Nghiên cứu vai trò của gen a20 và cơ chế phân tử trong điều hoà sinh lý tế bào

• Trường học: Trường Đại Học
• Chuyên ngành: Sinh học
• Đề tài: Vai Trò Của Gen A20 Trong Điều Hoà Sinh Lý Tế Bào Và Cơ Chế Phân Tử Liên Quan
• Loại tài liệu: luận án
• Năm xuất bản: 2023
• Địa điểm: Hà Nội

• MỞ ĐẦU
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU
• 1.1. Khái niệm và lịch sử nghiên cứu về protein A20
• 1.2. Cấu trúc gen A20 và protein A20
• 1.3. Vai trò của protein A20 điều hòa một số loại tế bào miễn dịch
• 1.4. Vai trò của protein A20 trong tế bào T
• 1.5. Vai trò của protein A20 trong tế bào B
• 1.6. Vai trò của protein A20 trong tế bào tua
• 1.7. Vai trò của protein A20 đối với sự chết theo chương trình apoptosis
• 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Vật liệu nguyên liệu
• 2.2. Đối tượng nghiên cứu
• 2.3. Thiết bị nghiên cứu
• 2.4. Phương pháp nghiên cứu
• 2.4.1. Phương pháp nuôi cấy và biệt hoá tế bào tua
• 2.4.2. Phương pháp đưa phân tử siRNA vào trong các tế bào tua
• 2.4.3. Kỹ thuật Western blot đo mức độ biểu hiện protein
• 2.4.4. Kỹ thuật ELISA đo nồng độ các cytokine tiết ra bởi tế bào tua
• 2.4.5. Phương pháp đếm tế bào theo dòng chảy (flow cytometry analysis)
• 2.4.6. Phương pháp xác định sự di cư tế bào (transwell migration assay)
• 2.4.7. Phương pháp phân tích số liệu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Vai trò của protein A20 điều hoà các chức năng sinh lý tế bào tua
• 3.2. Kết quả bất hoạt gen A20 trong tế bào tua
• 3.3. Vai trò của protein A20 điều hòa sự trưởng thành tế bào tua
• 3.4. Vai trò của protein A20 đối với sự tiết cytokine của tế bào tua
• 3.5. Vai trò của protein A20 đối với sự tiết cytokine của tế bào tua khi biệt hóa tế bào tua bằng FLT3
• 3.6. Vai trò của protein A20 đối với sự tiết cytokine của tế bào tua khi biệt hóa tế bào tua bằng GM-CSF
• 3.7. Vai trò của protein A20 đối với sự di cư của tế bào tua
• 3.8. Vai trò của protein A20 đối với sự di cư của tế bào tua khi biệt hóa tế bào tua bằng FLT3
• 3.9. Vai trò của protein A20 đối với sự di cư của tế bào tua khi phơi nhiễm với GM-CSF và phơi nhiễm LPS
• 3.10. Vai trò của protein A20 đối quá trình apoptosis của tế bào tua
• 3.11. Nghiên cứu một số tín hiệu phân tử liên quan đến quá trình sinh lý tế bào tua dưới vai trò điều hòa của protein A20
• 3.11.1. Protein A20 điều hòa sự phosphoryl hóa IκB-α, STAT1 và STAT3 trong tế bào tua nhóm CD11b+DC khi phơi nhiễm với profilin
• 3.11.2. Protein A20 điều hòa sự phosphoryl hóa IκB-α, STAT1 và STAT3 trong tế bào tua pDC khi phơi nhiễm với profilin
• 3.11.3. Protein A20 điều hòa sự phosphoryl hóa STAT1 và STAT3 trong tế bào tua nhóm CD11b+DC khi xử lý với LPS
• 3.12. Vai trò của protein A20 đối với một số chức năng sinh lý của tế bào pDC thông qua tín hiệu IκB-α và STAT1
• 3.13. Vai trò của protein A20 đối với sự trưởng thành của tế bào pDC thông qua tín hiệu IκB-α và STAT1
• 3.14. Ảnh hưởng của protein A20 đối với sự trưởng thành của tế bào pDC thông qua tín hiệu IκB-α và STAT1 khi phơi nhiễm profilin
• 3.15. Vai trò của protein A20 đối với sự tiết cytokine của tế bào pDC thông qua tín hiệu IκB-α và STAT1
• 3.16. Vai trò của protein A20 đối với sự di chuyển của tế bào pDC thông qua tín hiệu IκB-α và STAT1
• 3.17. Vai trò của protein A20 đối với chức năng của tế bào CD11b+DC thông qua tín hiệu STAT1
• 3.18. Vai trò của protein A20 đối với quá trình sản xuất cytokine của tế bào CD11b+DC thông qua tín hiệu STAT1
• 3.19. Vai trò của protein A20 trong điều hoà sự di chuyển của tế bào CD11b+DC thông qua tín hiệu STAT1
• 4. CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• Phụ lục 1: Kết quả nuôi cấy tế bào tua
• 1. Khả năng sống sót và biệt hóa của tế bào tua sau nuôi cấy
• 2. Hình ảnh tế bào tua sau nuôi cấy
• 3. Tế bào tua trưởng thành sau phơi nhiễm bởi Lipopolysaccharide
• Phụ lục 2: Sự tiết TNF-α của tế bào tua
• Phụ lục 3: Ảnh hưởng của một số cytokine đối với quá trình apoptosis của tế bào CD11b+DC
• 1. Tỷ lệ tế bào dương tính với marker Annexin V dưới tác động của cytokine IL-10, IL-2, TNF-α và INF-γ
• 2. Tỷ lệ tế bào dương tính với marker Caspase-3 dưới tác động của cytokine IL-10, IL-2, TNF-α và IFN-γ
• Phụ lục 4: Vai trò điều hòa của IL-10 đối với sự phosphoryl hóa STAT1 và STAT3 trong tế bào tua
• 1. Vai trò điều hoà của IL-10 đối với sự phosphoryl hoá STAT1
• 2. Vai trò điều hoà của IL-10 đối với sự phosphoryl hoá STAT3

