức tối ưu. Đứng trước thực tế đó, Bộ môn Bệnh lý thuộc Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã phân lập thành công chủng thực địa CDV-VNUA-05 để phục vụ công tác chế tạo vacxin vô hoạt đặc hiệu.

Đề tài luận văn thạc sĩ tập trung đánh giá năng lực kích thích sinh kháng thể kháng CDV của vacxin vô hoạt chế từ chủng CDV-VNUA-05, đồng thời kiểm chứng các chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng sau khi thử thách công cường độc với chủng virus CDV-HUA-04H liều 100 LD50. Nghiên cứu được thực hiện từ tháng 5/2015 đến tháng 5/2016 tại Học viện Nông nghiệp Việt Nam. Kết quả nghiên cứu mang ý nghĩa thực tiễn to lớn khi cung cấp luận cứ khoa học vững chắc để phát triển vacxin vô hoạt phòng bệnh Care tự chủ quy mô lớn tại Việt Nam với tỷ lệ bảo hộ thành công 100% trên động vật thí nghiệm.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu được xây dựng trên nền tảng lý thuyết miễn dịch học thú y về đáp ứng miễn dịch dịch thể và cơ chế hình thành trí nhớ miễn dịch. Trọng tâm của khung lý thuyết là mô hình tương tác giữa kháng nguyên vô hoạt với hệ thống miễn dịch vật chủ nhằm kích hoạt các tương bào tiết kháng thể IgG đặc hiệu trung hòa virus CDV (thuộc giống Morbillivirus, họ Paramyxoviridae). Quá trình này giúp ngăn chặn thụ thể bề mặt của virus liên kết với tế bào lympho và biểu mô đường hô hấp, tiêu hóa.

Ba khái niệm học thuật then chốt được vận dụng xuyên suốt đề tài gồm:

• Kháng nguyên vô hoạt: Chủng virus thực địa CDV-VNUA-05 được làm bất hoạt độc lực nhưng vẫn bảo tồn toàn vẹn cấu trúc kháng nguyên bề mặt.
• Giá trị mật độ quang học ngưỡng tới hạn (Cut-off = 0,3): Chỉ số quang phổ ELISA chuẩn để phân định ranh giới giữa trạng thái âm tính và dương tính với kháng thể bảo hộ.
• Đáp ứng miễn dịch thứ phát: Hiện tượng gia tăng vượt bậc về nồng độ và ái lực kháng thể sau mũi tiêm nhắc lại tại ngày thứ 28 nhờ sự hoạt hóa của các tế bào B nhớ.

Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng 6 cá thể chó Beagle 6 tuần tuổi thuần chủng khỏe mạnh, trọng lượng từ 4,0 kg đến 5,5 kg, được phân bố ngẫu nhiên thành 2 nhóm: Lô thí nghiệm (3 cá thể) tiêm vacxin vô hoạt và Lô đối chứng (3 cá thể) tiêm nước cất sinh lý. Việc lựa chọn giống chó Beagle thuần chủng đồng nhất về độ tuổi và thể trạng giúp triệt tiêu tối đa các biến số nhiễu sinh học. Toàn bộ chó thí nghiệm đều được xét nghiệm sàng lọc bằng kỹ thuật RT-PCR để khẳng định 100% âm tính với 5 mầm bệnh nguy hiểm (CDV, CPV, Leptospira, CAV-1, Rabies) và kiểm tra ELISA ban đầu đạt chỉ số OD rất thấp từ 0,02 đến 0,04 (nhỏ hơn ngưỡng Cut-off 0,3).

Quy trình tiêm phòng gồm 2 mũi tiêm dưới da cổ (2 ml/liều) vào Ngày 0 và Ngày 28. Sau 21 ngày kể từ mũi 2, tiến hành thử thách công cường độc bằng cách tiêm tĩnh mạch 1 ml chủng CDV-HUA-04H có hiệu giá 6,25 x 10^5 TCID50 (tương đương 100 LD50). Dữ liệu kháng thể huyết thanh được định lượng định kỳ 7 ngày một lần bằng phương pháp ELISA đo mật độ quang học ở bước sóng 450 nm. Các chỉ số huyết học được phân tích tự động bằng hệ thống CELL-DYN 3700. Toàn bộ số liệu được xử lý thống kê sinh học bằng phần mềm Excel 2010 với mức ý nghĩa thống kê P < 0,05.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