I. Vai trò của gen A20 trong điều hoà sinh lý tế bào

Gen A20 đóng vai trò quan trọng trong việc điều hoà sinh lý tế bào, đặc biệt là trong các tế bào miễn dịch. Gen A20 mã hóa cho protein A20, một yếu tố điều hòa có khả năng ức chế các tín hiệu viêm. Protein này tham gia vào việc điều chỉnh hoạt động của các tế bào như tế bào T, tế bào B và tế bào tua. Khi tế bào miễn dịch bị kích thích bởi các tác nhân như LPS, protein A20 giúp ức chế sự sản xuất cytokine, từ đó giảm thiểu phản ứng viêm. Nghiên cứu cho thấy, sự bất hoạt của gen A20 có thể dẫn đến tình trạng viêm nhiễm nghiêm trọng và các bệnh tự miễn. Điều này cho thấy vai trò của gen A20 trong việc duy trì cân bằng nội môi và điều hoà phản ứng miễn dịch.

1.1. Cơ chế hoạt động của protein A20

Protein A20 hoạt động chủ yếu thông qua việc ức chế con đường tín hiệu NF-κB và STAT. Khi bị kích thích, protein A20 ngăn chặn sự phosphoryl hóa của IκB-α, từ đó ngăn chặn sự hoạt hóa của NF-κB. Điều này giúp giảm thiểu sự sản xuất cytokine như TNF-α và IL-6, hai yếu tố chính trong phản ứng viêm. Hơn nữa, protein A20 cũng có khả năng điều chỉnh các tín hiệu khác liên quan đến sự sống sót và chết theo chương trình của tế bào. Sự điều chỉnh này không chỉ ảnh hưởng đến tế bào miễn dịch mà còn có thể tác động đến các tế bào khác trong cơ thể, cho thấy tầm quan trọng của protein A20 trong việc duy trì sự ổn định của hệ thống miễn dịch.

II. Tác động của gen A20 đến sự phát triển tế bào

Nghiên cứu cho thấy gen A20 có ảnh hưởng lớn đến sự phát triển và trưởng thành của tế bào tua. Tế bào tua là những tế bào trình diện kháng nguyên quan trọng trong hệ thống miễn dịch. Khi gen A20 bị bất hoạt, số lượng tế bào tua giảm đáng kể, dẫn đến sự suy giảm khả năng đáp ứng miễn dịch. Protein A20 giúp điều chỉnh sự trưởng thành của tế bào tua thông qua việc kiểm soát các tín hiệu từ các thụ thể như TLR. Sự điều chỉnh này không chỉ ảnh hưởng đến sự sống sót của tế bào tua mà còn tác động đến khả năng sản xuất cytokine và kích thích tế bào T. Điều này cho thấy vai trò của gen A20 trong việc duy trì chức năng của tế bào tua và khả năng đáp ứng miễn dịch của cơ thể.

2.1. Ảnh hưởng của protein A20 đến sự tiết cytokine

Protein A20 có vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh sự tiết cytokine của tế bào tua. Khi tế bào tua bị kích thích bởi các tác nhân như LPS, protein A20 giúp ức chế sự sản xuất cytokine như TNF-α và IL-10. Điều này có ý nghĩa quan trọng trong việc kiểm soát phản ứng viêm và ngăn chặn tình trạng viêm mãn tính. Sự điều chỉnh này không chỉ giúp bảo vệ cơ thể khỏi các tác nhân gây bệnh mà còn duy trì sự cân bằng trong hệ thống miễn dịch. Nghiên cứu cho thấy, việc tăng cường hoạt động của protein A20 có thể là một chiến lược tiềm năng trong điều trị các bệnh tự miễn và ung thư.

III. Gen A20 và cơ chế apoptosis

Ngoài vai trò trong việc điều hoà các tín hiệu viêm, gen A20 còn có tác động đến quá trình apoptosis của tế bào. Protein A20 được xác định là một yếu tố chống lại quá trình apoptosis, giúp tế bào sống sót trong các điều kiện căng thẳng. Sự tương tác của protein A20 với các thụ thể chết có thể điều chỉnh quá trình chết theo chương trình, từ đó ảnh hưởng đến sự sống còn của tế bào miễn dịch. Nghiên cứu cho thấy, khi gen A20 bị bất hoạt, tế bào có xu hướng chết nhiều hơn, dẫn đến sự suy giảm chức năng miễn dịch. Điều này cho thấy tầm quan trọng của gen A20 trong việc duy trì sự sống sót của tế bào miễn dịch và khả năng đáp ứng của cơ thể.

3.1. Cơ chế điều chỉnh apoptosis của protein A20

Protein A20 điều chỉnh quá trình apoptosis thông qua việc tương tác với các yếu tố tín hiệu như Caspase-8. Khi tế bào bị kích thích, protein A20 có khả năng ngăn chặn sự hình thành của các phức hợp gây chết, từ đó bảo vệ tế bào khỏi quá trình chết theo chương trình. Sự điều chỉnh này không chỉ ảnh hưởng đến tế bào miễn dịch mà còn có thể tác động đến các tế bào khác trong cơ thể. Việc hiểu rõ cơ chế này có thể mở ra hướng đi mới trong nghiên cứu và điều trị các bệnh lý liên quan đến rối loạn miễn dịch và ung thư.