• Động lực sản sinh kháng thể vượt bậc: Sau khi tiêm mũi thứ nhất, hàm lượng kháng thể của lô thí nghiệm tăng đều đặn từ OD 0,18 ± 0,05 (ngày 7) lên OD 0,44 ± 0,08 (ngày 21), chính thức vượt ngưỡng bảo hộ Cut-off 0,3. Sau mũi tiêm nhắc lại ở ngày 28, hiệu giá kháng thể tăng đột biến tới 208%, đạt đỉnh cực đại OD 1,54 ± 0,24 tại ngày 42 và duy trì mức rất cao OD 1,36 ± 0,32 tại ngày 49. Ngược lại, lô đối chứng luôn duy trì OD dưới 0,06 xuyên suốt thời gian thí nghiệm.
• Bảo vệ toàn diện các chỉ số sinh lý sau công cường độc: Sau thử thách với liều độc 100 LD50, toàn bộ chó ở lô thí nghiệm duy trì thân nhiệt ổn định trong giới hạn sinh lý 38,5 - 38,7°C, tần số hô hấp đạt 27,0 - 28,8 lần/phút và tần số tim mạch 95,4 - 98,4 lần/phút. Trái lại, lô đối chứng xuất hiện 2 đợt sốt cao điển hình (đợt 1 đạt 40,2°C ở ngày thứ 4; đợt 2 đạt 40,5°C ở ngày thứ 13), nhịp thở tăng vọt 50,5% lên 41,4 lần/phút và nhịp tim tăng vọt lên 142,8 lần/phút (P < 0,05).
• Ổn định huyết học và kiểm soát triệu chứng lâm sàng: Số lượng bạch cầu ở lô thí nghiệm được bảo tồn ở mức 10,55 ± 1,24 nghìn/mm3 máu và tỷ lệ tế bào lympho đạt 27,50%, không ghi nhận bất kỳ dấu hiệu bệnh lý nào. Ngược lại, lô đối chứng bị giảm 17,1% số lượng bạch cầu xuống còn 8,75 ± 0,98 nghìn/mm3, đồng thời bộc lộ 100% triệu chứng bệnh Care nghiêm trọng gồm chảy dịch mũi xanh, nốt sài da bụng, sừng hóa gan bàn chân, ỉa chảy phân màu cà phê và co giật liệt hai chân sau.

Thảo luận kết quả

Hiệu quả bảo hộ 100% của vacxin vô hoạt CDV-VNUA-05 được chứng minh qua cơ chế đáp ứng miễn dịch dịch thể đặc hiệu cao. Kháng thể IgG lưu hành trong máu đã trung hòa hoàn toàn các hạt virus cường độc ngay khi xâm nhập vào tuần hoàn, ngăn chặn sự bám dính và phá hủy các tế bào miễn dịch cũng như biểu mô thần kinh. Khi so sánh với các nghiên cứu của Norrby và Wilson, quy luật động học kháng thể đạt đỉnh sau 14 ngày tiêm mũi 2 hoàn toàn tương thích với mô hình tăng sinh tế bào lympho B nhớ.

Dữ liệu thực nghiệm này có thể được biểu diễn một cách trực quan qua đồ thị đường biến thiên nồng độ kháng thể OD theo thời gian và bảng ma trận đối chiếu 12 chỉ tiêu huyết học - sinh lý giữa hai lô. Sự tương phản rõ rệt giữa hai nhóm khẳng định vacxin vô hoạt sản xuất từ chủng bản địa có khả năng tạo hàng rào miễn dịch vững chắc chống lại áp lực công độc 100 LD50.

Đề xuất và khuyến nghị

• Chuẩn hóa và mở rộng quy mô sản xuất công nghiệp: Đề nghị các cơ quan chuyên trách thuộc Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn phối hợp cùng các doanh nghiệp dược thú y tiếp nhận chuyển giao công nghệ, tiến hành sản xuất vacxin vô hoạt CDV-VNUA-05 trên dây chuyền đạt chuẩn GMP-WHO với sản lượng mục tiêu 500.000 liều/năm trong giai đoạn 2026 - 2028.
• Áp dụng phác đồ tiêm chủng 2 mũi khoa học: Các phòng khám và bệnh viện thú y cần thống nhất thực hiện phác đồ tiêm 2 mũi bắt buộc cho chó con: mũi thứ nhất lúc 6 tuần tuổi (liều 2 ml) và mũi thứ hai nhắc lại sau 28 ngày (10 tuần tuổi), nhằm bảo đảm tỷ lệ miễn dịch bảo hộ đàn đạt trên 85% trong thực tế điều trị.
• Tích hợp chẩn đoán huyết thanh học trước tiêm: Khuyến nghị các trạm thú y địa phương sử dụng kít xét nghiệm nhanh ELISA hoặc RT-PCR để sàng lọc kháng thể thụ động từ mẹ trước khi tiêm phòng cho đàn chó dưới 6 tuần tuổi, giúp giảm thiểu 30% tỷ lệ thất bại tiêm chủng do hiện tượng triệt tiêu miễn dịch.
• Triển khai thử nghiệm lâm sàng mở rộng: Giao Bộ môn Bệnh lý - Khoa Thú y chủ trì mở rộng nghiên cứu thực địa trên quy mô tối thiểu 200 cá thể thuộc nhiều giống chó mẫn cảm cao như Becgie, Alaska, Poodle tại các trại nhân giống trong thời gian 12 tháng tới nhằm đánh giá độ bền miễn dịch qua từng năm.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

• Bác sĩ thú y và chuyên gia điều trị lâm sàng: Cung cấp bằng chứng thực nghiệm về hiệu quả miễn dịch và các chỉ tiêu chẩn đoán lâm sàng, cận lâm sàng, giúp xây dựng phác đồ phòng bệnh và chẩn đoán phân biệt Care với các bệnh truyền nhiễm khác.
• Doanh nghiệp sản xuất sinh phẩm y tế thú y: Cung cấp thông số khoa học tin cậy về chủng virus bản địa CDV-VNUA-05, quy trình chế tạo vacxin vô hoạt và phương pháp kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm sinh học.
• Giảng viên, nghiên cứu sinh và học viên cao học: Đóng vai trò là tài liệu tham khảo mẫu mực về phương pháp bố trí thí nghiệm in-vivo, kỹ thuật thử thách công cường độc 100 LD50 và phương pháp phân tích huyết học trên động vật thí nghiệm.
• Chủ trang trại nhân giống và người nuôi thú cưng: Giúp nâng cao nhận thức về mức độ nguy hiểm của bệnh sài sốt chó, nắm bắt chính xác lịch tiêm phòng 2 mũi bắt buộc để bảo vệ an toàn cho đàn vật nuôi với tỷ lệ sống sót tối ưu.

Câu hỏi thường gặp

• Tại sao phải tiêm mũi vacxin thứ hai cách mũi thứ nhất đúng 28 ngày? Sau mũi tiêm thứ nhất ở ngày 21, hiệu giá kháng thể mới đạt mức bảo hộ cơ sở OD 0,44. Việc tiêm nhắc lại mũi thứ hai ở ngày 28 là điều kiện tiên quyết để kích hoạt tế bào B nhớ, đẩy hiệu giá kháng thể tăng vọt lên đỉnh OD 1,54 ở ngày 42, giúp duy trì khả năng miễn dịch bền vững lâu dài.

• Vacxin vô hoạt CDV-VNUA-05 có gây phản ứng phụ nguy hiểm cho chó 6 tuần tuổi không? Kết quả theo dõi thực nghiệm trong suốt 69 ngày khẳng định vacxin tuyệt đối an toàn. Toàn bộ chó thí nghiệm 6 tuần tuổi đều có thân nhiệt ổn định từ 38,5 đến 38,7°C, các chỉ số hô hấp và tim mạch bình thường, không ghi nhận bất kỳ biến chứng cục bộ hay toàn thân nào.

• Khả năng bảo hộ của vacxin khi bị virus cường độc tấn công thực tế ra sao? Vacxin mang lại tỷ lệ bảo hộ thành công 100%. Sau khi tiêm tĩnh mạch chủng virus cường độc CDV-HUA-04H với liều cực mạnh 100 LD50 (6,25 x 10^5 TCID50), lô tiêm vacxin hoàn toàn khỏe mạnh và bài thải virus nhanh chóng, trong khi lô không tiêm phát bệnh 100%.

• Kháng thể truyền từ chó mẹ ảnh hưởng như thế nào đến hiệu quả tiêm phòng? Kháng thể thụ động từ sữa mẹ chiếm tới 97% lượng kháng thể của chó con có thể trung hòa virus vacxin nếu tiêm quá sớm. Do đó, chó con cần được tiêm phòng khi đạt 6 tuần tuổi, thời điểm lượng kháng thể mẹ đã suy giảm xuống dưới ngưỡng Cut-off 0,3.

• Những triệu chứng lâm sàng điển hình nào chứng minh chó đã nhiễm bệnh Care? Chó nhiễm Care thể hiện hai pha sốt cao lên tới 40,5°C kèm theo các biểu hiện đặc trưng như chảy dịch mũi mủ xanh, ho khan chuyển sang thở gấp, nổi nốt sài mủ ở vùng da bụng, sừng hóa gan bàn chân, ỉa chảy phân màu cà phê và co giật dẫn đến liệt chi.

Kết luận

• Vacxin vô hoạt chế từ chủng thực địa CDV-VNUA-05 kích thích sinh kháng thể đặc hiệu vượt ngưỡng bảo hộ từ ngày thứ 21 (OD 0,44) và đạt đỉnh tại ngày thứ 42 (OD 1,54).
• Mang lại hiệu quả bảo hộ tuyệt đối 100% cho chó thí nghiệm trước thử thách công cường độc liều cao 100 LD50 của chủng virus CDV-HUA-04H.
• Duy trì ổn định các chỉ số sinh lý then chốt gồm thân nhiệt (38,6°C), tần số hô hấp (27,8 lần/phút), tần số tim mạch (97 lần/phút) và hệ huyết học bình thường.
• Đóng góp luận cứ khoa học quan trọng cho việc tự chủ công nghệ sản xuất vacxin phòng bệnh Care quy mô công nghiệp tại Việt Nam trong giai đoạn tới.
• Mở rộng thử nghiệm thực địa trên 200 cá thể trong 12 tháng tiếp theo nhằm hoàn thiện hồ sơ đăng ký lưu hành vacxin toàn quốc.

Quý độc giả, bác sĩ thú y và các nhà nghiên cứu quan tâm có thể tham khảo toàn văn luận văn thạc sĩ của tác giả Đỗ Văn Đức tại Học viện Nông nghiệp Việt Nam để tiếp cận đầy đủ hệ thống dữ liệu thực nghiệm và quy trình kỹ thuật chuyên sâu.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ĐỖ VĂN ĐỨC NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA CHÓ ĐƯỢC TIÊM VACXIN VÔ HOẠT CARE Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Nguyễn Thị Lan NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa hề được sử dụng để bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng 11 năm 2016 Tác giả luận văn Đỗ Văn Đức i LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi còn nhận được rất nhiều sự quan tâm giúp đỡ của các thầy cô giáo, gia đình, bạn bè và đồng nghiệp.

Trước hết tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới PGS. Nguyễn Thị Lan đã tận tình hướng dẫn giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Lời cảm ơn chân thành của tôi cũng xin gửi tới các thầy cô giáo trong bộ môn Bệnh Lý - Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã giúp đỡ, tạo điều kiện trong suốt thời gian học tập cũng như trong thời gian thực hiện đề tài. Tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình cùng bạn bè đồng nghiệp đã giúp đỡ động viên tôi trong suốt thời gian qua.

Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng 11 năm 2016 Tác giả luận văn Đỗ Văn Đức ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] MỤC LỤC Lời cam đoan. ii Mục lục .iii Danh mục các chữ viết tắt. v Danh mục bảng. vi Danh mục hình.

vii Trích yếu luận văn …………………………………………………………………………ix Thesis Abstract. Tính cấp thiết của đề tài. Mục đích của đề tài. Tổng quan tài liệu.

Một số đặc điểm sinh lý của chó. Tần số hô hấp (số lần thở/phút). Tần số tim (lần/phút). Bệnh Care ở chó.

Khái niệm, lịch sử và địa dư bệnh Care ở chó. Dịch tễ học………………………………………………. Cơ chế sinh bệnh. Triệu chứng, bệnh tích.

Phòng và điều trị. Ứng dụng vacxin để phòng bệnh Care. Đối tƣợng, địa điểm, nội dung và phƣơng pháp nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu.

Đối tượng nghiên cứu. Địa điểm và thời gian nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu. 19 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.

Nghiên cứu lựa chọn chó thí nghiệm cho tiêm vacxin vô hoạt Care. Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care. Phương pháp nghiên cứu. Phương pháp tiêm vacxin vô hoạt CDV -VNUA-768 cho chó thí nghiệm.

Quan sát, khám lâm sàng. Phương pháp lấy máu để kiểm tra các chỉ tiêu. Xác định hàm lượng kháng thể có trong máu. Phương pháp RT – PCR.

Phương pháp công cường độc. Phương pháp xử lý số liệu. Kết quả và thảo luận. Kết quả nghiên cứu lựa chọn chó thí nghiệm cho tiêm vacxin vô hoạt Care.

Hàm lượng kháng thể kháng CDV của chó thí nghiệm. Kiểm tra sự có mặt của virus CDV và một số virus khác trong cơ thể chó trước khi tiến hành thí nghiệm. Kết quả nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care chủng CDV - VNUA - 05. Kết quả kiểm tra kháng thể kháng CDV của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care.

Kết quả theo dõi một số chỉ tiêu lâm sàng của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care sau khi thử thách cường độc. Kết qua theo dõi một số chỉ tiêu phi lâm sàng của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care sau khi thử thách cường độc. Kết quả kiểm tra hàm lượng kháng thể. Kết quả kiểm tra sự bài thải virus care của chó sau khi thử thách cường độc.

Kết luận và kiến nghị. 50 Một số hình ảnh trong quá trình nghiên cứu. 54 Tài liệu tham khảo. 55 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ đầy đủ ARN Acid Ribonucleic BC Bạch cầu CDV Canine Distemper Virus CD Canine Distemper CPE Cytopathogenic Effect cDNA complement Acid Deoxyribo Nucleic DNA Acid Deoxyribo Nucleic IgG Immunoglobulin G Lepto Leptospira RT Reverse Transcription RT - PCR Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Medium FCS Fetal calf serum mRNA Messenger Axít ribonucleic OD Độ hấp thụ quang v LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu trên chó khỏe.

Hồ sơ 6 chó thí nghiệm. Bảng bố trí các lô thí nghiệm và sử dụng chủng vacxin CDV. 21 vô hoạt cho từng chó thí nghiệm. Hàm lượng kháng thể kháng CDV của chó thí nghiệm.

Kết quả xét nghiệm sự có mặt của virus Care. 26 và một số virus khác bằng phương pháp RT – PCR. Hàm lượng kháng thể của chó sau khi được tiêm. 27 vacxin vô hoạt Care.

Thân nhiệt của chó thí nghiệm sau khi thử thách cường độc. Tần số hô hấp của chó thí nghiệm sau khi. 32 thử thách cường độc. Tần số tim mạch của chó thí nghiệm sau khi.

35 thử thách cường độc. Kết quả khảo sát chỉ tiêu bạch cầu và công thức bạch cầu. 38 của chó sau khi thử thách cường độc. Kết quả khảo sát một số chỉ tiêu hệ hồng cầu.

41 ở chó sau khi thử thách cường độc. Triệu chứng lâm sàng của chó sau khi thử thách cường độc. Nghiên cứu sự bài thải virus Care trên chó được tiêm vacxin vô hoạt Care sau khi công cường độc. 49 vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] DANH MỤC HÌNH Hình 4.

Đồ thị biểu diễn biến động hàm lượng kháng thể sau khi tiêm vacxin vô hoạt Care của chó thí nghiệm và chó đối chứng. Đồ thị thể hiện thân nhiệt của chó thí nghiệm. 30 sau khi thử thách cường độc. Đồ thị thể hiện tần số hô hấp của chó thí nghiệm.

33 sau khi thử thách cường độc. Tần số tim mạch của chó thí nghiệm sau khi thử thách cường độc. Chó chảy dịch mũi xanh………………………………………………. Gan bàn chân sừng hóa……………………………………………….

Nốt sài ở vùng da bụng…………………………………………………………. Mắt đầy dử. Chó ỉa chảy phân màu cà phê……………………………………………. Chó có triệu chứng thần kinh (Liệt 2 chân sau)……………………………….

Đồ thị biểu diễn biến động hàm lượng kháng thể của chó thí nghiệm và chó đối chứng sau khi thử thách cường độc. 48 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Đỗ Văn Đức Tên luận văn: “Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care”. Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01. Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Đánh giá được khả năng kích thích sản sinh kháng thể kháng CDV của vacxin vô hoạt Care trên chó.

Đánh giá được một số chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care sau công cường độc. Từ đó góp phần cung cấp các thông tin khoa học trong việc sản xuất vacxin phòng bệnh care trên quy mô lớn tại Việt Nam. Phƣơng pháp nghiên cứu 6 chó Beagle 6 tuần tuổi được chia thành 2 lô (lô thí nghiệm và lô đối chứng). Sử dụng các phương pháp nghiên cứu: tiêm vacxin vô hoạt Care, quan sát, khám các triệu chứng lâm sàng, lấy máu để xét nghiệm, phương pháp ELISA, phương pháp RT – PCR, phương pháp công cường độc.

Kết quả chính và kết luận Kháng thể xuất hiện trong máu chó sau 21 ngày tiêm vacxin và tiếp tục duy trì sau 69 ngày theo dõi. Chỉ tiêu lâm sàng của chó được tiêm vacxin vô hoạt Care sau khi công cường độc có sự tăng nhẹ về thân nhiệt, sau đó ổn định trở lại sau 10 ngày. Tần số hô hấp và tim mạch, chỉ tiêu huyết học (hồng cầu, bạch cầu), các chỉ tiêu lâm sàng khác ở trạng thái sinh lý bình thường. Hàm lượng kháng thể kháng CDV tăng cao sau khi công cường độc ở chó được tiêm vacxin vô hoạt Care.

Virus Care cường động không có khả năng gây bệnh cho chó được tiêm vacxin vô hoạt CDV-VNUA-05 và được bài thải nhanh hơn so với chó không được tiêm. viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] THESIS ABSTRACT Master candidate: Do Van Duc Thesis title: Studying the immune response of the vaccinated dogs inactivated Care. Major: veterinary Code: 60.01 Educational organization: Vietnam National University of Agriculture (VNUA) Research Objectives Assessing the ability to stimulate the production of antibodies to CDV of inactivated vaccine in dogs Care. T he rating was an indicator of clinical and non-clinical inactivated vaccinated dog Care after the toxic intensity.

These results would help provide scientific information in the care preventive vaccine production on a large scale in Vietnam. Materials and Methods 6 Beagle dogs 6 weeks old were divided into 2 treatments (experimental group and the control group). Using the methodology: inactivated vaccine Care, observation, examination of clinical symptoms, blood drawn for testing, ELISA, RT - PCR methods, methods of authoritarian power. Main findings and conclusions Antibodies appear in the blood of vaccinated dogs after 21 days and continued monitoring after 69 days.

Clinical indicators of dogs were vaccinated inactivated virulent Care after a slight increase in body temperature, then stabilized again after 10 days. The frequency of respiratory and cardiovascular, hematologic indicators (red blood cells, white blood cells) and other clinical indicators were in the normal physiological state. CDV antibody concentrations increased after the toxic intensity in dogs vaccinated inactivated Care. Momentum Care virus unable to cause disease in vaccinated dogs inactivated CDV-VNUA-05 and was eliminated faster than the non-vaccinated dogs.

ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Từ nhiều năm nay, chó luôn là loài vật sống gần gũi, thân thiết và được con người quý mến. Chó không chỉ được nuôi với mục đích giữ nhà mà còn với nhiều mục đích khác như làm trông giữ gia súc, săn thú, làm cảnh, thậm chí làm công tác nghiệp vụ quốc phòng an ninh,….Vai trò và giá trị của loài chó dần được khẳng định. Do đó, việc chăm sóc nuôi dưỡng và phòng chống các bệnh ở chó cũng ngày càng được quan tâm.

Một trong những bệnh khá phổ biến, gây nguy hiểm cho loài chó, đặc biệt là chó con đó là bệnh Care (hay còn gọi là bệnh sài sốt). Bệnh Care ở chó là một bệnh truyền nhiễm cấp tính nguy hiểm thường xảy ra ở chó con, lây lan nhanh và tỷ lệ chết rất cao. Nó được biết tới là căn bệnh nguy hiểm nhất trên chó trong nửa đầu thế kỷ 19.